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叶下珠提取物对急性乙型肝炎小鼠乙型肝炎病毒复制及其抗原表达的影响 被引量：13
1
作者 吴莹 雷宇 +3 位作者 王媛媛 李姝玉 禄颖 王旭丹 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2014年第12期51-54,共4页
目的观察叶下珠提取物在小鼠急性乙型肝炎病毒(HBV)感染模型中对HBV复制及其抗原表达的影响。方法 C57b/6小鼠尾静脉注射1.3倍HBV真核表达质粒(p HBV1.3),20μg/只,建立小鼠急性HBV感染模型。实验小鼠随机分为正常组、病毒组及中药高、... 目的观察叶下珠提取物在小鼠急性乙型肝炎病毒(HBV)感染模型中对HBV复制及其抗原表达的影响。方法 C57b/6小鼠尾静脉注射1.3倍HBV真核表达质粒(p HBV1.3),20μg/只,建立小鼠急性HBV感染模型。实验小鼠随机分为正常组、病毒组及中药高、中、低剂量组,感染后第1日起,给药组分别给予相应剂量药物灌胃,连续3 d。感染后第4日,化学发光法检测血清乙型肝炎表面抗原(HBs Ag)、乙型肝炎e抗原(HBe Ag)水平,PCR检测血清HBV-DNA含量;免疫组化法检测肝组织乙型肝炎核心抗原(HBc Ag)、HBs Ag表达。结果中药各剂量组均能明显降低感染小鼠血清中HBs Ag、HBe Ag含量,与病毒组比较差异有统计学意义(P<0.01);中药高剂量组显著降低血清中HBV-DNA水平,与病毒组比较差异有统计学意义(P<0.01),中药中、低剂量组血清HBV-DNA含量降低,但与病毒组比较差异无统计学意义(P>0.05);中药高剂量组明显抑制了肝组织了HBc Ag及HBs Ag的表达(P<0.05)。结论叶下珠提取物明显抑制小鼠急性HBV感染模型小鼠HBV的复制与表达,具有直接抗病毒作用。 展开更多
关键词 叶下珠提取物 乙型肝炎病毒 复制 表达 水动力法 小鼠
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T淋巴细胞与炎症性肠病 被引量：8
2
作者 王旭丹 袁学勤 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第B03期95-97,100,共4页
炎症性肠病与自身免疫密切相关, T淋巴细胞在其发病机制中承担了重要的角色。CD4+ T细胞既可作为导致肠黏膜炎症的效应细胞、也可作为抑制肠黏膜炎症的调节细胞发挥作用。CD4+ T细胞在IL-12的作用下极化为Th1, 形成IFN-γ、TNF-α升高的... 炎症性肠病与自身免疫密切相关, T淋巴细胞在其发病机制中承担了重要的角色。CD4+ T细胞既可作为导致肠黏膜炎症的效应细胞、也可作为抑制肠黏膜炎症的调节细胞发挥作用。CD4+ T细胞在IL-12的作用下极化为Th1, 形成IFN-γ、TNF-α升高的Th1型炎症; 在IL 13的作用下极化为Th2, 出现IL-4、IL-5升高的Th2型炎症。某些CD4+ T分化为以分泌IL-10、TGF-β为主的调节细胞, 抑制肠黏膜炎症。CD8+ T细胞在炎症性肠病中的作用目前尚不十分明确。此外, 肠黏膜上皮中某些特有的T细胞如CD4+ CD8+ αα双阳性细胞和γδT细胞也参与了肠黏膜炎症的调节。对T细胞的深入研究, 为炎症性肠病的治疗提供了免疫学方向和策略。 展开更多
关键词 炎症性肠病 TH1/TH2细胞因子
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苏木醇提物对人肺癌A549细胞作用影响的研究 被引量：9
3
作者 彭新 顾立刚 《中国中医基础医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期547-549,共3页
目的:观察苏木醇提物对人肺癌A549细胞的细胞毒作用和诱导凋亡作用。方法:制备苏木醇提物按不同浓度分别同人肺癌A549细胞共同培养,MTT法检测对细胞增殖作用的影响,光学显微镜、细胞膜磷脂酰丝氨酸外翻分析、细胞周期分析观察不同浓度... 目的:观察苏木醇提物对人肺癌A549细胞的细胞毒作用和诱导凋亡作用。方法:制备苏木醇提物按不同浓度分别同人肺癌A549细胞共同培养,MTT法检测对细胞增殖作用的影响,光学显微镜、细胞膜磷脂酰丝氨酸外翻分析、细胞周期分析观察不同浓度苏木醇提物对人肺癌A549细胞的细胞毒和凋亡作用。结果:苏木醇提物对人肺癌A549细胞有抑制作用,并呈浓度依赖性;苏木醇提物在诱导细胞发生凋亡外还存在其他形式的细胞死亡方式并对细胞各期均有影响。 展开更多
关键词 苏木醇取物 人肺癌A549细胞 凋亡
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靶向ezrin、radixin、moesin的siRNA慢病毒感染原代肺微血管内皮细胞促进流感病毒的复制 被引量：4
4
作者 吴莹 张淑静 +4 位作者 张晨月 玄子男 李姝玉 高誉珊 胡雨 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期456-461,共6页
目的构建分别靶向ezrin(E)、radixin(R)、moesin(M)的siRNA慢病毒表达载体,转染原代大鼠肺微血管内皮细胞,观察其对E、R、M基因表达及流感病毒复制的影响。方法根据siRNA设计原理,化学合成靶向大鼠E、R、M基因的siRNA序列,克隆入慢病毒... 目的构建分别靶向ezrin(E)、radixin(R)、moesin(M)的siRNA慢病毒表达载体,转染原代大鼠肺微血管内皮细胞,观察其对E、R、M基因表达及流感病毒复制的影响。方法根据siRNA设计原理,化学合成靶向大鼠E、R、M基因的siRNA序列,克隆入慢病毒表达质粒GV248,构建分别靶向E、R、M基因的慢病毒siRNA载体Lenti-E-siRNA、Lenti-R-siRNA、Lenti-M-siRNA,同时构建靶向无关序列的Lenti-control-siRNA;组织块法分离培养大鼠原代肺微血管内皮细胞(PMVEC);Lenti-E-siRNA、Lenti-R-siRNA、Lenti-M-siRNA转染原代大鼠PMVEC后,荧光定量PCR检测E、R、M的mRNA的表达,Western blot法检测ERM蛋白的表达,激光共聚焦显微镜技术检测ERM蛋白的分布;FM1流感病毒鼠肺适应株感染慢病毒转染的PMVEC后,荧光定量PCR检测慢病毒载体对流感病毒复制的影响。结果重组质粒经测序鉴定,Lenti-E-siRNA、Lenti-R-siRNA、Lenti-MsiRNA、Lenti-control-siRNA构建成功。慢病毒载体转染大鼠PMVEC,感染复数(MOI)为10时感染率达80%以上。Lenti-E-siRNA、Lenti-R-siRNA、Lenti-M-siRNA明显抑制PMVEC中E、R、M的转录及表达。流感病毒感染PMVEC中,慢病毒空载体及Lenti-control-siRNA抑制流感病毒的复制,而Lenti-E-siRNA、Lenti-R-siRNA、Lenti-M-siRNA增加PMVEC中流感病毒的mRNA水平。结论成功构建靶向ERM基因的慢病毒载体,证实其可稳定转染PMVEC特异高效地抑制E、R、M基因表达;慢病毒载体本身能抑制PMVEC中流感病毒复制,而靶向E、R、M的慢病毒siRNA却促进流感病毒的复制。 展开更多
关键词 小干扰RNA EZRIN RADIXIN MOESIN 肺微血管内皮细胞 流感病毒 复制
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基于Blackboard网络平台微生物学课程的实践探索 被引量：7
5
作者 彭桂英 周英武 顾立刚 《中医药管理杂志》 2009年第6期522-523,共2页
文章介绍了教研室借助Blackboard在线教学管理平台,通过布置网络自主学习任务、课堂教师面授、师生网络在线交流以及评价体系等,将现代信息技术与微生物学科进行整合,优化大学微生物课堂教学,提高学生学习的自主性、教学组织的系统性和... 文章介绍了教研室借助Blackboard在线教学管理平台,通过布置网络自主学习任务、课堂教师面授、师生网络在线交流以及评价体系等,将现代信息技术与微生物学科进行整合,优化大学微生物课堂教学,提高学生学习的自主性、教学组织的系统性和教学效率。 展开更多
关键词 Blackboard网络平台 微生物学 教学改革
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痰热清注射剂对流感病毒FM1感染小鼠肺损伤治疗作用的研究 被引量：12
6
作者 顾立刚 郑金粟 +2 位作者 赵慧 贾翎 曾郁敏 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期1629-1629,共1页
痰热清注射剂是由黄芩、熊胆粉、山羊角粉、金银花、连翘等五味药物组成的中药制剂,五药相配具有清热解毒、化痰解痉的功效.在临床治疗中,痰热清注射液主要用于治疗呼吸道感染性疾病,本实验采用流感病毒FM1感染小鼠作为模型,研究痰热清... 痰热清注射剂是由黄芩、熊胆粉、山羊角粉、金银花、连翘等五味药物组成的中药制剂,五药相配具有清热解毒、化痰解痉的功效.在临床治疗中,痰热清注射液主要用于治疗呼吸道感染性疾病,本实验采用流感病毒FM1感染小鼠作为模型,研究痰热清注射液对其肺损伤及免疫功能的影响并阐明其作用机制,为痰热清注射液的临床应用提供理论依据.痰热清注射液对流感病毒FM1感染小鼠的死亡保护作用、血凝滴度、肺指数的影响:结果发现,痰热清注射液大、中、小治疗组小鼠对流感病毒FM1感染后的死亡保护率分别为(45.45、63.63、54.54%),模型对照组为(33.33%),与对照模型组比较,具有明显的保护作用,P值分别＜0.05;痰热清注射液对小鼠肺组织匀浆病毒血凝滴度明显降低,与流感病毒FM1感染模型组比较,差异显著,P＜0.05;痰热清注射液治疗组小鼠肺组织形态结构较为完整,偶可见少量淋巴细胞的浸润;痰热清注射液治疗组小鼠肺指数与模型组小鼠比较,显著降低,P＜0.05. 展开更多
关键词 呼吸道感染性疾病 流感病毒FM1 痰热清注射液 小鼠肺指数 治疗作用 肺损伤 注射剂 感染模型 0.05
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疏风宣肺方和解表清里方体外干预甲型流感病毒H1N1诱导炎性细胞因子分泌作用的研究 被引量：6
7
作者 葛世杰 刘晓婷 +6 位作者 张沂 卢娜娜 顾立刚 吴珺 邱泽计 张洪春 晁恩祥 《河北中医》 2015年第6期863-866,891,共5页
目的研究疏风宣肺方和解表清里方对甲型流感病毒H1N1感染的人肺腺癌上皮细胞(A549)中炎性细胞因子的影响。方法培养A549,甲型流感病毒H1N1感染A549后,分为细胞对照组、H1V1感染组、奥司他韦对照组、疏风宣肺组及解表清里组。采用实时定... 目的研究疏风宣肺方和解表清里方对甲型流感病毒H1N1感染的人肺腺癌上皮细胞(A549)中炎性细胞因子的影响。方法培养A549,甲型流感病毒H1N1感染A549后,分为细胞对照组、H1V1感染组、奥司他韦对照组、疏风宣肺组及解表清里组。采用实时定量聚合酶链式反应(RT-PCR)和Western blotting法检测各组细胞中炎症相关的白细胞介素(IL)1、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IL-6、IL-10、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、调节活化正常T细胞表达和分泌的趋化因子(RANTES)的mRNA及蛋白表达的变化。结果基因芯片结果提示,与细胞对照组比较,H1N1感染组差异表达基因Il1β、Thf、Ccl5、Il10、Il6、Ccl2明显上调。与H1N1感染组比较,奥司他韦组、疏风宣肺组和解表清里组差异基因Thf、Il1β、Ccl5、Il10、Il6、Ccl2表达显著下调。RT-PCR结果显示,与细胞对照组比较,H1N1感染组IL-1、TNF-α、IL-6、IL-10、MCP-1、RANTES的mRNA表达均显著升高(P<0.01)。与H1N1感染组比较,疏风宣肺组IL-1、TNF-α、IL-6、IL-10、MCP-1的mRNA表达均明显降低(P<0.01,P<0.05),解表清里组IL-1、TNF-α、IL-6、MCP-1的mRNA表达均明显降低(P<0.01,P<0.05)。Western blotting结果显示,H1N1感染组IL-1、TNF-α、IL-6、IL-10、MCP-1、RANTES蛋白表达较细胞对照组显著升高(P<0.05);与H1N1感染组比较,疏风宣肺组及解表清里组IL-1、TNF-α、IL-6、IL-10、MCP-1、RANTES蛋白表达均显著降低(P<0.05,P<0.01)。结论疏风宣肺方和解表清里方均可抑制流感病毒感染后炎性细胞因子IL-1、TNF-α、IL-6、MCP-1的mRNA过表达及蛋白分泌,减轻炎症反应,并恢复机体免疫功能的稳定和平衡。 展开更多
关键词 流感病毒A型 H1N1亚型 抗病毒药(中药) 炎症趋化因子类 体外研究 基因表达调控 病毒
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人参总皂苷和小檗碱对肺癌PG细胞“Fas反击”的影响 被引量：6
8
作者 王萍 郝钰 +1 位作者 吴珺 邱全瑛 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期601-603,共3页
目的:探讨人参总皂苷(Ginsenoside,Gs)和小檗碱(Berberine,Ber)对肿瘤"Fas反击"免疫逃逸机制的影响。方法:首先建立肺癌PG细胞与Jurkat细胞的共培养体系;Giemsa染色和流式细胞仪观察和检测共培养后的Jurkat细胞的凋亡;SABC免... 目的:探讨人参总皂苷(Ginsenoside,Gs)和小檗碱(Berberine,Ber)对肿瘤"Fas反击"免疫逃逸机制的影响。方法:首先建立肺癌PG细胞与Jurkat细胞的共培养体系;Giemsa染色和流式细胞仪观察和检测共培养后的Jurkat细胞的凋亡;SABC免疫细胞化学法检测Gs和Ber处理后的PG细胞FasL、Fas分子的表达。结果:Jurkat细胞与PG细胞共培养后产生凋亡,Gs和Ber处理的PG细胞诱导的Jurkat细胞凋亡更为显著;Gs和Ber可以上调PG细胞FasL、Fas分子的表达。结论:Gs和Ber可以促进PG细胞诱导Jurkat细胞凋亡的作用,其机制可能与Gs和Ber上调PG细胞FasL分子的表达有关。 展开更多
关键词 人参总皂苷 小檗碱 肿瘤 免疫逃逸 Fas反击
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人参总皂苷和小檗碱对肺癌PG细胞分泌免疫抑制性细胞因子的影响 被引量：5
9
作者 郝钰 王萍 +1 位作者 吴珺 邱全瑛 《中西医结合学报》 CAS 2008年第3期278-282,共5页
目的:观察人参总皂苷(ginsenoside,Gs)和小檗碱(berberine,Ber)对肿瘤细胞分泌免疫抑制性细胞因子转化生长因子β1(transforming growth factor-beta1,TGF-β1)和前列腺素E_2(prostaglandin E_2,PGE_2)的影响,探讨Gs和Ber对肿瘤免疫逃... 目的:观察人参总皂苷(ginsenoside,Gs)和小檗碱(berberine,Ber)对肿瘤细胞分泌免疫抑制性细胞因子转化生长因子β1(transforming growth factor-beta1,TGF-β1)和前列腺素E_2(prostaglandin E_2,PGE_2)的影响,探讨Gs和Ber对肿瘤免疫逃逸的作用机制。方法:首先建立人肺癌PG细胞与人T淋巴细胞株Jurkat细胞的共培养体系,随机分为Gs(100μg/ml)组、Ber(10μg/ml)组、空白对照组和Jurkat组。用Gs和Ber作用PG细胞24 h后与Jurkat细胞共培养,24 h后倒置显徽镜下观察Jurkat细胞生长的状态;台盼蓝拒染实验计数共培养6 h和24 h后Jurkat活细胞数;流式细胞仪检测共培养24 h后Jurkat细胞的凋亡率;100、50、25μg/ml的Gs和10、5、2.5μg/ml的Ber分别处理PG细胞,并设空白对照组(PG细胞未经药物处理),酶联免疫吸附测定法和放射免疫法检测PG细胞上清液TGF-β1和PGE_2的含量。结果:Jurkat细胞与Gs和Ber处理过的PG细胞共培养后,其数目较空白对照组明显减少,而凋亡率较空白对照组明显增加;Gs和Ber可以增加PG细胞TGF-β1的分泌,对PGE_2的分泌无影响。结论:Gs和Ber可以增强PG细胞导致的Jurkat细胞生长抑制和凋亡,其机制可能与Gs和Ber增加PG细胞分泌TGF-β1有关。 展开更多
关键词 人参皂苷类 小檗碱 抑制因子 免疫 转化生长因子B1 前列腺素E类
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艾迪注射液对氯化钴诱导的Hela细胞缺氧诱导因子-1蛋白稳定及转录活性的影响研究 被引量：3
10
作者 董云巧 顾金保 +1 位作者 顾立刚 李佩文 《北京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期42-45,共4页
目的研究抗癌中药复方艾迪注射液对缺氧诱导因子-1(HIF-1)蛋白稳定性及转录活性的影响。方法MTT法检测艾迪注射液对Hela细胞增殖的影响。构建缺氧诱导因子-1的荧光素酶报告基因Hypoxia-responsive element-luciferase reportor gene(HRE... 目的研究抗癌中药复方艾迪注射液对缺氧诱导因子-1(HIF-1)蛋白稳定性及转录活性的影响。方法MTT法检测艾迪注射液对Hela细胞增殖的影响。构建缺氧诱导因子-1的荧光素酶报告基因Hypoxia-responsive element-luciferase reportor gene(HRE-LUC)利用双荧光素酶顺式报告系统,氯化钴模拟化学缺氧条件,检测不同浓度艾迪注射液对HRE-LUC相对荧光素酶值的影响。Western blot在蛋白质水平进一步验证在此条件下艾迪注射液对HIF-1α亚基蛋白稳定性的影响,RT-PCR进一步验证在此条件下艾迪注射液对HIF-1下游靶基因腺苷酸激酶3(AK3)转录水平的影响。结果艾迪注射液对Hela细胞增殖有明显的抑制作用。艾迪注射液200、300、400mL/L培养基组特异性地抑制缺氧条件下Hela细胞HRE-LUC相对荧光素酶值(P<0.05),且抑制作用随剂量增加而增强;Western blot显示艾迪注射液抑制氯化钴诱导的HIF-1α蛋白聚集,且抑制作用随剂量增加而增强;RT-PCR证实不同剂量的艾迪注射液均有抑制AK3基因转录的作用。结论艾迪注射液对Hela细胞的增殖具有明显的抑制作用,其抗癌机制可能与抑制HIF-1α亚基蛋白稳定性及降低其转录活性有关。 展开更多
关键词 缺氧诱导因子-1 双荧光素酶报告系统 艾迪注射液
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