目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)LINC01224是否通过调控微小RNA-125b(miR-125b)的表达,从而影响口腔鳞癌(OSCC)细胞增殖及凋亡。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测OSCC患者癌组织及癌旁组织中LINC01224的表达水平;体外培养O...目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)LINC01224是否通过调控微小RNA-125b(miR-125b)的表达,从而影响口腔鳞癌(OSCC)细胞增殖及凋亡。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测OSCC患者癌组织及癌旁组织中LINC01224的表达水平;体外培养OSCC细胞系CAL-27,将si-NC、si-LINC01224、si-LINC01224与anti-miR-NC、si-LINC01224与anti-miR-125b转染至CAL-27细胞;甲基噻唑基四唑(MTT)试验检测细胞增殖能力;流式细胞术检测细胞周期与细胞凋亡率;双荧光素酶报告试验验证LINC01224与miR-125b的靶向结合关系;western blot检测半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶3前体蛋白(pro-caspase-3)、增殖标记蛋白细胞增殖核抗原67(Ki67)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(clv-caspase-3)、P21蛋白的表达水平。结果与癌旁组织相比,OSCC患者癌组织中LINC01224的表达水平(1.00±0.05 vs 2.43±0.17)显著升高(t=94.345,P<0.05),miR-125b的表达水平(0.98±0.06 vs 0.22±0.02)显著降低(t=14.838,P<0.05);与si-NC组比较,si-LINC01224组细胞存活率[(100.02±6.73)%vs(47.94±4.69)%]显著降低(t=19.047,P<0.05),G 1期细胞比例[(31.03±3.01)%vs(42.29±4.12)%]显著增加(t=6.615,P<0.05),S期细胞比例[(34.18±3.38)%vs(23.49±2.57)%]显著减少(t=7.553,P<0.05),细胞凋亡率[(8.10±0.92)%vs(24.17±1.74)%]显著升高(t=24.494,P<0.05),Ki67、pro-caspase-3蛋白水平显著降低(P<0.05),P21、clv-caspase-3蛋白水平显著升高(P<0.05);双荧光素酶报告试验证实LINC01224与miR-125b靶向结合;与si-LINC01224+anti-miR-NC组比较,si-LINC01224+anti-miR-125b组细胞存活率[(48.03±4.57)%vs(90.01±5.59)%]显著升高(t=17.442,P<0.05),细胞凋亡率[(24.11±1.58)%vs(12.81±1.12)%]显著降低(t=17.504,P<0.05),G 1期细胞比例[(42.27±4.10)%vs(35.09±3.18)%]显著减少(t=4.151,P<0.05),S期细胞比例[(23.53±2.54)%vs(30.03±2.96)%]显著增加(t=4.999,P<0.05),pro-caspase-3、Ki67蛋白水平显著升高(P<0.05),clv-caspase-3、P21蛋白水平显著降低(P<0.05)。�展开更多
文摘目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)LINC01224是否通过调控微小RNA-125b(miR-125b)的表达,从而影响口腔鳞癌(OSCC)细胞增殖及凋亡。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测OSCC患者癌组织及癌旁组织中LINC01224的表达水平;体外培养OSCC细胞系CAL-27,将si-NC、si-LINC01224、si-LINC01224与anti-miR-NC、si-LINC01224与anti-miR-125b转染至CAL-27细胞;甲基噻唑基四唑(MTT)试验检测细胞增殖能力;流式细胞术检测细胞周期与细胞凋亡率;双荧光素酶报告试验验证LINC01224与miR-125b的靶向结合关系;western blot检测半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶3前体蛋白(pro-caspase-3)、增殖标记蛋白细胞增殖核抗原67(Ki67)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(clv-caspase-3)、P21蛋白的表达水平。结果与癌旁组织相比,OSCC患者癌组织中LINC01224的表达水平(1.00±0.05 vs 2.43±0.17)显著升高(t=94.345,P<0.05),miR-125b的表达水平(0.98±0.06 vs 0.22±0.02)显著降低(t=14.838,P<0.05);与si-NC组比较,si-LINC01224组细胞存活率[(100.02±6.73)%vs(47.94±4.69)%]显著降低(t=19.047,P<0.05),G 1期细胞比例[(31.03±3.01)%vs(42.29±4.12)%]显著增加(t=6.615,P<0.05),S期细胞比例[(34.18±3.38)%vs(23.49±2.57)%]显著减少(t=7.553,P<0.05),细胞凋亡率[(8.10±0.92)%vs(24.17±1.74)%]显著升高(t=24.494,P<0.05),Ki67、pro-caspase-3蛋白水平显著降低(P<0.05),P21、clv-caspase-3蛋白水平显著升高(P<0.05);双荧光素酶报告试验证实LINC01224与miR-125b靶向结合;与si-LINC01224+anti-miR-NC组比较,si-LINC01224+anti-miR-125b组细胞存活率[(48.03±4.57)%vs(90.01±5.59)%]显著升高(t=17.442,P<0.05),细胞凋亡率[(24.11±1.58)%vs(12.81±1.12)%]显著降低(t=17.504,P<0.05),G 1期细胞比例[(42.27±4.10)%vs(35.09±3.18)%]显著减少(t=4.151,P<0.05),S期细胞比例[(23.53±2.54)%vs(30.03±2.96)%]显著增加(t=4.999,P<0.05),pro-caspase-3、Ki67蛋白水平显著升高(P<0.05),clv-caspase-3、P21蛋白水平显著降低(P<0.05)。�