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人胎肝干细胞的分离、培养和鉴定 被引量：1
1
作者 王小平 陈瑞芬 +1 位作者 宋爱利 裴雪涛 《首都医科大学学报》 CAS 2004年第1期29-31,共3页
为探讨人胎肝中干细胞的存在并对其生物学特性进行鉴定 ,采用原代分离法培养人胎肝细胞集落 ,免疫组化鉴定细胞集落分子标志物的表达。结果 :从人胎肝组织中成功分离表达甲胎蛋白 (AFP)、白蛋白、波形蛋白等标志物的胎肝干细胞集落。证... 为探讨人胎肝中干细胞的存在并对其生物学特性进行鉴定 ,采用原代分离法培养人胎肝细胞集落 ,免疫组化鉴定细胞集落分子标志物的表达。结果 :从人胎肝组织中成功分离表达甲胎蛋白 (AFP)、白蛋白、波形蛋白等标志物的胎肝干细胞集落。证实人胎肝中同样存在具有干细胞特性的原始细胞。 展开更多
关键词 人胎肝干细胞 分离 培养 鉴定 集落样生长 免疫细胞化学
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骨髓间充质干细胞在心血管疾病治疗中的应用 被引量：8
2
作者 牛丽丽 裴雪涛 《中华内科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期208-210,共3页
关键词 骨髓间充质干细胞 心血管疾病 生物学特征 研究进展 细胞移植
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同种异体骨髓间充质干细胞在大鼠心脏的迁移及分化 被引量：29
3
作者 牛丽丽 郑敏 +7 位作者 曹丰 谢超 李海民 岳文 高艳红 白慈贤 祝善俊 裴雪涛 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期38-42,共5页
目的　探讨同种异体骨髓间充质干细胞 (MSC)在大鼠心脏定居存活情况、同种异体移植是否可行。正常心脏微环境与梗死心脏微环境对骨髓间充质干细胞 (MSC)迁移、分化的影响。方法　雌性Wistar大鼠 35只 ,①正常心脏MSC移植组 (1 0只 ) ;... 目的　探讨同种异体骨髓间充质干细胞 (MSC)在大鼠心脏定居存活情况、同种异体移植是否可行。正常心脏微环境与梗死心脏微环境对骨髓间充质干细胞 (MSC)迁移、分化的影响。方法　雌性Wistar大鼠 35只 ,①正常心脏MSC移植组 (1 0只 ) ;②急性心肌梗死对照组 (AMI,1 0只 ) ;③心肌梗死MSC移植组 (1 0只 ) ;④单个核细胞治疗组 (5只 )。结扎左冠状动脉前降支造成心肌梗死模型。分离纯化来自雄性Wistar大鼠的骨髓MSC ,于冠脉结扎后 1～ 3h植入到雌性正常大鼠和心肌梗死大鼠心脏组织 ,模拟同种异体细胞移植治疗。于细胞移植后 1 0周取心脏检测各种指标。结果(1 )经纯化的大鼠MSC在同种异体大鼠心脏可定居、生存 ,而未经纯化的单个核细胞移植在同种异体大鼠心脏未见存活 ;(2 )在正常心脏微环境中 ,带蓝色荧光的供体MSC细胞核呈小岛屿状分布 ,与宿主心肌纤维排列无关 ;而在心肌梗死模型大鼠心脏微环境中 ,蓝色细胞核分布广泛 ,呈椭圆形 ,似心肌细胞核 ,其排列方向与宿主心肌纤维排列方向一致 ,免疫组化检测胞浆心肌特异蛋白染色阳性。结论　纯化的MSC具有免疫耐受特性 ,无需加用免疫抑制剂 ,可进行同种异体移植 ;同种异体MSC在正常心脏微环境中不发生迁移、分化 ; 展开更多
关键词 同种异体移植 骨髓间充质干细胞 大鼠 心脏迁移 微环境 免疫耐受
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胚胎大鼠神经干细胞的分离培养及其鉴定 被引量：2
4
作者 郑敏 王健 +1 位作者 王亚平 裴雪涛 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2004年第4期433-436,共4页
目的 :通过培养了解神经干细胞 (neuralstemcell,NSC)生物学特性 ,为深入研究其体内外分化奠定基础。方法 :分离培养大鼠胎脑NSC。通过单细胞克隆实验检测其自我更新能力、增殖能力和生物学特性 ;免疫细胞化学检测NSC特征性标志nestin... 目的 :通过培养了解神经干细胞 (neuralstemcell,NSC)生物学特性 ,为深入研究其体内外分化奠定基础。方法 :分离培养大鼠胎脑NSC。通过单细胞克隆实验检测其自我更新能力、增殖能力和生物学特性 ;免疫细胞化学检测NSC特征性标志nestin表达和分化能力 ;BrdU掺入实验检测细胞增殖状态 ;并比较EGF、bFGF对鼠NSC增殖刺激作用。结果 :体外传代培养获得的NSC具有多向分化能力、很强的自我更新能力、表达nestin ;NSC扩增迅速 ;传代培养的NSC性能稳定 ;联合运用EGF、bFGF对NSC增殖作用较单用强。结论 :成功培养扩增了大鼠NSC ;EGF。 展开更多
关键词 神经干细胞 自我更新 多向分化 扩增
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凝集素FRIL体外维持造血干/祖细胞长期活存的机制初探 被引量：1
5
作者 谢小燕 谢超 +2 位作者 李锦 白慈贤 裴雪涛 《中华血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第8期501-504,共4页
关键词 凝集素FRIL 体外维持 造血干细胞 祖细胞 细胞周期
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干细胞——糖尿病细胞治疗的新资源 被引量：20
6
作者 李艳华 裴雪涛 《中华内分泌代谢杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期70-72,共3页
本文复习了干细胞的生物学特性和讨论了利用不同来源的干细胞治疗糖尿病的可能性
关键词 干细胞 糖尿病 治疗
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卵巢癌相关基因的筛选与鉴定 被引量：5
7
作者 岳文 孙丽亚 +2 位作者 李春海 张立新 裴雪涛 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第2期141-145,共5页
背景与目的:卵巢癌在妇科肿瘤中死亡率最高,但是目前对于在卵巢癌发生中的敏感和特异癌基因或抑癌基因的改变还知之甚少。因此,筛选新的卵巢癌相关基因并对其作用进行研究可能有助于探讨卵巢癌发生的机理,并可为卵巢癌的早期诊治提供有... 背景与目的:卵巢癌在妇科肿瘤中死亡率最高,但是目前对于在卵巢癌发生中的敏感和特异癌基因或抑癌基因的改变还知之甚少。因此,筛选新的卵巢癌相关基因并对其作用进行研究可能有助于探讨卵巢癌发生的机理,并可为卵巢癌的早期诊治提供有意义的生物学指标。本研究旨在获得新的卵巢癌相关基因。方法:在改良mRNA差异显示方法的基础上,结合反向Northern点杂交等鉴定方法,筛选卵巢癌组织和对侧正常卵巢组织之间的差异表达基因,进一步利用生物信息学资源对所获得的差异表达基因片段进行分析。并以差异表达片段作为探针,原位杂交方法检测基因在其它卵巢正常组织和卵巢癌组织中的表达。结果:筛选后得到12个差异表达基因,其中3个为基因组重复序列,5个未知基因序列,4个已知基因序列。原位杂交结果表明锌指蛋白361(Zincfingerprotein361,ZNF361)基因、蛋白酶体PSMA2(proteasomesubunit,alphatype2,PSMA2)基因、位于人1号染色体的未知基因OCRC13和位于9号染色体的未知基因OCRC4在36例卵巢癌组织中的表达均高于其在16例正常卵巢组织中的表达(P<0.05)。尤其是与鼠配子形成期特异表达家族成员-纺锤体蛋白(spindlin)基因高度同源的OCRC4基因,在16例正常卵巢癌组织中未见其表达,而在卵巢癌组织中的表达可达53%(17/36)。结? 展开更多
关键词 卵巢癌 ZNF361 PSMA2 OCRC4 OCRC13 MRNA差异显示法
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5-氮胞苷浓度对体外骨髓间充质干细胞诱导分化为心肌样细胞的影响 被引量：7
8
作者 程芮 王士雯 +5 位作者 曹丰 孟玲 王韫芳 李艳华 李泱 裴雪涛 《中华老年多器官疾病杂志》 2005年第3期196-199,220,共5页
目的 探讨不同浓度5-氮胞苷(5-aza)体外诱导小型猪骨髓间充质干细胞(MSCs)向心肌样细胞分化的可能性及其对细胞扩增速度的影响。方法 10 ml骨髓，1．077g／ml Ficoll密度梯度离心法分离骨髓单个核细胞(MNCs)，第2代传代细胞分别加入3，5... 目的 探讨不同浓度5-氮胞苷(5-aza)体外诱导小型猪骨髓间充质干细胞(MSCs)向心肌样细胞分化的可能性及其对细胞扩增速度的影响。方法 10 ml骨髓，1．077g／ml Ficoll密度梯度离心法分离骨髓单个核细胞(MNCs)，第2代传代细胞分别加入3，5，10μmol／L浓度5-aza化学诱导24 h，与对照组连续培养4周，细胞爬片免疫荧光法鉴定结蛋白desmin及心肌特异性肌钙蛋白I(cTnI)的表达，电镜观察诱导细胞的超微结构变化。结果 5-aza化学诱导后MSCs形态变长、增大，排列更加紧密、整齐，5和10μmol／L组可见较多的多核细胞，部分管状结构，诱导率分别为36％和31％，无显著性差异；3 μmol／L组上述变化的细胞极少，3种浓度及对照组4周后细胞扩增数量分别为(3．81±0．40)×10~6、(3．76±0．62)×10~6、(3．67±0．80)×10~6及(2．90±0．21)×10~6，10μmol／L组增殖速度明显减慢(P＜0．05)。各组诱导后的细胞均未见自发搏动。免疫组化提示desmin及cTnI表达阳性，5和10μmol／L组电镜下出现肌丝样结构、心房颗粒及细胞间的缝隙连接。结论 小型猪MSCs经5、10μmol／L 5-aza化学诱导可分化为心肌样细胞，其中5 μmol／L 5-aza不仅可以诱导心肌样细胞而且对细胞增殖速度影响小。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 心肌细胞 5-氮胞苷
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神经干细胞体外扩增和诱导分化为多巴胺能神经细胞 被引量：5
9
作者 郑敏 王冬梅 +5 位作者 焦文仓 李海民 赵连旭 白慈贤 王亚平 裴雪涛 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2003年第10期1041-1044,共4页
神经干细胞(neural stem cell, NSC)是神经系统发生的始祖细胞, 具有自我更新和多向分化潜能. NSC的研究不仅对阐明神经系统发育有重要意义, 对神经系统疾病的治疗也提出了新的思路. 在体外对NSC进行培养鉴定和扩增, 细胞巢蛋白表达阳... 神经干细胞(neural stem cell, NSC)是神经系统发生的始祖细胞, 具有自我更新和多向分化潜能. NSC的研究不仅对阐明神经系统发育有重要意义, 对神经系统疾病的治疗也提出了新的思路. 在体外对NSC进行培养鉴定和扩增, 细胞巢蛋白表达阳性, 具有多向分化能力; 体外传代培养15代后, 细胞数量增加约2.4(±0.4)×104倍; 在无血清培养体系中诱导NSC分化为多巴胺能神经细胞, 结果表明, 抗坏血酸(ascorbic acid, AA)能明显提高NSC定向分化为多巴胺能神经细胞的比例(由对照的(0.7±0.3)%升高到AA 100 mmol/L时的(17.2±2.3)%, P < 0.01). 这为获得足够的治疗帕金森疾病(PD)的多巴胺能神经元提供了新的思路, 对更好地利用NSC移植治疗PD有重要意义. 展开更多
关键词 神经干细胞 多巴胺能神经细胞 抗坏血酸 分化 帕金森疾病 巢蛋白表达 NSC移植
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新基因人MOB cDNA的克隆与功能分析 被引量：1
10
作者 袁红丰 王冬梅 +4 位作者 李海民 陈琳 白慈贤 岳文 裴雪涛 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第3期225-230,共6页
人MOB基因被认为是在脑组织中高表达的 5次跨膜而功能未知的膜蛋白 .从胎儿和成人肾脏消减杂交cDNA文库中获得了一条新的表达序列标签 (expressedsequencetag ,EST)序列 ,该序列对应于功能未知的MOB基因 .利用生物信息学分析工具和分子... 人MOB基因被认为是在脑组织中高表达的 5次跨膜而功能未知的膜蛋白 .从胎儿和成人肾脏消减杂交cDNA文库中获得了一条新的表达序列标签 (expressedsequencetag ,EST)序列 ,该序列对应于功能未知的MOB基因 .利用生物信息学分析工具和分子生物学技术 ,从胎儿肝脏中成功地克隆了人MOB基因cDNA序列 ,同时也获得了含有完整开放读码框的大鼠和鸡MOB的电子全长序列 .人MOB基因定位于 10q11 1～ 11 2之间 ,含有一个 12 4 2bp的开放阅读框 ,第 4 15位开始的ATG可能是翻译起始位点 .核酸序列相似性搜索发现 ,其他种属中存在与之高度相似的EST序列 ,如爪蟾 (79% )、羊 (87% )、猪 (94 % )、牛 (93% ) .蛋白质序列相似性搜索发现 ,人MOB与大鼠、小鼠和鸡MOB有 97%、 97%、 91%的相似性 ,与其他一些不同种属来源的假想蛋白有 4 5 %～ 73%的相似性 .不同物种之间MOB基因核酸和蛋白质序列的高度相似说明 ,MOB是进化上高度保守的蛋白质 .保守结构域分析发现 ,人、小鼠、大鼠和鸡MOB结构域组成完全一致 ,N端均与不育α基序(sterilealphamotif,SAM )结构域显著匹配 ,随后出现匹配显著性稍差的几个结构域 .核酸和蛋白质序列的保守性提示 ,除N端约 70个氨基酸组成SAM结构域外 。 展开更多
关键词 人 MOB基因 脑组织 膜蛋白 表达序列标签 EST 生物信息学 SAM结构域 CDNA序列 生物学功能
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