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骨质疏松症的病因病机研究概况 被引量:16
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作者 杨芳芳 马慧萍 +1 位作者 葸慧荣 高玉海 《医学综述》 2017年第18期3599-3603,共5页
近年来,骨质疏松症的发病率逐年升高,严重影响人们的健康和生活质量。其发病机制复杂多样,且早期阶段症状不明显,多半在发生损伤性骨折后被发现。目前,临床治疗主要以西药为主,效果明显,但西药具有不良反应大、价格昂贵的特点。因此,研... 近年来,骨质疏松症的发病率逐年升高,严重影响人们的健康和生活质量。其发病机制复杂多样,且早期阶段症状不明显,多半在发生损伤性骨折后被发现。目前,临床治疗主要以西药为主,效果明显,但西药具有不良反应大、价格昂贵的特点。因此,研究骨质疏松症的发病因素及探索其他更有效的预防与治疗方法显得十分必要。未来结合现代生活方式与临床疾病研究,整理总结出骨质疏松症的发病因素,及可引发骨质疏松症的其他疾病,将为临床主要以非药物治疗为主提供理论基础。 展开更多
关键词 骨质疏松症 生理因素 疾病因素 生活方式
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丹参酮ⅡA对去卵巢大鼠骨密度及骨形态计量学的影响 被引量:6
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作者 杨芳芳 葸慧荣 +3 位作者 高玉海 李文苑 马慧萍 陈克明 《中华骨质疏松和骨矿盐疾病杂志》 CSCD 北大核心 2018年第2期166-171,共6页
目的研究丹参酮ⅡA对去卵巢大鼠骨密度(bone mineral density,BMD)和骨形态计量学的影响,探讨丹参酮ⅡA对雌激素缺乏引起的骨质疏松症(osteoporosis,OP)的治疗作用。方法 3月龄SD雌性大鼠40只,采用数字表法随机分为假手术组(Sham)、单... 目的研究丹参酮ⅡA对去卵巢大鼠骨密度(bone mineral density,BMD)和骨形态计量学的影响,探讨丹参酮ⅡA对雌激素缺乏引起的骨质疏松症(osteoporosis,OP)的治疗作用。方法 3月龄SD雌性大鼠40只,采用数字表法随机分为假手术组(Sham)、单纯卵巢切除组(Ovx)、雌激素治疗组和丹参酮ⅡA治疗组,每组10只。手术后1周,雌激素组给予炔雌醇200μg/kg;丹参酮ⅡA治疗组给予丹参酮ⅡA 11mg/kg;Ovx组与Sham组每日给予与治疗组同等体积的0.9%氯化钠注射液,给药方式均为口服,1次/d。每2周称1次体质量,每个月检测全身BMD,3个月后处死所有实验动物并取材。测定椎骨和右侧股骨的离体BMD和生物力学性能;品红-苦味酸染色(Van-Gieson,VG)进行骨形态分析;大鼠处死前按时间依次皮下注射四环素、茜素红和钙黄绿素,镜下观察各组3种荧光之间的距离变化;计算子宫系数,并在光镜显微镜下观察子宫病理切片中各组子宫内膜厚度的变化。结果 Ovx组大鼠体质量(282.38±16.92)明显增加,给予丹参酮ⅡA治疗的大鼠体质量增长与Sham组差异无统计学意义(P>0.05),雌激素组大鼠体质量(248.33±15.57)明显低于其他各组,差异有统计学意义(P<0.01);丹参酮ⅡA组大鼠的子宫系数(0.925±0.553)与Ovx组(0.900±0.389)比较略高,差异无统计学意义(P>0.05),但明显低于雌激素组(2.386±0.495),差异有统计学意义(P<0.01);与Ovx组相比,丹参酮ⅡA组的全身BMD(0.149±0.008)、股骨三点弯曲试验和椎骨压缩试验的最大载荷(159.86±12.37、267.58±33.4)均有所提高,差异有统计学意义(P<0.05),而丹参酮ⅡA组和雌激素组组间差异无统计学意义(P>0.05);丹参酮ⅡA组的弹性模量与Ovx组之间差异无统计学意义(P>0.05),但丹参酮ⅡA组均值高于Ovx组;骨形态计量分析结果显示丹参酮ⅡA组和雌激素组较Ovx组骨小梁明显变多变密,改善了松质骨的微结构;荧光标记观察表明口服丹参酮ⅡA 展开更多
关键词 骨质疏松症 丹参酮ⅡA 去卵巢大鼠 骨密度 骨形态计量学
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丹参酮ⅡA与白藜芦醇的复方药对青年大鼠峰值骨量的影响 被引量:3
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作者 杨芳芳 高玉海 +3 位作者 葸慧荣 李文苑 马慧萍 陈克明 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期456-462,共7页
目的研究丹参酮ⅡA和白藜芦醇的复方药对青年大鼠峰值骨量的影响,并探讨其可能的机制,为探索抗骨质疏松中药新药奠定基础。方法 1月龄雌性Wistar大鼠40只,使用随机数字表法分为丹参酮ⅡA组、白藜芦醇组、丹参酮ⅡA与白藜芦醇的复方组和... 目的研究丹参酮ⅡA和白藜芦醇的复方药对青年大鼠峰值骨量的影响,并探讨其可能的机制,为探索抗骨质疏松中药新药奠定基础。方法 1月龄雌性Wistar大鼠40只,使用随机数字表法分为丹参酮ⅡA组、白藜芦醇组、丹参酮ⅡA与白藜芦醇的复方组和正常对照组,每组10只。每两周称1次体重,每月用双能X射线骨密度仪检测全身骨密度;待用药组与对照组全身骨密度差异有统计学意义后,处死所有实验动物。测定右侧股骨和椎骨的离体骨密度;用AGX系列台式电子万能实验机检测股骨和椎骨生物力学性能;品红-苦味酸染色进行骨形态分析;酶联免疫吸附法检测血清抗酒石酸酸性磷酸酶5b和骨钙素的水平。结果各组间大鼠的体重差异无统计学意义(P>0.05);喂药1个月后全身骨密度差异无统计学意义(P>0.05),2个月后给药组全身骨密度均高于对照组,其中复方药物组大鼠全身骨密度(P=0.016)、股骨骨密度(P=0.001)和椎骨骨密度(P=0.034)、骨小梁数目(P=0.024)、骨小梁宽度(P=0.040)和面积(P=0.038)均显著提高,而骨小梁分离度显著降低(P=0.032);与对照组相比,复方药物组能显著提高大鼠血清中骨钙素的含量(P=0.033),同时显著降低血清中抗酒石酸酸性磷酸酶5b的含量(P=0.028)。结论丹参酮ⅡA与白藜芦醇的复方灌胃可有效提高大鼠骨密度及骨质量,且效果优于丹参酮ⅡA单体及白藜芦醇单体。这些结果对探索抗骨质疏松中药复方有重要启示。 展开更多
关键词 丹参酮ⅡA 白藜芦醇 复方 峰值骨量 大鼠
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骨质疏松症的流行病学趋势与防治进展 被引量:116
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作者 胡军 张华 牟青 《临床荟萃》 CAS 2011年第8期729-731,共3页
世界卫生组织把每年的10月20日定为"世界骨质疏松日",每年都有一个主题。早在1885年Pornmer提出骨质疏松症,到1990年丹麦国际骨质疏松研讨会上得到世界公认以来,对骨质疏松症在病理生理、诊治、预防等方面有了深度的认识,
关键词 骨质疏松 流行病学 三级预防
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淫羊藿总黄酮对大鼠实验性骨质疏松生化学指标的影响 被引量:69
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作者 马慧萍 贾正平 +3 位作者 白孟海 葛欣 何晓英 陈克明 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期187-190,共4页
目的 探讨淫羊藿总黄酮防治大鼠实验性骨质疏松症过程中骨代谢生化指标的变化及其意义。方法 采用维甲酸灌胃造成大鼠实验性骨质疏松症模型 ,检测灌服高、中、低 3种剂量的淫羊藿总黄酮后大鼠血清生化指标、尿生化指标、骨矿含量及骨... 目的 探讨淫羊藿总黄酮防治大鼠实验性骨质疏松症过程中骨代谢生化指标的变化及其意义。方法 采用维甲酸灌胃造成大鼠实验性骨质疏松症模型 ,检测灌服高、中、低 3种剂量的淫羊藿总黄酮后大鼠血清生化指标、尿生化指标、骨矿含量及骨密度指标的变化 ,并与模型组、正常对照组和阳性对照组进行比较。结果  3个剂量组的血清E2 、T和BGP水平均高于模型组 ,尿Ca/Cr、DPD和血清PTH水平均低于模型组 ,股骨Ca、P和骨密度与正常对照组接近 ,与模型组差异有显著性。结论 淫羊藿总黄酮对维甲酸造成的大鼠骨质疏松症有明显的防治作用 ,骨代谢生化指标变化情况与骨密度的变化相一致 。 展开更多
关键词 淫羊藿总黄酮 大鼠 实验性骨质疏松 生化学指标 影响
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淫羊藿苷调节成骨细胞骨形成和破骨细胞骨吸收的机制 被引量:49
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作者 马小妮 葛宝丰 +7 位作者 陈克明 周建 石文贵 谢艳芳 郭晓宇 吕享 成魁 高玉海 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期432-438,共7页
目的探讨淫羊藿苷(ICA)调节骨形成和骨吸收的机制。方法原代培养大鼠颅骨成骨细胞,茜素红钙化结节染色,加入10-5mol/LICA12、24、36、48h后,用real-time RT-PCR检测骨源性分化的调节基因OSX、Runt相关基因2(Runx-2)、碱性磷酸酶(ALP)、... 目的探讨淫羊藿苷(ICA)调节骨形成和骨吸收的机制。方法原代培养大鼠颅骨成骨细胞,茜素红钙化结节染色,加入10-5mol/LICA12、24、36、48h后,用real-time RT-PCR检测骨源性分化的调节基因OSX、Runt相关基因2(Runx-2)、碱性磷酸酶(ALP)、Ⅰ型胶原(CollagenⅠ)、骨保护素(OPG)和核因子κB受体活化因子配体(RANKL)基因表达,Westernblotting检测OPG、RANKL和Ⅰ型胶原蛋白表达。加入10-5mol/LICA作用10~90min,流式细胞仪测定细胞内钙离子浓度。结果与对照组相比,ICA能明显促进骨形成,表现为OSX、Runx-2、ALP和Collagen Ⅰ基因表达量及Collagen Ⅰ蛋白表达量明显增加(P均<0.01),同时提高细胞内钙离子浓度。ICA也能明显抑制骨吸收,表现为提高OPG及OPG/RANKL基因和蛋白水平的表达量。结论 ICA可能是通过促进OSX、Runx-2、ALP和Collagen Ⅰ基因表达,提高CollagenⅠ蛋白表达量及细胞内钙离子浓度来促进成骨细胞骨形成;并通过促进OPG及OPG、RANKL基因和蛋白水平的表达量来抑制破骨细胞骨吸收。 展开更多
关键词 成骨细胞 核因子ΚB受体活化因子配体 骨保护素 淫羊藿苷 流式细胞仪
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β-七叶皂甙钠对肢体缺血再灌注损伤的保护作用 被引量:41
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作者 蓝旭 刘雪梅 +1 位作者 葛宝丰 许建中 《中国矫形外科杂志》 CAS CSCD 2000年第6期572-573,共2页
目的 :观察 β 七叶皂甙钠对肢体缺血再灌注损伤的保护作用。方法 :用兔造成肢体缺血再灌注损伤动物模型。实验分对照组、缺血再灌注组和 β 七叶皂甙钠组。取血浆测定丙二醛、肌酸磷酸激酶、谷草转氨酶和乳酸脱氢酶含量。取骨骼肌标本... 目的 :观察 β 七叶皂甙钠对肢体缺血再灌注损伤的保护作用。方法 :用兔造成肢体缺血再灌注损伤动物模型。实验分对照组、缺血再灌注组和 β 七叶皂甙钠组。取血浆测定丙二醛、肌酸磷酸激酶、谷草转氨酶和乳酸脱氢酶含量。取骨骼肌标本测定丙二醛、髓过氧化酶活性、肌细胞线粒体钙含量和组织湿 /干重比值。结果 :缺血再灌注组与对照组比较 ,血浆和骨骼肌的各项生化指标显著增高 (P <0 .0 1) ;使用 β 七叶皂甙钠后 ,血浆及骨骼肌各项测定指标较缺血再灌注组相比明显降低 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1)。结论 :β 七叶皂甙钠可减轻肢体缺血再灌注损伤 。 展开更多
关键词 Β-七叶皂甙钠 肢体 缺血 再灌注损伤
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含淫羊藿总黄酮大鼠血清对成骨细胞发育的影响 被引量:39
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作者 马慧萍 贾正平 +3 位作者 陈克明 张汝学 李茂星 王娟 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期928-931,共4页
目的:研究含淫羊藿总黄酮大鼠血清对体外培养成骨细胞(ROB)增殖和分化的影响。方法:将淫羊藿总黄酮(TFE)以0.1,1,10,100μg.mL-14种质量浓度、含淫羊藿总黄酮大鼠血清(SRAT)以2.5%,5%,10%3种质量浓度分别加入新生大鼠颅骨成骨细胞培养液... 目的:研究含淫羊藿总黄酮大鼠血清对体外培养成骨细胞(ROB)增殖和分化的影响。方法:将淫羊藿总黄酮(TFE)以0.1,1,10,100μg.mL-14种质量浓度、含淫羊藿总黄酮大鼠血清(SRAT)以2.5%,5%,10%3种质量浓度分别加入新生大鼠颅骨成骨细胞培养液中,研究它们对细胞增殖和分化成熟的影响。细胞增殖采用MTT法进行分析,细胞分化是于培养第4,8,12,20天分别检测碱性磷酸酶活性(比色法)、骨钙素分泌量(放射免疫法)、钙盐沉积量(比色法)和矿化结节(组织化学法)等。结果:TFE 4种质量浓度均对ROB细胞增殖和分化无明显影响,2.5%和5%SRAT则表现出强烈的刺激细胞增殖活性并显著提高碱性磷酸酶活性、骨钙素分泌量、矿化结节数和钙盐沉积量。结论:淫羊藿总黄酮代谢产物强烈刺激成骨细胞的增殖并促进其分化成熟,说明淫羊藿总黄酮代谢产物具有抗骨质疏松的活性。 展开更多
关键词 淫羊藿 黄酮 成骨细胞 分化 增殖
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淫羊藿总黄酮含药血清促进骨髓间充质干细胞增殖与成骨性分化 被引量:33
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作者 马慧萍 贾正平 +4 位作者 张汝学 陈克明 任俊 李茂星 王娟 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 2004年第4期420-422,428,共4页
目的 研究淫羊藿总黄酮(Total flavonoid extract of Eimedium sagittatum,TFE)对大鼠骨髓间充质干细胞(Mysenchymal stem cells,MSCs)增殖和成骨性分化的影响。方法将TFE和含淫羊藿总黄酮大鼠血清(Serum of rats administered TFE,SES... 目的 研究淫羊藿总黄酮(Total flavonoid extract of Eimedium sagittatum,TFE)对大鼠骨髓间充质干细胞(Mysenchymal stem cells,MSCs)增殖和成骨性分化的影响。方法将TFE和含淫羊藿总黄酮大鼠血清(Serum of rats administered TFE,SES)分别以不同浓度加入大鼠MSCs培养液中,进行细胞增殖和成骨性分化的分析。细胞增殖分析采用MTT法,成骨性分化则检测碱性磷酸酶、骨钙素、钙盐沉积量等分化指标。结果TFE直接加入培养液对:MSCs增殖无明显影响,SES则强烈刺激细胞增殖,成倍增加碱性磷酸酶染色阳性的克隆数。TFE不影响MSCs的成骨性分化,但SES显著提高碱性磷酸酶活性、骨钙素分泌量和钙盐沉积量。结论 淫羊藿总黄酮活性代谢产物强烈刺激MSCs的增殖和成骨性分化,是淫羊藿总黄酮抗骨质疏松症的重要机制。 展开更多
关键词 成骨 淫羊藿总黄酮 细胞增殖 性分化 大鼠 含药血清 骨髓问充质干细胞 骨钙素 碱性磷酸酶 MSC
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Ca^(2+)信号介导红景天苷促进小鼠骨髓间充质干细胞向神经细胞的定向分化 被引量:29
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作者 裴晶晶 吴润 +3 位作者 赵红斌 刘旭东 胡军 白孟海 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期1808-1812,共5页
背景:大量文献报道具有抗氧化作用的传统中药单体能促进骨髓间充质干细胞向神经细胞定向分化,红景天苷作为红景天的有效成分,具有较强的抗氧化功效。目的:探讨红景天苷影响小鼠骨髓间充质干细胞向神经细胞定向分化的分子机制。方法:体... 背景:大量文献报道具有抗氧化作用的传统中药单体能促进骨髓间充质干细胞向神经细胞定向分化,红景天苷作为红景天的有效成分,具有较强的抗氧化功效。目的:探讨红景天苷影响小鼠骨髓间充质干细胞向神经细胞定向分化的分子机制。方法:体外培养的小鼠骨髓间充质干细胞达80%融合后,设立3组,空白对照组加入细胞完全培养液,诱导组、阳性对照组分别在其基础上加入20mg/L红景天苷、0.1mg/L神经生长因子,培养12h,采用RT-PCR和Westernblot法检测诱导后神经细胞相关基因和蛋白的表达。取诱导组细胞,分别加入含EGTA(细胞外Ca2+螯合剂)、Nifedipine(L型Ca2+通道阻断剂)、LY294002(IP3受体阻断剂)作用12h,进行生物学信号传导通路检测。结果与结论:①诱导组可见神经元特异性烯醇化酶、β-TubulinⅢ和Nurr1mRNA的表达,阳性对照组上述基因的表达丰度均低于诱导组,空白对照组未见上述基因的表达;各组GFAPmRNA表达丰度均极低,诱导组c-fosmRNA呈高丰度表达。②与阳性对照组比较,诱导组能明显促进骨髓间充质干细胞神经元特异性烯醇化酶蛋白的表达;空白对照组无神经元特异性烯醇化酶蛋白的表达。③EGTA,Nifedipine,LY294002分别阻断细胞外Ca2+、L型Ca2+通道、IP3受体后,神经元特异性烯醇化酶和Nurr1基因、蛋白的表达均显著下调。结果证实红景天苷能使骨髓间充质干细胞定向分化为神经细胞,其生物学信号的传导与Ca2+信号有密切关系,IP3依赖的Ca2+信号途径是实现信号传导的重要方式之一。 展开更多
关键词 红景天苷 Ca2+信号 IP3 神经元特异性烯醇化酶 骨髓间充质干细胞
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葛根素在体外对成骨细胞增殖和分化的影响 被引量:27
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作者 王昌 汤旭磊 +1 位作者 陈克明 张莉 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2012年第33期6102-6106,共5页
背景:成骨细胞是骨代谢平衡过程中的关键功能细胞,植物雌激素对成骨细胞的增殖和分化有重要影响,葛根素作为植物雌激素的一种,在体外以较大范围浓度对成骨细胞功能的影响仍少见报道。目的:观察葛根素在体外对大鼠成骨细胞增殖和分化功... 背景:成骨细胞是骨代谢平衡过程中的关键功能细胞,植物雌激素对成骨细胞的增殖和分化有重要影响,葛根素作为植物雌激素的一种,在体外以较大范围浓度对成骨细胞功能的影响仍少见报道。目的:观察葛根素在体外对大鼠成骨细胞增殖和分化功能的影响。方法:取新生Wistar大鼠的颅盖骨,对成骨细胞进行分离、培养、纯化及鉴定。将培养的成骨细胞随机分为对照组、10-3~10-10mol/L不同浓度葛根素组,观察不同浓度葛根素对体外培养的成骨细胞增殖和碱性磷酸酶活性表达的影响。结果与结论:细胞经葛根素处理后10-5~10-9mol/L组成骨细胞增殖活性较对照组明显增加(P<0.05),第3天增殖最快(P<0.01),第4天开始下降;诱导第4天,各组碱性磷酸酶活性与对照组相比,差异均有显著性意义(P<0.01),其中以10-6mol/L组最显著(P<0.01)。然而葛根素10-3mol/L组成骨细胞增殖活性、碱性磷酸酶活性表达较对照组均减少(P<0.05)。提示葛根素对成骨细胞的影响存在剂量依赖性,并且具有双向性,即在低浓度(10-5~10-8mol/L)下刺激骨形成;在高浓度(10-3~10-4mol/L)下抑制骨形成。 展开更多
关键词 葛根素 成骨细胞:植物雌激素 增殖 分化 组织工程
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生物型FHR与PFNA治疗高龄股骨粗隆间骨折疗效观察 被引量:23
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作者 周胜虎 甄平 +4 位作者 李旭升 沈伟伟 刘军 李生贵 常彦峰 《中国矫形外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期487-491,共5页
[目的]探讨生物型人工股骨头置换(femoral head replacement,FHR)与股骨近端抗旋转髓内钉(proximal femoral nail anti-rotation,PFNA)治疗高龄股骨粗隆间骨折的临床疗效。[方法]2008年3月~2012年12月对108例高龄粗隆间骨折患者实施手... [目的]探讨生物型人工股骨头置换(femoral head replacement,FHR)与股骨近端抗旋转髓内钉(proximal femoral nail anti-rotation,PFNA)治疗高龄股骨粗隆间骨折的临床疗效。[方法]2008年3月~2012年12月对108例高龄粗隆间骨折患者实施手术治疗。男63例,女45例;平均年龄83.72岁(75~99岁)。所有患者术前常规行骨密度检测,骨折均行Evens-Jensen分型,随机分为生物型FHR组47例及PFNA组61例。比较两组患者手术时间、出血量、下床时间、住院时间、Harris评分及深静脉血栓、肺部及泌尿系感染等情况。[结果]所有患者术后均获12~36个月随访,平均(28.04±6.32)个月。平均手术时间:PFNA组(53.73±15.22)min,FHR组(77.50±16.83)min,差异有统计学意义(P<0.05)。平均术中出血量:PFNA组(132.51±33.21)ml,FHR组(286.34±43.23)ml,差异有统计学意义(P<0.05)。术后下床锻炼时间:PFNA组平均(12.24±3.72)d,FHR组平均(3.12±1.23)d,差异有统计学意义(P<0.05)。平均住院时间:PFNA组(7.60±1.83)d,FHR组(6.84±2.24)d,差异无统计学意义(P>0.05)。术后1年髋关节功能Harris评分:PFNA组(87.71±7.92)分,FHR组(88.31±9.21)分,差异无统计学意义(P>0.05)。术后并发症两组差异无统计学意义(P>0.05)。[结论]FHR与PFNA是治疗高龄股骨粗隆间骨折安全有效的内固定方式,均可获得良好的髋关节功能,但应严格掌握手术适应证,合理选择最佳有效的手术方式。 展开更多
关键词 股骨粗隆间骨折 高龄 股骨近端抗旋转髓内钉 人工股骨头置换术
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基于cAMP-PKA信号通路的淫羊藿苷促进骨形成研究 被引量:21
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作者 石文贵 李雪雁 +2 位作者 陈克明 马小妮 谢艳芳 《中国现代应用药学》 CAS CSCD 2015年第2期131-136,共6页
目的研究淫羊藿苷是否通过c AMP-PKA信号通路来促进成骨细胞(osteoblast,OB)成熟矿化。方法以1×10?5 mol·L?1淫羊藿苷分别处理体外培养的大鼠颅骨OB细胞和人类乳腺癌细胞(MCF-7)不同时间后,免疫荧光染色法检测2种细胞内雌激... 目的研究淫羊藿苷是否通过c AMP-PKA信号通路来促进成骨细胞(osteoblast,OB)成熟矿化。方法以1×10?5 mol·L?1淫羊藿苷分别处理体外培养的大鼠颅骨OB细胞和人类乳腺癌细胞(MCF-7)不同时间后,免疫荧光染色法检测2种细胞内雌激素受体(ERα)的核转位情况。待P1代OB细胞铺满80%皿底后,采用1×10?5 mol·L?1的2’,3’-双脱氧腺苷(2’,3’-dideoxyadenosine,DDA)抑制胞内腺苷酸环化酶(adenylate cyclase,AC),同时以1×10?5 mol·L?1淫羊藿苷分别作用于正常组和信号阻断组不同时间后,ELISA检测细胞内c AMP的含量。以终浓度为1×10?6 mol·L?1蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)抑制剂KT5720处理细胞,同时以1×10?5 mol·L?1淫羊藿苷分别作用于信号阻断组和正常组,3 d和6 d后检测胞内碱性磷酸酶(ALP)活性;药物处理48 h后,Real-time PCR检测I型胶原(collagen I,COL I)、Runx-2、ALP m RNA的表达量;Western blot检测COL I、Runx-2蛋白表达量。结果淫羊藿苷作用于细胞4 h后,MCF-7胞内ERα发生明显的核转位,而OB细胞在所有时间点都未检测到明显核转位现象,结合本课题组前期的淫羊藿苷雌激素比较试验说明,淫羊藿苷促进成骨细胞成骨性分化并不主要依赖于其雌激素活性。淫羊藿苷促OB细胞后,胞内c AMP迅速升高,处理1 h后与对照组相比具有显著性差异。加入DDA阻断AC后,淫羊藿苷促胞内c AMP升高的作用消失。1×10?5 mol·L?1淫羊藿苷能够显著地促进胞内ALP的活性,成骨性分化相关的因子COL I、Runx-2和ALP的基因表达也相应增高,同时COL I和Runx-2蛋白表达量也显著增加。当采用KT5720抑制PKA的活性之后,ALP活性下降,成骨性分化的指标也随之降低。结论淫羊藿苷促进OB细胞成骨性分化并不主要依赖于其雌激素活性,而是通过迅速提高成骨细胞内c AMP的含量,激活胞内c AMP-PKA信号通路,进而促进成骨性相关因子的表达,来促进OB细胞成熟矿化。 展开更多
关键词 淫羊藿苷 成骨细胞 CAMP 蛋白激酶A
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淫羊藿苷对rBMSCs成骨和成脂分化的影响 被引量:19
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作者 宋鹏 王鸣刚 +4 位作者 姚娟 马慧萍 葛宝丰 陈克明 成魁 《中国实验方剂学杂志》 CAS 北大核心 2012年第20期200-204,共5页
目的:研究淫羊藿苷对大鼠骨髓间充质干细胞(rBMSCs)成骨和成脂方向分化的影响。方法:在37℃5%CO2和饱和湿度的条件下贴壁筛选法体外培养rBMSCs。采用1×10-5mol.L-1的淫羊藿苷干预rBMSCs的成骨性分化,第3,6,9,12天进行碱性磷酸酶(A... 目的:研究淫羊藿苷对大鼠骨髓间充质干细胞(rBMSCs)成骨和成脂方向分化的影响。方法:在37℃5%CO2和饱和湿度的条件下贴壁筛选法体外培养rBMSCs。采用1×10-5mol.L-1的淫羊藿苷干预rBMSCs的成骨性分化,第3,6,9,12天进行碱性磷酸酶(ALP)活性测定,第15天进行钙化结节染色,第12,24,48,72 h提取总RNA,采用实时聚合酶链反应(Real time PCR)方法分析检测骨成型蛋白2(BMP-2)和骨特异性转录因子(Runx-2)mRNA表达水平。采用1×10-5mol.L-1的淫羊藿苷干预rBMSCs的成脂性分化,第5,10,15,20天进行甘油三酯含量的测定,第21天进行油红O染色,于12,24,48,72 h提取总RNA,采用Real Time PCR方法分析检测PPARγ和C/EBPα的mRNA表达水平。结果:淫羊藿苷显著提高了细胞中ALP的活性,增加了钙化结节数,并且升高了成骨性相关因子BMP-2和Runx-2的基因表达量。淫羊藿苷降低了细胞中甘油三酯的含量,减少了脂滴的形成,并且减弱了成脂转录因子过氧化物酶体增生物激活受体γ(PPARγ)和增强子结合蛋白(C/EBPα)的基因表达量。结论:淫羊藿苷对rBMSCs分化的调节有双向性,即它在促进rBMSCs成骨性分化的同时又抑制rBMSCs成脂分化。 展开更多
关键词 淫羊藿苷 骨髓间充质干细胞 成骨分化 成脂分化
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淫羊藿苷通过OPG/RANKL信号途径调节骨吸收的机理研究 被引量:21
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作者 马小妮 葛宝丰 +6 位作者 陈克明 周建 王嘉琪 郭晓宇 宋鹏 吕享 成魁 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期1-5,共5页
目的探讨淫羊藿苷抑制骨吸收的机理。方法贴壁分离法培养大鼠骨髓基质干细胞,流式检测细胞纯度。加入10-5M淫羊藿苷12 h、24 h、36 h、48 h后用Real-time-RT-PCR检测OPG和RANKL基因表达,Western blotting检测蛋白表达。结果第2代培养细... 目的探讨淫羊藿苷抑制骨吸收的机理。方法贴壁分离法培养大鼠骨髓基质干细胞,流式检测细胞纯度。加入10-5M淫羊藿苷12 h、24 h、36 h、48 h后用Real-time-RT-PCR检测OPG和RANKL基因表达,Western blotting检测蛋白表达。结果第2代培养细胞的纯度达到95%以上。OPG基因和蛋白表达水平在24 h时明显升高,与对照相比有显著差异。OPG和RANKL的比值显著高于对照组。结论淫羊藿苷主要通过提高OPG及OPG和RANKL的比值来发挥抑制骨吸收的作用。 展开更多
关键词 大鼠骨髓基质干细胞 核因子ΚB受体活化因子配体 骨保护素 淫羊藿苷
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骨髓间充质干细胞复合纤维蛋白凝胶修复大面积关节软骨缺损 被引量:12
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作者 陈克明 葛宝丰 +4 位作者 刘兴炎 王艳宁 白孟海 王勇 刘剑梅 《中国矫形外科杂志》 CAS CSCD 2004年第6期444-446,共3页
目的 :用自体骨髓间充质干细胞 (MSCs)复合纤维蛋白修复关节软骨缺损。方法 :抽取兔自体骨髓并分离和培养MSCs ,扩增足够数量后与同种异体纤维蛋白复合在一起 ,植入股骨关节面上 5mm× 10mm的骨软骨缺损区 ,对侧缺损区只植入单纯纤... 目的 :用自体骨髓间充质干细胞 (MSCs)复合纤维蛋白修复关节软骨缺损。方法 :抽取兔自体骨髓并分离和培养MSCs ,扩增足够数量后与同种异体纤维蛋白复合在一起 ,植入股骨关节面上 5mm× 10mm的骨软骨缺损区 ,对侧缺损区只植入单纯纤维蛋白或留作空白对照。结果 :术后 12周时 ,植入复合物的缺损区再生出典型的透明软骨样结构 ,甲苯胺蓝染色和Ⅱ型胶原基因表达检测均为阳性。对侧缺损区表面仅为纤维组织。结论 :自体骨髓间充质干细胞与纤维蛋白复合物可用于修复关节软骨缺损 ,但长远期疗效尚需做进一步研究。 展开更多
关键词 间充质干细胞 纤维蛋白 关节软骨缺损
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红景天苷诱导骨髓间充质干细胞向神经细胞定向分化的机制研究 被引量:17
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作者 陈亚男 刘辉 +4 位作者 赵红斌 刘阳 白洁 朱晓娟 王玉 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期1247-1252,共6页
探讨细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK1/2)和PI3K/AKT/mTOR信号通路介导红景天苷诱导骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)向神经细胞定向分化中的作用。以小鼠BMSCs细胞系(D1细胞... 探讨细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK1/2)和PI3K/AKT/mTOR信号通路介导红景天苷诱导骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)向神经细胞定向分化中的作用。以小鼠BMSCs细胞系(D1细胞)为研究对象,实验分为对照组和红景天苷诱导组。红景天苷(5、25、50、100和200μg.mL 1)作用于细胞24 h和红景天苷(100μg.mL 1)作用细胞0.5、1、3、6、9、12、24、48和72 h。采用细胞免疫荧光染色方法、实时定量PCR(real-time PCR)和Western blotting技术分别检测细胞NSE、MAP2、β-Tubulin III、NES和GFAP的阳性率和β-Tubulin III、NSE、ERK1/2和AKT的表达;PD98059和LY294002分别阻断ERK1/2和PI3K/AKT/mTOR信号通路后,检测ERK1/2和NSE的表达。结果表明,随着红景天苷诱导时间的延长,NSE、MAP2、NES、β-Tubulin III和GFAP的阳性率明显增加,NSE和β-Tubulin III蛋白的表达显著上调(P<0.01)。随着红景天苷水平和作用时间的增加,ERK1/2、AKT mRNA和蛋白的表达明显上调;PD98059和LY294002分别阻断EKR1/2和PI3K/AKT/mTOR信号通路后,显著抑制红景天苷促进NSE、NES和β-TubulinIII mRNA和NSE蛋白表达。结果提示,红景天苷通过激活ERK1/2和PI3K/AKT/mTOR信号通路,促进BMSCs向神经细胞定向分化。 展开更多
关键词 红景天苷 骨髓间充质干细胞 信号通路
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负压疗法促进创伤愈合的机制与进展 被引量:17
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作者 韩桂秋 陈克明 《中国骨伤》 CAS 2010年第7期558-560,共3页
负压疗法(negative pressure therapy,NPT)已广泛应用于临床并取得明显疗效,但对其作用机制的研究相对缺乏。本文对负压封闭引流技术促进创面愈合的机制、物理学作用、生物力学效应等作一综述,为负压疗法的进一步发展提供思路。
关键词 负压疗法 引流术 伤口愈合 综述文献
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50Hz正弦交变磁场对体外培养大鼠成骨细胞分化及BMP-2和collagen-I基因表达的影响 被引量:14
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作者 周建 李雪雁 +5 位作者 陈克明 李志锋 程国政 明磊国 韩桂秋 朱瑞请 《中国医学物理学杂志》 CSCD 2010年第5期2173-2177,共5页
目的:研究频率为50 Hz不同强度正弦交变电磁场(electromagnetic fields,EMFs)对体外培养成骨细胞(Osteoblasts,OB)分化的影响。方法:体外分离培养大鼠颅骨成骨细胞,传代后随机分为9组,分别用频率50 Hz,磁场强度为0 mT(对照组)、0.9 mT、... 目的:研究频率为50 Hz不同强度正弦交变电磁场(electromagnetic fields,EMFs)对体外培养成骨细胞(Osteoblasts,OB)分化的影响。方法:体外分离培养大鼠颅骨成骨细胞,传代后随机分为9组,分别用频率50 Hz,磁场强度为0 mT(对照组)、0.9 mT、1.2 mT、1.5 mT、1.8 mT、2.1 mT、2.4 mT、2.7 mT和3.0 mT的正弦交变磁场处理,30 min/次/d。倒置相差显微镜下观察细胞形态;第3 d、6 d、9 d测定钙含量;第10 d茜素红钙化结节染色;RT-PCR法检测BMP-2和Collagen-I基因的表达。结果:磁场处理了3 d以后成骨细胞呈漩涡样分布;第9 d磁场组钙盐沉淀量普遍高于对照组,尤以1.8 mT显著高于对照(P<0.01)及其他各组(P<0.05);磁场处理组的BMP-2、Collagen-I基因表达水平高于对照组,其中1.8 mT和2.1 mT组表达量明显较高。结论:本实验所用50 Hz,0.9 mT^3.0 mT的正弦交变磁场能促进体外培养成骨细胞分化成熟,并提高BMP-2和Collagen-I的基因表达水平,其中以1.8 mT效果最为明显。 展开更多
关键词 成骨细胞 电磁场 Collagen-I BMP-2
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兰州地区定量超声测定结果分析 被引量:16
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作者 白孟海 葛宝丰 +3 位作者 刘剑梅 高梅 王琦 郑荣 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 2002年第3期242-242,225,共2页
关键词 骨质疏松症 骨密度 老年人 流行病学 兰州市 定量超声
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