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构建分子标记连锁图谱的图论构图方法 被引量:4
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作者 谭远德 万春玲 +2 位作者 周泽阳 鲁成 向仲怀 《生物数学学报》 CSCD 1999年第3期338-347,共10页
结合统计学、遗传学和图论原理,建立了一种新的分子标记连锁图谱构建的方法,即图论构图法.应用这种方法,从77个家蚕RAPD标记位点中构建了7个标记位点的两个连锁群.与MAPMARKER程序所构建的结果相比表明,图论构图... 结合统计学、遗传学和图论原理,建立了一种新的分子标记连锁图谱构建的方法,即图论构图法.应用这种方法,从77个家蚕RAPD标记位点中构建了7个标记位点的两个连锁群.与MAPMARKER程序所构建的结果相比表明,图论构图法具有更为可靠的构图效果. 展开更多
关键词 连锁图谱 分子标记 图论 连锁检测
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家蚕丝素基因表达水平的定量分析 被引量:9
2
作者 孙霞 朱晨 +2 位作者 汪生鹏 沈小绢 郭锡杰 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期30-35,共6页
采用实时定量RT-PCR方法,对丝素轻链基因(fib-L)、丝素重链基因(fib-H)、P25基因在家蚕幼虫不同组织和不同发育时期的表达进行了定量分析。结果发现3种丝素基因除主要在5龄幼虫的后部丝腺中表达外,在其它组织如脂肪体和中部丝腺中也有... 采用实时定量RT-PCR方法,对丝素轻链基因(fib-L)、丝素重链基因(fib-H)、P25基因在家蚕幼虫不同组织和不同发育时期的表达进行了定量分析。结果发现3种丝素基因除主要在5龄幼虫的后部丝腺中表达外,在其它组织如脂肪体和中部丝腺中也有一定程度的表达;在4龄眠期的后部丝腺中3种丝素基因也有一定的表达水平,其中fib-L在这一时期的表达量较高。同时发现在5龄第3天和第5天的后部丝腺中,fib-H、fib-L与P25在mR-NA水平上的摩尔比分别为9∶18∶1和19∶32∶1,推测丝素基因的表达可能具有转录后调控,此结果说明家蚕丝素基因的表达可能具有更加精细的调控机制。 展开更多
关键词 家蚕 丝素基因 表达 实时定量RT-PCR 组织 发育时期
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催青温度对家蚕二化性品种滞育激素受体基因表达的影响及基因的结构特征 被引量:11
3
作者 王力刚 宋海韬 +4 位作者 黄勇 汪生鹏 唐顺明 赵巧玲 沈兴家 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期215-223,共9页
家蚕二化性品种的卵滞育与否受上代环境影响,25℃高温明催青将产滞育卵,而15℃低温暗催青将产非滞育卵。为探究催青温度调控二化性家蚕滞育的分子机制,对从家蚕卵巢细胞中克隆的家蚕滞育激素受体基因(Bmdhr)的5种cDNA进行生物信息学分析... 家蚕二化性品种的卵滞育与否受上代环境影响,25℃高温明催青将产滞育卵,而15℃低温暗催青将产非滞育卵。为探究催青温度调控二化性家蚕滞育的分子机制,对从家蚕卵巢细胞中克隆的家蚕滞育激素受体基因(Bmdhr)的5种cDNA进行生物信息学分析,结果表明Bmdhr基因的5种cDNA由相同的mRNA转录本通过不同的剪接方式而来,其中Bmdhr mR-NA-1与Bmdhr mRNA-2编码的氨基酸序列相同,Bmdhr mRNA-4编码的氨基酸序列与家蚕滞育激素BmDHR-1的序列相似度达99.2%。将家蚕二化性品种秋丰的蚕卵用蛾区半分法分成2组,分别以15℃暗催青和25℃明催青,利用实时荧光定量PCR分析催青温度对家蚕不同发育时期及蚕体组织中Bmdhr基因mRNA转录的影响。结果显示:Bmdhr mRNA-1主要在蛹期卵巢中表达,在对滞育激素最敏感的化蛹后4 d时,其转录水平急速上升至峰值,并且高温催青的转录水平高于低温催青;Bm-dhr mRNA-4主要在各发育时期的蚕体血液中表达,特别是在高温明催青条件下,其在蛹期血液中的转录水平是低温暗催青的7.7倍,说明BmDHR-4可能是决定家蚕二化性品种卵滞育与否的关键因子之一;Bmdhr mRNA-5在化蛹后2~3 d的卵巢中转录水平高,且低温催青的转录水平高于高温催青,化蛹后3 d其转录水平开始下降,至化蛹后4~5 d 2种催青处理间的转录水平无显著差异。研究结果为阐明家蚕滞育的分子机制积累了实验数据。 展开更多
关键词 家蚕 滞育激素受体 序列同源性 催青温度 基因表达 实时荧光定量PCR
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丝素-壳聚糖复合涂膜对鲜切苹果保鲜性能的研究 被引量:10
4
作者 余慧 吴唯可 +5 位作者 范楚宏 屠洁 曹喜涛 张业顺 季更生 张国政 《中国食品添加剂》 CAS 2018年第6期125-129,共5页
以鲜切苹果为研究材料,分别以0.6%丝素蛋白+1%壳聚糖溶液(b组)、0.6%丝素蛋白溶液(c组)、1%壳聚糖溶液(d组)进行保鲜处理,以未经处理的a组为对照,研究丝素蛋白-壳聚糖涂膜对鲜切苹果的保鲜效果。结果表明:在相同储藏期(8 day)和储藏环境... 以鲜切苹果为研究材料,分别以0.6%丝素蛋白+1%壳聚糖溶液(b组)、0.6%丝素蛋白溶液(c组)、1%壳聚糖溶液(d组)进行保鲜处理,以未经处理的a组为对照,研究丝素蛋白-壳聚糖涂膜对鲜切苹果的保鲜效果。结果表明:在相同储藏期(8 day)和储藏环境下(4℃),与a组相比,三组处理的保鲜效果最好的为b组,其褐变度减少,失重率降低,维持维生素C的含量,丙二醛生成量减少,起到了较好的保鲜效果。根据试验结果分析认为,b组有效地保持了鲜切苹果在贮藏期间的品质。 展开更多
关键词 丝素蛋白 壳聚糖 涂膜保鲜 鲜切苹果
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白藜芦醇丹阳黄酒抗氧化活性和稳定性研究 被引量:9
5
作者 乔晓月 靳迎春 +6 位作者 曹喜涛 徐志坚 屠洁 刘冠卉 张兆俊 季更生 张国政 《中国酿造》 CAS 北大核心 2018年第7期117-121,共5页
将白藜芦醇添加至丹阳黄酒中,形成含有质量浓度为0.1 mg/m L白藜芦醇的新型丹阳黄酒,以此为研究对象,对其清除DPPH、羟基、ABTS自由基和总还原能力进行测定,来评价白藜芦醇丹阳黄酒产品的抗氧化活性及稳定性。结果表明,0.1 mg/m L的白... 将白藜芦醇添加至丹阳黄酒中,形成含有质量浓度为0.1 mg/m L白藜芦醇的新型丹阳黄酒,以此为研究对象,对其清除DPPH、羟基、ABTS自由基和总还原能力进行测定,来评价白藜芦醇丹阳黄酒产品的抗氧化活性及稳定性。结果表明,0.1 mg/m L的白藜芦醇丹阳黄酒对DPPH、羟基、ABTS自由基的半抑制浓度(IC_(50)值)依次为0.40 m L/m L、0.80 m L/m L、0.51 m L/m L,普通丹阳黄酒IC_(50)值依次0.70 m L/m L、0.81 m L/m L、0.80 m L/m L,新型丹阳黄酒的总还原力明显高于普通丹阳黄酒。综合比较,含白藜芦醇丹阳黄酒抗氧化能力高于普通丹阳黄酒。同时,新型丹阳黄酒在常温下存放前3 d的白藜芦醇含量快速下降,之后趋于稳定。 展开更多
关键词 黄酒 白藜芦醇 抗氧化性 稳定性
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农药氰戊菊酯和杀虫双诱导家蚕血液蛋白的变化 被引量:7
6
作者 吴立娜 赵巧玲 +5 位作者 裘智勇 覃光星 夏定国 沈中元 沈兴家 郭锡杰 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期262-267,共6页
为了解析家蚕对常用农药氰戊菊酯和杀虫双的解毒机制,分别给家蚕5龄幼虫添食2种农药,观察家蚕对农药的中毒症状,采用双向电泳(2-DE)技术对添食农药的家蚕幼虫的血液蛋白进行分离,利用电喷雾电离(ESI)质谱对具有2次以上重复的显著差异蛋... 为了解析家蚕对常用农药氰戊菊酯和杀虫双的解毒机制,分别给家蚕5龄幼虫添食2种农药,观察家蚕对农药的中毒症状,采用双向电泳(2-DE)技术对添食农药的家蚕幼虫的血液蛋白进行分离,利用电喷雾电离(ESI)质谱对具有2次以上重复的显著差异蛋白点进行鉴定,并用生物信息学方法进行分析。家蚕5龄幼虫分别添食1/4LD50剂量浓度的2种农药后,均在3~12h内出现中毒症状,且血液蛋白的表达也发生了变化:在氰戊菊酯诱导下,幼虫血液中增加了纤维样蛋白、果糖-1,6-二磷酸醛缩酶、半胱氨酸蛋白酶抑制剂;在杀虫双诱导下,幼虫血液中增加了丝氨酸蛋白酶抑制剂-13;经2种农药分别诱导处理后3h,幼虫血液中都减少了体液低分子蛋白-Ⅲ的表达。推测家蚕对氰戊菊酯和杀虫双具有一定的免疫反应。 展开更多
关键词 家蚕 血液蛋白 氰戊菊酯 杀虫双 诱导 双向电泳 ESI质谱
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家蚕二化性品种(品系)转基因用蚕卵的预处理技术研究 被引量:5
7
作者 唐顺明 沈兴家 +3 位作者 赵巧玲 章扬 张国政 郭锡杰 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期872-876,共5页
家蚕为卵滞育昆虫,二化性家蚕品种(品系)的化性由上代卵期温度与光照等调控。将若干个二化性家蚕品种(品系)以1718℃温度催青诱导子代蚕卵非滞育,筛选出1个经济性状较优的实用品种"秋丰"、1个突变品系P33,二者非滞育卵圈比例分别... 家蚕为卵滞育昆虫,二化性家蚕品种(品系)的化性由上代卵期温度与光照等调控。将若干个二化性家蚕品种(品系)以1718℃温度催青诱导子代蚕卵非滞育,筛选出1个经济性状较优的实用品种"秋丰"、1个突变品系P33,二者非滞育卵圈比例分别达到96.4%和89.6%,正常催青的良卵实用孵化率分别达到96.11%和98.58%,解决了采用显微注射法以家蚕实用品种构建转基因系统过程中因蚕卵滞育不能及时孵化的难题。另对利用20%盐酸-2%甲醛混合液刺激解除蚕卵滞育的方法以及非滞育蚕卵表面用70%乙醇消毒的方法进行了尝试,前者可以获得96%以上的孵化率,后者可以缩短蚕卵预处理时间。 展开更多
关键词 家蚕 化性 催青温度 非滞育卵 转基因
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柞蚕孵化酶样基因的全长cDNA克隆及表达特征分析 被引量:5
8
作者 唐顺明 丁丽平 +4 位作者 沈兴家 吴俊 卢福浩 周其明 李喜升 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期1000-1007,共8页
孵化酶是后生动物卵孵化过程中起关键作用的一类蛋白酶。基于生物信息学和RACE方法,从柞蚕胚胎中克隆了一个998 bp的孵化酶样基因全长cDNA,命名为ApHEL(GenBank登录号:JN205047)。ApHEL由15 bp 5'-UTR,98 bp 3'-UTR和885 bp OR... 孵化酶是后生动物卵孵化过程中起关键作用的一类蛋白酶。基于生物信息学和RACE方法,从柞蚕胚胎中克隆了一个998 bp的孵化酶样基因全长cDNA,命名为ApHEL(GenBank登录号:JN205047)。ApHEL由15 bp 5'-UTR,98 bp 3'-UTR和885 bp ORF组成。ORF编码294个氨基酸残基,预测蛋白分子质量为33.51 kD,等电点为5.50。在ApHEL N-端存在16个氨基酸的信号肽。ApHEL蛋白酶功能区中含有锌结合序列(HEWMHILGFLHMQSTHNR)和Met-转角基序(YDYVSCLHY)等孵化酶保守功能区域。ApHEL与其他物种孵化酶氨基酸序列的相似度为30.0%~85.0%。基于孵化酶氨基酸序列的进化分析表明,柞蚕、家蚕、库蚊和果蝇聚为一类,亲缘关系较近。ApHEL在早期胚胎中没有转录,至催青第6天开始转录并维持较低水平,在催青第9天剧增至最高值直至孵化,显示ApHEL在柞蚕卵孵化过程中起重要作用。ApHEL在5龄期幼虫的中肠组织中特异性表达,暗示ApHEL可能还有其他生物学功能。 展开更多
关键词 中国柞蚕 孵化 孵化酶样基因 克隆 表达
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桑树黄化型萎缩病植原体延伸因子基因的克隆及序列分析 被引量:5
9
作者 卢全有 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期43-46,51,共5页
利用已报道的引物对fTuf Ay/rTuf Ay,采用PCR技术对桑树黄化型萎缩病植原体延伸因子(EF-Tu)tuf基因片段进行了扩增、测序及序列分析。结果表明,从表现黄化型萎缩病症状的桑树样品中扩增得到预期大小的目的片段。经核苷酸序列测定,扩增... 利用已报道的引物对fTuf Ay/rTuf Ay,采用PCR技术对桑树黄化型萎缩病植原体延伸因子(EF-Tu)tuf基因片段进行了扩增、测序及序列分析。结果表明,从表现黄化型萎缩病症状的桑树样品中扩增得到预期大小的目的片段。经核苷酸序列测定,扩增得到的延伸因子基因片段为946 bp(GenBank登录号为:GQ268317)。对桑树黄化型萎缩病植原体及16Sr I组中的各亚组代表植原体的延伸因子tuf基因的相似性比较结果表明,桑树黄化型萎缩病植原体与16Sr I组中的MD、PRIVA亲缘关系最近,核苷酸的相似性为99.9%。该序列与已知的16Sr-I各亚组代表植原体构建的进化树表明,桑黄化型萎缩病植原体与tufI-B亚组聚类为一个亚组,归为翠菊黄化植原体组(Candidatus Phytoplasma asteris),即16Sr I组tufI-B亚组,该结果从亚组水平上进一步确定了桑树黄化型萎缩病植原体的分类地位。 展开更多
关键词 桑树黄化型萎缩病植原体 延伸因子 系统发育
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野蚕孵化酶基因的克隆与生物信息学分析 被引量:5
10
作者 唐顺明 赵新慧 +2 位作者 吴俊 裘智勇 沈兴家 《江西农业学报》 CAS 2011年第10期1-5,共5页
采用RT-PCR法从野蚕胚胎中克隆了一个885 bp孵化酶基因,命名为BmandHE(GenBank登录号:JN620366)。BmandHE ORF编码294个氨基酸残基,蛋白分子质量为33.57 kD,等电点为5.55。在BmandHE N-端存在16个氨基酸的信号肽,BmandHE序列含有锌指结... 采用RT-PCR法从野蚕胚胎中克隆了一个885 bp孵化酶基因,命名为BmandHE(GenBank登录号:JN620366)。BmandHE ORF编码294个氨基酸残基,蛋白分子质量为33.57 kD,等电点为5.55。在BmandHE N-端存在16个氨基酸的信号肽,BmandHE序列含有锌指结合序列、Met-转角基序等孵化酶保守功能区域和构成孵化酶二级结构骨架的4个半胱氨酸残基。BmandHE与其他动物孵化酶氨基酸序列的相似性为30.4%~97.1%。进化分析表明,野蚕与昆虫家蚕、柞蚕、家蚊聚为一类,亲缘关系比较近。 展开更多
关键词 野蚕 孵化酶基因 ORF 克隆 生物信息学分析
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家蚕卵突变体“明”死卵(l-e^m)的卵壳构造和遗传分析 被引量:4
11
作者 陈安利 赵巧玲 +3 位作者 张国政 裘智勇 夏定国 代方银 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期139-143,共5页
在家蚕品种"明"中发现一种卵突变体,其卵产下后10 min左右即出现失水凹陷,1 h左右完全失水,全部溃死。解剖观察母蛾卵巢管,卵在其内排列整齐,大小和色泽都与正常卵无异;电镜观察死卵,精孔、后极部与正常卵无差异,但卵壳表面... 在家蚕品种"明"中发现一种卵突变体,其卵产下后10 min左右即出现失水凹陷,1 h左右完全失水,全部溃死。解剖观察母蛾卵巢管,卵在其内排列整齐,大小和色泽都与正常卵无异;电镜观察死卵,精孔、后极部与正常卵无差异,但卵壳表面凹陷处网格皲裂,其切面的中层可见有裂纹。遗传分析表明:该家蚕卵突变体由一个隐性遗传基因控制,纯合致死,遵循伪母性遗传模式。该突变体是一个不同于溃卵(Grcol)突变体的卵壳新突变,暂命名为"明"死卵(lethal egg of"ming",l-em)。 展开更多
关键词 家蚕 卵突变 “明”死卵 卵壳构造 遗传分析
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强健优质家蚕新品种丝雨二号的育成 被引量:3
12
作者 赵巧玲 吴怀民 +4 位作者 裘智勇 楼黎静 夏定国 钱文春 刘震玲 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期672-677,共6页
为适应高效省力化蚕业生产发展需求,培育健康体质和优良茧丝质均衡的家蚕新品种,采用杂交育种方法进行亲本筛选、性状选择及杂交组配,通过实验室比较鉴定和农村比较鉴定同时进行的培育模式,培育出综合性状优良的家蚕新品种丝雨二号。其... 为适应高效省力化蚕业生产发展需求,培育健康体质和优良茧丝质均衡的家蚕新品种,采用杂交育种方法进行亲本筛选、性状选择及杂交组配,通过实验室比较鉴定和农村比较鉴定同时进行的培育模式,培育出综合性状优良的家蚕新品种丝雨二号。其体质强健、发育整齐、丝质较优、稳产性好、繁育性能好。该品种的全国秋蚕期实验室共同鉴定成绩为:四龄起蚕虫蛹率92.44%,万蚕产茧量18.38kg,洁净95.49分,解舒率79.26%,鲜毛茧出丝率18.69%,茧层率23.68%,茧丝长1230m;秋蚕期生产鉴定成绩中的每盒种产茧量38.67kg;其原种公斤茧制种量在4.2张以上。丝雨二号于2015年9月2日通过国家农作物品种审定委员会审定,适宜在长江流域、黄河流域秋季饲养。 展开更多
关键词 家蚕 新品种 优质 强健 丝雨二号
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家蚕蚕丝蛋白基因表达调控研究进展 被引量:4
13
作者 汪生鹏 孙霞 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2009年第28期13514-13518,共5页
家蚕蚕丝蛋白是由家蚕丝腺特异合成的,蚕丝蛋白主要由丝素和丝胶组成。其中,丝素包括丝素重链(Fib-H)、丝素轻链(Fib-L)和P25共3种蛋白,其基因的表达主要是在转录水平上受到一系列反式作用因子与相应顺式作用元件的共同调控。蚕丝蛋白... 家蚕蚕丝蛋白是由家蚕丝腺特异合成的,蚕丝蛋白主要由丝素和丝胶组成。其中,丝素包括丝素重链(Fib-H)、丝素轻链(Fib-L)和P25共3种蛋白,其基因的表达主要是在转录水平上受到一系列反式作用因子与相应顺式作用元件的共同调控。蚕丝蛋白基因的表达具有组织和时期特异性,但是这种特异性并不是十分严格。 展开更多
关键词 丝腺 丝胶蛋白 丝素蛋白 顺式作用元件 反式作用因子
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家蚕孵化酶样基因BmHEL的原核表达及蛋白纯化与功能鉴定 被引量:4
14
作者 唐顺明 卢福浩 +5 位作者 沈兴家 王娜 丁丽平 赵巧玲 张国政 郭锡杰 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期407-412,共6页
孵化酶(hatchingenzyme,HE)是后生动物卵孵化过程中起关键作用的一类蛋白酶。在已完成全长967bp的家蚕孵化酶样基因(BmHEL)克隆及其转录特性分析的基础上,研究了该基因在原核表达系统的表达、产物纯化及其对家蚕卵壳的降解功能。以全长B... 孵化酶(hatchingenzyme,HE)是后生动物卵孵化过程中起关键作用的一类蛋白酶。在已完成全长967bp的家蚕孵化酶样基因(BmHEL)克隆及其转录特性分析的基础上,研究了该基因在原核表达系统的表达、产物纯化及其对家蚕卵壳的降解功能。以全长BmHEL质粒DNA为模板,用PCR方法分别获得了该基因的开放阅读框(BmHELORF,885bp)、缺失信号肽编码区(BmHELa,834bp)和推测成熟酶功能编码区(BmHELb,624bp)的3个片段,并亚克隆入原核表达载体pET28a(+),在大肠杆菌(E.coli)BL21中进行表达。表达的3种外源蛋白均以包涵体形式存在,获得含有6×His-Tag标签的融合蛋白,其分子质量分别为33.4、31.8、24.0kD。通过Westernblot方法检测到了用Ni-NTA亲和层析柱纯化的目的蛋白。纯化复性后的3种孵化酶对家蚕卵壳底物有一定降解活性,其中BmHELORF的活性最高,BmHELb的活性最低。在pH7.1反应条件下3种酶的活性比pH9.5时高。研究结果在蛋白质水平上进一步证实家蚕孵化酶样蛋白参与了蚕卵孵化这一重要生命过程。 展开更多
关键词 家蚕 孵化酶样基因 原核表达 蛋白纯化 卵壳底物 降解
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Study on Key Technique of Artificial Insemination for Silkworm,Bombyx mori 被引量:4
15
作者 张业顺 张国政 +1 位作者 韦亚东 夏定国 《Agricultural Science & Technology》 CAS 2009年第4期167-170,共4页
[Objective] The aim of this study was to investigate the efficient technique of artificial insemination for silkworm. [Method] Sperms were extracted from bursa copulatrix of female moths mated for 30 min through extru... [Objective] The aim of this study was to investigate the efficient technique of artificial insemination for silkworm. [Method] Sperms were extracted from bursa copulatrix of female moths mated for 30 min through extruding and centrifugal method, and then the semen was injected into other virgin moths with trypsinase. [ Result] A high-effective collection technology of spermatids from silkworm was established successfully, 50 μl semen could be collected by only one person in each hour. The survival rate of spermatids was over 80% in vito after collected from bursa copulatrix, while the obtained semen was quite pure and the average fertilization rate of silkworm was 76,5%. [ Conclusion] The establishment of high-effective semen extraction technique of silkworm provides the technical basis for studies on other related techniques for silkworm sperm. 展开更多
关键词 Bombyx mori Artificial insemination Key technique
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家蚕miR-0047对丝胶蛋白基因BmSer-1表达的调控作用研究 被引量:2
16
作者 钱平 蒋涛 +4 位作者 何平 陈晨 唐旭东 唐顺明 沈兴家 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期922-928,共7页
对家蚕中部丝腺小RNA高通量测序获得若干新miRNA,生物信息学分析发现Bmo-miR-0047可能对家蚕丝胶蛋白基因Bm Ser-1有调控作用。设计特异性茎环引物,利用半定量RT-PCR检测分析家蚕5龄3 d幼虫丝腺(包括前、中、后部丝腺)、头部、脂肪体、... 对家蚕中部丝腺小RNA高通量测序获得若干新miRNA,生物信息学分析发现Bmo-miR-0047可能对家蚕丝胶蛋白基因Bm Ser-1有调控作用。设计特异性茎环引物,利用半定量RT-PCR检测分析家蚕5龄3 d幼虫丝腺(包括前、中、后部丝腺)、头部、脂肪体、表皮、中肠、马氏管、精巢/卵巢、血淋巴细胞和气管等12个器官组织中Bmo-miR-0047的表达情况。结果显示,中部丝腺中Bmo-miR-0047的相对表达量明显高于其他组织,说明在家蚕5龄幼虫期Bmo-miR-0047对Bm Ser-1基因的表达调控存在时空特异性。为了进一步分析Bmo-miR-0047对Bm Ser-1基因表达的调控作用,构建重组表达载体pc DNA3.0(ie1-egfp-pri-miR-0047-SV40)和p GL3(A3-luc-Bm Ser-1 3'UTR-SV40),并以海肾荧光素酶报告质粒pRL-CMV为内参,利用家蚕卵巢培养细胞Bm N进行共转染。转染后检测发现实验组Bm N细胞中的荧光素酶活性与对照组相比显著减弱,表明Bmo-miR-0047在体外培养细胞中对Bm Ser-1基因的表达具有负调控作用。 展开更多
关键词 家蚕 微小RNA Bmo-miR-0047 丝胶蛋白基因Ser-1 转录后调控
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家蚕单性生殖早期胚胎SSH文库的构建及其序列分析 被引量:2
17
作者 王艳敏 夏定国 +3 位作者 张业顺 任晓俊 韦亚东 张国政 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期476-485,共10页
为了探讨家蚕早期胚胎性别决定的分子机制,以非减数分裂孤雌生殖(AMP)和双精雄核发育(BSA)技术获得的家蚕单一性别早期(2-24 h)发育蚕卵为材料,利用抑制消减杂交(SSH)技术构建了正向和反向抑制消减杂交cDNA文库。在正向与反向... 为了探讨家蚕早期胚胎性别决定的分子机制,以非减数分裂孤雌生殖(AMP)和双精雄核发育(BSA)技术获得的家蚕单一性别早期(2-24 h)发育蚕卵为材料,利用抑制消减杂交(SSH)技术构建了正向和反向抑制消减杂交cDNA文库。在正向与反向抑制消减杂交文库中分别随机选择62个和46个克隆测序,分别获得43种和29种cDNA序列,其中25个为新的cDNA序列。生物信息学分析显示,抑制消减杂交文库中与单性生殖有关的高温、低温、辐射等诱导表达基因出现的频次较高。对部分文库序列进行半定量RT-PCR分析表明,这些基因在两种单性生殖早期发育胚胎中存在差异表达。 展开更多
关键词 家蚕 非减数分裂孤雌生殖 双精雄核发育 抑制消减杂交
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安徽桑黄花型萎缩病植原体16S rDNA序列分析及分子检测 被引量:3
18
作者 卢全有 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期642-646,共5页
Mulberry yellow dwarf(MYD)disease is an quarantine disease and the causal agent is a phytoplasma.Two pairs of published universal primer,P1/P7 and Rm16F2/Rm16R1,based on the 16S-23S rDNA sequence of phytoplasma and to... Mulberry yellow dwarf(MYD)disease is an quarantine disease and the causal agent is a phytoplasma.Two pairs of published universal primer,P1/P7 and Rm16F2/Rm16R1,based on the 16S-23S rDNA sequence of phytoplasma and total DNA extracted from infected mulberry tissues were employed for PCR and nested-PCR detection.The results revealed that a phytoplasma-specific 1 830 bp fragment with a G+C content of 46.01% was sequenced(GenBank accession No.GQ249410).The sequence shared 99.7% and 99.8% identity with aster yellows,the representatiive phytoplasma in 16SrI group,and mulberry dwarf phytoplasma classified into subgroup B in 16SrI group and named as the MYD phytoplasma strain Anhui(MYD-Anh).A phylogenetic tree based on 16S rDNA sequences was constructed and showed that MYD-Anh was clustered into 16SrI group.Identity of 16S rDNA sequence between MYD-Anh and mulberry yellow dwarf phytoplasma strain Zhenjiang(MD-zj) was nearly 100%,and they might belong to the same strain.Nested-PCR was used to detect the pathogenic phytoplasma from the differential tissues of mulberry infected with MYD-Anh.The results showed that a phytoplasma-specific 1.4 kb fragment was amplified with total DNA extracted from bark and vein.Nested-PCR was more sensitive than PCR for detecting MYD phytoplasma. 展开更多
关键词 RDNA序列分析 萎缩病 植原体 桑黄 分子检测 花型 16S 检疫性病害
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二化性家蚕卵低温和常温催青的胚胎期蛋白质表达差异分析 被引量:2
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作者 章扬 裘智勇 +4 位作者 赵巧玲 唐顺明 汪生鹏 宋海韬 沈兴家 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期413-420,共8页
家蚕二化性品种的滞育性受上代胚胎期环境条件调控,查找家蚕胚胎期滞育关联蛋白,可为最终阐明家蚕滞育的分子机制提供实验依据。以家蚕二化性品种秋丰的蚕卵为材料,分别在25℃常温和18℃低温条件下催青,提取胚胎不同发育时期蚕卵的易溶... 家蚕二化性品种的滞育性受上代胚胎期环境条件调控,查找家蚕胚胎期滞育关联蛋白,可为最终阐明家蚕滞育的分子机制提供实验依据。以家蚕二化性品种秋丰的蚕卵为材料,分别在25℃常温和18℃低温条件下催青,提取胚胎不同发育时期蚕卵的易溶性和难溶性蛋白,采用蛋白质双向电泳(2-DE)和图像分析技术,研究蚕卵在胚胎不同发育时期的蛋白质差异表达谱。在易溶性和难溶性蛋白图谱中分别检测到5个和7个差异显著的蛋白点。对这些差异蛋白点进行质谱鉴定,有8个蛋白点得到可信的最佳匹配蛋白报告,共鉴定出卵特异蛋白、卵黄原蛋白、表皮蛋白和丙酮酸脱氢酶激酶4种蛋白。这些差异表达蛋白可能导致蚕卵胚胎中物质代谢和能量代谢的不同,据此推测低温和常温催青可能在蚕卵胚胎中诱导了不同的生理生化反应。 展开更多
关键词 家蚕 滞育 蛋白质 双向电泳 质谱鉴定
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家蚕两种新的类鹑斑突变体的遗传分析和SSR标记定位 被引量:3
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作者 赵巧玲 王文波 +4 位作者 陈安利 裘智勇 夏定国 钱荷英 沈兴家 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期369-375,共7页
在家蚕品种选育过程中发现了两种斑纹突变体,与普通斑相比,其幼虫眼状纹不明显,而半月纹和星状纹正常,其间有点和线构成鹑状斑纹,第6、7腹节背面布有纵向波纹状斑纹,整体斑纹与鹑斑(quail,q)极其相似,暂且命名为类鹑斑(quail-like,q-l)... 在家蚕品种选育过程中发现了两种斑纹突变体,与普通斑相比,其幼虫眼状纹不明显,而半月纹和星状纹正常,其间有点和线构成鹑状斑纹,第6、7腹节背面布有纵向波纹状斑纹,整体斑纹与鹑斑(quail,q)极其相似,暂且命名为类鹑斑(quail-like,q-l)。其中一种突变体稚蚕期体色呈褐色,蚕体发育正常,蚕茧大小一致,茧型正常,称为褐色类鹑斑(brown quail-like,q-lb);另一种突变体幼虫体色为浅粉紫色,幼虫食桑量少,发育缓慢,体质较弱,体型较小,茧型偏小,称为紫色类鹑斑(purple quail-like,q-lp)。遗传分析表明,两个类鹑斑基因均为隐性基因;褐色类鹑斑(q-lb)与紫色类鹑斑(q-lp)为等位基因,紫色类鹑斑(q-lp)对褐色类鹑斑(q-lb)为隐性。经与形态标记P3(2)、p(2)、Ze(3)、L(4)、re(5)、E(6)、q(7)、I-a(9)、ms(12)、ch(13)、oa(14)、cts(16)、mln(18)、msn(19)、rb(21)、so(26)测验和SSR分子标记多态性分析,新发现的两种类鹑斑不同于鹑斑(q),其基因座位于第8连锁群。 展开更多
关键词 家蚕 突变体 类鹑斑 等位基因 SSR分子标记
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