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免疫抑制性受体LILRB2对白血病细胞系增殖和凋亡的影响 被引量：1
1
作者 宇小婷 谢莉 +2 位作者 占蒙娜 郑俊克 于卓 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期967-972,977,共7页
目的探讨免疫抑制性受体—白细胞免疫球蛋白样受体亚家族B成员2(LILRB2)在人白血病细胞系中的表达、功能和相关机制,为白血病的靶向治疗提供新的方向。方法采用流式细胞术和Western blotting等方法确定LILRB2在THP1、U937、K562等白血... 目的探讨免疫抑制性受体—白细胞免疫球蛋白样受体亚家族B成员2(LILRB2)在人白血病细胞系中的表达、功能和相关机制,为白血病的靶向治疗提供新的方向。方法采用流式细胞术和Western blotting等方法确定LILRB2在THP1、U937、K562等白血病细胞系中的表达情况;以LILRB2高表达的THP1细胞为研究对象,利用特异性靶向LILRB2的shRNA慢病毒载体(带GFP标记)包装病毒并感染THP1细胞,使用流式细胞分选技术获得GFP+的稳定表达细胞株,并分别在mRNA水平和蛋白水平检测shRNA干扰效率,同时监测LILRB2敲除后不同时间点细胞增殖、凋亡等细胞命运的变化,分析LILRB2敲除后其下游调控信号改变等相关分子机制。结果 3株细胞系均表达LILRB2,其中又以THP1的表达最高;通过Real-Time PCR及Western blotting方法表明所构建的4个shRNA慢病毒干扰质粒中,shLILRB2-717及shLILRB2-1312能显著下调LILRB2的表达;抑制LILRB2在THP1细胞中的表达可导致细胞增殖明显减缓并出现大量坏死细胞。流式细胞术分析显示:shLILRB2-717和shLILRB2-1312组细胞早期凋亡率分别为(7.90±1.61)%和(24.80±1.32)%,显著高于对照组(Scramble组)的(3.96±0.64)%(P<0.05);两组细胞的晚期凋亡率分别为(13.80±0.98)%和(23.60±1.03)%,均显著高于Scramble组的(10.80±0.48)%(P<0.05);LILRB2敲除可导致SHP1和磷酸化SHP1(p-SHP1)表达的显著下调,提示LILRB2可能通过SHP1调控白血病细胞系的增殖和凋亡。结论免疫抑制性受体LILRB2可表达在多种白血病细胞系,抑制LILRB2的表达可引起THP1细胞中SHP1和p-SHP1的显著下调并导致细胞大量凋亡,揭示SHP1可能对白血病的演变具有正向调控作用。 展开更多
关键词 免疫抑制性受体 白细胞免疫球蛋白样受体亚家族B成员2 白血病 凋亡 SHP1
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抑癌基因PTEN对细胞增生的调控机制 被引量：2
2
作者 熊忠 陈国强 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期878-885,共8页
人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源的基因(PTEN)是近年来研究较多的抑癌基因,与肿瘤的关系极其密切。PTEN的异常导致PI3K-AKT信号通路活化是其引起癌症发生的主要机制。因此,关于PTEN调控机制的研究对于揭示其新的致病机制和寻... 人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源的基因(PTEN)是近年来研究较多的抑癌基因,与肿瘤的关系极其密切。PTEN的异常导致PI3K-AKT信号通路活化是其引起癌症发生的主要机制。因此,关于PTEN调控机制的研究对于揭示其新的致病机制和寻找新的治疗方案有着十分重要的意义。该文主要就PTEN在转录以及转录后调控、蛋白质翻译后修饰和蛋白之间相互作用等方面进行了论述,阐述了其在细胞中被调控的机制。 展开更多
关键词 抑癌基因 人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源的基因 细胞调控
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基于MRM-MS技术的蛋白质生物标志物研究的前景 被引量：2
3
作者 韩冰 王立顺 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期484-488,共5页
随着蛋白质组学技术的兴起，疾病生物标志物的研究发展迅速，但筛选出的海量候选标志物却极少进入临床应用。近几年，基于MRM—MS技术的方法和策略凭借其低成本、耗时短、高灵敏度、高准确性等优势引起了国内外检验医学界的广泛关注。基... 随着蛋白质组学技术的兴起，疾病生物标志物的研究发展迅速，但筛选出的海量候选标志物却极少进入临床应用。近几年，基于MRM—MS技术的方法和策略凭借其低成本、耗时短、高灵敏度、高准确性等优势引起了国内外检验医学界的广泛关注。基于MRM—MS的技术，特别是SISCAPA技术，可能在不远的将来将逐步发展成为蛋白质生物标志物研究的快车道。本文分析了当前生物标志物研究领域的瓶颈，系统阐述了MRM—MS技术的原理和特点，以及近年来该技术在蛋白质生物标志物研究领域的主要应用现状，并展望其发展前景。 展开更多
关键词 生物学标记 蛋白质组 肽类 质谱分析法
原文传递
基于SISCAPA技术的疾病标志物的转化医学研究
4
作者 王馨悦 韩冰 王立顺 《国际检验医学杂志》 CAS 2012年第20期2524-2526,共3页
基于蛋白质组学技术的基础生物研究筛选出了大量蛋白候选标志物，由于缺乏有效的验证手段。阻碍了其在疾病诊断、临床处理和疾病预后中的应用。目前，验证疾病候选标志蛋白主要依赖于免疫学分析方法，如ELISA。但对所有候选标志物都开发... 基于蛋白质组学技术的基础生物研究筛选出了大量蛋白候选标志物，由于缺乏有效的验证手段。阻碍了其在疾病诊断、临床处理和疾病预后中的应用。目前，验证疾病候选标志蛋白主要依赖于免疫学分析方法，如ELISA。但对所有候选标志物都开发ELISA法，是不切合实际的，因为抗体开发费用高昂，耗时长，成功率低[1-3]。 展开更多
关键词 质谱分析 抗肽抗体 免疫亲和富集 稳定同位素标记 转化医学
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