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携带凋亡素基因的溶瘤腺病毒ATV对人宫颈癌HeLa细胞的抑制作用 被引量：8
1
作者 尹逊哲 陈爽 +12 位作者 李文杰 朱羿龙 李一权 崔传信 李敏 崔英丽 赵津 李善智 郑颖 孙丽丽 李霄 郭焱 金宁一 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期1356-1361,共6页
目的:探讨携带凋亡素基因(apopptin)的溶瘤腺病毒ATV感染对人宫颈癌HeLa细胞自噬和凋亡的影响。方法:分别用携带凋亡素基因的溶瘤腺病毒ATV与对照病毒Ad-MOCK(均为前期工作构建)感染HeLa细胞后,应用WST-1法检测ATV感染对HeLa细胞增殖的... 目的:探讨携带凋亡素基因(apopptin)的溶瘤腺病毒ATV感染对人宫颈癌HeLa细胞自噬和凋亡的影响。方法:分别用携带凋亡素基因的溶瘤腺病毒ATV与对照病毒Ad-MOCK(均为前期工作构建)感染HeLa细胞后,应用WST-1法检测ATV感染对HeLa细胞增殖的影响,流式细胞术检测ATV感染对HeLa细胞凋亡和细胞周期的影响,Western blotting法检测ATV感染对HeLa细胞自噬相关蛋白LC3、P62与mTOR表达的影响,MDC染色法检测ATV感染对HeLa细胞自噬水平的影响。结果:ATV感染后抑制HeLa细胞增殖,并具有一定的时间效应关系;以ATV 100 MOI感染72 h后抑制率达到59.26%,其抑制能力明显强于同时间段对照组(P<0.01)。ATV感染48 h,ATV组HeLa细胞凋亡率显著高于对照组[(38.995±4.009)%vs(14.680±1.174)%,P<0.01]。感染后的HeLa细胞,随着ATV作用时间的延长,S期出现阻滞,48 h阻滞最强,显著高于对照组[(58.490±2.447)%vs(43.235±4.419)%,P<0.05]。与对照组相比,ATV感染HeLa后,LC3表达量6、12 h逐渐增高,12 h达到最大值(P<0.01),24 h表达量最低(P<0.01);P62蛋白在24 h出现最高表达水平(P<0.01);而mTOR随着作用时间延长逐渐降低(48 h时,P<0.01)。荧光显微镜下可见HeLa细胞核周区域MDC阳性染色,随着ATV作用时间延长,自噬小体明显增多;与对照组相比,6、12h自噬小体数量显著增多[(28.000±2.828)vs(8.500±2.121),(37.000±4.243)vs(14.000±1.414);均P<0.01],24 h相对减少[(12.000±2.828)vs(17.000±1.414),P<0.01]。结论:携带凋亡素基因的ATV溶瘤腺病毒可促进人宫颈癌HeLa细胞的凋亡和自噬水平,进而特异性杀伤肿瘤细胞。 展开更多
关键词 宫颈癌 HELA细胞 凋亡素基因 溶瘤腺病毒 自噬 凋亡
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双特异性溶瘤腺病毒和多柔比星对乳腺癌细胞增殖抑制作用的对比分析 被引量：2
2
作者 李善智 陈爽 +9 位作者 赵津 李一权 朱羿龙 李文杰 尹逊哲 崔英丽 王京 刘行 李霄 金宁一 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期1159-1165,共7页
目的:探讨多柔比星和双特异性溶瘤腺病毒(Ad-VT、Ad-T、Ad-VP3、Ad-Mock)对乳腺癌细胞和正常乳腺细胞增殖抑制作用的差异。方法:通过WST-1实验比较多柔比星和Ad-VT、Ad-T、Ad-VP3、Ad-Mock对乳腺癌细胞增殖的抑制率,并比较两种药物对正... 目的:探讨多柔比星和双特异性溶瘤腺病毒(Ad-VT、Ad-T、Ad-VP3、Ad-Mock)对乳腺癌细胞和正常乳腺细胞增殖抑制作用的差异。方法:通过WST-1实验比较多柔比星和Ad-VT、Ad-T、Ad-VP3、Ad-Mock对乳腺癌细胞增殖的抑制率,并比较两种药物对正常乳腺上皮细胞的存活率的影响。通过Annexin V流式术、Hoechst法、JC-1法检测研究溶瘤腺病毒和多柔比星对乳腺癌细胞和正常乳腺上皮细胞杀伤作用的影响,并比较其凋亡率差异。结果:4种双特异性溶瘤腺病毒均能有效地抑制乳腺癌细胞的增殖(P<0.05或P<0.01),且抑制效果为Ad-VT>Ad-T>Ad-VP3>Ad-MOCK,抑制作用与时间成正相关。多柔比星也能有效地抑制乳腺癌细胞的增殖(P<0.05或P<0.01),且随着浓度和时间的增加,抑制效果明显增强;但多柔比星对正常的乳腺上皮细胞也有较强的抑制作用,在72 h、5μg/ml条件下抑制率达到80%,而溶瘤腺病毒Ad-VT在72 h对MCF-10A的抑制率为20%。双特异性溶瘤腺病毒诱导乳腺癌凋亡能力随时间的增加逐渐增强(P<0.05或P<0.01),且致凋亡效率为Ad-VT>Ad-T>Ad-VP3>AdMOCK,而诱导正常乳腺细胞凋亡能力较弱。多柔比星诱导乳腺癌细胞和正常乳腺上皮细胞凋亡的能力基本相同(P<0.05或P<0.01),且都为0.05<0.5<5μg/ml。结论:双特异性溶瘤腺病毒能有效地抑制乳腺癌细胞的增殖,但对正常的乳腺细胞抑制作用较小,双特异性溶瘤腺病毒具有更好的安全性,为肿瘤的生物治疗提供了新的药物。 展开更多
关键词 乳腺癌细胞 溶瘤腺病毒 多柔比星 凋亡
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