目的研究"美蓝-(碱性)藏红O"双染色法用于快速准确测定A群脑膜炎奈瑟菌(group A Neisseria meningitidis,以下简称A群脑膜炎球菌)活菌率的可行性。方法制备A群脑膜炎球菌悬液,取菌悬液双染色法染色,用光学显微镜观察,计算活...目的研究"美蓝-(碱性)藏红O"双染色法用于快速准确测定A群脑膜炎奈瑟菌(group A Neisseria meningitidis,以下简称A群脑膜炎球菌)活菌率的可行性。方法制备A群脑膜炎球菌悬液,取菌悬液双染色法染色,用光学显微镜观察,计算活菌率。将菌悬液进行10倍系列稀释,各菌液分别用平板涂布法接种至10%羊血普通琼脂平皿,于CO2环境下、35~37℃培养12~20 h,计算菌悬液活菌率。比较两种方法测定8批A群脑膜炎球菌所测得的活菌率,并进行相关性和线性回归分析。结果 "美蓝-(碱性)藏红O"双染色法与平板涂布法所测得的活菌率结果差异无统计学意义(P>0.05);两种方法所测得的活菌率具有显著的直线回归关系(P<0.01,n=8),相关系数r=0.984,其回归方程为y=0.919x+1.661(R2=0.967)。结论 "美蓝-(碱性)藏红O"双染色法检测时间短、判定结果直观、操作简单、计数结果准确,可用于A群脑膜炎球菌活菌率的快速测定。展开更多
目的优化b型流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae type b,Hib)多糖活化工艺,提高Hib结合疫苗的产量和质量。方法设计三因素三水平正交试验,考察不同pH、溴化氰加量和活化时间对Hib多糖衍生物、多糖蛋白结合物的影响,依据正交试验结果...目的优化b型流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae type b,Hib)多糖活化工艺,提高Hib结合疫苗的产量和质量。方法设计三因素三水平正交试验,考察不同pH、溴化氰加量和活化时间对Hib多糖衍生物、多糖蛋白结合物的影响,依据正交试验结果确定最优的多糖活化工艺,并对该工艺进行放大和验证。结果多糖活化时pH和活化时间对多糖衍生物衍生率及重均分子量(M_(w))均影响显著(P均<0.05),溴化氰加量对多糖衍生物衍生率影响差异有统计学意义(P<0.05),但对衍生物M的影响差异无统计学意义(P>0.05)。多糖衍生物衍生率和M与多糖蛋白结合物的多糖回收率、多糖与蛋白比值、高分子结合物含量、K_(D)≤0.2的多糖回收率、GMT各指标均显著相关(P均<0.05)。综合多糖蛋白结合物产量、免疫原性及稳定性。确定的最优多糖活化工艺为:在pH 10.5条件下,加入与精制多糖等重的溴化氰反应5 min。结论经优化的多糖活化工艺可以用于Hib多糖蛋白结合物规模化的生产。展开更多
