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家族性进行性色素过度沉着症家系丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶11基因的克隆和序列鉴定 被引量：1
1
作者 张彩娥 邓云华 吴雄文 《新乡医学院学报》 CAS 2011年第5期548-550,共3页
目的进行家族性进行性色素过度沉着症(FPH)家系中患者丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶11(STK11)基因的克隆和序列鉴定,以期检测FPH发生是否由于STK11突变所致。方法从FPH患者永生化的B淋巴细胞中提取总RNA,反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)获取cDNA... 目的进行家族性进行性色素过度沉着症(FPH)家系中患者丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶11(STK11)基因的克隆和序列鉴定,以期检测FPH发生是否由于STK11突变所致。方法从FPH患者永生化的B淋巴细胞中提取总RNA,反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)获取cDNA序列,加入特异性引物经PCR扩增STK11 cDNA双链,再经过HindⅢ、EcoRI双酶切PCR产物及质粒载体pcDNA3.0,酶切产物经回收、连接,产物转化到大肠杆菌DH5α,选取阳性克隆菌落进行PCR鉴定、酶切鉴定和测序分析。结果成功构建重组质粒pcDNA3.0-STK11,其测序结果与美国国立生物技术信息中心查询的正常序列结果一致。结论该FPH家系发病并非由于STK11突变所致,在初步定位FPH致病基因的19p13.1-pter区段存在尚未发现的致病基因。 展开更多
关键词 家族性进行性色素过度沉着症 丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶11基因 克隆 序列鉴定
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胃肠道恶性肿瘤患者手术前后免疫功能的变化 被引量：3
2
作者 黄文广 张鹏 沈关心 《同济医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期350-352,共3页
为了解手术对胃肠道恶性肿瘤患者细胞免疫功能和体液免疫功能的影响 ,以 2 1例胃癌、结直肠癌患者作自身对照研究 ,检测手术前后血清中肿瘤坏死因子 - α、可溶性白介素 - 2受体、Ig G、Ig M、Ig A、C3 和 C4的含量。与术前相比 ,患者... 为了解手术对胃肠道恶性肿瘤患者细胞免疫功能和体液免疫功能的影响 ,以 2 1例胃癌、结直肠癌患者作自身对照研究 ,检测手术前后血清中肿瘤坏死因子 - α、可溶性白介素 - 2受体、Ig G、Ig M、Ig A、C3 和 C4的含量。与术前相比 ,患者术后第 1d血清肿瘤坏死因子 - α及可溶性白介素 - 2受体无明显改变 ,术后第 7d均明显减少 (P<0 .0 1) ;术后第 7d血清中 Ig G无明显改变 ,Ig M明显升高 (P<0 .0 1) ,Ig A升高 (P<0 .0 5 ) ,C3 、 C4无明显改变。证实胃肠道恶性肿瘤患者免疫功能低下与肿瘤负荷状态有关 ,切除肿瘤可使患者的细胞免疫功能得到改善 ,也可使体液免疫功能得到部分改善。 展开更多
关键词 胃肠肿瘤 外科手术 细胞免疫 体液免疫
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从妊娠人胎盘绒毛组织克隆HLA-G1 cDNA 被引量：3
3
作者 韩军艳 黄亚非 +1 位作者 吴雄文 龚非力 《同济医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期190-192,共3页
为系统研究 HL A- G1分子的生物学功能 ,采用 RT- PCR技术 ,从人流的胎盘绒毛组织中提取总 RNA,经过逆转录合成 HL A- G1的全长 c DNA,插入到真核表达载体 pc DNA3中 ,构建重组表达质粒 pc DNA3- HL A- G1;转化大肠杆菌 DH5 α,筛选其... 为系统研究 HL A- G1分子的生物学功能 ,采用 RT- PCR技术 ,从人流的胎盘绒毛组织中提取总 RNA,经过逆转录合成 HL A- G1的全长 c DNA,插入到真核表达载体 pc DNA3中 ,构建重组表达质粒 pc DNA3- HL A- G1;转化大肠杆菌 DH5 α,筛选其阳性克隆株 ,经酶切、 PCR及测序鉴定 ,证实 HL A- 展开更多
关键词 HLA-G1 克隆 CDNA 妊娠 胎盘绒毛组织
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人类白细胞抗原-抗原肽复合物特异性细胞毒性T细胞的诱生及克隆 被引量：1
4
作者 房崇芸 吴雄文 龚非力 《同济医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期407-409,共3页
为建立一种有效诱导及克隆人类白细胞抗原 ( HL A) -抗原肽复合物特异性细胞毒性 T细胞 ( CTL)的方法。用 EB病毒转化的 B淋巴母样细胞系细胞作为刺激细胞 ,采用长期混合淋巴细胞培养法诱导自身外周血 T细胞库中抗原肽 - HL A复合物特异... 为建立一种有效诱导及克隆人类白细胞抗原 ( HL A) -抗原肽复合物特异性细胞毒性 T细胞 ( CTL)的方法。用 EB病毒转化的 B淋巴母样细胞系细胞作为刺激细胞 ,采用长期混合淋巴细胞培养法诱导自身外周血 T细胞库中抗原肽 - HL A复合物特异性 CTL 增殖、分化 ,并用有限稀释法对之进行克隆。通过细胞毒实验证实获得的 CD3 +、CD8+ T细胞克隆具有高度抗原特异性并受某些 HL A型别的限制。 展开更多
关键词 细胞毒性 诱生 克隆细胞 人白细胞抗原 抗原肽复合物
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转化生长因子α转化作用异同及GM-CSF的协同作用
5
作者 江侃 李卓娅 +3 位作者 姜晓丹 冯玮 熊平 徐勇 《同济医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期515-517,共3页
通过集落形成法检测两型 TGFα对小鼠肾上皮细胞 (NRK)促转化作用以及粒细胞 /巨噬细胞集体刺激因子(GM- CSF)对其转化效应的协同作用。结果发现 :两型 TGFα均可促进 NRK细胞一定程度的转化 (P<0 .0 1) ,在 GM-CSF存在下 ,两型 TGF... 通过集落形成法检测两型 TGFα对小鼠肾上皮细胞 (NRK)促转化作用以及粒细胞 /巨噬细胞集体刺激因子(GM- CSF)对其转化效应的协同作用。结果发现 :两型 TGFα均可促进 NRK细胞一定程度的转化 (P<0 .0 1) ,在 GM-CSF存在下 ,两型 TGFα促进 NRK集落形成能力明显增强 (P<0 .0 1) ,且与剂量呈正相关 ;但 GM- CSF对 S- TGFα促进转化的协同作用比 TM- TGFα的作用强 2～ 3倍 (P<0 .0 1)。提示 :过量的 TGFα表达 ,加之 GM- CSF的协同作用 ,可能是导致增殖细胞恶性转化 ,从而引起肿瘤的发生和发展的重要原因。 展开更多
关键词 转化生长因子Α 粒细胞 巨噬细胞集落刺激因子 转化作用 GM-CSF 协同作用 肿瘤 发生学
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跨膜型与分泌型干细胞因子对肥大细胞趋化作用的影响
6
作者 郑浩 李卓娅 +4 位作者 龚非力 熊平 姜小丹 徐勇 冯玮 《同济医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期13-15,共3页
干细胞因子 (SCF)在体内以分泌型 (S)和跨膜型 (TM)两种形式存在 ,通过其受体 C- kit发挥生物学效应。观察并比较了两型 SCF对肥大细胞趋化作用及在人活化血清作用下对肥大细胞的促趋化作用。实验证明两型 SCF均能趋化肥大细胞的定向运... 干细胞因子 (SCF)在体内以分泌型 (S)和跨膜型 (TM)两种形式存在 ,通过其受体 C- kit发挥生物学效应。观察并比较了两型 SCF对肥大细胞趋化作用及在人活化血清作用下对肥大细胞的促趋化作用。实验证明两型 SCF均能趋化肥大细胞的定向运动 ,同时发现两型 SCF还可明显促进酵母活化血清对肥大细胞的趋化作用 ,但 S- SCF的促进作用比 TM- SCF强约 1.7倍 ,且所需活化血清浓度较后者低。提示 TM- SCF与 S- SCF一样 ,不但自身对肥大细胞具有趋化作用 。 展开更多
关键词 跨膜型干细胞因子 分泌型干细胞因子 肥大细胞 趋化作用
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