复方紫归对^（60）Co　γ射线照射小鼠免疫功能的影响 被引量：9

1

作者 吕秋军 黄沙菲 +2 位作者 周锡鹏 宋家云 唐仲雄 《中华放射医学与防护杂志》 CAS CSCD 北大核心 1995年第1期17-19,共3页

作者在实验中观察了复方紫归对６０Ｃｏγ射线照射小鼠免疫功能的影响．结果表明该复方能显著增强受照小鼠刀豆蛋白Ａ及细菌脂多糖诱导的脾细胞增殖反应，促进腹腔巨噬细胞分泌白细胞介素－１及脾细胞分泌白细胞介素－２．提高受照小鼠... 作者在实验中观察了复方紫归对６０Ｃｏγ射线照射小鼠免疫功能的影响．结果表明该复方能显著增强受照小鼠刀豆蛋白Ａ及细菌脂多糖诱导的脾细胞增殖反应，促进腹腔巨噬细胞分泌白细胞介素－１及脾细胞分泌白细胞介素－２．提高受照小鼠自然杀伤细胞的活性，揭示本复方可减轻６０Ｃｏγ射线对小鼠免疫功能的抑制作用。 展开更多

关键词 复方紫归 Γ射线照射 B淋巴细胞 自然杀伤细胞

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人源受体hGPCRc工程细胞株的建立及其应用 被引量：1

2

作者 袁广胜 刘永学 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期818-822,共5页

目的建立孤儿G蛋白偶联受体(OrphanGproteincoupledreceptors,oGPCRs)配基筛选体系并应用于化合物的筛选。方法利用RTPCR从人结肠组织获得oGPCR成员hGPCRc的氨基酸编码序列,在利用相关软件对hGPCRc的结构特点进行分析的基础上,构建hGPCR... 目的建立孤儿G蛋白偶联受体(OrphanGproteincoupledreceptors,oGPCRs)配基筛选体系并应用于化合物的筛选。方法利用RTPCR从人结肠组织获得oGPCR成员hGPCRc的氨基酸编码序列,在利用相关软件对hGPCRc的结构特点进行分析的基础上,构建hGPCRc之表达载体pcDNA3.1(+)hGPCRc,转染CHOK1细胞获得CHOhGPCR工程细胞株,将不同化合物作用于细胞株,用Fluo3为分子探针检测细胞内钙离子浓度变化,以分析化合物中是否为该受体的特异性配基。结果生物信息学分析得到:hGPCR定位于人染色体13q32.2,对应的氨基酸序列组成了7个跨膜区段的结构域,在进化树上与人源P2Y1受体最亲近,应属于人类GPCR成员;成功得到CHOhGPCRc工程细胞株;所检测化合物作用于细胞株并没有引起胞内钙离子的波动,很可能没有活化hGPCRc。结论hGPCRc是一个与已知人P2Y1最近的成员,但基于CHOhGPCRc工程细胞株的第二信使筛选结果表明,hGPCRc并不被P2Y1的已知配基活化因此很可能属于不同于P2Y1的嘌呤类受体新亚型。 展开更多

关键词 孤儿G蛋白偶联受体 hGPCRc 钙 CHO—K1细胞系 工程细胞株

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辐射小鼠骨髓CD34^+细胞的变化及其意义 被引量：18

3

作者 马增春 高月 +4 位作者 刘永学 谭洪玲 张立 陶来宝 陈鹏 《中华放射医学与防护杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期12-15,共4页

目的　研究γ射线照射后C5 7小鼠骨髓中CD34+细胞的数量变化规律及其意义。方法　流式细胞仪测定CD34+细胞在骨髓有核细胞中的比例 ;AnnexinV FITC试剂盒检测骨髓细胞的凋亡 ;细胞固定后PI染色测定细胞周期。结果　①CD34+细胞在骨髓有... 目的　研究γ射线照射后C5 7小鼠骨髓中CD34+细胞的数量变化规律及其意义。方法　流式细胞仪测定CD34+细胞在骨髓有核细胞中的比例 ;AnnexinV FITC试剂盒检测骨髓细胞的凋亡 ;细胞固定后PI染色测定细胞周期。结果　①CD34+细胞在骨髓有核细胞中的比例随照射剂量的加大而降低 ,在 5 5Gy照射后 14d内小鼠CD34+细胞的减少表现为持续性 ;②小鼠照射后6h骨髓细胞凋亡率最高 ,以 5 5Gy照射组最为明显 ;③ 5 5Gy照射后小鼠骨髓细胞周期紊乱。 结论　γ射线损伤骨髓中的干祖细胞 ,造成骨髓中干祖细胞的数量减少 ,其途径之一是诱导骨髓细胞凋亡。 展开更多

关键词 辐射 骨髓 细胞凋亡 CD34 细胞周期 流式细胞仪

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MTT方法测定培养细胞抗药水平的评价 被引量：14

4

作者 王楠 汤仲明 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第5期421-424,共4页

用ＭＴＴ方法测定了多药抗药细胞ＭＣＦ－７Ａｄｒ及其敏感细胞ＭＣＦ－７ＷＴ对阿霉素、长春新碱、秋水仙碱的化学敏感性。ＭＣＦ－７Ａｄｒ与ＭＣＦ－７ＷＴ相比，对三种药物有明显的抗药性。维拉帕米可逆转ＭＣＦ－７Ａｄｒ对阿霉素... 用ＭＴＴ方法测定了多药抗药细胞ＭＣＦ－７Ａｄｒ及其敏感细胞ＭＣＦ－７ＷＴ对阿霉素、长春新碱、秋水仙碱的化学敏感性。ＭＣＦ－７Ａｄｒ与ＭＣＦ－７ＷＴ相比，对三种药物有明显的抗药性。维拉帕米可逆转ＭＣＦ－７Ａｄｒ对阿霉素的抗药性。随选择药物撤除时间的延长，ＭＣＦ－７Ａｄｒ的抗药水平逐渐下降。Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交显示ＭＣＦ－７Ａｄｒ细胞有典型的ＭＤＲ１基因扩增现象。用ＭＴＴ方法测定Ｓｗｉｓｓ３Ｔ３细胞对阿霉素、长春新碱、秋水仙碱的化学敏感性，同时测定时各亚克隆株间差异较小，而分批测定时，不同批次相差很大。结果说明，ＭＴＴ方法能有效地检测出抗药细胞株的相对抗性；并提示，应在同时用完全相同的条件进行杀伤试验与ＭＴＴ测试，以避免批次间差异。 展开更多

关键词 抗药性 阿霉素 长春新碱 秋水仙碱 MTT方法

全文增补中

CHO-hm_1R工程细胞株的建立及乙酰胆碱对其细胞内钙离子浓度的影响 被引量：3

5

作者 余少平 熊永炎 +5 位作者 王琼 贺艳丽 伍仕敏 高月 高沛永 刘永学 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期17-21,共5页

目的　获得表达人毒蕈碱样乙酰胆碱Ⅰ型受体(hm1 R)的工程细胞株 (CHO hm1 R)并鉴定表达受体是否具有相应的功能活性。方法　以健康人基因组DNA为模板 ,PCR扩增hm1 R之cDNA ,并构建pcDNA3 .1 (+) hm1 R表达载体 ,转染CHO K1 细胞获得CH... 目的　获得表达人毒蕈碱样乙酰胆碱Ⅰ型受体(hm1 R)的工程细胞株 (CHO hm1 R)并鉴定表达受体是否具有相应的功能活性。方法　以健康人基因组DNA为模板 ,PCR扩增hm1 R之cDNA ,并构建pcDNA3 .1 (+) hm1 R表达载体 ,转染CHO K1 细胞获得CHO hm1 R工程细胞株 ,将不同浓度的乙酰胆碱作用于细胞 ,以Fura 2为荧光探针检测细胞内钙离子浓度变化 ;同时 ,观察阿托品预处理对乙酰胆碱作用的影响。结果　成功得到CHO hm1 R工程细胞株 ;乙酰胆碱 1 0 ,1 0 0 μmol·L-1 均可增高细胞内钙离子浓度 ,此反应可被阿托品 50 0 μmol·L-1 完全阻断。结论　CHO hm1 R工程细胞株可以用于hm1 R配基的检测 。 展开更多

关键词 受体 毒草碱样 乙酰胆碱 阿托品 钙离子浓度 细胞 CHO—K1

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过氧化物酶体增殖物激活型受体激活剂对新生大鼠心肌细胞肿瘤坏死因子-α的影响 被引量：10

6

作者 方红 周新 +4 位作者 叶平 贺艳丽 王琼 高月 刘永学 《军事医学科学院院刊》 CSCD 北大核心 2003年第2期89-91,95,共4页

目的 :探讨过氧化物酶体增殖物激活型受体 (peroxisomeproliferator_activatedreceptors ,PPARs)激活剂对新生大鼠心肌细胞肿瘤坏死因子_α(tumornecrosisfactor_α ,TNFα)和PPARs自身表达水平的影响。方法 :体外原代培养新生Wistar大... 目的 :探讨过氧化物酶体增殖物激活型受体 (peroxisomeproliferator_activatedreceptors ,PPARs)激活剂对新生大鼠心肌细胞肿瘤坏死因子_α(tumornecrosisfactor_α ,TNFα)和PPARs自身表达水平的影响。方法 :体外原代培养新生Wistar大鼠心肌细胞 ,分别给予不同浓度的非诺贝特 (PPARα激活剂 )或吡格列酮 (PPARγ激活剂 )刺激 ,并辅加脂多糖诱导TNFα表达。采用半定量RT_PCR法检测TNFα ,PPARα及PPARγmRNA的表达 ,ELISA法检测TNFα的蛋白水平 ,Western印迹法检测PPARα和PPARγ蛋白表达。结果 :与对照组相比 ,非诺贝特组和吡格列酮组的TNFαmRNA及蛋白表达水平均明显降低 ,且呈剂量依赖性。而相应PPARα和PPARγ表达则无显著变化。结论 :PPARα和PPARγ激活剂可显著抑制新生大鼠心肌细胞中脂多糖诱导的TNFα表达 ,PPARα和PPARγ活化后发挥抗炎作用 。 展开更多

关键词 心肌细胞 肿瘤坏死因子-Α 过氧化物酶体增殖物激活型受体激活剂 抗炎药物

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过氧化物酶体增殖物活化型受体γ在抑制大鼠心肌肥厚中的作用 被引量：8

7

作者 伍仕敏 叶平 +1 位作者 周新 刘永学 《中华心血管病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期250-253,共4页

目的　探讨过氧化物酶体增殖物活化型受体γ(peroxisomeproliferator activatedreceptorγ ,PPARγ)在大鼠心肌肥厚过程中的作用。方法　新生大鼠的原代心肌和非心肌培养细胞 ,以血管紧张素Ⅱ诱导建立体外心肌肥厚模型 ,并用不同浓度的P... 目的　探讨过氧化物酶体增殖物活化型受体γ(peroxisomeproliferator activatedreceptorγ ,PPARγ)在大鼠心肌肥厚过程中的作用。方法　新生大鼠的原代心肌和非心肌培养细胞 ,以血管紧张素Ⅱ诱导建立体外心肌肥厚模型 ,并用不同浓度的PPARγ内、外源性激活物 15脱氧前列腺素J2 (15d PGJ2 )和吡格列酮作用细胞。采用RT PCR法检测心肌肥厚特征性基因心钠肽和脑钠肽mRNA的表达 ,以MTT比色法和3 H TdR掺入实验检测非心肌细胞增殖情况 ,以3 H 亮氨酸掺入实验检测心肌细胞蛋白合成速率 ,并用软件分析心肌细胞表面积。结果　血管紧张素Ⅱ诱导后 ,心肌细胞表面积、心钠肽和脑钠肽mRNA的表达以及蛋白合成速率增加 ;非心肌细胞增殖活跃 ,但心钠肽和脑钠肽mRNA的表达没有显著变化。PPARγ激活物 15d PGJ2 和吡格列酮可以逆转这些变化 ,同时下调非心肌细胞的心钠肽和脑钠肽mRNA的表达 ,并呈一定的剂量依赖性。 展开更多

关键词 过氧化物酶体增殖物活化型受体γ 抑制 大鼠 心肌肥厚 转录因子 心肌病

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吡格列酮对大鼠肥大心肌细胞炎性细胞因子表达的影响 被引量：10

8

作者 杨维 叶平 +5 位作者 周新 伍仕敏 盛莉 陈静 韩春光 刘永学 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 北大核心 2006年第8期552-555,共4页

目的探讨过氧化物酶体增殖物活化受体γ(PPARγ)激活剂吡格列酮对体外肥大心肌细胞炎性细胞因子表达水平的影响。方法体外培养新生Wistar大鼠心肌细胞,以血管紧张素Ⅱ刺激建立心肌细胞肥大模型,培养的心肌细胞分为3组,正常对照组,肥大... 目的探讨过氧化物酶体增殖物活化受体γ(PPARγ)激活剂吡格列酮对体外肥大心肌细胞炎性细胞因子表达水平的影响。方法体外培养新生Wistar大鼠心肌细胞,以血管紧张素Ⅱ刺激建立心肌细胞肥大模型,培养的心肌细胞分为3组,正常对照组,肥大模型组,吡格列酮组(51、0、20μmol/L)。用软件分析心肌细胞表面积,3H-亮氨酸掺入检测心肌细胞蛋白合成速率,采用半定量逆转录聚合酶链反应法检测心肌细胞肥大特征性基因心钠肽(ANP),脑钠肽(BNP),炎性细胞因子白细胞介素-1β(IL-1β),白细胞介素-6(IL-6),基质金属蛋白酶2(MMP2)、MMP9以及PPARγ的mRNA表达。结果血管紧张素Ⅱ诱导后,心肌细胞表面积、ANP、BNP的mRNA表达以及蛋白合成速率增加;IL-1β,IL-6,MMP2,MMP9的mRNA表达也增加;PPARγ的mRNA表达下降。吡格列酮可以逆转心肌细胞肥大,下调ANP、BNP和炎性细胞因子及MMPs的mRNA表达,增加PPARγ的mRNA表达,并呈一定的剂量依赖性。结论吡格列酮能够抑制大鼠心肌细胞肥大,这一作用可能与其增加PPARγ的mRNA表达,下调炎性细胞因子的表达有关。 展开更多

关键词 心肌病 肥厚性 吡格列酮 细胞因子 基质金属蛋白酶 大鼠

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吡格列酮体外对大鼠心肌肥大的改善作用 被引量：7

9

作者 伍仕敏 叶平 +3 位作者 周新 王琼 罗成华 刘永学 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期45-49,共5页

目的　探讨噻唑烷二酮 (TZD)类药物吡格列酮在体外对心肌肥大的影响。方法　新生大鼠的原代培养心肌细胞和非心肌细胞 ,以血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )刺激建立体外心肌肥大模型 ,并用不同浓度的吡格列酮作用细胞。采用RT PCR法检测心肌肥大... 目的　探讨噻唑烷二酮 (TZD)类药物吡格列酮在体外对心肌肥大的影响。方法　新生大鼠的原代培养心肌细胞和非心肌细胞 ,以血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )刺激建立体外心肌肥大模型 ,并用不同浓度的吡格列酮作用细胞。采用RT PCR法检测心肌肥大特征性基因心钠肽 (ANP)和脑钠肽(BNP)的mRNA表达 ,以MTT比色法和3 H TdR参入实验检测非心肌细胞增殖情况 ,以3 H 亮氨酸参入实验检测心肌细胞蛋白合成速率 ,并用软件分析心肌细胞表面积。结果　肥大模型出现后 ,心肌细胞表面积、ANP和BNP的mRNA表达以及蛋白合成速率增加 ;非心肌细胞增殖活跃 ,但ANP和BNP的mRNA表达没有变化。吡格列酮可以逆转这些变化 ,同时下调非心肌细胞的ANP和BNP的mRNA表达 ,并呈一定的剂量依赖性。结论　吡格列酮体外对大鼠心肌肥大有改善作用 。 展开更多

关键词 吡格列酮 心肌肥大 ANP BNP

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不饱和脂肪酸影响HepG-2细胞PAI-1表达的机制初探 被引量：2

10

作者 贺艳丽 叶平 +3 位作者 周新 方红 王琼 刘永学 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期436-440,共5页

目的 :探讨不饱和脂肪酸对HepG - 2细胞纤溶酶原激活物抑制剂 - 1(PAI- 1)表达的影响及其机制。方法 :以发色底物法检测PAI- 1活性 ,RT -PCR法检测PAI- 1mRNA水平 ;构建两个含不同片段缺失的PAI- 1启动子序列控制表达的氯霉素转移乙酰酶... 目的 :探讨不饱和脂肪酸对HepG - 2细胞纤溶酶原激活物抑制剂 - 1(PAI- 1)表达的影响及其机制。方法 :以发色底物法检测PAI- 1活性 ,RT -PCR法检测PAI- 1mRNA水平 ;构建两个含不同片段缺失的PAI- 1启动子序列控制表达的氯霉素转移乙酰酶 (CAT)报告基因质粒 ,转染HepG - 2细胞 ,ELISA法检测CAT表达量。结果 :油酸、亚油酸诱导下HepG - 2细胞PAI- 1mRNA表达及蛋白活性显著高于对照组 ;共转染过氧化体增殖物激活型受体表达质粒 (PPARα -pSG5 )PAI- 1转录活性显著增加 ;转染NF -κB样蛋白结合序列缺失的重组质粒 ,亚油酸诱导下PAI- 1转录活性显著增加 ,而转染VLDL/脂肪酸反应元件缺失的重组质粒则无显著变化。结论 :不饱和脂肪酸增强HepG - 2细胞PAI- 1mRNA表达及活性 ;PPARα可能是其上调PAI- 1表达所涉及的转录因子之一 ,且VLDL/脂肪酸反应元件在该调控中具有重要作用 ,但可能并不涉及NF -κB信号转导途径。 展开更多

关键词 脂肪酸类 不饱和 纤溶酶原激活物抑制物1 HEPG-2细胞

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PPARγ激活物对体外肥大心肌细胞的影响 被引量：3

11

作者 伍仕敏 周新 +3 位作者 叶平 王琼 高月 刘永学 《军事医学科学院院刊》 CSCD 北大核心 2004年第2期105-107,170,共4页

目的 :探讨PPARγ激活物吡格列酮和 15脱氧前列腺素J2 (15d PGJ2 )对体外肥大心肌细胞的影响。方法 :新生大鼠的原代培养心肌细胞 ,以血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )刺激建立体外肥大心肌细胞模型 ,并用不同浓度的吡格列酮和 15d PGJ2 作用于上... 目的 :探讨PPARγ激活物吡格列酮和 15脱氧前列腺素J2 (15d PGJ2 )对体外肥大心肌细胞的影响。方法 :新生大鼠的原代培养心肌细胞 ,以血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )刺激建立体外肥大心肌细胞模型 ,并用不同浓度的吡格列酮和 15d PGJ2 作用于上述细胞。采用RT PCR法检测肥大心肌细胞特征性基因心钠肽 (ANP)和脑钠肽 (BNP)的mRNA表达 ,以3 H 亮氨酸掺入实验检测心肌细胞蛋白合成速率 ,并分析心肌细胞表面积。结果 :所建立的肥大心肌细胞模型呈现心肌细胞表面积、ANP和BNP的mRNA表达以及蛋白合成速率均为增加 ;而吡格列酮和 15d PGJ2 可以逆转这些变化 ,并呈一定的剂量依赖性。结论 :PPARγ激活物吡格列酮和 15d PGJ2 对体外心肌细胞肥大有抑制作用 。 展开更多

关键词 过氧化物酶体增殖物激活型受体Γ 心肌肥大 吡格列酮 15脱氧前列腺素J2 过氧化物酶体增殖物

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PPARα激活物影响HepG-2细胞PAI-1表达机制初探

12

作者 叶平 贺艳丽 +1 位作者 王琼 刘永学 《中华内科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第10期743-746,共4页

目的　探讨不同的过氧化体增殖物激活型受体α(PPARα)激活物对HepG 2细胞纤溶酶原激活物抑制剂 1(PAI 1)活性和mRNA表达的影响及其可能的机制。方法　分别以亚油酸和非诺贝特刺激HepG 2细胞 ,检测PAI 1活性和mRNA表达。基因瞬时转染... 目的　探讨不同的过氧化体增殖物激活型受体α(PPARα)激活物对HepG 2细胞纤溶酶原激活物抑制剂 1(PAI 1)活性和mRNA表达的影响及其可能的机制。方法　分别以亚油酸和非诺贝特刺激HepG 2细胞 ,检测PAI 1活性和mRNA表达。基因瞬时转染含不同片段缺失的PAI 1启动子序列控制表达的报告基因质粒 ,测定亚油酸和非诺贝特诱导后的转录活性。结果　亚油酸使HepG 2细胞PAI 1mRNA表达及蛋白活性显著增加 ,而非诺贝特使其著降低。转染HepG 2细胞由PAI 1启动子全长控制的表达质粒 ,亚油酸诱导PAI 1转录活性显著增加 ,非诺贝特显著抑制其转录活性 ;转染PAI 1启动子序列核转录因子κB(NF κB)反应元件缺失的质粒时 ,亚油酸和非诺贝特仍显著增加PAI 1转录活性 ;而转染PAI 1启动子序列极低密度脂蛋白 (VLDL) /脂肪酸反应元件缺失的质粒时 ,亚油酸对PAI 1转录活性无诱导作用 ,非诺贝特可下调其转录活性。结论　PPARα可能是亚油酸增强PAI 1表达所涉及的转录因子之一 ;非诺贝特下调PAI 1表达可能涉及对NF κB信号转导途径的抑制作用。 展开更多

关键词 PPARα激活物 HEPG-2细胞 PAI-1 过氧化体增殖物激活型受体α激活物 纤溶酶原激活物抑制剂-1

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过氧化体增殖物激活型受体激活物对HepG-2细胞PAI-1表达的影响 被引量：1

13

作者 贺艳丽 周新 +4 位作者 叶平 方红 刘永学 罗成华 王琼 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期298-301,共4页

目的 :观察不同的过氧化体增殖物激活型受体 (peroxisomeproliferator activatedreceptors,PPARs)激活物对HepG 2细胞纤溶酶原激活物抑制剂 1 (plasminogenactivatorinhibitor 1 ,PAI 1 )mRNA表达及其活性的影响 ,探讨过氧化体增殖物... 目的 :观察不同的过氧化体增殖物激活型受体 (peroxisomeproliferator activatedreceptors,PPARs)激活物对HepG 2细胞纤溶酶原激活物抑制剂 1 (plasminogenactivatorinhibitor 1 ,PAI 1 )mRNA表达及其活性的影响 ,探讨过氧化体增殖物激活型受体在PAI 1基因调控中的作用。方法 :分别利用硬脂酸、油酸、亚油酸、非诺贝特、吡格列酮作为诱导因素刺激HepG 2细胞 ,采用半定量RT PCR法检测PAI 1mRNA及PPARsmRNA的转录水平 ,比色法检测PAI 1活性变化 ,Westernblot法检测PPARs蛋白表达情况。结果 :与对照组比较 ,油酸、亚油酸组HepG 2细胞PAI 1mRNA表达及蛋白活性显著增加 ;非诺贝特组HepG 2细胞PAI 1mRNA表达及活性显著降低 ;硬脂酸、吡格列酮组HepG 2细胞PAI 1mRNA表达及蛋白活性均无显著变化 ;各组PPARs在mRNA及蛋白水平均无明显差异。结论 :PPARs激活物对HepG 2细胞PAI 1mRNA表达及其活性具有调节作用 ,PPARα可能是实现该调节作用的重要途径之一 ,同时不排除其他调控因素介入该调节过程。 展开更多

关键词 过氧化体增殖物激活型受体 激活物 HEPG-2细胞 PAI-1 表达 凝血系统

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PPARγ依赖和非依赖途径参与吡格列酮对人肝癌细胞的增殖抑制作用 被引量：1

14

作者 张克惠 伍仕敏 +1 位作者 杨华芬 刘永学 《军事医学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期521-526,共6页

目的观察过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)特异性外源配体吡格列酮(Pio)对体外培养的HepG2细胞增殖作用的影响,并探讨其是否通过PPARγ依赖途径发挥作用。方法将不同浓度的Pio作用于体外培养HepG2细胞,MTT比色法检测HepG2细胞增殖... 目的观察过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)特异性外源配体吡格列酮(Pio)对体外培养的HepG2细胞增殖作用的影响,并探讨其是否通过PPARγ依赖途径发挥作用。方法将不同浓度的Pio作用于体外培养HepG2细胞,MTT比色法检测HepG2细胞增殖情况,3H-TdR掺入实验检测细胞DNA合成速率,采用RT-PCR和Western印迹检测PPARγmRNA和蛋白的表达,流式细胞术检测细胞周期;同时观察PPARγ特异性拮抗剂GW9662和(或)瞬时转染pSG5-PPARγ真核表达质粒、PPARγ小干扰RNA(pGCsi-PPARγ)表达质粒稳定转染对Pio细胞增殖作用的影响。结果 Pio作用于HepG2细胞后,导致HepG2细胞的增殖受到抑制、DNA合成速率减慢,呈一定的剂量依赖关系;在此过程中,G0/G1期细胞比例明显增加,S期细胞比例明显减少,但PPARγmRNA和蛋白的表达没有显著变化;GW9662可以部分拮抗Pio的增殖抑制效应,但转染pSG5-PPARγ真核表达质粒可以逆转GW9662的作用;利用pGCsi-PPARγ表达质粒将PPARγ基因沉默后,Pio在高浓度(20μmol/L)时亦表现出细胞增殖抑制作用。结论 Pio能够抑制HepG2细胞的增殖,该作用与其诱导细胞G0/Gl期的停滞有关,PPARγ依赖和非依赖途径参与上述过程。 展开更多

关键词 过氧化物酶体增殖物激活受体Γ 吡格列酮 HEPG2细胞 细胞增殖 PPARγ依赖途径 PPARγ非依赖途径

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红细胞生成素受体mRNA在慢性肾功能衰竭大鼠骨髓细胞中表达减少

15

作者 吕秋军 叶棋浓 +3 位作者 高月 温利青 郭绍明 孙哲 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 1999年第3期217-220,共4页

采用RT-PCR方法观察次全肾切除大鼠的骨髓细胞中红细胞生成素(EPO)受体mRNA表达的变化,结果发现急性贫血可使骨髓细胞中EPO受体mRNA表达显著增多,而次全肾切除大鼠的骨髓细胞中EPO受体mRNA表达显著减少。结论表明,慢性肾功能衰竭能明显... 采用RT-PCR方法观察次全肾切除大鼠的骨髓细胞中红细胞生成素(EPO)受体mRNA表达的变化,结果发现急性贫血可使骨髓细胞中EPO受体mRNA表达显著增多,而次全肾切除大鼠的骨髓细胞中EPO受体mRNA表达显著减少。结论表明,慢性肾功能衰竭能明显抑制EPO受体基因表达,提示这一作用参与慢性肾功能衰竭贫血的发生。 展开更多

关键词 次全肾切除大鼠 肾功能衰竭 肾性贫血 红细胞生成素 红细胞生成素受体

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重组葡激酶致突变检测试验

16

作者 刘永学 王琼 高沛永 《癌变．畸变．突变》 CAS CSCD 2004年第5期298-300,共3页

背景与目的 :观察重组葡激酶有否遗传毒性。材料与方法 :分别经Ames试验、CHL细胞染色体畸变试验和昆明种小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验对其进行了系统检测。结果 :在5个给药剂量(40、20、5.7、3.5、0.7mg/皿)和±S9 mix的情况下 ,... 背景与目的 :观察重组葡激酶有否遗传毒性。材料与方法 :分别经Ames试验、CHL细胞染色体畸变试验和昆明种小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验对其进行了系统检测。结果 :在5个给药剂量(40、20、5.7、3.5、0.7mg/皿)和±S9 mix的情况下 ,重组葡激酶对组氨酸营养缺陷型鼠伤寒沙门氏菌株TA97、TA98、TA100 和TA102 均无诱发回变作用 ;CHL细胞经重组葡激酶3个剂量(5、2.5和1.25mg/ml)作用一定时间 ,无论在有否活化剂的情况下亦未检测到明显的细胞染色体畸变 ;昆明种雄性成熟小鼠经3个剂量(500、250、125mg/kg)的重组葡激酶尾静脉注射给药后 ,股骨骨髓微核检查结果为阴性。结论 展开更多

关键词 重组葡激酶 AMES试验 染色体畸变 微核

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基质金属蛋白酶在肥厚心肌中的表达与过氧化物酶体增殖物活化受体γ激活剂的调控效应

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作者 杨维 周新 +2 位作者 叶平 伍仕敏 刘永学 《中国临床康复》 CSCD 北大核心 2006年第40期40-43,共4页

目的:观察过氧化物酶体增殖物活化受体γ激活剂吡格列酮对体外肥厚心肌细胞基质金属蛋白酶表达水平的影响。方法:实验于2005-04/12在军事医学科学院放射医学研究所药理毒理室完成。体外培养新生Wistar大鼠心肌细胞,以血管紧张素Ⅱ刺激... 目的:观察过氧化物酶体增殖物活化受体γ激活剂吡格列酮对体外肥厚心肌细胞基质金属蛋白酶表达水平的影响。方法:实验于2005-04/12在军事医学科学院放射医学研究所药理毒理室完成。体外培养新生Wistar大鼠心肌细胞,以血管紧张素Ⅱ刺激建立心肌肥厚模型。将心肌细胞分为5组,即正常对照组、心肌细胞肥大模型组及吡格列酮5,10,20μmol/L组,其中肥大模型组仅诱导心肌细胞肥大,不加吡格列酮处理;吡格列酮5,10,20μmol/L组分别在加入血管紧张素Ⅱ前30min,培养液中加入不同浓度的吡格列酮(5,10,20μmol/L)处理;正常对照组不加血管紧张素Ⅱ。采用半定量反转录-聚合酶链反应法检测心肌肥厚特征性基因心钠肽、脑钠肽、基质金属蛋白酶2,9以及过氧化物酶体增殖物活化受体γmRNA的表达水平,通过测定3H-亮氨酸掺入量检测心肌细胞蛋白合成速率,并用软件分析心肌细胞表面积。结果:①与正常对照组相比,心肌细胞肥大模型组心肌细胞表面积增加了49%(P<0.01)、蛋白合成速率显著增加(P<0.01),心钠肽、脑钠肽、基质金属蛋白酶2,9的mRNA表达也显著增加(P<0.01),过氧化物酶体增殖物活化受体γ的mRNA表达显著下降(P<0.01)。②与心肌细胞肥大模型组相比,吡格列酮10μmol/L组心肌细胞的表面积减小了19%;吡格列酮5,10,20μmol/L组的蛋白合成速率及心钠肽、脑钠肽的mRNA表达均显著降低(P<0.05～0.01),并呈一定的剂量依赖性;吡格列酮5,20μmol/L组的基质金属蛋白酶2,9mRNA的表达均显著降低(P<0.05～0.01),过氧化物酶体增殖物活化受体γmRNA的表达显著增加(P<0.05～0.01),并呈一定的剂量依赖性。结论:吡格列酮能够抑制大鼠的心肌肥厚,这一作用可能与其增加过氧化物酶体增殖物活化受体γmRNA表达,下调基质金属蛋白酶表达有关。 展开更多

关键词 心肌病 肥大性 噻唑类/治疗应用 受体 金属蛋白酶类

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