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植物抗逆性与水杨酸介导的信号传导途径的关系 被引量：130
1
作者 林忠平 胡鸢雷 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1997年第2期185-188,共4页
基因表达既受发育过程的调控又受外界环境的影响。无论是内因还是外因诱发一组基因表达时都涉及信号传导(signal transduction)问题。局部器官和组织所发生的生理变化的信息要传递到远处的组织,引起基因表达时间和空间上的协调。信号传... 基因表达既受发育过程的调控又受外界环境的影响。无论是内因还是外因诱发一组基因表达时都涉及信号传导(signal transduction)问题。局部器官和组织所发生的生理变化的信息要传递到远处的组织,引起基因表达时间和空间上的协调。信号传导途径的研究是当今分子生物学的研究热点之一。 作为信号传递的分子主要是小分子物质,属于次生代谢产物。也发现某些小肽具有信号分子的功能。信号分子可以在胞间扩散,亦可通过输导组织传送到远处的器官。 展开更多
关键词 植物抗逆性 水杨酸 信号传导 植物生态学
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干旱诱导性启动子驱动的海藻糖-6-磷酸合酶基因载体的构建及转基因烟草的耐旱性 被引量：78
2
作者 赵恢武 陈杨坚 +2 位作者 胡鸢雷 高音 林忠平 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 2000年第6期616-619,共4页
通过PCR程序克隆拟南芥 (Arabidopsisthaliana (L .)Heynh .)的干旱诱导性启动子Prd2 9A及来自酿酒酵母(SaccharomycescerevisiaeHansen)的海藻糖_6_磷酸合酶基因 (TPS) ,并将它们组成可在植物中表达的载体RT。通过根癌土壤杆菌 (Agroba... 通过PCR程序克隆拟南芥 (Arabidopsisthaliana (L .)Heynh .)的干旱诱导性启动子Prd2 9A及来自酿酒酵母(SaccharomycescerevisiaeHansen)的海藻糖_6_磷酸合酶基因 (TPS) ,并将它们组成可在植物中表达的载体RT。通过根癌土壤杆菌 (Agrobacteriumtumefaciens (SmithetTownsend)Conn)LBA44 0 4介导 ,获得转基因烟草 (NicotianatabacumL .)。Southern分析表明TPS基因已经整合到烟草基因组中。Northern分析表明TPS基因的表达受干旱胁迫的诱导。转基因烟草的形态发生多种改变 ,包括变矮 ,茎变细 ,叶子呈柳叶状 ,腋芽明显 ,同时耐旱性得到增强。 展开更多
关键词 干旱诱导性启动子 烟草耐旱性 TPS 转基因
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查尔酮合酶基因对转基因植物花色和育性的影响 被引量：80
3
作者 邵莉 李毅 +3 位作者 杨美珠 宋云 陈章良 萧师辉 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1996年第7期517-524,共8页
查尔酮合酶 ( chalcone synthase,CHS)是花色素合成途径中的一个关键酶 ,它在植物中表达量的改变可能影响花的颜色。从矮牵牛 ( Petunia hybrida)特定发育阶段的花瓣的 c DNA中 ,克隆到查尔酮合酶基因 ,并正向插入到原核表达载体和含有... 查尔酮合酶 ( chalcone synthase,CHS)是花色素合成途径中的一个关键酶 ,它在植物中表达量的改变可能影响花的颜色。从矮牵牛 ( Petunia hybrida)特定发育阶段的花瓣的 c DNA中 ,克隆到查尔酮合酶基因 ,并正向插入到原核表达载体和含有花椰菜花叶病毒 Ca MV 35 S启动子的真核表达载体中 ,在原核中得到高效表达 ,并通过土壤农杆菌介导的方法转化矮牵牛。转基因植物的花色不但发生了明显的变异 ,其育性也受到了影响 ,不能产生正常花粉粒 ,成为雄性不育植株。 Northern杂交表明 ,转基因植物花瓣中 。 展开更多
关键词 查尔酮合酶 花色素 植物 转基因植物 花色 育性
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冷诱导基因的转录因子CBF1转化油菜和烟草及抗寒性鉴定 被引量：60
4
作者 甄伟 陈溪 +2 位作者 孙思洋 胡鸢雷 林忠平 《自然科学进展（国家重点实验室通讯）》 2000年第12期1104-1108,共5页
为研究冷诱导基因的转录因子CBFI(C-repeat binding factor)基因对植物抗寒的作用,利用PCR技术从拟南芥菜(Arabidopsis thaliana)中扩增并克隆了该转录因子,并将其与CaMV 35S启动子融合构建成植物表达载体pBPCBF1。以农杆菌介导的叶盘法... 为研究冷诱导基因的转录因子CBFI(C-repeat binding factor)基因对植物抗寒的作用,利用PCR技术从拟南芥菜(Arabidopsis thaliana)中扩增并克隆了该转录因子,并将其与CaMV 35S启动子融合构建成植物表达载体pBPCBF1。以农杆菌介导的叶盘法,分别转化了油菜和烟草。经PCR程序的DNA分析和Southern杂交对具有卡那霉素抗性的再生植株进行了鉴定,表明CBFl基因已整合进烟草和油菜基因组中。以电解质渗漏法分别检测了转化的油菜和烟草的抗寒性,结果显示转基因油菜的抗寒性较未转基因油菜有明显提高,转基因烟草抗寒性也有一定的提高。因此利用对转录因子的调控来提高植物的抗寒性可能有很好的应用前景。 展开更多
关键词 CBF1基因 遗传转化 抗寒性 转基因烟草 转基因油菜 冷诱导基因
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抗虫植物基因工程研究进展 被引量：57
5
作者 朱新生 朱玉贤 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1997年第3期282-288,共7页
虫害是造成农业减产的主要原因之一。据不完全统计,全世界每年因虫害引起的作物减产达总产量的15％,损失高达数千亿美元。在我国,因虫害水稻减产在lO％以上;小麦减产近20％;
关键词 抗虫植物 基因工程 抗虫育种 作物育种
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一种耐酚菌种及其固定化细胞降解含酚废水性能的比较研究 被引量：33
6
作者 孙艳 李京 谭立扬 《环境科学研究》 EI CAS CSCD 北大核心 1999年第1期1-4,9,共5页
通过对土壤及污水的采样、分离、纯化，得到了一种降解苯酚的菌种，经过一系列驯化实验，使其苯酚耐受能力达９１５ｍｇ／Ｌ。在此基础上，利用正交实验，确定了该菌种固定化细胞制备的最优操作条件。之后，对游离细胞和固定化细胞的降... 通过对土壤及污水的采样、分离、纯化，得到了一种降解苯酚的菌种，经过一系列驯化实验，使其苯酚耐受能力达９１５ｍｇ／Ｌ。在此基础上，利用正交实验，确定了该菌种固定化细胞制备的最优操作条件。之后，对游离细胞和固定化细胞的降解苯酚过程进行了动力学分析与比较。结果表明，２种类型细胞的降解苯酚过程均符合Ｍｏｎｏｄ模型，并且固定化细胞的降解效果明显高于游离细胞。 展开更多
关键词 苯酚 固定化细胞 模型 降解 耐酚菌种 废水处理
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耐旱植物厚叶旋蒴苣苔BDN1脱水素基因的克隆及表达特性分析 被引量：28
7
作者 赵恢武 刘晗 +4 位作者 于海源 胡鸢雷 高音 林忠平 李振宇 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2000年第15期1648-1654,共7页
根据已知植物脱水素基因的保守区域设计引物，采用ＲＴ－ＰＣＲ方法从耐旱植物厚叶旋蒴苣苔的总 ｃＤＮＡ中扩增出一个 ５００ ｂｐ的与植物脱水素基因同源的序列．结合 ５’ＲＡＣＥ获得了植物脱水素基因家族一个新成员ＢＤＮ１的全长... 根据已知植物脱水素基因的保守区域设计引物，采用ＲＴ－ＰＣＲ方法从耐旱植物厚叶旋蒴苣苔的总 ｃＤＮＡ中扩增出一个 ５００ ｂｐ的与植物脱水素基因同源的序列．结合 ５’ＲＡＣＥ获得了植物脱水素基因家族一个新成员ＢＤＮ１的全长ｃＤＮＡ（１１４８ ｂｐ）．Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交分析表明，ＢＤＮ１基因在厚叶旋蒴苣苔基因组中以单拷贝形式存在．Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交结果表明，该基因的表达受干旱、寒冷及ＡＢＡ的诱导．推测该基因与厚叶旋蒴苣苔的耐旱特性有关． 展开更多
关键词 耐旱植物 厚叶旋蒴苣苔 脱水素基因 表达 克隆
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鱼体内金属硫蛋白与水环境关系的研究 被引量：31
8
作者 林芃 任宏伟 茹炳根 《北京大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期779-784,共6页
金属硫蛋白 (Metallothionein ,简称MT)能有效地表征水体中重金属对生物的影响 ,故以鱼类MT含量来评价武汉东湖的水环境。对不同组织中MT含量测定可研究不同组织对重金属的积累能力 ;不同鱼种体内MT含量测定以了解鱼种对金属耐受力的影... 金属硫蛋白 (Metallothionein ,简称MT)能有效地表征水体中重金属对生物的影响 ,故以鱼类MT含量来评价武汉东湖的水环境。对不同组织中MT含量测定可研究不同组织对重金属的积累能力 ;不同鱼种体内MT含量测定以了解鱼种对金属耐受力的影响 ;而对不同水体中鱼类MT含量的分析 ,则对确定污染源及污染程度有重要意义。 展开更多
关键词 金属硫蛋白 水质污染 体内重金属积累 生物标志物 耐受力 鱼类 水质监测
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蚯蚓体内一种纤溶酶原激活剂(e-PA)的分离纯化 被引量：36
9
作者 杨嘉树 李令媛 茹炳根 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1998年第2期156-163,共8页
为获得一种高效，低廉的溶栓药物，从赤子爱胜蚓（Ｅｉｓｅｎｉａｆａｅｔｉｄａ）体内分离纯化出一种可体外激活纤溶酶原从而间接降解纤维蛋白的酶（ｅ－ＰＡ）．纯化过程包括：粗品的盐析，离子交换层析，凝胶过滤层析及疏水相互作用... 为获得一种高效，低廉的溶栓药物，从赤子爱胜蚓（Ｅｉｓｅｎｉａｆａｅｔｉｄａ）体内分离纯化出一种可体外激活纤溶酶原从而间接降解纤维蛋白的酶（ｅ－ＰＡ）．纯化过程包括：粗品的盐析，离子交换层析，凝胶过滤层析及疏水相互作用层析．该组份是由二个亚基通过疏水相互作用维系在一起的．通过凝胶过滤层析，可测得全酶的分子量为４５０００；ＳＤＳ电泳显示大、小亚基的分子量分别是２６０００与１８０００；而质谱法测得的大、小亚基的分子量分别为２４５５６．７与１５５４６．６．对大小亚基进行了氨基酸组成分析，结果显示大亚基不含Ｌｙｓ而小亚基不含Ｃｙｓ．测定了大亚基Ｎ端２５个氨基酸序列：ＶＩＧＧＴＮＡＳＰＧＥＩＰＷＱＬＳＱＱＲＱＳＧＳＷ．并与部分已知蛋白质序列进行了比较． 展开更多
关键词 赤子爱胜蚓 纤溶酶原激活剂 分离 纯化
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花分生组织决定基因AP1转化矮牵牛的研究 被引量：37
10
作者 安利忻 刘荣维 +1 位作者 陈章良 李毅 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 2001年第1期63-66,共4页
利用RT_PCR方法从拟南芥 (Arabidopsisthaliana (L .)Heynh .)中克隆了花分生组织决定基因 (flower_meristem_identitygene)AP1,进行了全序列测定。测序结果显示 ,所得到的基因与发表的序列仅有一个碱基的差异 ,但并不影响蛋白质的一级... 利用RT_PCR方法从拟南芥 (Arabidopsisthaliana (L .)Heynh .)中克隆了花分生组织决定基因 (flower_meristem_identitygene)AP1,进行了全序列测定。测序结果显示 ,所得到的基因与发表的序列仅有一个碱基的差异 ,但并不影响蛋白质的一级结构。将AP1基因克隆入植物中间载体p2 0 8,通过根癌土壤杆菌 (Agrobacteriumtumefaciens (SmithetTownsend)Conn)介导的方法转化矮牵牛 (PetuniahybridaVilm .)。对转基因植株进行了PCR和Southern检测 ,所得到的两个株系的转基因矮牵牛在R0 代即表现出提前且持续不断地开花的特性 。 展开更多
关键词 拟南芥 花分生组织决定基因 AP1 矮牵牛 基因转化
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导入蜘蛛杀虫肽基因的烟草具有抗虫性 被引量：25
11
作者 蒋红 朱玉贤 陈章良 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1996年第2期95-99,共5页
用带有杀虫肽基因的农杆菌（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｍ ｅｆａｃｉｅｎｓ）ＬＢＡ４４０４ 转化烟草（Ｎｉｃｏｔｉａｎａ ｔａｂａｃｕｍ ）叶片，共获得３０ 株抗卡那霉素的再生植株． 用这些再生植株对棉铃虫（Ｈｅｌｉｏ... 用带有杀虫肽基因的农杆菌（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｍ ｅｆａｃｉｅｎｓ）ＬＢＡ４４０４ 转化烟草（Ｎｉｃｏｔｉａｎａ ｔａｂａｃｕｍ ）叶片，共获得３０ 株抗卡那霉素的再生植株． 用这些再生植株对棉铃虫（Ｈｅｌｉｏｔｈｉｓａｒｍ ｉｇｅｒａ）进行毒力测定，有３ 株转杀虫肽基因植株对棉铃虫有较强抗性． 与对照相比，这３ 株转基因烟草的杀虫率可达３０％～４５％ ，并能显著抑制昆虫蜕皮和生长发育，表现出明显的抗虫作用． 以这３ 株为主进行了ＰＣＲ 扩增及Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ实验，结果表明杀虫肽基因已插入到这３ 展开更多
关键词 烟草 蜘蛛杀虫肽基因 抗虫性 基因导入
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甜椒的离体再生及基因转化 被引量：41
12
作者 王玉文 杨美珠 +1 位作者 潘乃穟 陈章良 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1991年第10期780-786,共7页
本研究从我国的6个甜椒(Capsicum frutescens)栽培品种中筛选出'双丰'、'中椒二号','中椒三号'3个再生能力较强的基因型,以苗龄10-16天的子叶为外植体,经过芽诱导、芽伸长、根诱导、移入土壤四个步骤的离体培养... 本研究从我国的6个甜椒(Capsicum frutescens)栽培品种中筛选出'双丰'、'中椒二号','中椒三号'3个再生能力较强的基因型,以苗龄10-16天的子叶为外植体,经过芽诱导、芽伸长、根诱导、移入土壤四个步骤的离体培养,已获得能正常开花结实的再生植株。所有培养基以MS为基本培养基,附加不同种类不同浓度的植物激素。最适的芽诱导培养基为MS+4-6mg/L BA+0.5mg/L IAA,芽诱导率可达100%。诱导出的芽转入MS+2mg/L zeatin或2mg/L BA+1-2mg/L GA;的培养基上,可使芽伸长,伸长率为35%左右。已伸长的芽在生根培养基MS或MS+0.1-0.5mg/L NAA上生根后,转入土壤成为正常植株。以子叶为外植体,用叶盘法进行甜椒的基因转化工作,筛选出侵染性强的菌株C58和GV3111,并检测到GUS基因在甜椒子叶上的短期表达。在含50mg/L卡那霉素培养基上已获得抗性芽,进一步检测工作以及转移抗烟草花叶病毒和黄瓜花叶病毒基因的工作正在进行。 展开更多
关键词 甜椒 离体再生 基因转化
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高效马铃薯遗传转化体系的建立及甜蛋白基因的导入 被引量：30
13
作者 杨美珠 潘乃穟 陈章良 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1992年第1期31-36,共6页
本研究选用了三个马铃薯(Solanum Iuberosum L.)栽培品种“85T-14-3”、“86-2”及“Favorita”的块茎、微型薯和试管薯为起始材料,应用根癌农杆菌 Ti 质粒系统成功地建立了一种方法简单、速度快和频率高的遗传转化体系。其中试管薯薄... 本研究选用了三个马铃薯(Solanum Iuberosum L.)栽培品种“85T-14-3”、“86-2”及“Favorita”的块茎、微型薯和试管薯为起始材料,应用根癌农杆菌 Ti 质粒系统成功地建立了一种方法简单、速度快和频率高的遗传转化体系。其中试管薯薄片的转化速度最快,经根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)共培养后,薄片在100mg/L 卡那霉素的分化培养上,2—3周就可产生出抗性小芽,这些小芽进一步仲长后可在50—100mg/L 卡那霉素的无激素MS 培养基上生根。从共培养到转化植株的获得只需6—7周。微型薯和试管薯的转化频率较高,最高可达67.5%。大多数抗性植株均能检测到胭脂碱合成酶或 GUS 基因的表达。把带有甜蛋白基因和胭脂碱合成酶标记基因的Ti质粒导入马铃薯,获得大量转化植株。叶片抗性检测和 nopaline 检测可推断外源甜蛋白基因已进入马铃薯基因组。 展开更多
关键词 马铃薯 遗传转化 甜蛋白基因
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CHS基因外显子2的进化规律及其用于植物分子系统学研究的可行性 被引量：26
14
作者 王金玲 瞿礼嘉 +2 位作者 陈军 顾红雅 陈章良 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2000年第9期942-950,共9页
ＣＨＳ基因的外显子２在进化中较为保守．用ＰＣＲ方法，从低等的裸子植物（银杏、攀枝花、苏铁）和被子植物（玉兰、睡莲、垂柳、山茶）中成功地扩增了ＣＨＳ基因外显子２的部分序列，长约８６０ ｂｐ．对这些序列与已发表的序列（合... ＣＨＳ基因的外显子２在进化中较为保守．用ＰＣＲ方法，从低等的裸子植物（银杏、攀枝花、苏铁）和被子植物（玉兰、睡莲、垂柳、山茶）中成功地扩增了ＣＨＳ基因外显子２的部分序列，长约８６０ ｂｐ．对这些序列与已发表的序列（合计１９个科８３个序列）进行最简约性分析，结果表明，对于大部分科，同一科的序列形成一组，而少数科的序列则分散在相距较远的分支中．用ＣＨＳ基因全长编码区的ＤＮＡ序列构建的最简约树与用其外显子２构建的最简约树相同．相对进化速率检测结果显示，ＣＨＳ基因在不同科中进化速率不一致，菊科和茄科的非同义替换率与总的碱基替换率均很高，禾本科的非同义替换很快，而总的碱基替换并不快．从目前的结果来看，ＣＨＳ基因家族的成员在不同科中的重复和丢失事件的式样不一样，因此，很难找到在不同科中直系同源的成员来进行被子植物科间的系统发育研究，但可用它进行科以下分类等级的研究． 展开更多
关键词 CHS基因 外显子2 进化规律 植物 系统发育
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转基因马铃薯中病原诱导GO基因的表达及其对晚疫病的抗性 被引量：27
15
作者 甄伟 陈溪 +3 位作者 梁浩博 胡鸢雷 高音 林忠平 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2000年第10期1071-1075,共5页
利用 ＰＣＲ技术从黑曲霉（Ａｓｐｅｎｇｉｌｌｕｓ　ｎｉｇｅｒ）中扩增并克隆了葡萄糖氧化酶（ｇｌｕｃｏｓｅ ｏｘｉｄａｓｅ，简称ＧＯ）基因，并将马铃薯病原诱导型启动子（Ｐｒｎｌ－１基因启动子）与其融合构建了植物表达载体ｐ... 利用 ＰＣＲ技术从黑曲霉（Ａｓｐｅｎｇｉｌｌｕｓ　ｎｉｇｅｒ）中扩增并克隆了葡萄糖氧化酶（ｇｌｕｃｏｓｅ ｏｘｉｄａｓｅ，简称ＧＯ）基因，并将马铃薯病原诱导型启动子（Ｐｒｎｌ－１基因启动子）与其融合构建了植物表达载体ｐＣＡＭＧＯ．经农杆菌介导转化获得了转基因植株，Ｓｏｕｔｎｅｒｎ杂交显示葡萄糖氧化酶基因已经整合进马铃薯基因组．该基因的表达及所引起的Ｈ_２Ｏ_２的生成由淀粉－ＫＩ的显色反应得到证实．用马铃薯晚疫病 Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ ｉｎｄｓｔａｎｓ复合生理小种侵染，结果表明：转基因马铃薯中病原诱导型启动子可受马铃薯晚疫病病原的诱导；获得的转基因植株对晚疫病的抗性水平各不相同，多数表现发病时间推迟和病征明显减弱，其中４株表现明显抗性，１株形成过敏性病斑表现高度抗性．表明病原诱导型启动于驱动ＧＯ基因的表达在抗植物真菌病基因工程中具有很好的应用前景。 展开更多
关键词 转基因马铃薯 病原诱导型启动子 晚疫病 抗性
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水杨酸处理导致过氧化氢酶基因mRNA水平的下降 被引量：23
16
作者 宋泽双 江国英 +1 位作者 卢迎春 朱玉贤 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 1998年第4期422-425,共4页
用所克隆的大麦过氧化氢酶cDNA为探针 ,研究水杨酸对过氧化氢酶活性及基因表达的影响 .结果表明 ,浓度大于 3 0mmol/L的水杨酸对过氧化氢酶活性有显著抑制作用 ,Northern杂交分析显示水杨酸对过氧化氢酶活性的抑制作用是通过影响该基因... 用所克隆的大麦过氧化氢酶cDNA为探针 ,研究水杨酸对过氧化氢酶活性及基因表达的影响 .结果表明 ,浓度大于 3 0mmol/L的水杨酸对过氧化氢酶活性有显著抑制作用 ,Northern杂交分析显示水杨酸对过氧化氢酶活性的抑制作用是通过影响该基因的转录水平实现的 . 展开更多
关键词 过氧化氢酶 基因 水杨酸处理 SAR 大麦 MRNA水平
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通过转δ-OAT基因获得抗盐抗旱水稻 被引量：30
17
作者 吴亮其 范战民 +4 位作者 郭蕾 李勇青 张文静 瞿礼嘉 陈章良 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2003年第19期2050-2056,共7页
δ-OAT基因编码的鸟氨酸-δ-氨基转移酶是以鸟氨酸为前体合成脯氨酸途径中的关键酶。采用基因枪法将拟南芥δ-OAT基因导入粳稻品种中作321,通过PCR及分子杂交分析确定目的基因已插入水稻染色体中并得到超量表达。抗盐抗旱检测结果表明,... δ-OAT基因编码的鸟氨酸-δ-氨基转移酶是以鸟氨酸为前体合成脯氨酸途径中的关键酶。采用基因枪法将拟南芥δ-OAT基因导入粳稻品种中作321,通过PCR及分子杂交分析确定目的基因已插入水稻染色体中并得到超量表达。抗盐抗旱检测结果表明,水稻在受到渗透胁迫时会大量积累脯氨酸,各种条件下转基因水稻积累的脯氨酸是对照的5～15倍;同等胁迫条件下转基因株系相对生长更快,苗与根的生物学产量都要高于对照,最后种子产量也显著高于对照,如在0.1mol/L NaCl胁迫下转基因株系相对产量提高了16％～41％,说明δ-OAT基因超量表达并积累脯氨酸在抗渗透胁迫中有着重要作用,通过转化δ-OAT基因可以获得抗盐抗旱的基因工程水稻。 展开更多
关键词 抗盐抗旱水稻 转基因水稻 δ-OAT基因 基因枪法 PCR 分子杂交 鸟氨酸-δ-氨基转移酶
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籼稻明恢63成熟种子愈伤组织的诱导及转基因水稻的抗性检测 被引量：25
18
作者 王莉江 明小天 +2 位作者 安成才 苑华毅 陈章良 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期323-326,T001,共5页
利用不含附加营养成分的 2 ,4 D培养基 (2mg L)诱导明恢 6 3的成熟种子 ,9天预诱导后获得了大量的愈伤组织。利用基因枪辅助的土壤农杆菌转化法将天花粉蛋白 (Trichosanthin ,TCS)基因转入籼稻明恢 6 3的愈伤组织 ,并通过再生 (含有 3mg... 利用不含附加营养成分的 2 ,4 D培养基 (2mg L)诱导明恢 6 3的成熟种子 ,9天预诱导后获得了大量的愈伤组织。利用基因枪辅助的土壤农杆菌转化法将天花粉蛋白 (Trichosanthin ,TCS)基因转入籼稻明恢 6 3的愈伤组织 ,并通过再生 (含有 3mg L 6 BA ,0 .5mg LABA和 1mg LNAA的N6培养基 )获得了转基因植物。Southernblot分析和Westernblot检测证明外源基因已经插入到T0代明恢 6 3的基因组中并获得了表达。初步研究结果表明 。 展开更多
关键词 籼稻 明恢63 成熟种子 愈伤组织 诱导 转基因水稻 抗性 检测 天花粉蛋白 抗真菌
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蚯蚓体内一种纤溶酶原激活剂(e-PA)的部分性质研究 被引量：21
19
作者 杨嘉树 李令媛 茹炳根 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1998年第2期164-169,共6页
从赤子爱胜蚓（Ｅｉｓｅｎｉａｆａｅｔｉｄａ）中纯化出的一种纤溶酶原激活剂（ｅ－ＰＡ）在纤维蛋白平板上可表现出三种活性，分别记为：ＣＦＰｇ，ｕＣＦＰｇ和ｕＣＦ．为更好了解各种活性与ｅ－ＰＡ的纤溶能力的关系，考察了在ＳＤ... 从赤子爱胜蚓（Ｅｉｓｅｎｉａｆａｅｔｉｄａ）中纯化出的一种纤溶酶原激活剂（ｅ－ＰＡ）在纤维蛋白平板上可表现出三种活性，分别记为：ＣＦＰｇ，ｕＣＦＰｇ和ｕＣＦ．为更好了解各种活性与ｅ－ＰＡ的纤溶能力的关系，考察了在ＳＤＳ和不同抑制剂存在下各种活性的变化．结果表明，ＳＤＳ可以增强ＣＦＰｇ活性且使得ｅ－ＰＡ变得对一些抑制剂更敏感；ｌｅｕｐｅｐｔｉｎ，ｃｈｙｍｏｓｔａｔｉｎ，ｐｅｐｓｔａｔｉｎ，ａｐｒｏ－ｔｉｎｉｎ，ｐｈｅｎｙｌｍｅｔｈｙｌｓｕｌｆｏｎｙｌｆｌｕｏｒｉｄｅ（ＰＭＳＦ）和ｄｉｔｈｉｏｔｈｒｅｉｔｏｌ（ＤＴＴ）对ｕＣＦ没有影响；ｐｅｐ－ｓｔａｔｉｎ能增强ＣＦＰｇ和ｕＣＦＰｇ活性，Ｅ－６４（一种巯基抑制剂）能增强ｕＣＦＰｇ和ｕＣＦ活性．这些现象说明不能简单将ｅ－ＰＡ归结为丝氨酸蛋白酶或巯基蛋白酶．此外又以纤溶酶原为底物，分析了ｅ－ＰＡ在体外降解天然蛋白质的肽键特异性，结果表明：ｅ－ＰＡ可以切割碱性氨基酸，小的中性氨基酸及Ｍｅｔ的羧基端，同时ｅ－ＰＡ确能将纤溶酶原切割为纤溶酶；这一结论为ｅ－ＰＡ有可能成为新型溶栓药物提供了生化基础． 展开更多
关键词 SDS 纤溶酶原 抑制剂 性质
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番茄转果聚糖合酶基因获得抗寒植株 被引量：23
20
作者 王关林 李铁松 +3 位作者 方宏筠 胡鸢雷 赵恢武 林忠平 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2004年第8期1193-1197,共5页
从枯草芽孢杆菌毖Bacillus subtilis中分离克隆果聚糖合酶(levansucrase)基因sacB,构建置于CaMV35s启动子调控下的表达载体,通过农杆菌介导,将sacB基因导入番茄栽培品种碧娇。Southern杂交证明,目的基因已经整合到番茄基因组中。RT-PCR... 从枯草芽孢杆菌毖Bacillus subtilis中分离克隆果聚糖合酶(levansucrase)基因sacB,构建置于CaMV35s启动子调控下的表达载体,通过农杆菌介导,将sacB基因导入番茄栽培品种碧娇。Southern杂交证明,目的基因已经整合到番茄基因组中。RT-PCR分析表明,sacB基因在转基因植株中获得转录。在含50mg·ml-1卡那霉素生根培养基中转化植株生根良好。抗冻试验、叶片电导率测定、多糖含量测定的试验结果均表明,果聚糖合酶基因赋予转基因番茄良好的抗寒性状。 展开更多
关键词 番茄 转果聚糖合酶基因 抗寒植株 农杆菌转化
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