期刊文献+
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
共找到98篇文章
< 1 2 … 5 >
每页显示 20 50 100
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
显示方式：
中国妇女行为危险因素与子宫颈癌发病关系的Meta分析 被引量：19
1
作者 张宏彦 占瑾琼 +1 位作者 曹玉广 张文杰 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 2011年第3期165-169,共5页
目的：应用Meta分析法研究行为因素在中国妇女子宫颈癌发病中的危险性。方法：用Review Manger 5.0对国内8篇最近文献的病例-对照研究结果进行固定（FEM）或随机效应模型（REM）的定量综合分析。结果：各因素合并比值比OR（95%CI）分别... 目的：应用Meta分析法研究行为因素在中国妇女子宫颈癌发病中的危险性。方法：用Review Manger 5.0对国内8篇最近文献的病例-对照研究结果进行固定（FEM）或随机效应模型（REM）的定量综合分析。结果：各因素合并比值比OR（95%CI）分别为：首次性交年龄〈20岁,OR=2.32（1.41-3.80）;首次怀孕年龄≤21岁,OR=2.96（1.36-6.42）;孕次〉3,OR=1.93（1.13-3.31）;性伴侣数〉2,OR=2.18（1.24-3.84）;绝经,OR=2.62（1.76-3.91）;主动或被动吸烟,OR=2.33（1.46-3.70）;教育程度≤9年,OR=3.34（1.53-7.28）。结论：多行为因素Meta分析证实,首次性交年龄〈20岁、首次怀孕年龄≤21岁、孕次〉3、性伴侣数〉2、绝经、主动或被动吸烟及教育程度≤9年与子宫颈癌的发生有关,是子宫颈癌发病的危险因素。而首次性交年龄20-22岁或≥23岁、首次生育年龄≤21岁、产次〉2、口服避孕药及居住地与子宫颈癌发病无相关。 展开更多
关键词 妇女 行为 危险因素 子宫肿瘤 META分析
原文传递
体外诱导扩增大鼠树突状细胞及其特性鉴定 被引量：14
2
作者 王云甫 孙圣刚 +5 位作者 何国厚 陈吉相 杨敬宁 李罗清 曹学兵 吴雄文 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期76-78,共3页
　目的: 体外诱导和扩增大鼠骨髓树突状细胞 (DC)的方法, 并进行生物学特性鉴定。方法: 将大鼠骨髓细胞培养 48h后, 去除悬浮细胞, 加入IL- 4和GM- CSF培养 2wk。在光镜和透射电镜下观察培养的DC的形态学特征。应用流式细胞仪检测DC表... 　目的: 体外诱导和扩增大鼠骨髓树突状细胞 (DC)的方法, 并进行生物学特性鉴定。方法: 将大鼠骨髓细胞培养 48h后, 去除悬浮细胞, 加入IL- 4和GM- CSF培养 2wk。在光镜和透射电镜下观察培养的DC的形态学特征。应用流式细胞仪检测DC表面分子MHC-Ⅱ类分子、B7 -1、B7- 2的表达水平。将DC与同种异体T细胞混合培养, 采用MTT比色法测定不同细胞密度的DC刺激同种T细胞增殖的能力。结果: 培养的DC胞浆突起大而长, 呈树突状, 具有DC的典型形态。培养 2wk的DC表面MHC -Ⅱ类分子表达的阳性率为 74. 2%, B7- 1、B7 -2分别为 81%、76%。培养的DC具有明显刺激同种异体T细胞增殖的能力。结论: 将大鼠骨髓细胞经贴壁去除悬浮的细胞, 加入IL -4和GM -CSF培养, 可获得足量、较高纯度的DC, 为研究DC的功能奠定了基础。 展开更多
关键词 树突状细胞 细胞因子 MHC-Ⅱ类分子 共刺激分子
下载PDF
N24p55γPI3K靶向抑制胃癌细胞增殖的研究 被引量：13
3
作者 王晶 刘双又 +5 位作者 高霞 罗学来 夏献民 陶德定 龚建平 胡俊波 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第10期1221-1223,共3页
目的探讨P13K的调节亚基p55γN端24个氨基酸-N24p55γP13K对胃癌细胞系MKN-28增殖及细胞周期的影响。方法通过免疫沉淀及Western blot检测胃癌细胞系MKN-28中Rb家族蛋白(p130/107,p110)和p55γP13K蛋白的表达。采用脂质体转染的方法,将... 目的探讨P13K的调节亚基p55γN端24个氨基酸-N24p55γP13K对胃癌细胞系MKN-28增殖及细胞周期的影响。方法通过免疫沉淀及Western blot检测胃癌细胞系MKN-28中Rb家族蛋白(p130/107,p110)和p55γP13K蛋白的表达。采用脂质体转染的方法,将质粒N24p55-GFP导入MKN-28,通过流式细胞仪分析细胞周期,通过BrdU掺入法,激光共聚焦及流式检测Cyclin D1,Cyclin A的表达以观察其对细胞增殖的影响。结果胃癌细胞系MKN-28含有Rb家族蛋白p130/107而无p110,也含p55γP13K蛋白,且p130/107与p55γP13K相结合。与对照质粒pEGFP-C1相比,转染了N24p55-GFP的MKN-28细胞增殖受抑制,G_0/G_1期增加,S期减少,Cy- clin D1和Cyclin A的表达明显降低。结论这种新的N24P55γP13K调节亚单位可通过p130/p107途径阻滞细胞周期进程,抑制细胞增殖,从而为胃癌的基因治疗提供了一个新的分子靶点。 展开更多
关键词 胃癌 磷脂酰肌醇-3激酶 细胞周期 DNA合成
原文传递
同型半胱氨酸对血管内皮细胞NF-κB的激活及其机制的探讨 被引量：13
4
作者 倪岚 沈关心 王国平 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期13-15,F0003,共4页
目的探讨同型半胱氨酸(HCY)对血管内皮细胞核因子-κB(NF-κB)的激活及其机制,以明确HCY在动脉粥样硬化发病过程中的作用。方法从人脐静脉分离血管内皮细胞;用电泳迁移率和免疫荧光方法检测NF-κB的活性;用免疫印迹实验检测κB抑制蛋白(... 目的探讨同型半胱氨酸(HCY)对血管内皮细胞核因子-κB(NF-κB)的激活及其机制,以明确HCY在动脉粥样硬化发病过程中的作用。方法从人脐静脉分离血管内皮细胞;用电泳迁移率和免疫荧光方法检测NF-κB的活性;用免疫印迹实验检测κB抑制蛋白(IκB-α)的磷酸化。结果电泳迁移率变动实验(EMSA)证明HCY可以时间依赖性和浓度依赖性地激活血管内皮细胞NF-κB;免疫荧光共聚焦显微镜可见在HCY刺激后的血管内皮细胞,大量的NF-κB-P65蛋白从细胞质转移入细胞核内,故NF-κB-P65蛋白染色在细胞核内呈强阳性,而细胞质内染色较弱;Westernblot证明HCY能明显地诱导血管内皮细胞IκB-α的磷酸化。结论HCY可能通过增强IκB-α的磷酸化,抑制血管内皮细胞IκB-α的活性,从而激活NF-κB,在转录水平对下游的趋化因子和黏附因子产生调节作用,促进动脉粥样硬化的形成和发展。 展开更多
关键词 同型半胱氨酸 核因子-ΚB κB抑制蛋白-α 内皮细胞
下载PDF
质粒电穿孔转染条件的选择 被引量：9
5
作者 杨薇 王迪 +4 位作者 陈克清 于敏 王桂华 胡俊波 王晶 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期858-860,共3页
关键词 电穿孔转染 质粒
下载PDF
大豆异黄酮和钙对去卵巢大鼠骨密度及IGF-Ⅰ表达的影响 被引量：8
6
作者 李万里 田玉慧 沈关心 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期696-698,共3页
目的探讨大豆异黄酮和钙对去卵巢骨质疏松大鼠的骨密度及胰岛素样生长因子(IGF-Ⅰ)表达的影响。方法将雌性SD大鼠28只,随机分为假手术组(sham)、去卵巢组(OVX)、去卵巢补钙组[Ca,50mg/(kg.d)]和去卵巢加大豆异黄酮组[Isof,100mg/(kg.d)]... 目的探讨大豆异黄酮和钙对去卵巢骨质疏松大鼠的骨密度及胰岛素样生长因子(IGF-Ⅰ)表达的影响。方法将雌性SD大鼠28只,随机分为假手术组(sham)、去卵巢组(OVX)、去卵巢补钙组[Ca,50mg/(kg.d)]和去卵巢加大豆异黄酮组[Isof,100mg/(kg.d)],10周后测骨密度和尿液钙含量,用免疫组化法测骨骼组织IGF-Ⅰ表达,原位杂交法测骨骼组织IGF-ⅠmRNA的表达。结果去卵巢组大鼠尿钙显著增高,而骨密度降低,骨IGF-Ⅰ和IGF-ⅠmRNA表达显著低于sham组。大豆异黄酮组大鼠尿钙丢失减少,骨密度升高,IGF-Ⅰ和IGF-ⅠmRNA表达增加。单纯补钙组与去卵巢组比较,各指标恢复不明显。结论大豆异黄酮表现出类似雌激素的作用,能够调节IGF-Ⅰ等生长因子的表达,减少尿钙丢失,可用于预防骨质疏松。 展开更多
关键词 大豆异黄酮 胰岛素样生长因子 骨质疏松
下载PDF
IL-32与肿瘤生物学行为 被引量：8
7
作者 陈儒 沈关心 《医学分子生物学杂志》 CAS 2017年第1期55-58,共4页
肿瘤是威胁人类健康的重大疾病，其进程与肿瘤微环境密切相关。炎性介质是肿瘤微环境的重要组分，IL-32是一种炎性因子，主要由免疫细胞及上皮细胞表达，目前共发现IL-32α、β、γ、δ、ε、η、s、θ、ζ9种亚型。IL-32可诱导IL-6、I... 肿瘤是威胁人类健康的重大疾病，其进程与肿瘤微环境密切相关。炎性介质是肿瘤微环境的重要组分，IL-32是一种炎性因子，主要由免疫细胞及上皮细胞表达，目前共发现IL-32α、β、γ、δ、ε、η、s、θ、ζ9种亚型。IL-32可诱导IL-6、IL-8、IL1β等介质的表达，参与炎性疾病的进程，还可以通过NF—κB（核因子κB）、MMP-2（基质蛋白酶2）等信号通路影响乳腺癌、宫颈癌、胃癌、肝癌等肿瘤的侵袭转移、增殖和凋亡。文章介绍了IL-32的发现、生物结构、分泌及其受体，IL-32在肿瘤微环境中的表达特点及其对肿瘤的生物学效应，旨在为IL-32的研究及肿瘤分子靶向治疗提供思路。 展开更多
关键词 白介素32 肿瘤 肿瘤微环境 肿瘤生物学行为
原文传递
人β_2m基因的克隆及表达 被引量：7
8
作者 陈浩 翁秀芳 +4 位作者 吴雄文 梁智辉 韩军艳 黄亚非 龚非力 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期1-4,共4页
目的 克隆和表达HLA I类分子轻链(β2m)基因,为人工制备HLA I类分子提供基础。方法 利用逆转录PCR技术从Jeg-3细胞株中克隆β2m基因,与质粒pET22b(+)重组,构建原核表达载体pET22b(+)-β2m,转化宿主菌E.coli BL21(DE3),诱导β2m基因高效... 目的 克隆和表达HLA I类分子轻链(β2m)基因,为人工制备HLA I类分子提供基础。方法 利用逆转录PCR技术从Jeg-3细胞株中克隆β2m基因,与质粒pET22b(+)重组,构建原核表达载体pET22b(+)-β2m,转化宿主菌E.coli BL21(DE3),诱导β2m基因高效表达,并采用双抗体夹心ELISA法对表达产物进行抗原性和功能鉴定。结果 酶切和测序证实β2m基因克隆和载体构建成功,目的蛋白在宿主菌中高效表达于包涵体中;通过包涵体的分离和纯化获得初步纯化的β2m,所制备的β2m能够与特异性抗体结合,并能与HLA I类分子重链形成具有天然构象的HLA I类分子。结论 人β2m基因能够在原核宿主中高效表达,表达产物具有形成HLA I类分子的功能。 展开更多
关键词 β2m基因 克隆 表达 人工制备
下载PDF
钙和鸡冠花黄酮提取物对大鼠废用性骨质疏松的作用 被引量：6
9
作者 李万里 吕清波 +3 位作者 何群力 张永喜 宋笑飞 沈关心 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期601-603,共3页
目的　探讨钙和鸡冠花黄酮提取物对废用性骨质疏松大鼠的作用 ,为骨质疏松的防治提供依据。方法　选用健康SD大鼠 40只 ,雄性。随机分为 5组 ,第 1、 2组分别为正常对照和阳性对照 ,灌胃蒸馏水 5ml/(kg·d) ,第 2～ 5组制造废用性... 目的　探讨钙和鸡冠花黄酮提取物对废用性骨质疏松大鼠的作用 ,为骨质疏松的防治提供依据。方法　选用健康SD大鼠 40只 ,雄性。随机分为 5组 ,第 1、 2组分别为正常对照和阳性对照 ,灌胃蒸馏水 5ml/(kg·d) ,第 2～ 5组制造废用性骨质疏松大鼠模型 ,第 3、 4、 5组为预防组 ,分别灌胃等量鸡冠花提取物 ,碳酸钙 ,鸡冠花提取物加钙溶液。实验 8周后 ,测骨密度 (BMD) ,股骨CT值 ,测血清MDA、SOD及 2 4h尿钙、羟脯氨酸 (HOP)、尿肌酐含量等。结果　阳性组与正常对照组比较股骨重、灰分重、CT值、血清钙下降 ,尿钙、尿HOP升高 (P <0 0 5或0 0 1) ,预防组与阳性组比较股骨重、CT值显著增加 ,碳酸钙组、鸡冠花加钙组灰分重显著增加 (P <0 0 5)。与阳性组比较各预防组血清钙增加 ,尿钙、尿HOP减少 (P <0 0 5或 <0 0 1)。鸡冠花组、鸡冠花加钙组与阳性组比较股骨BMD、血清SOD升高 ,MDA降低 ,单纯补钙组仅BMD升高 (P <0 0 5或 <0 0 1)。结论　鸡冠花提取物、钙对废用性骨质疏松大鼠骨质代谢均有促进作用 ,两者合用具有更好的预防效果 。 展开更多
关键词 钙 鸡冠花黄酮 提取物 大鼠 废用性骨质疏松 作用 防治
下载PDF
保留十二指肠胰头切除术后并发症的防治体会 被引量：5
10
作者 朱世凯 吴河水 +3 位作者 周玉 熊炯炘 赵刚 王春友 《中华肝胆外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期813-815,共3页
目的探讨保留十二指肠胰头切除术后并发症的防治措施。方法回顾性分析2003—2008年期间武汉协和医院胰腺中心行保留十二指肠胰头切除术56例病人的临床诊疗经过。结果术后发生并发症13例（23．2％），包括胰瘘7例（12．5％），十二指肠瘘... 目的探讨保留十二指肠胰头切除术后并发症的防治措施。方法回顾性分析2003—2008年期间武汉协和医院胰腺中心行保留十二指肠胰头切除术56例病人的临床诊疗经过。结果术后发生并发症13例（23．2％），包括胰瘘7例（12．5％），十二指肠瘘2例（5．4％）；胆瘘1例（2．8％）；腹膜后积液和感染2例（5．4％）；腹腔大出血1例（2．8％）。消化道瘘经支持治疗和维持通畅引流等治疗而痊愈，腹膜后积液和感染病人在B超引导下置管引流治愈，腹腔大出血者急诊选择性腹腔动脉造影显示胃十二指肠动脉分支破裂出血，经明胶海绵和不锈钢圈栓塞后治愈。结论胰瘘、十二指肠瘘、胆瘘、腹腔感染和出血等是DPPHR术后主要并发症，严格掌握手术适应证，术中仔细操作，尽量保留十二指肠的血液供应是减少DPPHR术后并发症和提高手术成功率的关键，一旦出现并发症应采用正确的治疗方法。 展开更多
关键词 胰腺切除术 术后并发症
原文传递
新冠疫情下有效网络教学设计促进基础医学课程“以学生为中心”的教学改革 被引量：1
11
作者 翁秀芳 尹丙姣 +5 位作者 郑芳 吕付佳 黄亚玲 谭政 吴雄文 晏汉姣 《中国高等医学教育》 2023年第5期136-138,共3页
在2020春新冠疫情大环境下,教育部“停课不停学”的政策触发网络教学的大规模开展,以华中科技大学医学免疫学9个网络教学课堂为调查对象,结果显示疫情期间网络教学方式推进师生对教学软件、平台以及资源的充分利用,有效网络教学设计让... 在2020春新冠疫情大环境下,教育部“停课不停学”的政策触发网络教学的大规模开展,以华中科技大学医学免疫学9个网络教学课堂为调查对象,结果显示疫情期间网络教学方式推进师生对教学软件、平台以及资源的充分利用,有效网络教学设计让学生深刻体会到参与式教学的优点,为后期进一步开展与完善“以学生为中心”的教学改革奠定了良好的基础。 展开更多
关键词 网络教学 以学生为中心 参与式教学 网络教学资源 BOPPPS有效教学设计
下载PDF
17β-雌二醇对子宫内膜异位症患者在位子宫内膜间质细胞PI3K/Akt信号转导通路活化的影响 被引量：5
12
作者 镇澜 刘义 +5 位作者 吕立群 陈宏 海娜 廉红梅 满奕村 刘娜 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期321-326,共6页
目的研究17β-雌二醇(17β-E2)对子宫内膜异位症(内异症)患者在位子宫内膜间质细胞磷脂酰肌醇3激酶/Akt(PI3K/Akt)信号转导通路活化的影响,探讨PI3K/Akt信号转导通路在介导雌激素促进内异症发生发展中的作用。方法体外分离培养内异症患... 目的研究17β-雌二醇(17β-E2)对子宫内膜异位症(内异症)患者在位子宫内膜间质细胞磷脂酰肌醇3激酶/Akt(PI3K/Akt)信号转导通路活化的影响,探讨PI3K/Akt信号转导通路在介导雌激素促进内异症发生发展中的作用。方法体外分离培养内异症患者在位子宫内膜间质细胞。用1×10-6mol/L17β-E2处理子宫内膜间质细胞不同时间(0、10、20、30、120min),然后用MTT法检测子宫内膜间质细胞的活性,Western blot法检测细胞Akt的活化情况,确定子宫内膜间质细胞活性最强的时间点。用Western blot和MTT法分别检测不同浓度PI3K抑制剂LY294002对1×10-6mol/L17β-E2作用子宫内膜间质细胞20min后Akt、细胞活性的影响。结果 1×10-6mol/L17β-E2作用20min时,子宫内膜间质细胞的活性最强,Akt活化在17β-E2作用10min后出现,在20min时达高峰;随着LY294002作用浓度的增加,Akt活化水平逐渐下降,浓度为50μmol/L时已被完全阻断;随着LY294002作用浓度的增加,子宫内膜间质细胞活性逐渐下降,在50μmol/L和100μmol/L时活性最低,但此时仍高于空白对照组。结论 17β-E2增强在位子宫内膜间质细胞的活性可能与17β-E2通过非转录机制,迅速激活子宫内膜间质细胞的PI3K/Akt信号转导通路有关。 展开更多
关键词 子宫内膜异位症 非转录途径 17Β-雌二醇 PI3K/AKT信号通路
下载PDF
Nelin与F-actin及Filamin相互作用的鉴定 被引量：2
13
作者 王震 刘冬青 +2 位作者 王茵 屈伸 孟宪敏 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期281-284,F0003,共5页
目的在用酵母双杂交方法将Nelin与人心脏cDNA文库进行杂交筛选,得到3个阳性克隆的基础上,进一步探讨新基因Nelin及其心肌表达产物Nelin蛋白的功能,并寻找能够与其发生相互作用的蛋白质。方法采用基因转染和表达技术,在真核细胞内外分别... 目的在用酵母双杂交方法将Nelin与人心脏cDNA文库进行杂交筛选,得到3个阳性克隆的基础上,进一步探讨新基因Nelin及其心肌表达产物Nelin蛋白的功能,并寻找能够与其发生相互作用的蛋白质。方法采用基因转染和表达技术,在真核细胞内外分别进行了Nelin蛋白与肌动蛋白(F-actin)结合的共沉降及免疫荧光共定位实验。并通过免疫共沉淀实验进一步验证所得的实验结果。结果证实了在细胞内外Nelin蛋白均能同F-actin相结合;还能与Filamin的C-末端免疫球蛋白样结构发生相互作用。结论Nelin为一个新的兼有actin及Filamin结合能力的蛋白。在心肌细胞内,Nelin很可能作为一个膜-细胞骨架连接蛋白,参与了细胞黏着斑形成的过程。 展开更多
关键词 Nelin 肌动蛋白 细丝蛋白 免疫共沉淀
下载PDF
抗SARS抗体独特型单链抗体的筛选及鉴定 被引量：4
14
作者 何峰容 王晓娟 +4 位作者 周小欧 李曼君 朱慧芬 吴万敏 沈关心 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期224-226,共3页
目的从人源噬菌体抗体库中筛选抗SARS独特型抗体为SARS的诊断及疫苗的研究奠定基础。方法以混合SARS病人恢复期血清免疫球蛋白(Ig)作为筛选分子,从噬菌体抗体库中筛选出能与病人血清IgG(IgM)结合的抗体,并通过与混合正常人血清Ig作负性... 目的从人源噬菌体抗体库中筛选抗SARS独特型抗体为SARS的诊断及疫苗的研究奠定基础。方法以混合SARS病人恢复期血清免疫球蛋白(Ig)作为筛选分子,从噬菌体抗体库中筛选出能与病人血清IgG(IgM)结合的抗体,并通过与混合正常人血清Ig作负性筛选,从而获得抗SARS病毒的独特型抗体(AId)。通过4轮“吸附-洗涤-扩增”,从最后一轮所得单克隆菌株中分别通过ELISA筛选出能和SARS病人恢复期血清Ig结合的菌株,提取质粒DNA,并对PCR扩增产物进行DNA序列测定,最后用所筛选的克隆通过与不同人群血清反应,证实其特异性。结果随机挑选经第4轮筛选后的200个单克隆菌落,其中有10个与SARS病人恢复期血清Ig结合的OD值明显高于其与正常人Ig结合的OD值;以上10个克隆经PCR扩增,其中有6个克隆于1 000 bp处有电泳条带;其DNA序列经与BLAST数据库和IMGT/QUEST软件比对有5个均与人的重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)高度同源,且与其同源性最高的人Ig的VH属VHI亚群,VL属k链,属VKⅡ亚群;最后确认有3个克隆其噬菌体抗体和SARS病人血清Ig结合的OD值均明显高于与正常人血清Ig结合的OD值。结论利用抗体库技术可不经免疫制备特异性抗SARS抗体独特型抗体,为SARS诊断及疫苗的研制奠定基础。 展开更多
关键词 SARS 噬菌体抗体库技术 独特型抗体(AId) 单链抗体(ScFv)
下载PDF
改进溶液Ⅱ配方可提高质粒DNA提取的质量及得率 被引量：5
15
作者 黄南 程熠 +2 位作者 连欢 张述 李卓娅 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期816-818,共3页
目的通过改进溶液Ⅱ配方,消除质粒DNA提取中的不可逆变性条带,提高质粒DNA提取的质量与得率。方法取氨苄LB液体培养液中培养好的DH5α(pCDNA3),以NaOH系列梯度浓度/甘氨酸-NaOH缓冲液体系配制溶液Ⅱ,依据文献提供的方法,小量提取制备质... 目的通过改进溶液Ⅱ配方,消除质粒DNA提取中的不可逆变性条带,提高质粒DNA提取的质量与得率。方法取氨苄LB液体培养液中培养好的DH5α(pCDNA3),以NaOH系列梯度浓度/甘氨酸-NaOH缓冲液体系配制溶液Ⅱ,依据文献提供的方法,小量提取制备质粒DNA,以凝胶电泳、紫外分光光度计及酶切验证提取效果。结果在NaOH浓度为0.10mol/L下,不可逆变性条带基本得到消除,超螺旋DNA的提取纯度和得率均得到明显提高。结论改变溶液Ⅱ的碱性条件,可以制备高质量的质粒DNA。 展开更多
关键词 质粒DNA提取 碱裂解法 溶液Ⅱ
下载PDF
卡介苗活化的CD1-限制性细胞毒T细胞的抗膀胱癌效应 被引量：1
16
作者 方敏 龚非力 +4 位作者 李卓娅 冯玮 熊平 姜小丹 徐勇 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期242-244,共3页
为研究卡介苗 (BCG)活化的 T细胞亚群在抗膀胱癌效应中的作用 ,通过细胞因子 (IL- 4与 GM- CSF)体外诱导而获得高表达 CD1分子的抗原提呈细胞 ,然后用 BCG抗原致敏抗原提呈细胞以激活各 T细胞亚群 ,比较 BCG活化的 T细胞亚群对膀胱癌细... 为研究卡介苗 (BCG)活化的 T细胞亚群在抗膀胱癌效应中的作用 ,通过细胞因子 (IL- 4与 GM- CSF)体外诱导而获得高表达 CD1分子的抗原提呈细胞 ,然后用 BCG抗原致敏抗原提呈细胞以激活各 T细胞亚群 ,比较 BCG活化的 T细胞亚群对膀胱癌细胞株 T2 4生长抑制效应。结果表明 ,BCG活化的 CD1-限制性 T细胞具有明显的抗瘤活性 ,CD4 + T细胞和γδT也发挥抑制瘤细胞生长的作用。该研究结果提示具有非特异免疫功能的 T细胞亚群在 展开更多
关键词 卡介苗 T细胞亚群 免疫治疗 膀胱癌
下载PDF
人前列腺癌细胞PC-3M亚系u-PAR基因与蛋白质表达 被引量：3
17
作者 廖国宁 李清芬 +1 位作者 冯友梅 邓耀祖 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期363-366,共4页
为研究与人前列腺癌细胞 (PC- 3M)侵袭能力相关的靶分子 ,采用有限稀释法分离单克隆细胞株 ,并应用单层细胞侵袭等实验鉴定各亚系的体外侵袭能力 ;借助 RT- PCR和免疫组化的方法 ,分别在转录和翻译水平检测 5株侵袭能力不同的 PC- 3M亚... 为研究与人前列腺癌细胞 (PC- 3M)侵袭能力相关的靶分子 ,采用有限稀释法分离单克隆细胞株 ,并应用单层细胞侵袭等实验鉴定各亚系的体外侵袭能力 ;借助 RT- PCR和免疫组化的方法 ,分别在转录和翻译水平检测 5株侵袭能力不同的 PC- 3M亚系尿激酶型纤溶酶原激活物受体 (u- PAR)的表达。结果显示 :高侵袭亚系 u- PAR基因 m RNA的表达和蛋白质水平均明显高于低侵袭亚系。提示 :PC- 3M亚系 u- PAR的高表达与其较强的侵袭能力密切相关 ,而 展开更多
关键词 肿瘤侵袭 尿激酶型纤溶酶原激活物受体 前列腺肿瘤 细胞亚系
下载PDF
应用酵母双杂交系统筛选与新基因nelin相互作用的蛋白质 被引量：3
18
作者 王震 刘冬青 +5 位作者 王茵 曹慧青 丁金凤 郭莲军 屈伸 孟宪敏 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期1-4,9,共5页
　目的　通过筛选能够与新基因nelin的心肌特异表达产物相互作用的蛋白质从而揭示nelin的生物功能。方法　构建表达nelin阅读框全长的诱饵质粒并利用酵母双杂交系统筛选人心脏cDNA文库, 以寻找与nelin蛋白发生相互作用的蛋白质。并利用... 　目的　通过筛选能够与新基因nelin的心肌特异表达产物相互作用的蛋白质从而揭示nelin的生物功能。方法　构建表达nelin阅读框全长的诱饵质粒并利用酵母双杂交系统筛选人心脏cDNA文库, 以寻找与nelin蛋白发生相互作用的蛋白质。并利用生物信息学方法对筛选得到的蛋白质进行功能结构域分析。结果　筛选得到3 个蛋白质分别为肌联蛋白 (Titin ) N2B亚型, 细丝蛋白 (Filamin ) C亚型即γ Filamin和α胰蛋白酶抑制物重链前体 (inter alphatrypsin inhibitor heavy chain precursor, ITIH)。对这3种蛋白的C末端结构域进行分析发现Titin和Filamin均含有免疫球蛋白样结构域 (Ig- like domain)。结论　实验结果揭示了新基因nelin很可能表达一个细胞骨架相关蛋白, 它可通过其蛋白质的C末端同Titin和Filamin的免疫球蛋白样结构域发生相互作用而参与细胞骨架网络的形成。 展开更多
关键词 新基因 蛋白质 筛选 细胞骨架 免疫球蛋白 特异表达 酵母双杂交系统 结构域 相互作用 末端
下载PDF
转录调控子SAMD15通过ADCK1/β-catenin通路调控胃癌的生长与增殖
19
作者 李洵 王晶 贾凌威 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期1-6,共6页
目的探究14号染色体开放阅读框174(SAMD15)在胃癌发生发展中的作用以及相应机制。方法通过数据库分析、免疫蛋白印迹法、荧光定量PCR探究了SAMD15在胃癌临床样本中的表达;通过多种增殖实验及皮下瘤模型检测SAMD15在体内外对胃癌细胞增... 目的探究14号染色体开放阅读框174(SAMD15)在胃癌发生发展中的作用以及相应机制。方法通过数据库分析、免疫蛋白印迹法、荧光定量PCR探究了SAMD15在胃癌临床样本中的表达;通过多种增殖实验及皮下瘤模型检测SAMD15在体内外对胃癌细胞增殖的影响。结果SAMD15在胃癌组织中高表达。体内及体外实验证明,敲低SAMD15能够抑制人胃腺癌细胞系(AGS)的增殖能力。在机制研究层面,SAMD15通过正向调控AarF结构域激酶1(ADCK1)的表达水平,上调β-catenin以及下游细胞骨髓细胞瘤病毒癌基因(c-Myc)的含量。同时,数据分析表明SAMD15高表达的胃癌患者呈现不良预后。结论SAMD15能通过ADCK1/β-catenin通路促进胃癌的发生发展,同时其表达水平能够预测部分胃癌患者的生存预后。 展开更多
关键词 胃癌 Β-CATENIN信号通路 增殖 生物信息学分析
下载PDF
抗转铁蛋白受体单链抗体原核表达载体的构建和表达 被引量：3
20
作者 朱慧芬 杨道锋 +1 位作者 沈关心 周春 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期402-404,408,共4页
目的　构建抗转铁蛋白受体 (TfR)单链抗体原核表达载体 ,为进一步研究其效应奠定基础。方法　从抗TfR单克隆抗体重链和轻链可变区基因的克隆载体 pGEM T VH和 pGEM T VL中扩增重链可变区 (VH)和轻链可变区 (VL)基因 ,用重叠延伸PCR的方... 目的　构建抗转铁蛋白受体 (TfR)单链抗体原核表达载体 ,为进一步研究其效应奠定基础。方法　从抗TfR单克隆抗体重链和轻链可变区基因的克隆载体 pGEM T VH和 pGEM T VL中扩增重链可变区 (VH)和轻链可变区 (VL)基因 ,用重叠延伸PCR的方法 ,在VH和VL基因间引入连接短肽 (Linker) ,构建VH Linker VL的单链抗体 (singlechainFv ,scFv)基因。经NcoⅠ和NotⅠ酶切后亚克隆到原核分泌型表达载体pUC19/119上 ,转化和筛选后 ,阳性细菌经IPTG诱导表达。间接免疫荧光法 (IFA)及抗体封闭试验鉴定其抗体活性。结果　凝胶电泳可见重叠延伸PCR扩增产物约 70 0bp条带 ,SDS PAGE鉴定表达产物的分子量为 2 7kD左右 ,与scFv的理论值一致 ,IFA及抗体封闭试验证明表达产物有抗人TfR的活性。结论　本研究成功地构建并表达了抗人TfRscFv ,为抗人TfRscFv的应用奠定了基础。 展开更多
关键词 抗转铁蛋白受体 单链抗体 原核表达 跨膜糖蛋白
下载PDF
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
上一页 1 2 … 5 下一页 到第 页
使用帮助 返回顶部