树突细胞从凋亡癌细胞获取抗原后的免疫应答 被引量：7

1

作者 吴刚 余宏 +1 位作者 韩本立 裴雪涛 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第1期8-12,共5页

目的观察树突状细胞(DCs)从凋亡胆管癌细胞获取抗原后,体外诱导抗肿瘤免疫应答及对胆管癌细胞的特异性免疫杀伤效果。方法用粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)加白介素-4(IL-4)从人外周血分化、诱导DCs、γ-射线在体外诱导培养的人胆管... 目的观察树突状细胞(DCs)从凋亡胆管癌细胞获取抗原后,体外诱导抗肿瘤免疫应答及对胆管癌细胞的特异性免疫杀伤效果。方法用粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)加白介素-4(IL-4)从人外周血分化、诱导DCs、γ-射线在体外诱导培养的人胆管癌细胞凋亡,将DCs、T淋巴细胞和凋亡胆管癌细胞共培养,同时设计不同类型肿瘤细胞(坏死胆管癌细胞及培养胆管癌细胞)作对照,7d后,分离、富集DCs、T淋巴细胞进行免疫应答及肿瘤细胞杀伤试验。结果与凋亡胆管癌细胞共培养之DCs可以有效提呈胆管癌细胞抗原,有强烈的免疫应答,刺激的细胞毒T淋巴细胞(CTLs)特异性地杀伤胆管癌细胞。结论用GM-CSF加IL-4从人外周血分化、诱导的DCs能从凋亡胆管癌细胞有效提呈肿瘤抗原并诱导出显著的杀伤胆管癌细胞的免疫反应。 展开更多

关键词 树突状细胞 细胞凋亡 抗的提呈 免疫应答

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反义bcl-2基因的表达诱导癌细胞凋亡致敏树突状细胞的研究 被引量：1

2

作者 吴刚 顾红光 +1 位作者 韩本立 裴雪涛 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期433-434,共2页

目的　探讨bcl 2基因与癌细胞的关系 ,建立反义bcl 2基因的逆转录病毒表达载体诱导癌细胞凋亡致敏从人外周血诱导扩增的树突状细胞 (DCs)的方法。方法　从正常人外周血分离获得单核细胞 ,加入 50 μg/L、1 0 0 0U/L白细胞介素 (IL) 4,... 目的　探讨bcl 2基因与癌细胞的关系 ,建立反义bcl 2基因的逆转录病毒表达载体诱导癌细胞凋亡致敏从人外周血诱导扩增的树突状细胞 (DCs)的方法。方法　从正常人外周血分离获得单核细胞 ,加入 50 μg/L、1 0 0 0U/L白细胞介素 (IL) 4,隔日 1次 ,共 4次 ,培养第 3天 ,加入反义bcl 2表达诱导凋亡的胆管癌细胞 ,再继续体外培养 4d后 ,用树突细胞富集柱收集DCs。结果DCs高表达共刺激分子B7和CD1a ,表面具有典型不规则突起 ,反义bcl 2表达诱导癌细胞凋亡形成的凋亡小体被DCs捕捉、吞噬 ,负载抗原的DCs其激发同种异体T淋巴细胞增殖的能力进一步增强。结论　反义bcl 2表达诱导癌细胞凋亡可以致敏rhGM CSF加rhIL 4从人外周血单核细胞诱导、扩增出的DCs,DCs可以有效提呈凋亡胆管癌细胞的抗原 ,可望成为有效的肿瘤抗原致敏DC的新途径。 展开更多

关键词 BCL-2基因 树突细胞 脱噬作用 细胞凋亡 胆管癌

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Egr-1启动子基因调控FLT3配基基因表达的实验研究(英文) 被引量：1

3

作者 杜楠 裴雪涛 +4 位作者 罗成基 李梁 邹仲敏 冯凯 白慈贤 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第3期166-171,共6页

目的探索辐射诱导基因调控序列启动造血生长因子基因表达及观察其对造血恢复的作用。方法本实验将带有 Egr- 1调控序列启动的 FL T3配基 ( FL )和 EGFP双顺反子基因表达载体 ( Egr- EF)转染骨髓基质细胞系 HFCL (称 HFCL /EF) ;用 RT— ... 目的探索辐射诱导基因调控序列启动造血生长因子基因表达及观察其对造血恢复的作用。方法本实验将带有 Egr- 1调控序列启动的 FL T3配基 ( FL )和 EGFP双顺反子基因表达载体 ( Egr- EF)转染骨髓基质细胞系 HFCL (称 HFCL /EF) ;用 RT— PCR鉴定细胞内目的基因的 m RNA表达 ;采用 FACS观察 EGFP绿色荧光表达的阳性细胞 ;用 EL ISA方法检测 HFCL / EF细胞培养上清 FL的含量 ;观察 HFCL / EF培养上清液对 CD34+细胞的增殖作用。结果在 HFCL / EF细胞中证实有外源性基因 EGFP和 FL 的整合和表达 ,在辐照 16 h后的 HFCL/ EF细胞培养上清液中表明 FL 含量较照射前明显增高( P<0 .0 1) ;同时证实辐射 10 d后 HFCL/ EF培养上清液对 CD34+造血祖细胞的作用较辐射前具有明显的扩增作用 ( P<0 .0 1)。结论 Egr- 展开更多

关键词 辐射诱导基因 造血生长因子 基因治疗

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γ-射线诱导胆管癌细胞凋亡致敏树突状细胞后的免疫应答

4

作者 吴刚 顾红光 +1 位作者 韩本立 裴雪涛 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第7期700-703,共4页

目的：建立γ-射线诱导癌细胞凋亡致敏从人外周血诱导扩增的树突状细胞（dendritic cells,DCs）的方法。方法：从正常人外周血分离获得单核细胞，加入50 ng/ml rhGM-CSF，1000 U/ml rhIL-4,隔天1次，共4次，培养第3天，加入γ-射线诱导... 目的：建立γ-射线诱导癌细胞凋亡致敏从人外周血诱导扩增的树突状细胞（dendritic cells,DCs）的方法。方法：从正常人外周血分离获得单核细胞，加入50 ng/ml rhGM-CSF，1000 U/ml rhIL-4,隔天1次，共4次，培养第3天，加入γ-射线诱导凋亡的胆管癌细胞，再继续体外培养4天后，用树突细胞富集柱收集DCs。结果：DCs高表达共刺激分子B7和CD1a, 表面具有典型不规则突起，γ-射线诱导癌细胞凋亡形成的凋亡小体被DC捕捉、吞噬，负载抗原的DCs其激发同种异体T淋巴细胞增殖的能力进一步增强。结论：γ-射线诱导癌细胞凋亡可以致敏rhGM-CSF加rhIL-4从人外周血单核细胞诱导、扩增出的DCs，DCs可以有效提呈凋亡胆管癌细胞的抗原，可望成为有效的肿瘤抗原致敏DC的新途径。 展开更多

关键词 树突状细胞 粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子 白细胞介素4 细胞凋亡 凋亡小体 胆管癌

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反义bcl-2的表达诱导癌细胞凋亡致敏树突状细胞的免疫应答

5

作者 吴刚 顾红光 +1 位作者 韩本立 裴雪涛 《重庆医学》 CAS CSCD 2002年第8期697-700,共4页

目的　观察树突状细胞 (DCs)从反义bcl 2的逆转录病毒表达载体诱导的凋亡胆管癌细胞获取抗原后 ,抗肿瘤免疫应答及对胆管癌细胞的特异性免疫杀伤效果。方法　用粒 巨噬细胞集落刺激因子 (GM CSF)加白介素 4(IL 4)从人外周血分化、诱导... 目的　观察树突状细胞 (DCs)从反义bcl 2的逆转录病毒表达载体诱导的凋亡胆管癌细胞获取抗原后 ,抗肿瘤免疫应答及对胆管癌细胞的特异性免疫杀伤效果。方法　用粒 巨噬细胞集落刺激因子 (GM CSF)加白介素 4(IL 4)从人外周血分化、诱导DCs ,反义bcl 2的逆转录病毒表达载体在体外诱导培养的人胆管癌细胞凋亡 ,将DCs、T淋巴细胞和凋亡胆管癌细胞共培养 ,同时设计不同类型肿瘤细胞 (坏死胆管癌细胞及培养胆管癌细胞 )作对照 ,7d后 ,分离、富集DCs、T淋巴细胞进行免疫应答及肿瘤细胞杀伤试验。结果　DCs高表达共刺激分子B7和CD1a ,表面具有典型不规则突起 ,反义bcl 2表达诱导癌细胞凋亡形成的凋亡小体被DCs捕捉、吞噬 ,负载抗原的DCs可以有效提呈胆管癌细胞抗原 ,有强烈的免疫应答 ,刺激的细胞毒T淋巴细胞 (CTLs)特异性地杀伤胆管癌细胞。结论　反义bcl 2的逆转录病毒表达载体诱导癌细胞凋亡可以致敏rhGM CSF加rhIL 4从人外周血单核细胞诱导、扩增出的DCs并产生显著的杀伤胆管癌细胞的免疫反应 。 展开更多

关键词 反义BCL-2 癌细胞 树突状细胞 免疫应答 细胞凋亡 逆转录病毒载体

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树突状细胞提呈凋亡癌细胞抗原的实验研究

6

作者 吴刚 韩本立 裴雪涛 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2000年第11期808-811,共4页

建立从人外周血诱导扩增树突状细胞（ＤＣ）及吞噬凋亡小体负载抗原。方法：从正常人外周血分离获得单核细胞，加入５０ｎｇ／ｍｌ　ｒｈＧＭ－ＣＳＦ １０００ｎｇ／ｍｌ　ｒｈＩＬ—４，隔天一次，共４次，培养第三天，加入ｒ射线照... 建立从人外周血诱导扩增树突状细胞（ＤＣ）及吞噬凋亡小体负载抗原。方法：从正常人外周血分离获得单核细胞，加入５０ｎｇ／ｍｌ　ｒｈＧＭ－ＣＳＦ １０００ｎｇ／ｍｌ　ｒｈＩＬ—４，隔天一次，共４次，培养第三天，加入ｒ射线照射过的胆管癌细胞，再继续体外培养一周后，用树突细胞富集柱收集ＤＣ。结果：见ＤＣ高表达共刺激分子Ｂ７和ＣＤ１ａ，表面具有典型不规则突起，ＤＣ还可捕捉凋亡小体、吞噬凋亡小体。负载抗原的 ＤＣ其激发同种异体 Ｔ淋巴细胞增殖的能力进一步增强。结论：用 ｒｈＧＭ— ＣＳＦ加 ｒｈＩＬ— ４能从人外周血诱导、扩增 ＤＣ，此 ＤＣ可以有效提是凋亡胆管癌细胞的抗原，可望成为有效的肿瘤抗原装载ＤＣ的新途径。 展开更多

关键词 树突状细胞 RHGM-CSF 胆管癌 提呈凋亡

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丝裂霉素诱导的肝癌细胞凋亡致敏树突状细胞(英文) 被引量：2

7

作者 吴刚 韩本立 裴雪涛 《中国临床康复》 CSCD 北大核心 2006年第32期190-192,i0001,共4页

目的:建立丝裂霉素诱导癌细胞凋亡致敏从人外周血诱导扩增的树突状细胞的方法。设计:以癌细胞凋亡致敏树突状细胞为观察对象的随机对照实验。单位:解放军第三军医大学大坪医院野战外科研究所,解放军军事医学科学院放射医学研究所。材料... 目的:建立丝裂霉素诱导癌细胞凋亡致敏从人外周血诱导扩增的树突状细胞的方法。设计:以癌细胞凋亡致敏树突状细胞为观察对象的随机对照实验。单位:解放军第三军医大学大坪医院野战外科研究所,解放军军事医学科学院放射医学研究所。材料:实验于1998-04/1999-05在解放军军事医学科学院放射医学研究所完成。细胞株为QBC939胆管癌细胞株,药物为抗肿瘤药物丝裂霉素。方法:从正常人外周血分离获得单核细胞,加入50μg/L重组人粒细胞集落刺激因子,1000U/mL白细胞介素4,隔天一次,共4次,培养第3天,加入丝裂霉素诱导凋亡的胆管癌细胞,再继续体外培养4d后,用树突细胞富集柱收集树突状细胞。主要观察指标:①培养的树突状细胞的鉴定。②树突状细胞和坏死胆管癌细胞以及正常培养的胆管癌细胞共培养,观察其吞噬凋亡小体负载抗原。③检测不同密度的树突状细胞(1×103/孔,5×103/孔,1×104/孔)的免疫刺激活性及负载抗原后的免疫刺激活性,以单核细胞作对照组。结果:①培养、扩增得到的树突状细胞高表达共刺激分子B7和CDla,表面具有典型不规则突起。②丝裂霉素诱导癌细胞凋亡形成的凋亡小体被树突状细胞捕捉、吞噬。③负载抗原的树突状细胞其激发同种异体T淋巴细胞增殖的能力进一步增强。结论:丝裂霉素诱导癌细胞凋亡可以致敏重组人粒细胞集落刺激因子加重组人白细胞介素4从人外周血单核细胞诱导、扩增出的树突状细胞,树突状细胞可以有效提呈凋亡胆管癌细胞的抗原,可望成为有效的肿瘤抗原致敏树突状细胞的新途径。 展开更多

关键词 丝裂霉素 树突细胞 单核细胞 粒细胞巨噬细胞集落刺激因子 白细胞介素4 细胞凋亡

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造血干细胞的可塑性研究进展 被引量：1

8

作者 郑守虎 段海锋 《实用医学杂志》 CAS 2006年第1期109-111,共3页

关键词 造血干细胞 可塑性 成体干细胞 CELLS 学术界 HSC

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肝细胞生长因子对骨髓间充质干细胞生物学特性的影响 被引量：19

9

作者 刘红军 段海峰 +4 位作者 鲁茁壮 王华 张群伟 吴祖泽 王立生 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2005年第6期1044-1048,共5页

骨髓间充质干细胞的增殖、分化及迁移等生物学特性受骨髓微环境的调节。肝细胞生长因子(HGF)是骨髓微环境分泌的主要因子之一,但它对骨髓间充质干细胞生物学特性的影响并不清楚。本研究目的是观察重组人HGF对骨髓MSC生物学特性的影响。... 骨髓间充质干细胞的增殖、分化及迁移等生物学特性受骨髓微环境的调节。肝细胞生长因子(HGF)是骨髓微环境分泌的主要因子之一,但它对骨髓间充质干细胞生物学特性的影响并不清楚。本研究目的是观察重组人HGF对骨髓MSC生物学特性的影响。用免疫组织化学方法检测cMet的表达,用MTT法测定细胞增殖,定量测定ALP的活性,进行细胞迁移分析和失巢凋亡(anoikis)诱导MSC凋亡分析。结果表明,重组人HGF不影响骨髓间充质干细胞的增殖和向成骨细胞的分化,但可明显促进骨髓间充质干细胞的迁移并抑制anoikis诱导的细胞凋亡;PI3K和MAPK途径参与了HGF促进细胞迁移的作用。结论:肝细胞生长因子通过受体cMet影响骨髓间充质干细胞的生物学特性。 展开更多

关键词 肝细胞生长因子 骨髓间充质干细胞 骨髓微环境 生物学特性

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重组人肝再生增强因子对大鼠实验性肝纤维化的保护作用 被引量：19

10

作者 王爱民 杨晓明 +4 位作者 郭瑞峰 杨跃伟 李培建 王清明 贺福初 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第9期707-708,共2页

初步研究表明，从哺乳动物幼仔肝、胚胎肝组织提取的肝细胞生长因子（ＨＧＦ）、肝刺激物（ＨＳＳ）有抗慢性肝损伤的作用。我们以四氯化碳（ＣＣｌ４）中毒性大鼠肝纤维化为模型，研究了重组人肝再生增强因子（ｈＡＬＲ）的抗慢性肝损... 初步研究表明，从哺乳动物幼仔肝、胚胎肝组织提取的肝细胞生长因子（ＨＧＦ）、肝刺激物（ＨＳＳ）有抗慢性肝损伤的作用。我们以四氯化碳（ＣＣｌ４）中毒性大鼠肝纤维化为模型，研究了重组人肝再生增强因子（ｈＡＬＲ）的抗慢性肝损伤作用，结果表明，重组ｈＡＬＲ有明... 展开更多

关键词 肝纤维化 hALR 肝再生增强因子 动物模型

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间充质干细胞临床试验中的问题及其解决策略 被引量：17

11

作者 张薇薇 郭子宽 李占全 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2007年第4期901-904,共4页

人间充质干细胞(mesenchymal s temcells,MSCs)具有多向分化特性、免疫调节作用及体外分离培养扩增操作简便,因此国内外多家单位均开展了MSC临床试验,以预防和治疗异基因骨髓移植后移植物抗宿主病,修复骨和软骨损伤,治疗心肌梗塞和肝脏... 人间充质干细胞(mesenchymal s temcells,MSCs)具有多向分化特性、免疫调节作用及体外分离培养扩增操作简便,因此国内外多家单位均开展了MSC临床试验,以预防和治疗异基因骨髓移植后移植物抗宿主病,修复骨和软骨损伤,治疗心肌梗塞和肝脏损伤等多种疾病。然而,越来越多的资料提示,在制订临床应用方案及具体实施过程中,必须考虑到细胞培养用动物血清蛋白的内在化、植入细胞体内存活以及分化专一性等诸多因素。本文综述了临床试验设计中宜注意的问题。 展开更多

关键词 间充质干细胞 临床试验

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天然多羟基芪类化合物抗病毒及抗肿瘤活性的研究进展 被引量：9

12

作者 陈志强 吴祖泽 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期U011-U013,共3页

关键词 天然多羟基芪类化合物 抗病毒 抗肿瘤 研究进展 生物活性

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间充质干细胞在组织再生和免疫调节治疗中的应用 被引量：9

13

作者 郭子宽 王立生 吴祖泽 《中国医药生物技术》 CSCD 2006年第1期58-61,共4页

关键词 MSC 体外培养 免疫原性 异体 间充质干细胞 成体干细胞 组织再生 人骨髓 HGF 基因修饰 横向分化

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间充质干细胞不抑制体内T淋巴细胞的增殖 被引量：6

14

作者 王恒湘 边素艳 +2 位作者 陈金龙 汪劲松 郭子宽 《组织工程与重建外科杂志》 2006年第5期248-250,共3页

目的探讨不同种属来源的间充质干细胞(MSC)在体内是否具有相似的作用。方法用尼绒毛法分离不含脾脏细胞灌注模型(C57/BL)源脾脏T淋巴细胞,CFSE膜荧光染料标志的胞进行细胞标记,按2×107/只与C57/BL来源的MSC(1×105～1×106... 目的探讨不同种属来源的间充质干细胞(MSC)在体内是否具有相似的作用。方法用尼绒毛法分离不含脾脏细胞灌注模型(C57/BL)源脾脏T淋巴细胞,CFSE膜荧光染料标志的胞进行细胞标记,按2×107/只与C57/BL来源的MSC(1×105～1×106/只)共输注给γ射线照射的雌性BALB/c(5Gy)。不同时间段取受体的脾脏细胞,以单纯输注T淋巴细胞组为对照,流式细胞仪分析T淋巴细胞增殖状态。结果与体外结果明显不同,MSC输注对外源淋巴细胞比例没有影响,共输注不能抑制T淋巴细胞的增殖。结论异体MSC在组织工程构建和移植物抗宿主病治疗中的应用,提出了新的问题。 展开更多

关键词 充质干细胞 体内 淋巴细胞 细胞的增殖 T Lymphocytes 输注 脾脏细胞 流式细胞仪分析 不同时间段 Γ射线照射 组织工程 增殖状态 荧光染料 移植物抗 细胞标记 灌注模型 不同种属 病治疗 应用 外源

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腺病毒载体对骨髓间充质干细胞体外分化能力的影响 被引量：5

15

作者 边素艳 盖鲁粤 +3 位作者 叶平 郭子宽 王华 胡泽斌 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期1152-1156,共5页

目的研究腺病毒载体对Wistar大鼠骨髓间充质干细胞体外分化能力的影响。方法密度梯度离心加贴壁培养法自2周龄Wistar大鼠骨髓中分离培养MSC,用携带绿色荧光蛋白基因的腺病毒载体(Ad-GFP)感染,48 h后用流式细胞仪检测感染效率;在特殊诱... 目的研究腺病毒载体对Wistar大鼠骨髓间充质干细胞体外分化能力的影响。方法密度梯度离心加贴壁培养法自2周龄Wistar大鼠骨髓中分离培养MSC,用携带绿色荧光蛋白基因的腺病毒载体(Ad-GFP)感染,48 h后用流式细胞仪检测感染效率;在特殊诱导剂诱导下,用碱性磷酸酶(ALP)染色、ALP活性及油红O染色分别鉴定腺病毒载体对MSCs成骨和成脂分化潜能的影响。结果 Ad-GFP感染MSC 48 h后97.82%的细胞表达GFP;MSC经特异性诱导剂诱导后可向脂肪及成骨细胞分化,Ad-GFP感染对MSC成脂及成骨分化能力无显著影响。结论腺病毒载体对大鼠骨髓MSC感染效率高,且不影响其体外多向分化潜能,是基因修饰MSC的理想载体。 展开更多

关键词 大鼠 骨髓间充质干细胞 分化

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骨髓间充质干细胞移植治疗缺血性心脏病的机制 被引量：5

16

作者 边素艳 盖鲁粤 郭子宽 《组织工程与重建外科杂志》 2007年第6期350-352,共3页

缺血性心脏病的发病率和死亡率极高，严重威胁着人类健康。不可逆性功能心肌细胞数量的减少，造成心肌收缩功能降低，发展成为心力衰竭。目前常规的治疗手段只能缓解症状，而不能修复死亡或濒死的心肌。细胞移植作为一种新兴的生物学方... 缺血性心脏病的发病率和死亡率极高，严重威胁着人类健康。不可逆性功能心肌细胞数量的减少，造成心肌收缩功能降低，发展成为心力衰竭。目前常规的治疗手段只能缓解症状，而不能修复死亡或濒死的心肌。细胞移植作为一种新兴的生物学方法，为缺血性心血管疾病的治疗开创了一个全新的领域。 展开更多

关键词 细胞移植治疗 缺血性心脏病 骨髓间充质 缺血性心血管疾病 收缩功能降低 生物学方法 人类健康 细胞数量

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四种哺乳类动物骨实质中存在间充质干细胞 被引量：3

17

作者 边素艳 郭子宽 +3 位作者 叶平 盛莉 肖铁卉 祁莉萍 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2010年第1期151-154,共4页

人们对间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)的生物学特性,已经进行了广泛的体外研究。然而,由于MSC缺乏特异性的表面标志,这类细胞在体内存在的具体部位仍不清楚。既往的研究表明,人和小鼠骨实质中存在MSC。为观察此现象是否见于... 人们对间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)的生物学特性,已经进行了广泛的体外研究。然而,由于MSC缺乏特异性的表面标志,这类细胞在体内存在的具体部位仍不清楚。既往的研究表明,人和小鼠骨实质中存在MSC。为观察此现象是否见于其他动物,收集Wistar大鼠、Beagle犬、C57小鼠及新西兰白兔股骨,用I型胶原酶将其骨片消化;去除消化细胞后,将消化后的骨碎片接种于人骨髓MSC培养体系中。结果表明,数天后可见成纤维细胞样细胞从骨片中迁移,并逐渐形成致密的贴壁层,可传代培养,且均一表达间充质细胞标志波形蛋白。分化实验表明,细胞具有明显的体外成骨和成脂肪能力。鉴于骨实质结构简单,本研究结果为MSC体内分布特性研究提供了有意义的数据。 展开更多

关键词 间充质干细胞 骨实质 细胞培养 哺乳动物

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应用生物发光成像技术示踪植入的骨髓间充质干细胞 被引量：3

18

作者 边素艳 盖鲁粤 +4 位作者 叶平 杨月峰 王华 郭子宽 王立生 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2009年第5期1307-1311,共5页

以间充质干细胞(MSC)为基础的细胞治疗已进入临床试验阶段,用于多种组织修复,而移植细胞体内存活是影响疗效的重要因素。为了体内示踪MSC,构建了萤火虫荧光素酶基因(fluc)逆转录病毒表达载体pL(fluc)SN,并筛选出稳定表达fluc的GPE+86细... 以间充质干细胞(MSC)为基础的细胞治疗已进入临床试验阶段,用于多种组织修复,而移植细胞体内存活是影响疗效的重要因素。为了体内示踪MSC,构建了萤火虫荧光素酶基因(fluc)逆转录病毒表达载体pL(fluc)SN,并筛选出稳定表达fluc的GPE+86细胞克隆。将逆转录病毒上清转染C57小鼠来源的MSC,经G418筛选后得到稳定表达fluc的MSC。将2×106个标记好的细胞注射正常骨骼肌,应用生物发光技术检测移植后不同时间细胞的存活情况。结果表明,随着时间的延长,细胞存活数目逐渐减少;移植后1天细胞死亡率高达(43.2±11.7)%,3天后细胞存活(8.6±2.5)%,6天后仅为(5.4±3.1)%,10天时未检测到荧光信号。结论:生物发光成像技术可用于移植的MSC体内示踪,但是即使将MSC植入正常的骨骼肌组织,大部分注入的MSC也将在短期内死亡。 展开更多

关键词 生物发光成像技术 骨髓间充质干细胞 细胞标记 细胞移植

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自骨密质中分离、培养大鼠骨髓间充质干细胞 被引量：3

19

作者 边素艳 盖鲁粤 +3 位作者 叶平 郭子宽 王华 王立生 《组织工程与重建外科杂志》 2010年第1期1-4,共4页

目的介绍一种自Wistar大鼠骨密质中分离培养间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSC)的方法。方法应用骨髓密度梯度离心、酶消化骨密质两种方法分离、培养Wistar大鼠MSC,比较其形态学、体外增殖能力差异;并用碱性磷酸酶染色和油红O染... 目的介绍一种自Wistar大鼠骨密质中分离培养间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSC)的方法。方法应用骨髓密度梯度离心、酶消化骨密质两种方法分离、培养Wistar大鼠MSC,比较其形态学、体外增殖能力差异;并用碱性磷酸酶染色和油红O染色分别鉴定MSC的成骨和成脂分化潜能。结果采用密度梯度离心骨髓或用酶消化后的骨密质,经贴壁培养后均能够成功分离和培养大鼠的MSC,两者在形态学和体外增殖能力方面无明显差异;且两种方法培养的MSC经特异性诱导剂诱导后,均可向脂肪及成骨细胞分化,油红O染色及碱性磷酸酶染色均阳性。结论自骨髓和骨密质中均能够分离培养出较为纯化的大鼠MSC,两种方法培养的MSC体外生物学性能无明显差异。 展开更多

关键词 大鼠 骨髓间充质干细胞 骨密质 细胞培养

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人树突状细胞体外提呈凋亡胆管癌细胞抗原的研究 被引量：2

20

作者 吴刚 韩本立 裴雪涛 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第2期142-145,共4页

目的 :建立从人外周血诱导扩增树突状细胞 (DC)及其从凋亡癌细胞提呈抗原的方法。方法 :从正常人外周血分离获得单核细胞 ,加入50ng/mlhGM -CSF ,1000ng/mlhIL 4,隔天1次 ,共4次 ,培养第3天 ,加入γ射线照射过的胆管癌细胞 ,再继续体外... 目的 :建立从人外周血诱导扩增树突状细胞 (DC)及其从凋亡癌细胞提呈抗原的方法。方法 :从正常人外周血分离获得单核细胞 ,加入50ng/mlhGM -CSF ,1000ng/mlhIL 4,隔天1次 ,共4次 ,培养第3天 ,加入γ射线照射过的胆管癌细胞 ,再继续体外培养1周后 ,用树突状细胞富集柱收集DC。结果 :DC高表达共刺激分子B7和CD1a,表面具有典型不规则突起 ,DC捕捉凋亡小体、吞噬凋亡小体 ,负载抗原的DC其激发同种异体T淋巴细胞增殖的能力进一步增强。结论 :用GM CSF加IL 4能从人外周血诱导、扩增出DC ,并可以有效提呈凋亡胆管癌细胞的抗原 ,可望成为有效的肿瘤抗原装载DC的新途径。 展开更多

关键词 树突状细胞 细胞凋亡 抗原 胆管肿瘤

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