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PCR方法鉴别肉骨粉中的动物成份种类 被引量：23
1
作者 李林 徐江涛 +1 位作者 张永强 王志亮 《动物检疫》 2004年第4期29-31,共3页
为防范疯牛病传入我国,有必要鉴别肉骨粉中动物成份的种类。针对牛、羊、猪和鸡四种动物的特异性核苷酸序列,分别选用和设计了四对特异性引物,用试剂盒提取四种动物的肉骨粉或者处理过的肉组织中的DNA,然后进行PCR扩增,所扩增的目的片... 为防范疯牛病传入我国,有必要鉴别肉骨粉中动物成份的种类。针对牛、羊、猪和鸡四种动物的特异性核苷酸序列,分别选用和设计了四对特异性引物,用试剂盒提取四种动物的肉骨粉或者处理过的肉组织中的DNA,然后进行PCR扩增,所扩增的目的片断大小分别为271bp、199bp、196bp、148bp,运用PCR技术建立了鉴定这四种动物源性成分的方法。结果分别扩增出四种动物的特异性条带,证明该PCR方法具有很高的特异性和敏感性,而且成本低廉,简便易行,因此可以作为鉴别肉骨粉种类的常规方法。 展开更多
关键词 PCR方法 鉴别技术 肉骨粉 动物成份 品种类型 引物序列 牛海绵状脑病 人畜共患病
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淫羊藿-蜂胶佐剂的免疫调节作用 被引量：17
2
作者 刘家国 胡元亮 +1 位作者 张宝康 宋大鲁 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期383-385,共3页
用微量全血 3H-Td R掺入法测定了淫羊藿 -蜂胶 (以下简称淫 -蜂 )佐剂对 4周龄和 8周龄小鼠外周血中 T淋巴细胞转化率的影响。结果 :4周龄小鼠 T淋巴细胞转化率 ,淫 -蜂佐剂 ( YF)组显著高于阴性对照( C)组、淫 -蜂 /环磷酰胺 ( YF/ Cy... 用微量全血 3H-Td R掺入法测定了淫羊藿 -蜂胶 (以下简称淫 -蜂 )佐剂对 4周龄和 8周龄小鼠外周血中 T淋巴细胞转化率的影响。结果 :4周龄小鼠 T淋巴细胞转化率 ,淫 -蜂佐剂 ( YF)组显著高于阴性对照( C)组、淫 -蜂 /环磷酰胺 ( YF/ Cy)组和环磷酰胺 ( Cy)组 ( P <0 .0 5) ;YF/ Cy组略低于 C组 ,但此 2组均显著高于 Cy组 ( P <0 .0 5)。对于 8周龄小鼠 ,除 YF组与 Cy组之间表现出明显差异 ( P <0 .0 5)外 ,其他各组间均无显著差异 ( P >0 .0 5)。表明 :淫 -蜂佐剂不仅能提高外周血 T淋巴细胞的转化率 ,而且可对抗环磷酰胺对 T淋巴细胞活性的抑制作用 ,使受抑制的 T淋巴细胞转化活性基本恢复正常。上述作用在幼鼠中表现尤其明显。以间接 ELISA检测了淫 -蜂佐剂对家兔血清特异性抗体水平的影响。结果 :淫 -蜂佐剂抗原组兔血清特异性抗体水平显著高于无佐剂抗原组 ,抗体高水平维持的时间也更长 ;与油佐剂组相比 ,抗体产生的时间亦更早。说明淫 -蜂佐剂作为佐剂配合抗原应用 ,能提高抗原的免疫原性 。 展开更多
关键词 中药免疫调节剂 免疫佐剂 淫羊藿 蜂胶
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荣昌猪盲肠微生物消化粗纤维的体外试验研究 被引量：6
3
作者 胥清富 孙镇平 +2 位作者 杨建生 王金洛 任明强 《扬州大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 1999年第3期31-34,共4页
将羧甲基纤维素(CMC)、稻草粉、稻草秆作底物,分别与5头空怀荣昌母猪的盲肠内容物上清液一起,进行体外液体或半流体培养,以灭菌的上清液培养作空白对照,观察荣昌猪盲肠微生物对粗纤维的消化能力.试验结果:CMC培养液中有还原糖产生,并在... 将羧甲基纤维素(CMC)、稻草粉、稻草秆作底物,分别与5头空怀荣昌母猪的盲肠内容物上清液一起,进行体外液体或半流体培养,以灭菌的上清液培养作空白对照,观察荣昌猪盲肠微生物对粗纤维的消化能力.试验结果:CMC培养液中有还原糖产生,并在培养20～24h达到峰值;培养72h后,稻草粉、稻草秆液体和半流体培养,试验组干物质(DM)、酸性洗涤纤维(ADF)、纤维素(CL)消失率均高于空白对照组;半流体培养,稻草粉DM、ADF、CL净消失率和稻草秆DM净消失率都明显高于液体培养;两种培养状态下的稻草粉DM净消失率都高于稻草秆.结果表明:体外培养条件下,荣昌猪盲肠微生物有较强的消化粗纤维的能力; 展开更多
关键词 猪 盲肠 微生物 粗纤维素 消化 荣昌猪 体外试验
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狂犬病的实验室诊断 被引量：1
4
作者 姚真蓝 黄国庆 《国外畜牧学（猪与禽）》 2012年第7期49-51,共3页
狂犬病是由弹状病毒科、狂犬病病毒属的嗜神经病毒引起的一种世界性的人兽共患病。一旦出现症状,病死率近100%。由于该病无特征性大体病变,因而建立敏感、快速、准确的实验室诊断方法对狂犬病的防控工作至关重要。实验室诊断通常需要采... 狂犬病是由弹状病毒科、狂犬病病毒属的嗜神经病毒引起的一种世界性的人兽共患病。一旦出现症状,病死率近100%。由于该病无特征性大体病变,因而建立敏感、快速、准确的实验室诊断方法对狂犬病的防控工作至关重要。实验室诊断通常需要采集来自中枢神经的脑组织样本。通过病理组织学染色观察内基小体(Negri)是一种经典的实验室诊断方法,但是由于方法敏感性低,易受样本自溶的干扰,而已趋向于淘汰。抗原检测技术中首推的是荧光抗体试验(FAT):丙酮固定的脑组织切片在用荧光抗体染色后,可在荧光显微镜下观察是否有病毒包涵体或者病毒颗粒。此外,随着胶体金免疫层析法(GICA)在病原及小分子物质检测领域的快速发展,近年还出现了该技术用于狂犬病抗原检测的研究,且取得了较好效果。此外,小鼠颅内接种(MIT)和细胞培养分离(CIT)除了可用于狂犬病病毒培养外,还可单独作为诊断手段,或者配合FAT进行病原诊断。新鲜材料得到的单份阴性结果往往需要进行以MIT和CIT来进行再确认。此外巢式逆转录-聚合酶链式反应(NestedRT-PCR)可通过检测狂犬病病毒核酸来诊断病原,并进行分型。狂犬病的血清学试验在抗原诊断方面价值不大,多用于动物体内保护性抗体的检测。血清学试验中,荧光抗体中和试验(FAVN)及快速荧光抑制灶试验(RFFIT)是国际贸易规定的病毒中和试验。酶联免疫吸附试验(ELISA)也是一种快速、灵敏的血清学抗体检测方法,且如今已有包被狂犬病病毒G蛋白的间接ELISA试剂盒销售。 展开更多
关键词 狂犬病 组织病理学 病毒培养法 血清学诊断 抗原检测 病原核酸检测
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肠道病毒71型VP1蛋白单克隆抗体的制备及初步鉴定
5
作者 包林 张黎 +6 位作者 曾晓燕 郭喜玲 史凤娟 黄明明 梁淑仪 汪华 焦永军 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期37-41,共5页
目的:制备肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)VP1外壳蛋白单克隆抗体。方法:利用重组纯化的EV71-VP1蛋白为抗原免疫BALB/c鼠,按常规杂交瘤技术进行细胞融合,对阳性杂交瘤细胞进行筛选及亚克隆,获得1株能稳定分泌抗EV71-VP1抗体的杂交瘤... 目的:制备肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)VP1外壳蛋白单克隆抗体。方法:利用重组纯化的EV71-VP1蛋白为抗原免疫BALB/c鼠,按常规杂交瘤技术进行细胞融合,对阳性杂交瘤细胞进行筛选及亚克隆,获得1株能稳定分泌抗EV71-VP1抗体的杂交瘤细胞株6F2B9,细胞体外扩大培养后的上清用Protein G柱纯化,超滤后用BCA法测其浓度,用免疫球蛋白亚类鉴定试剂盒鉴定单克隆抗体亚型,间接ELISA方法检测其效价和特异性,间接免疫荧光法检测其与EV71病毒的特异性结合能力。结果:本研究得到的抗EV71-VP1抗体DSE-136,纯化后浓度为1.9 g/L,免疫球蛋白亚类为IgG2b,轻链属于κ链;间接ELISA检测效价为1∶3.2×105;间接免疫荧光结果显示其可与EV71病毒特异性结合。结论:成功制备出1个效价高、特异性好的抗EV71-VP1单克隆抗体DSE-136,为VP1抗原诊断、疫苗研发及其效果评价奠定了基础。 展开更多
关键词 肠道病毒71型 VP1蛋白 单克隆抗体
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编码日本血吸虫Argonaute 3蛋白全长cDNA的获得及初步研究 被引量：3
6
作者 陈晶 郭素霞 +4 位作者 杨燕萍 刘金明 林矫矫 李家奎 程国锋 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期310-314,共5页
目的获得日本血吸虫Argonaute3(Ago3)蛋白的全长编码cDNA并对其初步分析。方法利用cDNA末端快速扩增技术(RACE)获得日本血吸虫Ago3蛋白全长编码cDNA,利用原核表达系统对此蛋白片段进行重组表达,采用亲和层析法纯化重组蛋白,并免疫动物... 目的获得日本血吸虫Argonaute3(Ago3)蛋白的全长编码cDNA并对其初步分析。方法利用cDNA末端快速扩增技术(RACE)获得日本血吸虫Ago3蛋白全长编码cDNA,利用原核表达系统对此蛋白片段进行重组表达,采用亲和层析法纯化重组蛋白,并免疫动物制备多克隆抗体。利用Western blot技术分析该蛋白在日本血吸虫中的表达。结果采用RACE获得了日本血吸虫Ago3蛋白编码全长cDNA,长度为2772bp;利用原核表达系统获得了该蛋白片段的重组融合蛋白,并制备了多克隆抗体;Western blot分析表明,该抗体与日本血吸虫全虫蛋白在分子量约为100kDa处具有特异性反应。结论获得了编码日本血吸虫Ago3蛋白的全长编码cDNA,并制备了多克隆抗体,为进一步研究该蛋白的功能奠定了基础。 展开更多
关键词 日本血吸虫 Argonaute蛋白 CDNA末端快速扩增技术 非编码小RNA
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狂犬病的实验室诊断
7
作者 姚真蓝 《中国畜牧兽医文摘》 2013年第2期140-140,共1页
狂犬病是由弹状病毒科、狂犬病病毒属的嗜神经病毒引起的一种世界性的人兽共患病。一旦出现症状，病死率近100％。由于该病无特征性大体病变，因而建立敏感、快速、准确的实验室诊断方法对狂犬病的防控工作至关重要。实验室诊断通常需... 狂犬病是由弹状病毒科、狂犬病病毒属的嗜神经病毒引起的一种世界性的人兽共患病。一旦出现症状，病死率近100％。由于该病无特征性大体病变，因而建立敏感、快速、准确的实验室诊断方法对狂犬病的防控工作至关重要。实验室诊断通常需要采集来自中枢神经的脑组织样本。通过病理组织学染色观察内基小体（Negri）是一种经典的实验室诊断方法，但是由于方法敏感性低，易受样本自溶的干扰，而已趋向于淘汰。抗原检测技术中首推的是荧光抗体试验（FAT）：丙酮固定的脑组织切片在用荧光抗体染色后，可在荧光显微镜下观察是否有病毒包涵体或者病毒颗粒。 展开更多
关键词 实验室诊断 狂犬病病毒 荧光抗体染色 荧光抗体试验 弹状病毒 诊断方法 中枢神经 人兽共患病
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