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培养基对兔骨髓间充质干细胞扩增与分化的影响 被引量：8
1
作者 须珏华 胡静波 +1 位作者 周燕 谭文松 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期467-470,I0002,共5页
目的:考察α-MEM,DMEM-HG,DMEM-LG3种培养基对兔骨髓间充质干细胞体外贴壁、增殖与分化的影响。方法:实验于2005-04/2005-12在华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室完成。①兔骨髓间充质干细胞的获取:从1个月龄新西兰大白兔股骨中... 目的:考察α-MEM,DMEM-HG,DMEM-LG3种培养基对兔骨髓间充质干细胞体外贴壁、增殖与分化的影响。方法:实验于2005-04/2005-12在华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室完成。①兔骨髓间充质干细胞的获取:从1个月龄新西兰大白兔股骨中用全骨髓分离法分离得到兔骨髓间充质干细胞,体外培养,将第4代兔骨髓间充质干细胞分别在α-MEM,DMEM-HG,DMEM-LG三种培养基中以1×107L-1的密度培养于24孔板中,观察细胞形态,测生长曲线和贴壁率。②为消除贴壁差异,在α-MEM培养基中待接种的细胞贴附后,分别更换DMEM-HG或α-MEM培养基进行培养;在DMEM-HG培养基中贴附的细胞以同样方法处理,比较其生长速率和细胞密度。③以100个细胞/孔的密度将细胞接种于3种培养基的6孔板中,测克隆形成率。④细胞以0.5×107L-1的密度接种于24孔板,分别在3种培养基中扩增至50%汇合后,改用成骨诱导培养液进行诱导培养,茜素红染色测其矿化能力。结果:①3种培养基中细胞在α-MEM中贴壁率最高,达(41.7±1.4)%,第1天即进入对数生长期,平均比生长速率最大,为0.57d-1,平均倍增时间最短,为2d,培养期最大扩增倍数为27.9倍,克隆形成率最多,达(30.9±2.6)%。②消除贴壁差异后,细胞在不同培养基中生长无明显差别,两条生长曲线基本重合。③3种培养基中扩增的细胞经成骨诱导后,茜素红染色皆为阳性,其中DMEM-HG培养基中阳性最明显。结论:α-MEM培养基适合于骨髓间充质干细胞体外培养和扩增,引起细胞在不同培养基中生长差异的主要原因在于贴壁率的不同。 展开更多
关键词 骨髓细胞 间质干细胞 细胞粘附 细胞 培养的
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间充质干细胞在低氧环境下的增殖、代谢与成骨分化:胎盘羊膜及骨髓来源间充质干细胞的对比 被引量：7
2
作者 陈亭 周燕 +1 位作者 张治萍 谭文松 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期957-961,共5页
背景:目前关于低氧对间充质干细胞成骨分化影响的报道结果有差异,这些差异可能是采用氧体积分数不同引起的,也有可能是间充质干细胞来源不同引起的。目的:比较胎盘羊膜间充质干细胞和骨髓间充质干细胞在低氧下的生物性状差异。方法:两... 背景:目前关于低氧对间充质干细胞成骨分化影响的报道结果有差异,这些差异可能是采用氧体积分数不同引起的,也有可能是间充质干细胞来源不同引起的。目的:比较胎盘羊膜间充质干细胞和骨髓间充质干细胞在低氧下的生物性状差异。方法:两步酶消化法与全骨髓贴壁法分别获得人胎盘羊膜间充质干细胞和兔骨髓间充质干细胞,体外传代培养。分别取相同代次的人胎盘羊膜间充质干细胞和骨髓间充质干细胞,细胞以2×104cells/孔接种于12孔板,加入含体积分数为10%胎牛血清的α-MEM培养基,分别在体积分数为5%O2或体积分数为20%O2条件下培养生长12d。成骨诱导时,细胞以1×105cells/孔接种于12孔板,加入成骨诱导培养基,分别在体积分数为5%O2或体积分数为20%O2条件下成骨诱导14d。观察两种间充质干细胞在不同氧浓度下的生长情况及在不同氧浓度下葡萄糖的消耗与乳酸生成及成骨分化情况。结果与结论:与常氧组相比,低氧促进人胎盘羊膜间充质干细胞和骨髓间充质干细胞的增殖和成骨分化。但与骨髓间充质干细胞相比,低氧能更好地促进人胎盘羊膜间充质干细胞的增殖;低氧下人胎盘羊膜间充质干细胞消耗较少的葡萄糖,产生较少的乳酸。在成骨诱导方面,低氧显著促进骨髓间充质干细胞的碱性磷酸酶表达,且远高于人胎盘羊膜间充质干细胞,但是两者的单位细胞钙沉积量无明显差异。 展开更多
关键词 低氧 胎盘羊膜间充质干细胞 骨髓间充质干细胞 增殖 代谢 成骨分化
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