野大麦幼穗原生质体的分离和培养 被引量：6

1

作者 李彦舫 程肖蕊 +1 位作者 张亚兰 庞劲松 《植物学通报》 CSCD 1999年第1期67-71,共5页

以野大麦（Ｈｏｒｄｅｕｍｂｒｅｖｉｓｕｂｕｌａｔｕｍ）的幼穗诱导愈伤组织，建立悬浮细胞系，利用胚性悬浮细胞系在不同的酶解条件和不同的酶解液中分离原生质体并进行培养，获得了细胞分裂，形成细胞团。

关键词 野大麦 原生质体 细胞分裂

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野大麦幼根的愈伤组织诱导及植株再生 被引量：4

2

作者 程肖蕊 张亚兰 +1 位作者 杨松涛 李彦舫 《吉林农业科学》 CSCD 1997年第2期94-96,共3页

以野大麦（Hordeumbrevisubulatum（Trin．）Link）的幼根为外植体，采用MS培养基附加不同浓度的2，4－D诱导愈伤组织，结果以2，4－D4．0mg／L为最佳。以较低浓度2，4－D培养基进行愈伤组织的继代。在MS培养基附加2，4－D1．0mg／L＋6... 以野大麦（Hordeumbrevisubulatum（Trin．）Link）的幼根为外植体，采用MS培养基附加不同浓度的2，4－D诱导愈伤组织，结果以2，4－D4．0mg／L为最佳。以较低浓度2，4－D培养基进行愈伤组织的继代。在MS培养基附加2，4－D1．0mg／L＋6－BA0．1mg／L，以极低的频率分化出芽，再在附加IAA0．5mg／L＋6－BA2．0mg／L＋KT1．0mg／L＋Sucrose20g／L上的MS培养基上生根，最终再生成完整植株。 展开更多

关键词 大麦 野大麦 愈伤组织 植株再生

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野大麦幼根和幼叶悬浮细胞系的原生质体培养 被引量：3

3

作者 程肖蕊 张亚兰 +1 位作者 杨松涛 李彦舫 《西北农业大学学报》 CSCD 北大核心 1998年第2期22-26,共5页

以野大麦（Ｈｏｒｄｅｕｍｂｒｅｖｉｓｕｂｕｌａｔｕｍ（Ｔｒｉｎ．）Ｌｉｎｋ）的幼根、幼叶为外植体，诱导愈伤组织，建立悬浮细胞系。利用胚性悬浮细胞系进行质壁分离处理再游离原生质体，在不同的光照条件下进行原生质体培养，并... 以野大麦（Ｈｏｒｄｅｕｍｂｒｅｖｉｓｕｂｕｌａｔｕｍ（Ｔｒｉｎ．）Ｌｉｎｋ）的幼根、幼叶为外植体，诱导愈伤组织，建立悬浮细胞系。利用胚性悬浮细胞系进行质壁分离处理再游离原生质体，在不同的光照条件下进行原生质体培养，并由原生质体再生出小细胞团。 展开更多

关键词 野大麦 原生质体 细胞分裂 育种

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野大麦耐盐变异体的筛选和植株再生(英文) 被引量：4

4

作者 朱进 李彦舫 +3 位作者 张云 唐家琪 杨松涛 张亚兰 《南京师大学报（自然科学版）》 CAS CSCD 1998年第1期82-85,共4页

以野大麦（Ｈｏｒｄｅｕｍｂｒｅｖｉｓｕｂｕｌａｔｕｍ（Ｔｒｉｎ．）Ｌｉｎｋ）的成熟胚为外植体诱导愈伤组织，选取淡黄色、易碎的胚性愈伤组织为材料，进行细胞悬浮培养．当建立起均质、分散且生长迅速的细胞系后，结合诱变剂甲基... 以野大麦（Ｈｏｒｄｅｕｍｂｒｅｖｉｓｕｂｕｌａｔｕｍ（Ｔｒｉｎ．）Ｌｉｎｋ）的成熟胚为外植体诱导愈伤组织，选取淡黄色、易碎的胚性愈伤组织为材料，进行细胞悬浮培养．当建立起均质、分散且生长迅速的细胞系后，结合诱变剂甲基磺酸乙酯（ＥＭＳ）对细胞的化学处理，在含盐０．８％ＮａＣｌ和１．２％ＮａＣｌ的ＭＳ培养基上筛选耐盐变异体．研究结果表明：筛选得到的变异体能在含盐培养基上持续增殖，而对照组则逐渐褐化死亡．变异体与对照组在游离脯氨酸含量、相对电导率、酯酶同工酶等几个生理生化指标方面存在着较大的差异．耐盐１．２％ＮａＣｌ的愈伤组织的游离脯氨酸含量是对照组的６．６８倍，而相对电导率比对照组小２９．９％，两者的酯酶同工酶酶谱也存在明显的差异．以上分析表明，筛选出的愈伤组织具有一定的耐盐性且较稳定．耐盐愈伤组织转入分化培养基中，可经体细胞胚胎发生和器官分化两种途径再生植株，但分化率相对较低． 展开更多

关键词 野大麦 耐盐变异体 植株再生 筛选

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牛微量白细胞样品的处理及其Y染色体特异DNA的扩增 被引量：2

5

作者 欧阳红生 张永亮 +2 位作者 阮承迈 张玉静 江玉松 《生物技术》 CAS CSCD 1995年第1期33-35,共3页

本文建立了牛微量白细胞样品的处理及其Ｙ染色体特异ＤＮＡ的扩增的方法。采集成年公牛全血，用ＥＤＴＡ抗凝血。分离白细胞，用０．１４５ｍｏｌ／ＬＮａＣｌ洗净．用０．１４５ｍｏｌ／ＬＮａＣｌ稀释，计数。分别将０、５、５０、５... 本文建立了牛微量白细胞样品的处理及其Ｙ染色体特异ＤＮＡ的扩增的方法。采集成年公牛全血，用ＥＤＴＡ抗凝血。分离白细胞，用０．１４５ｍｏｌ／ＬＮａＣｌ洗净．用０．１４５ｍｏｌ／ＬＮａＣｌ稀释，计数。分别将０、５、５０、５００细胞在含１０ｍｍｏｌ／ＬＴｒｉｓ—ＨＣｌ（ｐＨ８．３）、５０ｍｍｏｌ／ＬＫＣｌ、２ｍｍｏｌ／ＬＭｇＣｌ２、０．４５％ＮＰ—４０、０．４５％Ｔｗｅｅｎ—２０、０．１ｍｇ／ｍＬ蛋白酶Ｋ、总体积２０μＬ的溶液中５５℃孵化６０ｍｉｎ。直接用此细胞处理液做为模板进行ＰＣＲ。ＰＣＲ反应总体积为５０μＬ，主要成分含量为ｄＮＴＰ各为４０ｐｍｏｌ，引物各为２５ｐｍｏｌ，ＤＮＡ聚合酶１ＩＵ。反应在微机控制ＰＣＲ仪上进行，采用９２．５℃变性，５５℃退火，７２℃延伸，共３５个循环。扩增产物琼脂糖凝胶电泳结果，５、５０、５００细胞组均出现特异扩增片段，无细胞对照组不出现特异扩增片段。表明本方法可对５个以上公牛体细胞样品进行Ｙ染色体特鼻ＤＮＡ扩增。 展开更多

关键词 牛 Y染色体 DNA 白细胞 聚合酶链反应 胚胎

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绒山羊血清蛋白组分及含量 被引量：2

6

作者 崔建华 刘万臣 +5 位作者 汪玉松 马宁 李永军 宋雅琴 栾维民 娄玉杰 《中国养羊》 1996年第3期29-30,共2页

关键词 山羊 绒山羊 血清蛋白组分 测定

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中国人血小板生成素基因的克隆 被引量：1

7

作者 刘万臣 张玉静 +3 位作者 李爱民 谭芬 张永亮 欧阳红生 《中国生化药物杂志》 CAS CSCD 1997年第5期232-234,共3页

从5mo龄水囊引产胎儿肝脏中分离提取mRNA，经反转录PCR方法扩增出中国人全长血小板生成素（TPO）cDNA，然后将该cDNA片段重组入pGEM3Zf载体，并进行了限制性内切酶鉴定与序列分析，该cDNA全长1059bP，编码353个氨基酸。为开展TPO在真核... 从5mo龄水囊引产胎儿肝脏中分离提取mRNA，经反转录PCR方法扩增出中国人全长血小板生成素（TPO）cDNA，然后将该cDNA片段重组入pGEM3Zf载体，并进行了限制性内切酶鉴定与序列分析，该cDNA全长1059bP，编码353个氨基酸。为开展TPO在真核细胞中的表达打下了基础。 展开更多

关键词 血小板生成素 聚合酶链反应 基因克隆 克隆

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牛β-酪蛋白5′端上游调控序列的克隆和序列分析 被引量：1

8

作者 欧阳红生 孙燕 +5 位作者 张永亮 张玉静 赵建军 刘松财 李鹏 赵凤云 《生物技术》 CAS CSCD 1999年第5期1-4,共4页

该文用PCR扩增了牛β－酪蛋白基因5′－端上游调控序列，并对其进行了克隆和序列分析。采集成年母牛肝，提取DNA。在牛β－酪蛋白基因外显子1和上游调控区内设计引物，扩增其上游调控序列。两条引物长均为19个核苷酸，引物间跨度为635b... 该文用PCR扩增了牛β－酪蛋白基因5′－端上游调控序列，并对其进行了克隆和序列分析。采集成年母牛肝，提取DNA。在牛β－酪蛋白基因外显子1和上游调控区内设计引物，扩增其上游调控序列。两条引物长均为19个核苷酸，引物间跨度为635bp。以牛肝DNA为模板，进行PCR扩增，扩增产物在2％琼脂糖凝胶上电泳，可见特异的目的条带。从凝胶中回收目的片段，克隆到pGEM－T载体中。重组质粒提取DNA，进行序列分析。测序结果与文献发表的类似序列相比，仅有4个碱基不同，同源性达99．4％。表明获得了牛β－酪蛋白基因5′－端上游调控序列的克隆。 展开更多

关键词 牛 Β-酪蛋白 基因上游 调控序列 克隆

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原生质体培养在作物改良中的应用 被引量：1

9

作者 程肖蕊 杨松涛 李彦舫 《吉林农业大学学报》 CAS CSCD 1996年第S1期71-73,共3页

论述了原生质培养在作物改良实践中的应用,尤其是在遗传转化和体细胞杂交方面的应用研究进展。

关键词 原生质体 转基因 体细胞杂交

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CO_2浓度升高对禾本科植物幼苗生长发育的影响 被引量：1

10

作者 张亚兰 程肖蕊 +2 位作者 杨柏明 杨松涛 李彦舫 《吉林农业大学学报》 CAS CSCD 1996年第S1期80-83,共4页

对CO_2正常浓度(体积分数为3.5×10^(-4))和CO_2倍增(体积分数为7.0×10^(-4))条件下,小麦、半野生小麦等12种禾本科植物苗期的平均株高、鲜重、茎秆直径、根的直径等生长指标进行了比较研究。结果表明,CO_2浓度升高,对不同种... 对CO_2正常浓度(体积分数为3.5×10^(-4))和CO_2倍增(体积分数为7.0×10^(-4))条件下,小麦、半野生小麦等12种禾本科植物苗期的平均株高、鲜重、茎秆直径、根的直径等生长指标进行了比较研究。结果表明,CO_2浓度升高,对不同种类植物的作用不同。总体上看,CO_2浓度升高,使C_3种类比C_4种类植物的平均株高、鲜重、根直径有较明显增加;野生种类茎秆直径的增加幅度小于栽培种类。 展开更多

关键词 禾本科植物 幼苗 CO₂ 生长发育

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未知基因p2.18

11

作者 张永亮 欧阳红生 +3 位作者 冯立文 岳军明 刘松财 张玉静 《生物技术》 CAS CSCD 1998年第1期7-9,共3页

用根据GRF设计的引物,以猪的下丘脑总RNA和mRNA为模板、进行RT—PCR扩增.将扩增产物纯化并克隆到T载体(pGEM3—Zf),自动测序仪测定其序列.发现所克隆的基因并非GRF基因.应用BLAST软件对其在INTERNET作了分析,未能确定为何种基因.

关键词 GRF PCR 基因扩增 T载体 P2.18

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草原之星野大麦 被引量：6

12

作者 程肖蕊 杨松涛 张成武 《植物杂志》 北大核心 1996年第6期12-12,共1页

野大麦别名菜麦草、大麦草、野黑麦,主要分布在东北、华北、内蒙古、青海、新疆等省区,为禾本科大麦属多年生草本植物,须根稠密,常具短根茎,茎直立或基部膝曲、具2—5节,疏丛型,叶长5—16厘米、宽2—6厘米、绿色或灰绿色,叶舌较短,高50... 野大麦别名菜麦草、大麦草、野黑麦,主要分布在东北、华北、内蒙古、青海、新疆等省区,为禾本科大麦属多年生草本植物,须根稠密,常具短根茎,茎直立或基部膝曲、具2—5节,疏丛型,叶长5—16厘米、宽2—6厘米、绿色或灰绿色,叶舌较短,高50—80厘米,穗状花序长5—10厘米、宽2—6厘米、常四棱形、紧密、绿色、成熟时带紫色,成熟穗轴易逐节断落,穗序上每节有小穗3枚,两侧为有柄小穗,通常较小、不孕或为雄性。 展开更多

关键词 野大麦 野黑麦 牧草

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