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葡萄酒相关酵母β-葡萄糖苷酶活性及影响因素研究 被引量：9
1
作者 王凤梅 张邦建 岳泰新 《中国酿造》 CAS 北大核心 2018年第7期83-87,共5页
以内蒙古西部地区分离到的6个属7个种共340株葡萄酒相关酵母菌株为材料,对产β-葡萄糖苷酶菌株进行初筛,进而采用对硝基苯基-β-D-吡喃葡萄糖苷(p NPG)法检测菌株胞外、胞壁结合及胞内β-葡萄糖苷酶活力,并对高酶活性菌株中β-葡萄糖苷... 以内蒙古西部地区分离到的6个属7个种共340株葡萄酒相关酵母菌株为材料,对产β-葡萄糖苷酶菌株进行初筛,进而采用对硝基苯基-β-D-吡喃葡萄糖苷(p NPG)法检测菌株胞外、胞壁结合及胞内β-葡萄糖苷酶活力,并对高酶活性菌株中β-葡萄糖苷酶的理化性质进行了研究。结果表明,分属5个属5个种(葡萄汁有孢汉逊酵母(Hanseniaspora uvarum)、酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、浅黄隐球酵母(Cryptococcus flavescens)、异常毕赤酵母(Pichia anomala)及星形假丝酵母(Candida stellata))的66株酵母菌株产β-葡萄糖苷酶,且胞内酶活性均高于胞壁结合酶活性;不同菌株中β-葡萄糖苷酶具有相同的理化性质,4%以上葡萄糖可抑制该酶的活性,5%~15%(V/V)的乙醇添加量对该酶活性无明显影响,其最适p H值为5.0~6.0,最适温度为40℃。 展开更多
关键词 葡萄酒 酵母 Β-葡萄糖苷酶 酶学性质
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转木糖还原酶基因XYL1酿酒酵母的构建及产木糖醇能力研究 被引量：4
2
作者 王凤梅 张邦建 +1 位作者 岳泰新 马利兵 《中国酿造》 CAS 北大核心 2018年第12期66-70,共5页
将人工合成的树干毕赤酵母(Pichia stipitis)的木糖还原酶基因XYL1插入酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)表达载体pYES2中,然后将重组质粒pYES2-XYL1导入酿酒酵母INVSc1中,构建转木糖还原酶基因XYL1酿酒酵母菌株INVSc1/pYES2-XYL1,最... 将人工合成的树干毕赤酵母(Pichia stipitis)的木糖还原酶基因XYL1插入酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)表达载体pYES2中,然后将重组质粒pYES2-XYL1导入酿酒酵母INVSc1中,构建转木糖还原酶基因XYL1酿酒酵母菌株INVSc1/pYES2-XYL1,最后采用营养缺陷培养基筛选转木糖还原酶基因酿酒酵母并对其产木糖醇的能力进行检测。结果表明,成功获得2株转木糖还原酶基因XYL1酿酒酵母菌株INVSc1/pYES2-XYL1-01、INVSc1/pYES2-XYL1-02,当两菌株以50 g/L木糖及10 g/L半乳糖为碳源发酵5 d后,木糖醇产量分别高达(13.68±2.37)g/L、(12.09±1.45)g/L,显著高于非转基因酿酒酵母INVSc1的木糖醇产量(1.08±0.37)g/L(P<0.05),说明XYL1基因的导入显著提高了酿酒酵母INVSc1生产木糖醇的能力(P<0.05)。为采用基因工程酿酒酵母制备食用木糖醇提供了理论及技术基础。 展开更多
关键词 酿酒酵母 木糖还原酶基因 工程菌构建 木糖醇
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内蒙古西部地区野生葡萄酒相关酵母发酵及产酯能力分析 被引量：4
3
作者 王凤梅 张邦建 岳泰新 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期825-830,共6页
【目的】探究葡萄酒相关酵母的发酵能力及产酯能力,筛选具有更高产酯能力的非酿酒酵母,为采用本土野生酵母混合发酵酿制具有地区特色的葡萄酒提供参考依据。【方法】以内蒙古西部地区分离到的分属6个属7个种[葡萄汁有孢汉逊酵母(Hanseni... 【目的】探究葡萄酒相关酵母的发酵能力及产酯能力,筛选具有更高产酯能力的非酿酒酵母,为采用本土野生酵母混合发酵酿制具有地区特色的葡萄酒提供参考依据。【方法】以内蒙古西部地区分离到的分属6个属7个种[葡萄汁有孢汉逊酵母(Hanseniaspora uvarum)、酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、浅黄隐球酵母(Cryptococcus flavescens)、异常毕赤酵母(Pichia anomala)、星形假丝酵母(Candida stellata)、东方伊萨酵母(Issatchenkia orientalis)和克鲁维毕赤酵母(Pichia kluyveri)]的7株葡萄酒相关酵母菌株为材料,以霞多丽葡萄汁为培养基质,采用单酵母菌种接种方式进行发酵,通过测定不同发酵时期的酵母细胞数量及发酵液残糖量评价不同酵母菌种的发酵能力,并采用气相色谱技术测定发酵产物中的4种酯类物质浓度。【结果】酿酒酵母的发酵能力显著高于6种非酿酒酵母(P<0.05,下同),20℃发酵10 d后,酿酒酵母发酵液中的残糖量为3 g/L,酵母细胞数107～108个/mL,酒精度可达11.6%(v/v),葡萄酒pH为3.33;而6株野生非酿酒酵母菌株酿制的葡萄酒在酒精度、酵母细胞数及总失重方面均低于酿酒酵母;不同酵母菌种的产酯能力存在明显差异,克鲁维毕赤酵母产乙酸乙酯浓度为50.20μg/mL,葡萄汁有孢汉逊酵母产4种酯的浓度均显著高于酿酒酵母,异常毕赤酵母产乙酸乙酯及乙酸异戊酯浓度(162.00和0.732μg/mL)显著高于酿酒酵母(1.36和0.245μg/mL)。【结论】克鲁维毕赤酵母、葡萄汁有孢汉逊酵母和异常毕赤酵母可显著提高发酵终产物中某些酯类物质的浓度,因此可采用酿酒酵母与高产酯非酿酒酵母按不同接种量和接种时间混合发酵,使酯类物质浓度显著提高,赋予酿制葡萄酒特殊的水果香气及花香,酿制具有地区特色的葡萄酒。 展开更多
关键词 酿酒酵母 非酿酒酵母 葡萄酒 挥发性酯 产酯能力
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混菌发酵葡萄汁对葡萄糖苷类芳香前体物水解作用的影响 被引量：2
4
作者 王凤梅 张邦建 岳泰新 《中国酿造》 CAS 北大核心 2018年第8期118-122,共5页
探究非酿酒酵母对葡萄汁中葡萄糖苷类芳香前体物的水解作用,以内蒙古西部地区分离到的具有β-葡萄糖苷酶活性的分属5个属5株酵母菌株为材料,对部分酵母细胞进行胞壁透化处理。随后,采用酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)单独接种或与... 探究非酿酒酵母对葡萄汁中葡萄糖苷类芳香前体物的水解作用,以内蒙古西部地区分离到的具有β-葡萄糖苷酶活性的分属5个属5株酵母菌株为材料,对部分酵母细胞进行胞壁透化处理。随后,采用酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)单独接种或与非酿酒酵母non-Saccharomyces混合接种的方式进行发酵,探究酿酒酵母与非酿酒酵母混合(1∶1)发酵对发酵进程及发酵液中葡萄糖苷类芳香前体物水解作用的影响。结果表明,除星形假丝酵母(Candida stellata)外,其他3株非酿酒酵母与酿酒酵母混合接种对发酵结果均无明显影响(P>0.05),且均可显著降低发酵液中葡萄糖苷类物质的浓度(P<0.05),其中尤以萄萄汁有孢汉逊酵母(Hanseniaspora uvarum)及异常毕赤酵母(Pichia anomala)的能力最强,葡萄糖苷类物质的浓度分别为3.04 mmol/L和2.66 mmol/L。 展开更多
关键词 酿酒酵母 非酿酒酵母 葡萄酒 Β-葡萄糖苷酶 葡萄糖苷类芳香前体物
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转牛LDHA基因酿酒酵母构建及产乳酸能力分析
5
作者 左梦娜 何佳宁 +2 位作者 尹千禧 王凤梅 马利兵 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期3719-3726,共8页
【目的】探究转牛乳酸脱氢酶A基因(LDHA)酿酒酵母发酵制备食品级乳酸的可行性,为采用转基因商业酿酒酵母规模化制备乳酸提供技术支撑。【方法】从NCBI网站检索牛LDHA基因编码序列,并将编码序列中的同义密码子替换为酿酒酵母偏好密码子,... 【目的】探究转牛乳酸脱氢酶A基因(LDHA)酿酒酵母发酵制备食品级乳酸的可行性,为采用转基因商业酿酒酵母规模化制备乳酸提供技术支撑。【方法】从NCBI网站检索牛LDHA基因编码序列,并将编码序列中的同义密码子替换为酿酒酵母偏好密码子,经人工合成后导入酿酒酵母表达载体pAUR123,再将重组表达载体p AUR123-LDHA导入商业化酿酒酵母EC1118株,采用Aureobasidin A筛选转基因酿酒酵母。将转基因及非转基因酿酒酵母EC1118株分别接种于含200 g/L葡萄糖的YPD液体培养基中连续培养5 d,期间检测2组酿酒酵母的LDHA活性及其发酵产乳酸能力,以评估转牛LDHA基因酿酒酵母发酵制备乳酸的可行性。【结果】牛LDHA基因编码序列长1170 bp,共编码389个氨基酸残基;以酿酒酵母偏好密码子替换牛LDHA基因编码序列中的同义密码子,其替换率高达58.35%。牛LDHA在酿酒酵母中的预计半衰期>20 h,其二级结构富含α-螺旋和无规则卷曲。替换后的牛LDHA基因编码序列由表达载体pAUR123携带导入酿酒酵母中,经Aureobasidin A筛选获得1株转基因酿酒酵母菌株,命名为EC1118-LDHA。转基因酿酒酵母EC1118-LDHA株以200 g/L葡萄糖为碳源,发酵24 h后的LDHA活性达4.7±1.2 mU/mg,发酵2~3 d后约制备出30 g/L乳酸,同时产生约70 g/L乙醇,乳酸产出率约为0.15 g/g葡萄糖。【结论】将替换酿酒酵母偏好密码子后的牛LDHA基因编码序列导入酿酒酵母中能成功构建转牛LDHA基因酿酒酵母,牛LDHA基因的导入不会影响商业化酿酒酵母的发酵能力,且赋予了酿酒酵母以200 g/L葡萄糖为碳源约制备出30 g/L乳酸的能力。因此,采用转牛LDHA基因酿酒酵母制备食品级乳酸完全可行。 展开更多
关键词 酿酒酵母 牛 乳糖脱氢酶A基因(LDHA) 乳酸 发酵
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真实工作情境的实践教学研究——以包头轻工职业技术学院啤酒生产技术优质核心课程建设为例
6
作者 钟彩霞 纪铁鹏 张文华 《明日风尚》 2018年第20期262-262,共1页
本文结合我校实训条件,通过高职啤酒生产技术课程改变传统教学方式,构建以啤酒的生产真实工作情景为导向的各个工作环节操作技能为主线课程体系,学生以员工形式的学习教学改革进行研究。
关键词 工作情境 改革 探索
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