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题名生物素-亲和素偶联探针蛋白芯片检测技术
被引量：1
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作者
于晓波
赵天明
孙志丹
袁宏坤
何为
许丹科
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机构
蛋白质组学国家重点实验室
军事医学科学院放射与辐射医学研究所生物化学研究室
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出处
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第3期515-520,共6页
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基金
国家科技部973项目资助(No.2006CB910803)~~
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文摘
自行制备一种新型生物素-亲和素偶联探针分子并用于反相蛋白芯片的检测。首先,将生物素-羊抗鼠IgG与亲和素按照不同比例混合后与鼠IgG蛋白芯片反应,观察荧光信号的放大情况;然后以鼠IgG-羊抗鼠IgG体系为研究模式,对反相蛋白芯片的制备条件进行了考察和优化,包括荧光分子的非特异性吸附、点样缓冲液的选择以及蛋白的活性等。最后,采用此偶联探针对反相蛋白芯片进行了检测。结果表明,BSA缓冲液制备的反相蛋白芯片可以防止非特异性吸附,并有利于保持固定蛋白活性和提高检测限;另外,与传统的与生物素-亲和素检测技术相比,采用生物素-亲和素偶联探针对反相芯片的检测限可以提高4倍左右。表明亲和素-生物素偶联探针成本低、易于合成、并可以与其它的信号放大技术联用进一步提高检测的灵敏度,有望用于蛋白质芯片的检测。
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关键词
生物素-亲和素系统
信号放大
反相蛋白芯片
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Keywords
biotin-avidin system, signal amplification, reverse-phase protein microarray
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分类号
R446.6
[医药卫生—诊断学]
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