贵州矮马血清蛋白的多态性研究 被引量：6

1

作者 赵星艳 王嘉福 +3 位作者 冉雪琴 田松军 黄勇 覃信忠 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2011年第6期103-107,共5页

以西南马为对照,采用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳技术对31匹贵州矮马的转铁蛋白(TF)、白蛋白(Alb)、α1-B糖蛋白(AlB)3种血清蛋白进行了多态性研究。结果表明,AlB位点呈现单态,TF、Alb蛋白位点均表现出不同程度的多态性。Alb位点共发现6... 以西南马为对照,采用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳技术对31匹贵州矮马的转铁蛋白(TF)、白蛋白(Alb)、α1-B糖蛋白(AlB)3种血清蛋白进行了多态性研究。结果表明,AlB位点呈现单态,TF、Alb蛋白位点均表现出不同程度的多态性。Alb位点共发现6种蛋白型,对应3个等位基因,贵州矮马Alb位点的基因频率分别为A(0.2097)、B(0.5645)、C(0.2258);TF位点共发现8种蛋白型对应5个等位基因,贵州矮马TF位点的基因频率分别为A(0.0484)、B(0.5806)、C(0.1129)、D(0.1452)、E(0.1129)。Alb、TF位点的多态信息含量(PIC)和遗传杂合度均较大,说明贵州矮马的遗传多样性较高,具有较大的选育空间。但是贵州矮马在白蛋白及转铁蛋白位点的杂合度均低于西南马,说明在相对闭锁的环境中生存的贵州矮马,保持了较为纯净的原始基因库。贵州矮马的Alb和TF的个体识别率及累积非父排除率均较高,提示这两个蛋白的多态性可应用于贵州矮马的谱系鉴定和个体鉴别。 展开更多

关键词 贵州矮马 血清蛋白 多态性

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植物萜类生物合成相关酶类及其编码基因的研究进展 被引量：48

2

作者 陈建 赵德刚 《分子植物育种》 CAS CSCD 2004年第6期757-764,共8页

萜类化合物是植物界广泛存在的一种次生代谢物质,其种类繁多,不仅在植物的生命活动中扮演重要的作用,而且还被广泛的应用于工业、医药卫生等方面。萜类化合物的合成包括甲羟戊酸和丙酮酸两条途径,二者都是以异戊烯基焦磷酸为主要的代谢... 萜类化合物是植物界广泛存在的一种次生代谢物质,其种类繁多,不仅在植物的生命活动中扮演重要的作用,而且还被广泛的应用于工业、医药卫生等方面。萜类化合物的合成包括甲羟戊酸和丙酮酸两条途径,二者都是以异戊烯基焦磷酸为主要的代谢中间产物。萜类化合物的合成较为复杂,其过程受多种酶协调控制,根据各种酶在萜类合成不同阶段的作用,可将其分为Ⅰ、Ⅱ、和Ⅲ类酶。当前人们对其研究主要是Ⅰ类和Ⅱ类酶,试图弄清其合成机理以生产更多有用的萜类化合物。本文综述了植物次生代谢物质萜类的生物合成途径,催化主要中间产物形成相关酶的研究进展,并对其研究前景作简要展望。 展开更多

关键词 植物 萜类化合物 生物合成 编码基因 Ⅰ类酶 Ⅱ类酶

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一株产紫杉醇罗汉松内生真菌的分离和鉴定 被引量：42

3

作者 孙端方 冉雪琴 王嘉福 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期589-595,共7页

【目的】紫杉醇是重要的抗癌药物,主要从罗汉松等植物中提取,为了保护罗汉松等种质资源,本文从罗汉松植株中分离产紫杉醇内生真菌,并对内生真菌所产紫杉醇的抗肿瘤活性进行了分析。【方法】采用组织块法自罗汉松的根、茎、叶等组织中分... 【目的】紫杉醇是重要的抗癌药物,主要从罗汉松等植物中提取,为了保护罗汉松等种质资源,本文从罗汉松植株中分离产紫杉醇内生真菌,并对内生真菌所产紫杉醇的抗肿瘤活性进行了分析。【方法】采用组织块法自罗汉松的根、茎、叶等组织中分离内生真菌;通过四唑蓝(Methyl Thiazolyl Tetrazolium,MTT)比色法筛选有抗肿瘤活性的内生真菌菌株,通过薄层层析(Thin Layer Chromatography,TLC)和高效液相色谱(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)对内生真菌所产活性物质进行鉴定;采用抽提法抽提内生真菌所产紫杉醇,应用Vero细胞对抽提的紫杉醇的活性进行了分析。【结果】从罗汉松属(Podocrapus)植物中分离到155株内生真菌,其中28株内生真菌具有较高的抑癌活性。将其中一株菌株A2命名为EPTP-1,经形态学和分子分类学分析鉴定为烟曲霉(Aspergillus fumigatus)。菌株EPTP-1中抽提的紫杉醇5.553μg/L～555.3μg/L作用24h表现出明显的致细胞凋亡作用。菌株EPTP-1发酵5天时紫杉醇的产率为0.5578±0.0294mg/L。【结论】从罗汉松中分离到了一株产紫杉醇内生真菌EPTP-1,可作为紫杉醇类药物工业化生产的候选菌株。 展开更多

关键词 罗汉松 内生真菌 紫杉醇

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石斛内生真菌的研究概述 被引量：15

4

作者 张延威 康冀川 《山地农业生物学报》 2005年第5期438-441,470,共5页

目前从石斛Dendrobium分离并鉴定出的内生真菌分别属于担子菌亚门Basid iomycotina和半知菌亚门Deuteromycotina的17个属。研究发现石斛内生真菌具有促进石斛种子萌发和植株生长的作用。另外,对石斛小菇的药理活性和化学成分的初步研究... 目前从石斛Dendrobium分离并鉴定出的内生真菌分别属于担子菌亚门Basid iomycotina和半知菌亚门Deuteromycotina的17个属。研究发现石斛内生真菌具有促进石斛种子萌发和植株生长的作用。另外,对石斛小菇的药理活性和化学成分的初步研究也有所报道。本文对石斛内生真菌的研究进展进行了概述。 展开更多

关键词 石斛 内生真菌 药理活性 生理活性 分离鉴定

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蜜环菌研究进展 被引量：19

5

作者 邹容 康冀川 《山地农业生物学报》 2005年第3期260-264,共5页

近年来天麻共生蜜环菌Armillariamellea作为一种新兴的药用真菌受到较广泛的关注,研究主要集中在蜜环菌发酵产物中活性成分、功能及在功能食品中的开发应用,而对其分类及分子系统学研究有待深入。本文概述了蜜环菌属真菌的系统学研究概... 近年来天麻共生蜜环菌Armillariamellea作为一种新兴的药用真菌受到较广泛的关注,研究主要集中在蜜环菌发酵产物中活性成分、功能及在功能食品中的开发应用,而对其分类及分子系统学研究有待深入。本文概述了蜜环菌属真菌的系统学研究概况以及天麻共生蜜环菌研究的历史与现状。 展开更多

关键词 蜜环菌 研究进展 分子系统学研究 药用真菌 活性成分 发酵产物 开发应用 功能食品 研究概况 共生 天麻

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一种适用于木本植物RNA提取的方法 被引量：17

6

作者 李晓毓 赵德刚 李丰伯 《安徽农学通报》 2007年第23期42-42,56,共2页

木本植物富含酚类、多糖等代谢物质,用普通方法提取RNA时很难将其除去。选取杜仲叶片做材料,通过比较研究Trizol、改良CTAB法和热硼酸盐法三种RNA提取方法,发现改良CTAB法提取效果好且简单易行,单位鲜重材料获得的RNA产量高,电泳条带清... 木本植物富含酚类、多糖等代谢物质,用普通方法提取RNA时很难将其除去。选取杜仲叶片做材料,通过比较研究Trizol、改良CTAB法和热硼酸盐法三种RNA提取方法,发现改良CTAB法提取效果好且简单易行,单位鲜重材料获得的RNA产量高,电泳条带清晰完整,OD260/OD280=1.84,是一种适于木本植物RNA提取的方法。 展开更多

关键词 木本植物 杜仲 RNA提取

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兰科植物天麻基因组DNA提取方法的比较研究 被引量：15

7

作者 关萍 康冀川 +1 位作者 邹容 石建明 《山地农业生物学报》 2004年第5期422-425,共4页

天麻Gastrodiaelata组织内含有大量的糖类、酚类等次生代谢物质 ,用常规的CTAB(十六烷基溴化铵 )法或SDS(十二烷基硫酸钠 )法难以获得高质量的DNA模板。为获得高质量的DNA ,笔者通过对兰科植物天麻基因组DNA几种提取方法以及天麻不同部... 天麻Gastrodiaelata组织内含有大量的糖类、酚类等次生代谢物质 ,用常规的CTAB(十六烷基溴化铵 )法或SDS(十二烷基硫酸钠 )法难以获得高质量的DNA模板。为获得高质量的DNA ,笔者通过对兰科植物天麻基因组DNA几种提取方法以及天麻不同部位所得的DNA质量进行分析。结果表明 ,SDS -CTAB法是较理想的提取方法 ,能满足普通PCR的需要。天麻不同部位DNA提取的结果表明 。 展开更多

关键词 兰科植物 天麻 基因组DNA 提取方法 SDS-CTAB法

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CTAB法在金黄色葡萄球菌DNA提取中的应用 被引量：16

8

作者 郭新梅 康冀川 张杰 《山地农业生物学报》 2005年第6期558-560,共3页

关键词 金黄色葡萄球菌 DNA提取 PCR CTAB法

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银杏产黄酮内生真菌的分离与鉴定 被引量：15

9

作者 钱龙 杨明飞 +1 位作者 冉雪琴 王嘉福 《山地农业生物学报》 2007年第4期305-310,共6页

为了保护银杏资源,寻找生产黄酮类物质的替代品,采用选择性培养基,从银杏Gingkgo bilobaL.的根、茎和叶中分离7株内生真菌,经高效液相色谱分析,证实3株内生真菌可产生槲皮素和山萘素类黄酮物质,其中内生真菌Enf 7的黄酮产量最高,达到70m... 为了保护银杏资源,寻找生产黄酮类物质的替代品,采用选择性培养基,从银杏Gingkgo bilobaL.的根、茎和叶中分离7株内生真菌,经高效液相色谱分析,证实3株内生真菌可产生槲皮素和山萘素类黄酮物质,其中内生真菌Enf 7的黄酮产量最高,达到70mg.100g-1干菌丝,可作为生产银杏黄酮的候选菌株。根据真菌的孢子结构、菌丝形态、菌落生长速度等形态学特征,结合核糖体RNA基因的居间序列(internal transcribed spacer,ITS)的碱基差异,确定3株产黄酮内生真菌分别属于安培菌属的白粉菌寄生菌Anpelomyces humuli、茎点霉属的头状茎点霉Phoma glomerata和镰孢属的茄镰孢Fusarium solani。 展开更多

关键词 银杏 内生真菌 黄酮类化合物

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分子标记在园艺植物上的应用与研究进展 被引量：13

10

作者 宋常美 文晓鹏 《山地农业生物学报》 2005年第5期442-447,共6页

分子标记是继形态学标记、细胞学标记和生化标记之后发展起来的一种新的遗传标记,已广泛应用于园艺植物上。本文综述了分子标记技术在园艺植物种质资源遗传多样性评价、遗传变异检测、遗传图谱构建、分子克隆、分子标记辅助选择育种等... 分子标记是继形态学标记、细胞学标记和生化标记之后发展起来的一种新的遗传标记,已广泛应用于园艺植物上。本文综述了分子标记技术在园艺植物种质资源遗传多样性评价、遗传变异检测、遗传图谱构建、分子克隆、分子标记辅助选择育种等领域上的研究进展。文中还就分子标记在园艺植物遗传育种上存在的问题进行了探讨。 展开更多

关键词 分子标记 园艺植物 遗传多样性 遗传图谱 选择育种

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苗期特耐冷贵州地方水稻品种孕穗期耐冷性研究 被引量：9

11

作者 蒋向辉 余显权 +1 位作者 赵福胜 赵德刚 《山地农业生物学报》 2004年第4期288-292,共5页

分别用17℃和12℃恒温对苗期特耐冷贵州地方水稻品种孕穗期处理3d,鉴定出一批孕穗期耐冷性极强的品种;经低温处理后,测定过氧化物酶(POD)、相对电导率、叶绿素含量、根系活力、花药长度、正常花粉率等指标,成熟后统计未处理和低温处理... 分别用17℃和12℃恒温对苗期特耐冷贵州地方水稻品种孕穗期处理3d,鉴定出一批孕穗期耐冷性极强的品种;经低温处理后,测定过氧化物酶(POD)、相对电导率、叶绿素含量、根系活力、花药长度、正常花粉率等指标,成熟后统计未处理和低温处理后的千粒重、单株产量和结实率。结果表明,在17℃处理条件下,根系活力、相对电导率与结实率呈显著负相关(相关系数分别为-0 577 和-0 6904 ),正常花粉率、单株产量与结实率呈极显著正相关(相关系数分别为0 8276 和0 8028 )。对各耐冷指标的通径分析发现,正常花粉率的直接通径系数最高(0 659),对耐冷性的作用最大。对不同生育期耐冷性的相关分析发现,芽期与苗期呈显著正相关,苗期与开花期呈显著正相关。 展开更多

关键词 贵州 水稻 地方品种 孕穗期 耐冷性 过氧化物酶 相对电导率 叶绿素

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猪水肿病大肠杆菌志贺样毒素Ⅱ型突变体新基因的分子特征 被引量：8

12

作者 冉雪琴 王红珍 +2 位作者 艾虎 吴拥军 王嘉福 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期167-171,共5页

从仔猪水肿病样品中分离的一株大肠杆菌菌株NP96 2 1,抽提染色体DNA ,构建NP96 2 1的总DNA文库 ,经菌落原位杂交筛选、限制酶酶切和Southern印迹等分析 ,获得含有志贺样毒素基因的重组质粒 ,核苷酸序列分析表明 ,该基因的A亚基与SLT IIe... 从仔猪水肿病样品中分离的一株大肠杆菌菌株NP96 2 1,抽提染色体DNA ,构建NP96 2 1的总DNA文库 ,经菌落原位杂交筛选、限制酶酶切和Southern印迹等分析 ,获得含有志贺样毒素基因的重组质粒 ,核苷酸序列分析表明 ,该基因的A亚基与SLT IIes的同源性为 97 6 %～ 98 1% ,与SLT IIc、SLT IId及EHECO15 7:H7产生的SLT II的A亚基之间的同源性分别为 93 1%、93 0 %和 92 9% ;B亚基与SLT IIes的同源性为 99 6 2 %～ 10 0 % ,与SLT IIc、SLT IId及SLT II的同源性分别为 81 5 %、81 1%和 81 5 % ;与 2 9种已知序列的SLT II、SLT I及志贺毒素STX进行聚类分析 ,结果证实大肠杆菌NP96 2 1菌株中的志贺样毒素基因属于一种新的SLT IIe亚型。SLT IIe NP96 2 1的A亚基与其它SLT IIe之间存在 7～ 9个氨基酸的差异 ,B亚基的氨基酸序列完全相同 ,与A亚基毒力活性密切相关的氨基酸分别为Thr4、Glu16 7、Arg170和Arg176。 展开更多

关键词 猪水肿病 大肠杆菌 志贺样毒素Ⅱ型突变体 基因 菌株NP9621 同源性 SLT-IIe亚型

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猪水肿病志贺样毒素大肠杆菌的分离与鉴定 被引量：6

13

作者 王红珍 艾虎 +2 位作者 吴拥军 冉雪琴 王嘉福 《西南农业学报》 CSCD 2004年第3期378-381,共4页

大肠杆菌产生的志贺样毒素Ⅱ型突变体(Shiga liketoxinvariant,SLTⅡv)是猪水肿病的主要致病因子。采用聚合酶链式反应,以特异的寡核苷酸片段为引物,从200份贵州省患水肿病猪粪样中检出19株菌株含有志贺样毒素Ⅱ型突变体基因,生化实验... 大肠杆菌产生的志贺样毒素Ⅱ型突变体(Shiga liketoxinvariant,SLTⅡv)是猪水肿病的主要致病因子。采用聚合酶链式反应,以特异的寡核苷酸片段为引物,从200份贵州省患水肿病猪粪样中检出19株菌株含有志贺样毒素Ⅱ型突变体基因,生化实验结果符合大肠埃希氏杆菌的特点。经鉴定,19株大肠杆菌分属于O8、O65、O82、O1394种血清型,其中O82占63%。研究结果证实,在贵州省猪水肿病中存在志贺样毒素基因。 展开更多

关键词 大肠杆菌 猪水肿病 志贺样毒素Ⅱ型突变体基因

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喜树茎尖组织培养与植株再生 被引量：6

14

作者 吕立堂 朱冬雪 赵德刚 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期682-684,共3页

目的　探索喜树的人工快繁。方法　以喜树幼苗的茎尖作为外植体 ,培养在附加不同激素的培养基上。结果　以 B5培养基附加 6 - BA 0 .2 m g/ L ,IBA 0 .0 5 mg/ L和 AS (afenine sulfate,10 mg/ L )对丛生芽的诱导与增值效果最佳 ,而附加... 目的　探索喜树的人工快繁。方法　以喜树幼苗的茎尖作为外植体 ,培养在附加不同激素的培养基上。结果　以 B5培养基附加 6 - BA 0 .2 m g/ L ,IBA 0 .0 5 mg/ L和 AS (afenine sulfate,10 mg/ L )对丛生芽的诱导与增值效果最佳 ,而附加 IBA0 .5 mg/ L,KT0 .1mg/ L 和 AS10 m g/ L 的生根效果最佳。试管苗移栽到珍珠岩 -土壤(3∶ 7)的基质中生长良好 ,成活率高达 96 %。结论　为喜树的开发利用提供了一条新途径。 展开更多

关键词 喜树 植株再生 组织培养

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杜仲抗真菌肽对黄曲霉的抑制作用(英文) 被引量：10

15

作者 刘世会 赵德刚 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 2008年第2期332-334,共3页

用纸片琼脂扩散法,研究了杜仲抗真菌肽EAFP3对黄曲霉(Aspergillus flavus)的抗真菌活性。研究结果表明,EAFP3对黄曲霉有明显抑制作用,最小抑菌浓度为125μg/mL。

关键词 杜仲 抗真菌肽 黄曲霉

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贵州地方耐冷水稻品种开花期耐冷的生理特性研究 被引量：3

16

作者 蒋向辉 余显权 +1 位作者 赵德刚 赵福胜 《广西农业科学》 CSCD 2005年第1期6-10,共5页

对已筛选出的苗期特耐冷的贵州地方水稻品种进行了开花期耐冷性鉴定 ,同时测定了在冷处理条件下其生理生化特性的变化。结果表明 :各品种的叶绿素含量、净光合速率、根系活力等指标随着温度的降低而降低 ;相对电导率随温度的降低而增高 ... 对已筛选出的苗期特耐冷的贵州地方水稻品种进行了开花期耐冷性鉴定 ,同时测定了在冷处理条件下其生理生化特性的变化。结果表明 :各品种的叶绿素含量、净光合速率、根系活力等指标随着温度的降低而降低 ;相对电导率随温度的降低而增高 ;POD酶的活性随着温度的降低呈现先增后降的趋势 ;17℃低温下相对电导率与 POD酶活性呈现显著正相关 (r=0 .6 5 0 5 * ) ,与结实率呈显著负相关 (r=0 .5 84 8* ) ;POD酶活性与根系活力呈显著正相关 (r=0 .6 378* ) ,与结实率呈极显著负相关 (r=0 .85 4 4 * * ) ;结实率与单株产量呈显著的正相关 (r=0 .6 97* )。 展开更多

关键词 耐冷水稻 开花期 生理特性

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不产子实体蛹虫草单孢子分离株的获得及RAPD分析 被引量：5

17

作者 李闽锋 何劲 +3 位作者 丁玲 康冀川 张桥 郑庆委 《西南农业学报》 CSCD 2007年第3期547-550,共4页

对优势蛹虫草原始菌株WWM04进行单孢子分离,共获得9个单孢子分离株,采用米饭培养基培养确证并且获得6个完全不产子实体的单孢子分离株。利用随机扩增多态性DNA(RAPD)分子标记方法对菌落差异的4个菌落特征典型的不产子实体单孢子分离株(S... 对优势蛹虫草原始菌株WWM04进行单孢子分离,共获得9个单孢子分离株,采用米饭培养基培养确证并且获得6个完全不产子实体的单孢子分离株。利用随机扩增多态性DNA(RAPD)分子标记方法对菌落差异的4个菌落特征典型的不产子实体单孢子分离株(SSP2、SSP7、SSP19和SSP21)、原始菌株以及由原始菌株12次转接后退化的菌株进行遗传多样性分析。结果表明,引物S37、S61对6个菌株的扩增谱带具有非常明显的特异性,该结果为蛹虫草退化分子标记奠定基础,并且在一定程度上也印证了蛹虫草异核现象和准性生殖理论。 展开更多

关键词 蛹虫草 单孢子分离株 RAPD 异核现象

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蒺藜状苜蓿中MtERF-6基因的克隆及序列分析 被引量：5

18

作者 连瑞丽 李宇伟 赵德刚 《草业科学》 CAS CSCD 2006年第9期82-87,共6页

乙烯反应元件结合蛋白属于植物特有的一个转录因子家族,这个家族保守的DNA结合域称为ERF结构域。根据对蒺藜状苜蓿Medicago truncatula测序的数据库进行分析,设计合成引物,通过RT-PCR扩增得到了乙烯反应元件结合蛋白基因(MtERF-6),并测... 乙烯反应元件结合蛋白属于植物特有的一个转录因子家族,这个家族保守的DNA结合域称为ERF结构域。根据对蒺藜状苜蓿Medicago truncatula测序的数据库进行分析,设计合成引物,通过RT-PCR扩增得到了乙烯反应元件结合蛋白基因(MtERF-6),并测定了其核苷酸全序列。该基因完整的读码框包括654 bp,编码218个氨基酸。用此片段的氨基酸序列通过GenBankBLAST分析表明,该基因属于EREBP(Ethylene responsive element binding proteins)家族,其核苷酸与已报道的ERF4[Gossypium hirsu-tum]、ATERF-9[Arabidopsis thaliana]、NtERF3[Nicotiana tabacum]、NsERF3[Nicotiana sylvestris]、CaEREBP-C1[Capsicum annuum]的相似性分别为45%、47%、41%、40%和42%,是新的基因。MtERF-6的核酸序列在GenBank发表,登录号为DQ344024。 展开更多

关键词 蒺藜状苜蓿 乙烯反应元件结合蛋白 MtERF-6基因

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利用CTAB法提取灵芝属部分菌株基因组DNA 被引量：5

19

作者 张杰 康冀川 +1 位作者 崔彦慧 郭新梅 《山地农业生物学报》 2005年第6期555-557,564,共4页

关键词 灵芝属 基因组DNA GTAB法 凝胶电泳

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西方许旺酵母α-淀粉酶基因的克隆及其在大肠杆菌中的分泌表达 被引量：2

20

作者 廖昱泓 涂桂洪 赵德刚 《生物技术》 CAS CSCD 2006年第2期21-23,共3页

目的:将带有完整自身信号肽的西方许旺酵母α-淀粉酶基因克隆到大肠杆菌中,验证西方许旺酵母α-淀粉酶基因能否在大肠杆菌中有效表达。方法:利用PCR扩增带有完整自身信号肽的西方许旺酵母α-淀粉酶基因,并将其接入Zeocin启动子片段,构... 目的:将带有完整自身信号肽的西方许旺酵母α-淀粉酶基因克隆到大肠杆菌中,验证西方许旺酵母α-淀粉酶基因能否在大肠杆菌中有效表达。方法:利用PCR扩增带有完整自身信号肽的西方许旺酵母α-淀粉酶基因,并将其接入Zeocin启动子片段,构建了重组表达载体GapZA,转化大肠杆菌,验证得到的阳性克隆菌株是否表达α-淀粉酶活性。结果:阳性克隆菌株均有α-淀粉酶活性。结论:证明了许旺酵母α-淀粉酶能在自身信号肽引导下分泌到大肠杆菌细胞外,并且表现出明显酶活。 展开更多

关键词 西方许旺酵母 Α-淀粉酶基因 克隆 分泌表达

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