目的探讨体外诱导和纯化CD4^＋CD25^-T淋巴细胞（effector T cell，Teff）转化为CD4^＋CD8^-双阴性调节T细胞（double negative regulatory T cell，DNTreg）的最适条件。方法采用免疫磁珠分选方法提取C57BL／6小鼠的CD4^＋CD25^-T淋巴...目的探讨体外诱导和纯化CD4^＋CD25^-T淋巴细胞（effector T cell，Teff）转化为CD4^＋CD8^-双阴性调节T细胞（double negative regulatory T cell，DNTreg）的最适条件。方法采用免疫磁珠分选方法提取C57BL／6小鼠的CD4^＋CD25^-T淋巴细胞、DBA／2小鼠的成熟树突状细胞共培养，加入不同剂量的IL-2，通过流式细胞检测CD4^-CD8^-T细胞的转化比例并确定最适条件，免疫磁珠阴性选择分选提纯转化的CD3^＋CD4^-CD8^-T细胞，流式细胞仪检测转化的CD4^-CD8^-调节T细胞对CD4^＋CD25^-效应T细胞增殖抑制情况。结果CD4^＋CD25^-T淋巴细胞与DBA／2小鼠的树突状细胞共培养6d后检测Cd4^-CD8^-调节T细胞的转化比率为6．21％±2．03％，实验组加入不同浓度IL-2的转化率：A组（25ng／ml）为14．77％±2．15％，B组（50ng／m1）为21．29％±2．68％，C组（75ng／m1）为43．45％±4．45％，D组（100ng／ml）为28．59％±3．05％，IL-2浓度在75ng／ml时，转化获得率最高（C组与对照组、实验A、B、D组比较分别t=10．700，8．288，6．158，3．932，均P〈0．05）；分离提纯CD4^-CD8^-双阴性调节细胞纯度达到98．10％，CD4^-CD8^-双阴性调节细胞与CFSE染色的CIM^＋CD25^-T淋巴细胞、小鼠树突状细胞共培养6d，实验组增殖指数为1．15明显低于对照组2．07。结论小鼠CD4^＋CD25^-T淋巴细胞在体外，成熟树突状细胞刺激下可转化为CD4^-CD8^-双阴性调节T细胞，IL-2可显著提高其转化率。展开更多
文摘目的探讨体外诱导和纯化CD4^＋CD25^-T淋巴细胞（effector T cell，Teff）转化为CD4^＋CD8^-双阴性调节T细胞（double negative regulatory T cell，DNTreg）的最适条件。方法采用免疫磁珠分选方法提取C57BL／6小鼠的CD4^＋CD25^-T淋巴细胞、DBA／2小鼠的成熟树突状细胞共培养，加入不同剂量的IL-2，通过流式细胞检测CD4^-CD8^-T细胞的转化比例并确定最适条件，免疫磁珠阴性选择分选提纯转化的CD3^＋CD4^-CD8^-T细胞，流式细胞仪检测转化的CD4^-CD8^-调节T细胞对CD4^＋CD25^-效应T细胞增殖抑制情况。结果CD4^＋CD25^-T淋巴细胞与DBA／2小鼠的树突状细胞共培养6d后检测Cd4^-CD8^-调节T细胞的转化比率为6．21％±2．03％，实验组加入不同浓度IL-2的转化率：A组（25ng／ml）为14．77％±2．15％，B组（50ng／m1）为21．29％±2．68％，C组（75ng／m1）为43．45％±4．45％，D组（100ng／ml）为28．59％±3．05％，IL-2浓度在75ng／ml时，转化获得率最高（C组与对照组、实验A、B、D组比较分别t=10．700，8．288，6．158，3．932，均P〈0．05）；分离提纯CD4^-CD8^-双阴性调节细胞纯度达到98．10％，CD4^-CD8^-双阴性调节细胞与CFSE染色的CIM^＋CD25^-T淋巴细胞、小鼠树突状细胞共培养6d，实验组增殖指数为1．15明显低于对照组2．07。结论小鼠CD4^＋CD25^-T淋巴细胞在体外，成熟树突状细胞刺激下可转化为CD4^-CD8^-双阴性调节T细胞，IL-2可显著提高其转化率。
