燕麦种子萌发期抗旱能力的综合评价 被引量：13

1

作者 王力伟 付晓峰 +5 位作者 房永雨 刘红葵 王蕴华 张志芬 刘俊青 何江峰 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期692-702,共11页

为了研究不同燕麦材料的抗旱能力,以83份燕麦为试验对象,以200g/L聚乙二醇(PEG-6000)进行胁迫处理,测定各燕麦品种的相对发芽势、相对发芽率、发芽指数、种子萌发率、发芽势和发芽率共6个形态指标,通过计算并绘制韦恩图,筛选出9份抗旱... 为了研究不同燕麦材料的抗旱能力,以83份燕麦为试验对象,以200g/L聚乙二醇(PEG-6000)进行胁迫处理,测定各燕麦品种的相对发芽势、相对发芽率、发芽指数、种子萌发率、发芽势和发芽率共6个形态指标,通过计算并绘制韦恩图,筛选出9份抗旱性较强的燕麦材料。进一步对9份燕麦萌发期的丙二醛(MDA)质量摩尔浓度、脯氨酸(Pro)质量分数、过氧化物酶(POD)活性及超氧化物歧化酶(SOD)活性进行测定。在主成分分析的基础上,利用加权隶属函数法构建燕麦萌发期抗旱性的综合评价体系,探究燕麦种子萌发的抗旱评价指标。通过两种指标同时检测和相互映证,建立萌发期燕麦抗旱综合评价体系,研究结果表明‘2010-48’和‘H44’为强抗旱品种;‘2010-5’和‘04-111’为中抗旱品种;‘ly05-2’‘05-22’‘06-31’‘2010-26’‘05-34’为弱抗旱品种。 展开更多

关键词 裸燕麦 干旱胁迫 萌发期 隶属函数 生理指标

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微生物青贮添加剂研究进展 被引量：10

2

作者 萨初拉 苏少锋 +4 位作者 吴青海 其布日 高娃 赵俊利 呼和 《畜牧与饲料科学》 2020年第1期48-55,共8页

青贮制备技术的发展与人类农牧历史紧密相关。青贮作为家畜尤其是反刍动物的重要饲料来源,如何充分发挥其营养价值、提升家畜生产性能,一直是动物饲料科学方面的研究热点。青贮添加剂的出现为实现这一目标提供了机遇。目前,许多种类的... 青贮制备技术的发展与人类农牧历史紧密相关。青贮作为家畜尤其是反刍动物的重要饲料来源,如何充分发挥其营养价值、提升家畜生产性能,一直是动物饲料科学方面的研究热点。青贮添加剂的出现为实现这一目标提供了机遇。目前,许多种类的微生物青贮添加剂已实现商品化,并且制备开发的新型添加剂也在不断涌现。围绕现有青贮微生物添加剂的发展历史、主要类型、发展现状与发展前景等方面进行了综述,以期为进一步开发新型优良微生物添加剂提供参考。 展开更多

关键词 青贮 微生物 添加剂

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干旱胁迫和复水处理后梭梭转录因子的转录组分析 被引量：6

3

作者 何江峰 王力伟 +3 位作者 房永雨 王蕴华 王朝 刘红葵 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2020年第1期36-43,共8页

为了探明梭梭应对干旱胁迫和水分刺激的分子调控机理,利用高通量测序技术对正常浇水(对照,CK)、干旱胁迫组(轻度干旱胁迫组,LWS;中度干旱胁迫组,MWS;重度干旱胁迫组,SWS)和复水组(RSWS)梭梭的转录组和转录因子表达谱进行分析。结果表明... 为了探明梭梭应对干旱胁迫和水分刺激的分子调控机理,利用高通量测序技术对正常浇水(对照,CK)、干旱胁迫组(轻度干旱胁迫组,LWS;中度干旱胁迫组,MWS;重度干旱胁迫组,SWS)和复水组(RSWS)梭梭的转录组和转录因子表达谱进行分析。结果表明:数据经de novo拼接共获得74641条非冗余Unigene,N50长度1537 bp,对转录组数据比对、注释后共检测到56个转录因子家族、1307个转录因子编码基因。与对照组相比,干旱胁迫组和复水组中的差异表达基因均以下调表达方式为主,其中,AP2-EREBP、MYB、bHLH、WRKY、NAC、ABI3VP1家族基因在各胁迫组中均表达且表达数较多。复水组中偏向通过增加AP2-EREBP、WRKY和NAC家族上调编码基因数量来实现梭梭幼苗对水分刺激的应答调节;而干旱组更偏向下调AP2-EREBP和bHLH的编码基因数量来实现幼苗对干旱胁迫的响应。干旱组和复水组测序结果的表达量(FPKM)与用荧光定量PCR法得到的基因表达量之间的相关性分别为0.9478(P<0.01),0.9672(P<0.01),结果证实了2种处理产生的差异表达基因数据的有效性。综合而言,AP2-EREBP、MYB和bHLH转录因子家族成员对梭梭干旱胁迫具有正负调控的作用。 展开更多

关键词 梭梭 转录因子 转录组测序 干旱胁迫 差异表达

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内蒙古胡麻地方品种资源遗传多样性分析 被引量：5

4

作者 伊六喜 斯钦巴特尔 +5 位作者 高凤云 周宇 贾霄云 陈明哲 张辉 贾海滨 《作物杂志》 CAS 北大核心 2018年第6期53-57,共5页

为了揭示内蒙古胡麻地方品种的遗传多样性和亲缘关系,采用SRAP分子标记对23份胡麻地方品种进行了遗传多样性分析。结果表明:胡麻25.0μL SRAP-PCR最佳反应体系为10μmol/L正反向引物0.3μL、2×Taq Master Mix 9.0μL、DNA模板量40n... 为了揭示内蒙古胡麻地方品种的遗传多样性和亲缘关系,采用SRAP分子标记对23份胡麻地方品种进行了遗传多样性分析。结果表明:胡麻25.0μL SRAP-PCR最佳反应体系为10μmol/L正反向引物0.3μL、2×Taq Master Mix 9.0μL、DNA模板量40ng;18对SRAP引物扩增得到219个条带,平均每对引物扩增的条带为12.17,多态性条带为136,多态性比率为62.10%,观测等位基因数为2.00,平均每个位点有效等位基因数1.59,多态性信息量(PIC)平均为0.61;有效等位基因数(N_e)、香农信息指数(Ⅰ)和Nei’s遗传相似系数(H)分别为1.5630、0.6715和0.4738;在遗传相似系数0.55处供试胡麻分为两大类,在遗传相似系数0.38处,第一大类群分为3个亚群。结论认为,内蒙古胡麻地方品种的遗传多样性丰富,同一个地区培育的胡麻品种亲缘关系较近。 展开更多

关键词 胡麻 内蒙古地区 遗传多样性 SRAP

原文传递

高丹草叶片总蛋白双向电泳体系的建立 被引量：4

5

作者 韩平安 李晓东 +2 位作者 石海波 王良 牟英男 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期2322-2327,共6页

本研究以杂种高丹草及其亲本为试材,分别采用2种方法(三氯乙酸丙酮沉淀法,丙酮沉淀法)提取高丹草叶片总蛋白,并对IPG胶条的pH范围、蛋白上样量进行了优化。研究结果表明:与三氯乙酸丙酮沉淀法相比,丙酮沉淀法更适合高丹草叶片总蛋白的提... 本研究以杂种高丹草及其亲本为试材,分别采用2种方法(三氯乙酸丙酮沉淀法,丙酮沉淀法)提取高丹草叶片总蛋白,并对IPG胶条的pH范围、蛋白上样量进行了优化。研究结果表明:与三氯乙酸丙酮沉淀法相比,丙酮沉淀法更适合高丹草叶片总蛋白的提取;采用17 cm pH 4~7 IPG胶条,上样量为800μg,构建了背景清晰,分辨率高,重复性好的高丹草双向电泳图谱,为后期高丹草差异蛋白质组学研究提供良好的技术支撑。 展开更多

关键词 高丹草 叶片 蛋白质组 双向电泳

原文传递

利用农杆菌介导法将抗草甘膦基因转入玉米自交系H99的研究 被引量：4

6

作者 韩平安 吴新荣 +7 位作者 孙瑞芬 石海波 薛春雷 常悦 唐宽刚 梁亚晖 任芹勇 李晓东 《北方农业学报》 2020年第2期21-26,共6页

【目的】利用转基因手段培育抗除草剂玉米品种以解决草害问题。【方法】采用农杆菌介导法对玉米自交系H99的幼胚进行遗传转化研究,进行单因素试验,分别设置不同胚的大小、农杆菌的菌液浓度和共培养时间处理,比较分析转基因幼胚GUS的瞬... 【目的】利用转基因手段培育抗除草剂玉米品种以解决草害问题。【方法】采用农杆菌介导法对玉米自交系H99的幼胚进行遗传转化研究,进行单因素试验,分别设置不同胚的大小、农杆菌的菌液浓度和共培养时间处理,比较分析转基因幼胚GUS的瞬时表达率。【结果】幼胚大小1.5~2.0 mm、农杆菌的侵染浓度OD_(600)为0.4、侵染5 min、共培养3 d,GUS的瞬时表达率最高。PCR检测证明成功获得7株阳性转基因苗,且抗性鉴定实验证明转基因苗具有草铵膦抗性。【结论】为玉米转基因技术体系优化和培育抗除草剂新品种提供了理论参考。 展开更多

关键词 玉米 抗草甘膦基因(EPSPS) 农杆菌介导法 遗传转化 GUS染色

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蒙古马盲肠中纤维素分解菌的筛选、鉴定及酶学特性分析 被引量：2

7

作者 李雅静 宋海燕 +5 位作者 苏少锋 其日格日 陶金山 张建强 芒来 赵一萍 《饲料工业》 CAS 北大核心 2022年第1期52-58,共7页

为研究蒙古马耐粗饲料的优良特点,试验以蒙古马盲肠内容物为研究对象,旨在筛选、分离出高效的蒙古马源纤维素分解菌株,并对分离菌株进行鉴定和酶学特性分析。采用羧甲基纤维素平板法和摇瓶发酵法分离菌株并鉴定菌株类型。最后,通过测定... 为研究蒙古马耐粗饲料的优良特点,试验以蒙古马盲肠内容物为研究对象,旨在筛选、分离出高效的蒙古马源纤维素分解菌株,并对分离菌株进行鉴定和酶学特性分析。采用羧甲基纤维素平板法和摇瓶发酵法分离菌株并鉴定菌株类型。最后,通过测定纤维素酶活力分析菌株在不同pH、温度、碳源和氮源条件下的酶学特性。研究从蒙古马盲肠内容物中分离筛选到具有较高降解纤维素能力的解淀粉芽孢杆菌H3(Bacillus amyloliquefaciens H3)。菌株H3分泌纤维素酶的最适p H为4.8,在p H 3.0~8.0范围内,其酶活力相对稳定;在温度为65℃,酶活力最高,当温度为40~50℃时,该酶活力维持在80%左右,稳定性强。此外,H3发酵所需的最佳碳源为玉米粉,最佳氮源为2%的蛋白胨+酵母粉复合物(1:1),它具有相对较高的纤维素酶活力,有深入开发的潜力。 展开更多

关键词 蒙古马 纤维素分解菌 盲肠 纤维素酶 酶学特性

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甜菜雄性不育系及其保持系花蕾期差异蛋白分析 被引量：2

8

作者 韩平安 白晨 +5 位作者 吴新荣 王良 张自强 孙瑞芬 张必周 李晓东 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2020年第16期5230-5236,共7页

甜菜是重要的糖料作物之一,利用雄性不育系配制杂交种是甜菜育种的主要途径。为探索甜菜雄性不育形成机理,本研究以甜菜不育系(N9849)和保持系(960766)的现蕾期花蕾为试材,采用双向电泳、质谱鉴定、生物信息学分析方法,进行差异蛋白质... 甜菜是重要的糖料作物之一,利用雄性不育系配制杂交种是甜菜育种的主要途径。为探索甜菜雄性不育形成机理,本研究以甜菜不育系(N9849)和保持系(960766)的现蕾期花蕾为试材,采用双向电泳、质谱鉴定、生物信息学分析方法,进行差异蛋白质组学研究。结果表明:不育系和保持系间差异表达蛋白21个,涉及8个功能类别,其中胁迫响应、碳水化合物代谢、花粉发育等功能类别所占比例较大。谷胱甘肽-S-转移酶、过氧化氢酶等在不育系中显著低表达,活性氧的清除能力弱,酶保护系统遭到破坏,代谢紊乱,可能导致了花粉败育;蔗糖合酶在不育系中表达量较低,碳水化合物代谢强度低,能量代谢匮乏促进了花粉不育的发生;Ⅲ型聚酮合酶A在保持系中显著高表达,可能是保持系维持育性的重要原因。本研究为解析甜菜雄性不育机理提供科学依据。 展开更多

关键词 甜菜(Beta vulgar L.) 花蕾 雄性不育 双向电泳

原文传递

葡萄F1代杂交种的SRAP分子标记鉴定 被引量：2

9

作者 耿牡丹 刘俊 +4 位作者 孙瑞芬 赵镒 石慧芹 苏慧明 金珂 《北方农业学报》 2019年第5期76-81,共6页

葡萄在遗传上高度杂合,从分子水平上对葡萄杂交后代的真伪性进行早期、快速鉴定,旨在为加速葡萄种质创制提供辅助手段。采用SRAP分子标记技术对3对葡萄杂交组合红提×红玫瑰、红提×贝达和红提×贵妃的8个F1代实生苗进行了... 葡萄在遗传上高度杂合,从分子水平上对葡萄杂交后代的真伪性进行早期、快速鉴定,旨在为加速葡萄种质创制提供辅助手段。采用SRAP分子标记技术对3对葡萄杂交组合红提×红玫瑰、红提×贝达和红提×贵妃的8个F1代实生苗进行了杂种真实性鉴定。从196对SRAP-PCR引物中筛选出10对可以在红提与贝达间产生清晰、稳定的多态性条带的引物,其中有4对引物能够区别红提与红玫瑰,有4对引物能够区别红提与贵妃;各选取3对引物分别对3对杂交组合的F1代实生苗进行鉴定。结果表明:8个F1代实生苗均为真杂种。该研究为利用SRAP标记技术有效、快速鉴定葡萄杂种后代提供依据。 展开更多

关键词 葡萄 SRAP分子标记 杂交种鉴定

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产琥珀酸丝状杆菌内切葡聚糖酶end-1基因密码子偏好性分析 被引量：2

10

作者 苏少锋 萨初拉 +5 位作者 刘红葵 赵小庆 吴青海 其布日 王蕴华 呼和 《畜牧与饲料科学》 2017年第2期1-9,共9页

产琥珀酸丝状杆菌(Fibrobacter succinogenes)end-1基因表达的内切葡聚糖酶是能够降解纤维素的纤维素复合酶中的一种。利用Codon W、CUSP和CHIPS等相关软件分析产琥珀酸丝状杆菌内切葡聚糖酶end-1基因的密码子使用情况,比较end-1基因与... 产琥珀酸丝状杆菌(Fibrobacter succinogenes)end-1基因表达的内切葡聚糖酶是能够降解纤维素的纤维素复合酶中的一种。利用Codon W、CUSP和CHIPS等相关软件分析产琥珀酸丝状杆菌内切葡聚糖酶end-1基因的密码子使用情况,比较end-1基因与大肠杆菌、酿酒酵母菌、枯草芽胞杆菌以及乳酸乳球菌的密码子偏好性。结果表明,内切葡聚糖酶end-1基因偏好使用G/C结尾的密码子,其中有25种偏好密码子(RSCU值大于1),偏好性较强的有GCT、TGC、GAA、GGT、CAC、ATC、CTC、CCG、CGT、TCC和TAC(RSCU值均大于或等于2);end-1基因的密码子偏好性与4个宿主的基因组密码子偏好性差异较大,其中与乳酸乳球菌的密码子偏好性差异最大。若使该基因在上述几种表达系统中得到较高水平的表达,则需要对其密码子进行优化。 展开更多

关键词 产琥珀酸丝状杆菌 内切葡聚糖酶 密码子偏好性 密码子优化 异源表达

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基因枪介导抗草甘膦基因对玉米自交系A188的遗传转化 被引量：1

11

作者 韩平安 吴新荣 +5 位作者 孙瑞芬 常悦 石海波 唐宽刚 梁亚晖 李晓东 《北方农业学报》 2020年第6期1-5,共5页

【目的】有效利用除草剂进行杂草防治,培育抗除草剂转基因玉米种质材料,进一步完善玉米转基因育种技术。【方法】采用基因枪对玉米自交系A188幼胚愈伤组织进行遗传转化研究,实施单因素试验,分别设置不同胚的大小、除草剂浓度,比较分析... 【目的】有效利用除草剂进行杂草防治,培育抗除草剂转基因玉米种质材料,进一步完善玉米转基因育种技术。【方法】采用基因枪对玉米自交系A188幼胚愈伤组织进行遗传转化研究,实施单因素试验,分别设置不同胚的大小、除草剂浓度,比较分析愈伤组织诱导率。【结果】玉米幼胚大小为1.5~2.0 mm时,愈伤组织的诱导率最高(93.3%);双丙氨膦浓度为3 mg/L时是除草剂最佳筛选浓度;PCR检测证明得到5株转基因苗,同时转基因苗抗性鉴定试验表现出较强草甘膦抗性。【结论】建立基因枪介导的玉米遗传转化体系,为培育抗除草剂玉米种质材料奠定了基础。 展开更多

关键词 玉米 抗草甘膦基因(EPSPS) 基因枪介导 遗传转化

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亚麻木酚素含量与遗传多样性的评价 被引量：1

12

作者 萨如拉 宋晓玲 +4 位作者 赵小庆 石松利 白迎春 王艳芳 张玺蕊 《作物杂志》 CAS 北大核心 2019年第1期56-62,共7页

用高效液相色谱法对50份亚麻种质木酚素含量检测,并对其进行基于SRAP标记的遗传多样分析,进一步了解亚麻种质的木酚素含量变异和遗传多样性,为高木酚素含量品种选育和后续亚麻木酚素品质改良育种提供科学依据。结果表明,供试材料的木酚... 用高效液相色谱法对50份亚麻种质木酚素含量检测,并对其进行基于SRAP标记的遗传多样分析,进一步了解亚麻种质的木酚素含量变异和遗传多样性,为高木酚素含量品种选育和后续亚麻木酚素品质改良育种提供科学依据。结果表明,供试材料的木酚素含量变幅为2.819～13.001μg/g,平均值为7.581μg/g,最高木酚素含量种质为加拿大的J-309。11对SRAP引物扩增得到135个条带,多态性条带为73,多态性比率为54.07%,引物多态性信息量(PIC)平均为0.74。有效等位基因数(N_e)、香农信息指数(I)和Nei′s遗传相似系数(H)分别为1.6010、0.7341和0.4925。木酚素含量和基因型数据的聚类分析结果表明,两种不同聚类的同一个类群中大部分种质相同。亚麻种质之间的木酚素含量差异和遗传多样性受地域影响较大。 展开更多

关键词 亚麻 木酚素 遗传多样性 SRAP

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Rd29A启动子驱动AmDHN基因转化紫花苜蓿

13

作者 聂利珍 孙瑞芬 +3 位作者 房永雨 李晓东 孙杰 韩平安 《分子植物育种》 CAS 北大核心 2021年第23期7867-7874,共8页

为获得抗逆性强、生长正常的转基因紫花苜蓿植株,本研究以野生型拟南芥(Arabidopsis thaliana)和蒙古沙冬青(Ammppiptanthus mongolicus)为材料,利用PCR和DNA重组技术,克隆了拟南芥Rd29A基因ATG上游共1520 bp的启动子区域;克隆了蒙古沙... 为获得抗逆性强、生长正常的转基因紫花苜蓿植株,本研究以野生型拟南芥(Arabidopsis thaliana)和蒙古沙冬青(Ammppiptanthus mongolicus)为材料,利用PCR和DNA重组技术,克隆了拟南芥Rd29A基因ATG上游共1520 bp的启动子区域;克隆了蒙古沙冬青脱水素基因(AmDHN)共572 bp的开放阅读框,构建了Rd29A启动子驱动AmDHN基因表达的植物表达载体pCHF-RD-DHN。以紫花苜蓿(Medicago satiua)品种‘敖汉苜蓿’的下胚轴和子叶为受体材料,利用农杆菌介导法,将构建的pCHF-RD-DHN表达载体转入‘敖汉苜蓿’中,经筛选获得了抗性再生植株。通过PCR检测显示,Rd29A启动子驱动的AmDHN基因已转入‘敖汉苜蓿’的基因组中。利用20%PEG模拟干旱胁迫后,经RT-PCR分析证实,当用20%的PEG胁迫转基因苜蓿植株时,转基因苜蓿株系中AmDHN基因表达量明显增强,而在水处理的条件下,转基因植株中AmDHN基因微量表达。本研究结果将为逆境诱导型启动子驱动抗逆基因在牧草中的表达研究及其遗传改良提供依据。 展开更多

关键词 紫花苜蓿(Medicago sativa) 脱水素基因 诱导型启动子 转基因

原文传递

食品级重组产朊假丝酵母菌的构建及其遗传稳定性测定

14

作者 其布日 萨初拉 +5 位作者 苏少锋 高娃 王蕴华 刘红葵 吴青海 呼和 《畜牧与饲料科学》 2018年第12期6-12,共7页

旨在构建食品级酵母工程菌株,并对其遗传稳定性进行评价。采用重叠延伸PCR(gene splicing by overlap extension PCR,SOE-PCR)方法,将实验室已构建完成的原核表达载体PGZM18中的原核基因序列删除,设计2组引物,以PGZM18原核载体序列为模... 旨在构建食品级酵母工程菌株,并对其遗传稳定性进行评价。采用重叠延伸PCR(gene splicing by overlap extension PCR,SOE-PCR)方法,将实验室已构建完成的原核表达载体PGZM18中的原核基因序列删除,设计2组引物,以PGZM18原核载体序列为模板进行引物设计,将片段序列分为2个片段P1-1和P2-1,通过重叠延伸PCR技术删除来自原核的DNA序列(包括抗药性标记Amp在内的细菌质粒序列DNA片段及原核复制区),将最终获得的PCR产物GZM18转化至产朊假丝酵母中,通过菌落计数和PCR方法测定外源基因遗传稳定性。结果表明,食品级产朊假丝酵母工程菌株构建成功,外源基因具有较高的遗传稳定性。研究结果为产朊假丝酵母工程菌在微生物饲料开发方面的应用提供了科学依据。 展开更多

关键词 食品级菌株 产朊假丝酵母 SOE-PCR 遗传稳定性

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富含蛋氨酸醇溶蛋白在产朊假丝酵母中的表达研究

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作者 其布日 萨初拉 +5 位作者 苏少锋 高娃 王蕴华 刘红葵 吴青海 呼和 《畜牧与饲料科学》 2018年第11期16-23,共8页

为构建表达富含蛋氨酸醇溶蛋白的产朊假丝酵母工程菌株,利用基因工程技术,将玉米δ-10kD-醇溶蛋白基因(zein),酵母的GAP启动子(GAP-p)、终止子(GAP-t)拼接合成表达框,以18S rDNA片段为整合介导区,用放线菌酮(CYH)抗性基因作为筛选标记,... 为构建表达富含蛋氨酸醇溶蛋白的产朊假丝酵母工程菌株,利用基因工程技术,将玉米δ-10kD-醇溶蛋白基因(zein),酵母的GAP启动子(GAP-p)、终止子(GAP-t)拼接合成表达框,以18S rDNA片段为整合介导区,用放线菌酮(CYH)抗性基因作为筛选标记,结合pBR322质粒构建了同源整合表达载体,把zein基因同源重组整合到产朊假丝酵母染色体上,构建表达zein基因的产朊假丝酵母工程菌株。蛋氨酸含量测定结果显示,重组菌株的蛋氨酸表达量比起始菌株提高了17.14%。该产朊假丝酵母工程菌的构建为下一步提高其蛋氨酸产量的研究和应用打下了良好的基础。 展开更多

关键词 醇溶蛋白基因 产朊假丝酵母 载体构建

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