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我国猪瘟的流行病学现状分析 被引量：74
1
作者 吕宗吉 涂长春 +4 位作者 余兴龙 吴健敏 李月红 马刚 张茂林 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期300-303,共4页
根据调查、收集的猪瘟 (CSF)临床与流行病学资料 ,分析了全国 16个省市自治区 48个发病猪场 (疫点 )的流行状况。调查结果表明 ,我国的CSF流行在较大范围内以临床表现不典型的CSF为主 ,发病多见于 3月龄以下的仔猪 ,发病率与死亡率普遍... 根据调查、收集的猪瘟 (CSF)临床与流行病学资料 ,分析了全国 16个省市自治区 48个发病猪场 (疫点 )的流行状况。调查结果表明 ,我国的CSF流行在较大范围内以临床表现不典型的CSF为主 ,发病多见于 3月龄以下的仔猪 ,发病率与死亡率普遍较高 ,流行规模以局部流行为主 ,同一猪场中育肥猪与种猪的发病率很低。但母猪多呈隐性感染 ,部分感染母猪表现出繁殖障碍 ,因此认为隐性感染母猪可能是仔猪感染的重要传染源。在某些地区 ,仍然流行着高发病率和致死率的急性、典型CSF。所调查的猪群具有较高防疫注射密度 ,但仍有CSF发生 ,可能表明猪群的免疫水平不高。 展开更多
关键词 中国 猪瘟 流行病学
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不同给药方式下鲤对诺氟沙星的药代动力学研究 被引量：54
2
作者 张雅斌 张祚新 +4 位作者 郑伟 刘艳辉 杨永胜 张锦霞 吴永魁 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第6期559-563,共5页
通过不同给药方式鲤对诺氟沙星的药代动力学研究，建立相关的吸收、分布与消除等药动学参数及生物 利用度资料。结果以 １０ｍｇ·ｋｇ－１鱼体重单剂量肌注、口灌诺氟沙星的药时数据符合开放性二室模型，以 １０ｍｇ· ｋｇ－... 通过不同给药方式鲤对诺氟沙星的药代动力学研究，建立相关的吸收、分布与消除等药动学参数及生物 利用度资料。结果以 １０ｍｇ·ｋｇ－１鱼体重单剂量肌注、口灌诺氟沙星的药时数据符合开放性二室模型，以 １０ｍｇ· ｋｇ－１鱼体重药物剂量单次混饲给药的药时数据符合开放性一室模型。肌注给药的主要药代动力学参数为：ＡＵＣ２４．９４８１μｇ·ｈ·ｍＬ－１， Ｃｍａｘ　１６．８９９２μｇ·ｍＬ－１，ｔ１／２α０．１２７９ｈ，ｔ１／２β　３．４０３２ｈ；口灌给药的主要药代动力学参数为：ＡＵＣ１５０．６０２９μｇ·ｈ·ｍＬ－１，Ｃｍａｘ５．７９９８μｇ·ｍＬ－１，ｔ１／２α３．４０７１ｈ，ｔ１／２β７７．１２３９ｈ；混饲口灌给药的主要药代动力学 参数为： ＡＵＣ６．８１８３μｇ·ｈ·ｍＬ－１，Ｃｍａｘ１．７２１７μｇ·ｍＬ－１，ｔ１／２ｋａ０．２２６４３ｈ，ｔ１／２ｋｅ２．０２１３ｈ。不同给药方式的主要药 代动力学参数差异显著（Ｐ＜０．０１）。 展开更多
关键词 诺氟沙星 鲤 药代动力学 给药方式 细菌性疾病
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犬瘟热的诊断及其预防免疫的研究进展 被引量：61
3
作者 何洪彬 夏咸柱 《动物医学进展》 CSCD 2001年第1期12-15,21,共5页
本文对犬瘟热 ( CD)的诊断、预防免疫和免疫失败的影响因素及犬瘟热病毒( CDV)的宿主范围进行了综述。 CDV不仅感染陆生食肉动物 ,而且也感染水生食肉动物 ,并且其宿主范围还在不断扩大。CDV感染主要采用病毒分离、特异性病毒抗原或特... 本文对犬瘟热 ( CD)的诊断、预防免疫和免疫失败的影响因素及犬瘟热病毒( CDV)的宿主范围进行了综述。 CDV不仅感染陆生食肉动物 ,而且也感染水生食肉动物 ,并且其宿主范围还在不断扩大。CDV感染主要采用病毒分离、特异性病毒抗原或特异性核酸检测等方法确诊。疫苗包括灭活的 CDV疫苗、麻疹病毒 ( MV)异源苗及 CDV弱毒活苗。疫苗接种犬的免疫反应主要取决于毒株特性及犬的应答能力 ,只有弱毒活苗能诱导产生持久而坚强的保护力。尽管多年来 CDV弱毒活苗的使用控制了 CD的发生 ,但最近免疫过的犬发生 CD的病例并不少见。分析免疫失败的原因 ,主要是母源抗体干扰、疫苗质量差、其它病毒的免疫抑制以及 展开更多
关键词 犬瘟热 诊断 预防免疫 免疫失败
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巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)表达系统及其在外源蛋白生产中的优势与应用前景 被引量：15
4
作者 马兴元 谭建华 +1 位作者 朱平 孙曼霁 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期98-101,共4页
关键词 巴斯德毕赤酵母 表达系统 外源蛋白生产 应用前景
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恩诺沙星在鲤体内的药效学及药动力学研究 被引量：42
5
作者 张雅斌 刘艳辉 +3 位作者 张祚新 祖岫杰 唐虹 刘铁钢 《大连水产学院学报》 CSCD 北大核心 2004年第4期239-242,共4页
用恩诺沙星对5种淡水养殖鱼类常见病、多发病致病菌进行抑菌试验,获得了恩诺沙星对细菌出血性败血病、打印病、赤皮病、烂鳃病、肠炎病致病菌的最小抑菌浓度(MIC)分别为0 02、0 04、0 63、0 31、0 04μg/mL。体内抗菌药效试验结果表明,... 用恩诺沙星对5种淡水养殖鱼类常见病、多发病致病菌进行抑菌试验,获得了恩诺沙星对细菌出血性败血病、打印病、赤皮病、烂鳃病、肠炎病致病菌的最小抑菌浓度(MIC)分别为0 02、0 04、0 63、0 31、0 04μg/mL。体内抗菌药效试验结果表明,每日以10mg/kg剂量混饲口灌给药,能有效地杀灭致病菌,提高感染鱼的成活率。并应用高效液相色谱(HPLC)法测定以该剂量给药后不同时间鱼血浆中药物的质量浓度。采用MCPKP药代动力学软件处理药时数据,获得了鲤对恩诺沙星的吸收、分布与排除数据,结果表明,混饲口灌恩诺沙星在鱼体内的药时数据符合开放式一室模型,=0 2015h,t1/2K=主要药代动力学参数:AUC=45 0550μg/(mL·h),Cmax=2 1472μg/mL,t1/2Ka13 6513h。 展开更多
关键词 恩诺沙星 鲤 药效学 药动力学
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微生物接种剂和酶制剂对玉米秸秆发酵品质的影响 被引量：34
6
作者 王建兵 韩继福 +3 位作者 高宏伟 许进香 陈维岩 王景林 《内蒙古畜牧科学》 2001年第2期4-7,共4页
通过对比研究的方法，在25 ℃室温玉米秸秆厌氧发酵时添加了复合产乳酸菌、酶制剂及益生菌，以评价其单独或联合应用对玉米秸秆发酵品质的影响。玉米秸秆调制试验分为一个对照，甲酸、复合产乳酸菌、纤维素酶、固体发酵剂、液体发酵剂等... 通过对比研究的方法，在25 ℃室温玉米秸秆厌氧发酵时添加了复合产乳酸菌、酶制剂及益生菌，以评价其单独或联合应用对玉米秸秆发酵品质的影响。玉米秸秆调制试验分为一个对照，甲酸、复合产乳酸菌、纤维素酶、固体发酵剂、液体发酵剂等5个处理组。除甲酸处理组外，其余4个处理组又分为2个添加水平。试验结果表明：单独添加纤维素酶或复合产乳酸菌对玉米秸秆pH值无明显影响（P＞0．05），但使得其发酵质量较对照组有所改善，纤维素酶组在整个发酵期，复合产乳酸菌组（高剂量）在20 d、40 d时乳酸含量明显高于对照组（P＜0．05或P＜0．01）；固体发酵剂、液体发酵剂在整个发酵期显著降低了pH值、NH3－N及丁酸含量（P＜0．05或P＜0．01），大大增加了乳酸含量（P＜0．01），全面改善了玉米秸秆发酵品质。 展开更多
关键词 玉米秸秆 发酵品质 复合产乳酸菌 纤维素酶 固体发酵剂 液体发酵剂 秸秆青贮
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我国部分地区猪瘟病毒流行株的基因差异 被引量：23
7
作者 吕宗吉 李红卫 +4 位作者 涂长春 余兴龙 吴健敏 李月红 殷震 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期313-316,共4页
采用 RT-PCR方法 ,从我国 1 0个省、市、自治区收集的 2 3个猪瘟病毒 ( CSFV)流行毒株中 ,扩增了CSFV E2基因中主要抗原位点编码区。对各扩增片段进行了序列测定 ,通过计算机分析构建了系统发生树 ,并确定了它们间的遗传相关性。结果表... 采用 RT-PCR方法 ,从我国 1 0个省、市、自治区收集的 2 3个猪瘟病毒 ( CSFV)流行毒株中 ,扩增了CSFV E2基因中主要抗原位点编码区。对各扩增片段进行了序列测定 ,通过计算机分析构建了系统发生树 ,并确定了它们间的遗传相关性。结果表明 ,2 3个流行毒株中的 1 8株属基因 群 ,占 78.2 6%;另外 5个流行株与传统石门强毒、兔化弱毒株属基因 群 ,占 2 1 .74 %。两群间测序区的核酸同源性只有 78.90 %。此外 ,根据序列差异程度 ,将基因 群流行株分为 3个亚群 ,各基因群 CSFV在地域分布上未发现有明显的特征性。本研究初步揭示了我国较大范围内流行的 CSFV毒株与传统的石门强毒和疫苗用兔化弱毒在抗原基因上存在较大的差异 。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 RT-PCR 基因差异 疫苗株 流行株
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猪瘟病毒保护性抗原E2蛋白单抗的制备及其抗原表位的初步分析 被引量：27
8
作者 马刚 李作生 +2 位作者 余兴龙 刘思国 涂长春 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期121-124,共4页
应用大肠杆菌表达的猪瘟病毒主要保护性 E2抗原决定簇蛋白和全长 E2基因构建的 DNA疫苗免疫 BAL B/c小鼠。取免疫小鼠脾细胞与 SP2 /0骨髓瘤细胞进行融合 ,经克隆和间接 EL ISA筛选 ,获得了 A11、B2、E3、H6、D5、D86株稳定分泌抗猪瘟病... 应用大肠杆菌表达的猪瘟病毒主要保护性 E2抗原决定簇蛋白和全长 E2基因构建的 DNA疫苗免疫 BAL B/c小鼠。取免疫小鼠脾细胞与 SP2 /0骨髓瘤细胞进行融合 ,经克隆和间接 EL ISA筛选 ,获得了 A11、B2、E3、H6、D5、D86株稳定分泌抗猪瘟病毒 E2蛋白单克隆抗体 (Mc Ab)的杂交瘤细胞株。它们的腹水效价在 1∶ 80 0～ 1∶ 2 10 0 0 0之间。抗体类型鉴定结果表明 ,A11、E3、H6、D5和 D8为 Ig M类型 ,B2为 Ig G类型。随后用蛋白 A凝胶层析法和 PEG沉淀法分别纯化了 Ig G和 Ig M单抗。对纯化单抗进行的抗原识别表位研究结果初步表明 ,6株单抗可能识别 3种不同的E2抗原表位。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 McAb 纯化 表位分析 保护性抗原E2 蛋白 单抗
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通过病毒分离鉴定和基因检测首次发现虎流感 被引量：28
9
作者 夏咸柱 高玉伟 +8 位作者 扈荣良 王立刚 刘丹 邹啸环 黄耕 贺文琦 王玮 苏伟林 刘文良 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期107-110,共4页
应用 F8 1 猫肾传代细胞 ,从高热、拒食和间有神经症状的死亡虎病料中分离获得 1株病毒 ,经形态学、理化学、生物学和血清学系统鉴定 ,证明为流感病毒。采用流感病毒核蛋白基因引物 ,对分离病毒及该虎病料进行 RT- PCR扩增和序列分析 ,... 应用 F8 1 猫肾传代细胞 ,从高热、拒食和间有神经症状的死亡虎病料中分离获得 1株病毒 ,经形态学、理化学、生物学和血清学系统鉴定 ,证明为流感病毒。采用流感病毒核蛋白基因引物 ,对分离病毒及该虎病料进行 RT- PCR扩增和序列分析 ,结果从分离病毒和虎病料中均扩增出与理论值大小相符的 4 6 4 bp基因片段 ;其序列与 A、B、C 3型流感病毒相比较 ,同源性分别为 84 .9%、35 .0 %、2 4 .8%。由此说明 ,所分离病毒为 A型流感病毒 ,命名为 A/虎 /哈尔滨 (中国 ) / 0 1/ 2 0 0 2。用此分离病毒静脉接种于 3月龄家猫 3只 ,均出现与病虎相似的临床症状 ,其中 1只耐过 ,2只死亡。死亡猫剖检变化与死虎相似 ,主要呈现肺炎病变 ,并可从病料中回收到所接种病毒。以此分离病毒为 HA抗原 ,进行虎与猫血清的 HI抗体检测 ,结果康复虎血清比其病初血清、康复猫血清比其接种前血清 HI抗体均增高 4倍以上 ,表明该病毒具有致病性 ,是引起该虎与试验猫发病甚至死亡的病原。 展开更多
关键词 基因检测 A型流感病毒 分离 鉴定 虎 流感
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诺氟沙星在鱼类细菌性疾病中的应用研究 被引量：27
10
作者 张雅斌 张祚新 +1 位作者 郑伟 刘艳辉 《大连水产学院学报》 CSCD 2000年第2期79-85,共7页
以鲤细菌出血性败血病致病菌强毒力菌株对诺氟沙星 (Norfloxacin)等 7种抑菌药物进行体外敏感性测定 ,其中诺氟沙星高度敏感 ,最小抑菌浓度 <0 2 μg/mL。体内抗菌药效试验结果表明 ,每kg鱼体重注射 1mg诺氟沙星和口服 1 0mg/d诺氟... 以鲤细菌出血性败血病致病菌强毒力菌株对诺氟沙星 (Norfloxacin)等 7种抑菌药物进行体外敏感性测定 ,其中诺氟沙星高度敏感 ,最小抑菌浓度 <0 2 μg/mL。体内抗菌药效试验结果表明 ,每kg鱼体重注射 1mg诺氟沙星和口服 1 0mg/d诺氟沙星均能有效杀灭致病菌 ,提高感染鱼成活率。诺氟沙星的药动学研究结果表明 ,混饲给药后 0 75h至 2 4h ,血药浓度在 0 2 μg/mL以上。据此确定给药方案 :口服给药剂量为 1 0mg/(kg·d) ,连续给药 5次 ,在生产中应用效果良好。诺氟沙星对鲤急性口灌毒性实验结果LD50>1 0 0 0mg/kg ( 96h) ,肌肉残毒测定结果证明 ,停药 1 44h即无诺氟沙星检出 ,该药安全范围大 ,残余期短。 展开更多
关键词 诺氟沙星 药效 给药方案 鱼类 细菌性疾病
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犬细小病毒血凝抑制抗体和中和抗体的关系 被引量：25
11
作者 邱薇 夏咸柱 +7 位作者 范泉水 王春华 黄耕 何洪彬 范秀军 乔军 余春 武银莲 《中国兽医科技》 CSCD 2000年第10期3-5,共3页
对 8份犬细小病毒免疫的犬血清同时进行中和 (SN)抗体和血凝抑制 (HI)抗体检测。结果 ,SN抗体和HI抗体具有正比线性关系 ,SN抗体近似于 6倍HI抗体。其中HI抗体检测可在 3h内获得结果 ,操作简便 。
关键词 犬细小病毒 血凝抑制试验 中和试验 抗体检测
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应用多联PCR对引发猪繁殖障碍有关病毒的检测 Ⅰ.JEV、PPV、PRRSV、PRV多联PCR引物设计 被引量：24
12
作者 孙明 何旭玉 《中国兽医学报》 CSCD 北大核心 2000年第1期10-14,共5页
首先在ＧinＢank查出日本乙型脑炎病毒（ＪＥＶ）、伪狂犬病病毒（ＰＲＶ）、猪繁殖与 呼吸系统综合征病毒（ＰＲＲＳＶ）和猪细小病毒（ＰＰＶ）基因组的所有已知序列，对各病毒基因区域进行同源性分析，结果各病毒基因组的结构特点，... 首先在ＧinＢank查出日本乙型脑炎病毒（ＪＥＶ）、伪狂犬病病毒（ＰＲＶ）、猪繁殖与 呼吸系统综合征病毒（ＰＲＲＳＶ）和猪细小病毒（ＰＰＶ）基因组的所有已知序列，对各病毒基因区域进行同源性分析，结果各病毒基因组的结构特点，发现并确定了ＰＲＶ的gＨ基因区、ＪＥＶ的多聚蛋白基因区、ＰＲＲＳＶ的结构蛋白区和ＰＰＶ的ＶＰ２基因区为各自病毒保守序列。利用Ｇoldkey软件对上述保守的特殊序列进行引物设计。 展开更多
关键词 JEV PPV PRRSV PRV 多联PCR 引物设计 诊断
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犬瘟热、犬冠状病毒联合RT-PCR检测方法的建立及应用 被引量：24
13
作者 乔军 孟庆龄 +2 位作者 夏咸柱 何宏彬 范泉水 《西南农业学报》 CSCD 2002年第1期93-95,共3页
用CDV、CCV特异性引物对同一样品中CDV和CCVRNA模板进行联合RT PCR扩增 ,并对扩增条件进行了优化。结果同时得到了两条大小与试验设计完全相符的特异性扩增带 ,且不扩增犬细小病毒、犬腺病毒、犬副流感病毒、轮状病毒的核酸。敏感性试... 用CDV、CCV特异性引物对同一样品中CDV和CCVRNA模板进行联合RT PCR扩增 ,并对扩增条件进行了优化。结果同时得到了两条大小与试验设计完全相符的特异性扩增带 ,且不扩增犬细小病毒、犬腺病毒、犬副流感病毒、轮状病毒的核酸。敏感性试验表明 ,该联合PCR能检测出 10 - 4倍稀释的CDV模板 (10 6 6 TCID50 / 0 1mL)和 10 - 3倍稀释的CCV模板 (10 5 9TCID50 /0 1mL)。通过对 7份临床发病犬病料的检测 ,其阳性检出率高于电镜负染检查。初步应用表明 ,此法具有高度敏感、特异、准确、快速等特点 ,适用于兽医临床对CDV。 展开更多
关键词 犬瘟热 犬冠状病毒 RT-PCR检测 应用 特异性引物 核酸 敏感性 CCV模板 电镜负染 兽医临床
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纤维素酶产生菌黑曲霉X—15的选育及其产酶条件 被引量：18
14
作者 王景林 蒋兴村 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第1期97-99,共3页
突变型黑曲霉（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｒｓ ｎｉｇｅｒ）Ｍ００１分别经紫外线（ＵＶ）、亚消基胍（ＮＴＧ）、ＴＤＰ辐射仪及空间微重力辐射（ＳＣ）等因素的多级循环处理，得到１株形态发生改变的变异菌株Ｘ－１５。其固体培养纤维素酶... 突变型黑曲霉（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｒｓ ｎｉｇｅｒ）Ｍ００１分别经紫外线（ＵＶ）、亚消基胍（ＮＴＧ）、ＴＤＰ辐射仪及空间微重力辐射（ＳＣ）等因素的多级循环处理，得到１株形态发生改变的变异菌株Ｘ－１５。其固体培养纤维素酶的滤纸分解酶活力（ＦＰＡ）为１９Ｕ／g，羟甲基纤维素酶（ＣＭＣａｓｅ）活力为４５３Ｕ／g，β－葡萄糖苷酶（β－ｇｌｕａｓｅ）活力为１５４Ｕ／g，与出发菌株Ｍ００１相比，分别为其２．８倍、 展开更多
关键词 黑曲霉 纤维素酶 诱变育种 产酶条件 X-15
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鸡卵清蛋白基因5′调控序列表达载体的构建及其在鸡原代输卵管上皮细胞及鸡成纤维细胞的表达 被引量：18
15
作者 宇丽 赵君 +6 位作者 张艳玲 刘斌 张守峰 王凤阳 赵宝全 扈荣良 殷震 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期21-24,共4页
将氯霉素乙酰转移酶 ( CAT)基因与鸡卵清蛋白基因上游调控序列融合 ,构建了 p CAT-3-OVP(鸡卵清蛋白基因 5′调控序列 )表达载体。将构建的载体与脂质体混合后制备转染液 ,转染鸡原代输卵管上皮细胞和鸡成纤维细胞进行瞬时表达。结果表... 将氯霉素乙酰转移酶 ( CAT)基因与鸡卵清蛋白基因上游调控序列融合 ,构建了 p CAT-3-OVP(鸡卵清蛋白基因 5′调控序列 )表达载体。将构建的载体与脂质体混合后制备转染液 ,转染鸡原代输卵管上皮细胞和鸡成纤维细胞进行瞬时表达。结果表明 ,在鸡原代输卵管上皮细胞 ,转染后 4 8h表达量最高 ,为 0 .67μg/L;而在鸡成纤维细胞 ,不论有无类固醇激素存在 ,均不表达。结果提示 ,在输卵管细胞中存在细胞特异性转录因子。 展开更多
关键词 鸡 卵清蛋白基因 调控序列 表达 载体构建
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猪白细胞介素18成熟蛋白基因的克隆及在大肠杆菌中的表达 被引量：22
16
作者 郑敏 金宁一 +2 位作者 张洪勇 李昌 尹革芬 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期430-432,共3页
通过 RT- PCR方法从用 PHA和 L PS刺激的猪脾脏细胞中扩增出猪白细胞介素 18(p IL - 18)成熟蛋白基因的c DNA,克隆到 T载体 p UCm- T后 ,序列测定表明 ,p IL- 18成熟蛋白基因核苷酸长度为 4 74 bp,编码 15 7个氨基酸。将该基因片段克隆... 通过 RT- PCR方法从用 PHA和 L PS刺激的猪脾脏细胞中扩增出猪白细胞介素 18(p IL - 18)成熟蛋白基因的c DNA,克隆到 T载体 p UCm- T后 ,序列测定表明 ,p IL- 18成熟蛋白基因核苷酸长度为 4 74 bp,编码 15 7个氨基酸。将该基因片段克隆到大肠杆菌表达载体 p ET- 2 8a构建重组质粒 p ETIL 18m,转化大肠杆菌 BL 2 1(DE3) ,并用 IPTG诱导。重组菌菌体裂解物 SDS- PAGE可检测到相对分子质量为 190 0 0的重组蛋白 ,免疫印迹法证实该重组蛋白可以与人 IL- 展开更多
关键词 猪白细胞介素18 成熟蛋白 基因克隆 原核表达 RT-PCR 大肠杆菌 免疫佐剂 免疫调节剂
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应用实时荧光定量TaqManRT-PCR检测口蹄疫病毒 被引量：18
17
作者 花群义 金宁一 +3 位作者 周晓黎 董俊 杨云庆 徐自忠 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期116-119,共4页
按照口蹄疫病毒 (FMDV )聚合酶 3D基因序列 ,设计合成了引物和探针 ,经各反应条件的优化 ,建立了实时荧光定量 RT- PCR技术 ,对细胞培养物、水泡液、水泡皮及分泌物、血液中的 FMDV进行了特异性检测和敏感性试验。结果 ,用 30 0 nmol/ L... 按照口蹄疫病毒 (FMDV )聚合酶 3D基因序列 ,设计合成了引物和探针 ,经各反应条件的优化 ,建立了实时荧光定量 RT- PCR技术 ,对细胞培养物、水泡液、水泡皮及分泌物、血液中的 FMDV进行了特异性检测和敏感性试验。结果 ,用 30 0 nmol/ L 的引物浓度和 2 0 0 nmol/ L 探针浓度 ,获得的 CT值较小 ,而 ΔRn最大 ;可检测到相当于 0 .1 TCID50 的病毒 RNA;与 VSV和其他水泡性病毒不发生交叉反应 ;制作的标准曲线中各浓度范围内有极好的线性关系 ,且线性范围宽 ,相关系数为 0 .984 ;组内和组间试验重复性的变异系数 (CV)分别为 5 .4 %和 6 .7% ;与常规 RT- PCR相比较 ,该方法具有快速、特异、敏感、可定量 。 展开更多
关键词 口蹄疫病毒 荧光定量RT-PCR 实时检测 口蹄疫
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人类促性腺激素释放激素受体在垂体外正常组织和癌组织的分布 被引量：20
18
作者 赵刚 龚守良 +1 位作者 岳瑛 朱平 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期445-447,共3页
促性腺激素释放激素 ( LHRH)受体在垂体外正常组织和癌组织的分布及两者性质的比较。
关键词 促性腺激素释放激素受体 癌组织 促性腺激素释放激素 垂体外组织 对比分析
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共表达新城疫病毒F基因、传染性法氏囊病病毒VP_0基因的重组鸡痘病毒的抗原性和免疫原性 被引量：15
19
作者 夏志平 金宁一 +6 位作者 金扩世 郭志儒 许凌峰 王宏 郑敏 张洪勇 赵怀龙 《兽医大学学报》 CSCD 北大核心 2003年第3期214-217,共4页
以鸡痘病毒 (FPV) 2 82 E4 株 TK基因为侧翼 ,将 2个相同的复合启动子 ATI· p7.5× 2 0以反向方式连接 ,分别调控新城疫病毒 (NDV) F基因和传染性法氏囊病病毒 (IBDV) VP0 基因 ,得到重组转移质粒 p VP0 - 2 ATI· p7.5... 以鸡痘病毒 (FPV) 2 82 E4 株 TK基因为侧翼 ,将 2个相同的复合启动子 ATI· p7.5× 2 0以反向方式连接 ,分别调控新城疫病毒 (NDV) F基因和传染性法氏囊病病毒 (IBDV) VP0 基因 ,得到重组转移质粒 p VP0 - 2 ATI· p7.5× 2 0 -F。然后将该重组转移质粒用脂质体转染预先感染 FPV 2 82 E4 株的鸡胚成纤维细胞 (CEF) ,在经 Brd U (5 -溴 -脱氧尿嘧啶 )加压处理后的 CEF上传代 ,用间接免疫荧光试验、Western blot检测 ,有 2株鸡痘病毒能同时表达 NDV F蛋白和IBDV VP0 蛋白。用这 2株重组鸡痘病毒刺种商品 L eghorn雏鸡 ,于刺种前及刺种后 1、2、3周对抗 NDV特异性抗体水平和淋巴细胞转化能力检测 ,结果发现 ,重组鸡痘病毒能激发机体产生良好的免疫反应。结果表明 。 展开更多
关键词 重组鸡痘病毒 共表达 免疫原性 NDVF基因 IBDVVP0基因 新城疫病毒 法氏囊病病毒
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原核表达的猪瘟病毒E2蛋白抗原多肽的复性和纯化 被引量：13
20
作者 刘伯华 余兴龙 +5 位作者 张茂林 肖昌 徐兴然 吴健敏 李作生 涂长春 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期145-148,共4页
对原核中以包涵体形式高效表达的猪瘟病毒 (CSFV) E2蛋白抗原表位区段 (m E2 )进行了变性、复性与纯化研究。包涵体经超声破菌分离 ,然后进行变性溶解和复性 ,复性产物经硫酸铵沉淀浓缩后 ,利用免疫亲和层析进行纯化。纯化产物的 SDS- P... 对原核中以包涵体形式高效表达的猪瘟病毒 (CSFV) E2蛋白抗原表位区段 (m E2 )进行了变性、复性与纯化研究。包涵体经超声破菌分离 ,然后进行变性溶解和复性 ,复性产物经硫酸铵沉淀浓缩后 ,利用免疫亲和层析进行纯化。纯化产物的 SDS- PAGE分析结果表明 ,其纯度达 97%。酶联免疫试验测定的结果显示 ,与复性前变性蛋白相比 ,纯化蛋白与 CSFV特异的单抗和多克隆阳性血清的反应活性提高了 2～ 16倍。 展开更多
关键词 原核表达 猪瘟病毒 E2蛋白抗原多肽 包涵体 复性 纯化 保护性抗原蛋白
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