葡萄VvMET1-1基因在葡萄和拟南芥中的功能研究

1

作者 王风霞 丁亭亭 +7 位作者 刘蕙萍 李科 杨国伟 李傲 张庆田 Chebukin Pavel 任凤山 王鹏飞 《中外葡萄与葡萄酒》 北大核心 2024年第3期1-12,共12页

DNA甲基化修饰对于植物的生长发育十分重要,而MET1是植物中重要的甲基转移酶,能维持植物的CG位点甲基化修饰。为了研究葡萄MET1基因的功能及对植物发育的影响,将葡萄VvMET1-1基因转入葡萄胚性愈伤组织和拟南芥中进行研究。本研究选择35S... DNA甲基化修饰对于植物的生长发育十分重要,而MET1是植物中重要的甲基转移酶,能维持植物的CG位点甲基化修饰。为了研究葡萄MET1基因的功能及对植物发育的影响,将葡萄VvMET1-1基因转入葡萄胚性愈伤组织和拟南芥中进行研究。本研究选择35S::VvMET1-1-GFP表达载体转入葡萄胚性愈伤组织后检测到明显的GFP信号,且该胚性愈伤组织能被成功诱导为体细胞胚,表明VvMET1-1首次被成功转入葡萄胚性愈伤组织中并且不影响胚性愈伤组织的发育和分化。VvMET1-1被转入拟南芥中发现,该基因能影响拟南芥叶片的长度和宽度,但是不影响植株形态和种子发育;转录组数据分析表明,许多逆境胁迫、生长素、种子萌发、果实成熟、脱落酸和茉莉酸合成相关的基因差异表达;甲基化组结果显示,拟南芥过表达VvMET1-1后CG和CHH位点甲基化水平分别发生了明显的上调和下调,且DNA甲基化差异区(DMR)的类型主要是CG和CHH型,因此推测VvMET1-1可能通过调控DNA甲基化水平的变化影响下游基因的表达,进而调控拟南芥的生长发育。 展开更多

关键词 葡萄 胚性愈伤组织 VvMET1-1 转录组测序

下载PDF 职称材料

37份山羊豆种质资源的遗传多样性SSR分析 被引量：5

2

作者 尹淑英 Vladimir F.Chapurin +2 位作者 Nickolay I.Dzyubenko 高洪文 王赞 《中国草地学报》 CSCD 北大核心 2016年第6期29-35,共7页

利用筛选出的10对SSR多态性引物对国外引进的37份山羊豆种质资源进行遗传多样性SSR分析,共扩增出102个等位基因,变异范围为8-13个等位基因;多态信息含量变异范围为0.778-0.879,平均值为0.830;基因多样性变异范围为0.805-0.888,平均值为0... 利用筛选出的10对SSR多态性引物对国外引进的37份山羊豆种质资源进行遗传多样性SSR分析,共扩增出102个等位基因,变异范围为8-13个等位基因;多态信息含量变异范围为0.778-0.879,平均值为0.830;基因多样性变异范围为0.805-0.888,平均值为0.848;期望杂合度变异范围为0.081-0.757,平均值为0.457。37份山羊豆种质显示出丰富的遗传多样性,不同地理来源种质资源多样性水平存在一定的差异。主成分分析与聚类分析结果基本一致,37份材料基本按照地理来源分布聚类,部分材料有交叉。 展开更多

关键词 山羊豆 SSR分子标记 遗传多样性

下载PDF 职称材料

菊芋不同种植密度比较试验 被引量：2

3

作者 张宇 stepan kiru +5 位作者 刘俊 门果桃 鲍红春 natalia anushkevich natalia lebedeva 赵胜利 《当代畜禽养殖业》 2017年第10期9-10,共2页

通过对科尔沁菊芋进行不同密度种植研究发现,宽窄行距相间的种植模式比等行距种植的效果显著,平均块茎产量增产18.7%。因此,在内蒙古中部地区实施宽窄行小株距的密度栽培是提高菊芋产量的有效途径,对发展菊芋规模生产、促进农牧民增效... 通过对科尔沁菊芋进行不同密度种植研究发现,宽窄行距相间的种植模式比等行距种植的效果显著,平均块茎产量增产18.7%。因此,在内蒙古中部地区实施宽窄行小株距的密度栽培是提高菊芋产量的有效途径,对发展菊芋规模生产、促进农牧民增效增收具有积极的意义。 展开更多

关键词 菊芋 行距 密度 产量

下载PDF 职称材料

菊芋不同种植密度比较试验

4

作者 张宇 Stepan Kiru +5 位作者 刘俊 门果桃 鲍红春 Natalia Anushkevich Natalia Lebedeva 赵胜利 《当代畜禽养殖业》 2017年第9期80-81,共2页

通过对科尔沁菊芋进行不同密度种植研究 发现,宽窄行距相间的种植模式比等行距种植的效果 显著,平均块茎产量增产18.7%遥因此,在内蒙古中部 地区实施宽窄行小株距的密度栽培是提高菊芋产量 的有效途径,对发展菊芋规模生产、促进农牧民增... 通过对科尔沁菊芋进行不同密度种植研究 发现,宽窄行距相间的种植模式比等行距种植的效果 显著,平均块茎产量增产18.7%遥因此,在内蒙古中部 地区实施宽窄行小株距的密度栽培是提高菊芋产量 的有效途径,对发展菊芋规模生产、促进农牧民增效 增收具有积极的意义. 展开更多

关键词 菊芋 行距 密度 产量

下载PDF 职称材料

山羊豆种质资源形态多样性分析 被引量：29

5

作者 王俊娥 王赞 +2 位作者 王运琦 高洪文 Vladimir Chapurin 《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 2008年第2期201-205,共5页

采用15个形态性状对43份山羊豆种质资源进行遗传多样性分析,结果表明,山羊豆种质资源遗传变异丰富,多样性指数为1.863,其中俄罗斯南部地区可能是山羊豆形态多样性的分布中心。基于形态性状的聚类分析把43份材料聚为5类,其中第1类15份资... 采用15个形态性状对43份山羊豆种质资源进行遗传多样性分析,结果表明,山羊豆种质资源遗传变异丰富,多样性指数为1.863,其中俄罗斯南部地区可能是山羊豆形态多样性的分布中心。基于形态性状的聚类分析把43份材料聚为5类,其中第1类15份资源的株高和主茎分枝数明显高于其他类,且叶量丰富,营养性状表现良好;结实性状中荚果长和百粒重较大,综合性状表现较好,可以从中筛选合适的材料作为引种驯化和育种的试验材料。 展开更多

关键词 山羊豆 种质资源 形态性状 主成分分析 聚类分析

下载PDF 职称材料

中俄茄子种质资源遗传多样性研究 被引量：20

6

作者 齐东霞 张映 +2 位作者 刘富中 A.Artemyeva I.Gashkova 《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期404-412,共9页

利用25对SSR分子标记和24个表型性状对105份中俄茄子材料进行遗传多样性分析。表型变异分析结果表明:24个表型性状在中俄材料间均表现出了不同程度的多样性,但是同一性状在中俄材料中多样性不同;主成分分析可将24个表型性状概括为果形... 利用25对SSR分子标记和24个表型性状对105份中俄茄子材料进行遗传多样性分析。表型变异分析结果表明:24个表型性状在中俄材料间均表现出了不同程度的多样性,但是同一性状在中俄材料中多样性不同;主成分分析可将24个表型性状概括为果形因子、颜色因子、果实外观因子、叶片形态因子、果萼刺和花药条纹6个指标,其中果实特征占主要成分;利用UPGMA法进行聚类,遗传相似系数在0.4~0.8之间,平均值0.6。25对多态性SSR标记,扩增出122个条带,含有等位基因82个,其中有效等位数24.8个,PIC值为0.3~0.7。分子聚类的遗传相似系数在0.5~1之间,平均值是0.7。表型聚类和分子标记聚类的结果相似,105份茄子种质资源间的类群划分与地理来源之间没有直接关系,但与茄子的果实性状有一定的相关性。 展开更多

关键词 茄子 表型性状 SSR标记 多态性

下载PDF 职称材料

东方山羊豆4香豆酸:辅酶A连接酶(4CL)基因的克隆和荧光定量表达分析 被引量：9

7

作者 杨冬梅 王学敏 +5 位作者 高洪文 Dzyubenko Nikolay Chapurin Vladimir 韩永增 宋清晓 董洁 《草地学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期533-538,共6页

东方山羊豆(Galega orientalisL.)是20世纪末引种到我国的牧草品种,为发掘其基因资源,本实验克隆出东方山羊豆4 CL基因,并深入研究4 CL基因对东方山羊豆抗逆性的影响,为今后东方山羊豆在我国的种植和应用奠定基础。结果表明:采用RACE技... 东方山羊豆(Galega orientalisL.)是20世纪末引种到我国的牧草品种,为发掘其基因资源,本实验克隆出东方山羊豆4 CL基因,并深入研究4 CL基因对东方山羊豆抗逆性的影响,为今后东方山羊豆在我国的种植和应用奠定基础。结果表明:采用RACE技术结合RT-PCR方法从东方山羊豆中获得一个编码4 CL基因的cDNA全长序列,命名为Go4 CL。该序列全长1916 bp,开放阅读框1653 bp,编码510个氨基酸。利用Real-Time PCR方法检测发现,Go4 CL基因在东方山羊豆的根中表达量最高,叶中表达量最少。在PEG、ABA、MeJA、SA胁迫处理下Go4 CL基因的表达量均有不同程度的上调,说明此基因在植物抵御干旱、病菌侵袭和机械损伤等胁迫过程中能够起到调控作用。 展开更多

关键词 东方山羊豆 4香豆:酸辅酸A连接酶 基因克隆 荧光定量PCR

下载PDF 职称材料

东方山羊豆种质资源遗传多样性ISSR分析 被引量：9

8

作者 余国辉 王赞 +5 位作者 王俊娥 刘海泉 高洪文 Nikolay Dzyubenko Vladimir Chapurin 呼天明 《中国草地学报》 CSCD 北大核心 2014年第3期22-27,共6页

利用9对ISSR引物对33份东方山羊豆种质进行遗传多样性分析,共得到110条带,其中多态性条带107条,多态位点百分率96.7%。东方山羊豆种质资源遗传多样性非常丰富,多态性信息含量平均为0.670,Shannon’s指数平均为0.557,期望杂合度平均0.380... 利用9对ISSR引物对33份东方山羊豆种质进行遗传多样性分析,共得到110条带,其中多态性条带107条,多态位点百分率96.7%。东方山羊豆种质资源遗传多样性非常丰富,多态性信息含量平均为0.670,Shannon’s指数平均为0.557,期望杂合度平均0.380,遗传相似系数变幅为0.216~0.812。33份东方山羊豆种质资源在GS=0.42处可划分为三类,主成分分析与聚类分析结果一致。东方山羊豆不同地理来源种质相互混杂分布,种质资源间遗传分布与地理来源之间没有显著相关性。 展开更多

关键词 东方山羊豆 遗传多样性 ISSR

下载PDF 职称材料

东方山羊豆蔗糖转运蛋白基因克隆及表达载体构建 被引量：6

9

作者 李俊 王学敏 +4 位作者 董洁 王赞 高洪文 Dzyubenko Nikolay Chapurin Vladimir 《中国草地学报》 CSCD 北大核心 2011年第3期39-46,共8页

根据已知的EST序列,采用RACE技术克隆了东方山羊豆蔗糖转运蛋白基因全长cDNA,命名为GoSUT(GenBank accession No.HM802255)。序列分析结果表明,该cDNA全长1883bp,开放阅读框1545bp,编码514个氨基酸。应用生物信息学软件对编码蛋白的理... 根据已知的EST序列,采用RACE技术克隆了东方山羊豆蔗糖转运蛋白基因全长cDNA,命名为GoSUT(GenBank accession No.HM802255)。序列分析结果表明,该cDNA全长1883bp,开放阅读框1545bp,编码514个氨基酸。应用生物信息学软件对编码蛋白的理化性质、结构和功能进行了分析和预测。进化树分析显示,该蛋白属于蔗糖转运蛋白第Ⅰ类。利用Real-Time PCR方法分析表明,GoSUT在茎中表达量高,在根、叶中表达量低。在PEG、NaCl胁迫处理下,GoSUT基因相对表达量都有不同程度上调。利用pCAMBIA1302质粒,成功构建了GoSUT基因植物表达载体。 展开更多

关键词 东方山羊豆 蔗糖转运蛋白 SMARTRACE 实时荧光定量PCR 植物表达载体

下载PDF 职称材料

东方山羊豆水通道蛋白基因的克隆及初步分析 被引量：6

10

作者 吴晓静 王学敏 +3 位作者 高洪文 Dzyubenko Nikolay Chapurin Vladimir 刘大林 《草地学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期331-339,共9页

根据已知EST片段结合RT-PCR和RACE技术,从东方山羊豆(Galega Orientalis)中克隆到一个水通道蛋白(AQP)基因,命名为GoAQP(GenBank登录号:HM 803185)。测序和生物信息学分析表明,此序列全长1258bp,开放读码框(ORF)870 bp,编码289个氨基酸... 根据已知EST片段结合RT-PCR和RACE技术,从东方山羊豆(Galega Orientalis)中克隆到一个水通道蛋白(AQP)基因,命名为GoAQP(GenBank登录号:HM 803185)。测序和生物信息学分析表明,此序列全长1258bp,开放读码框(ORF)870 bp,编码289个氨基酸。GoAQP包含MIP家族信号序列HINPAVT/SFG,高等植物PIP高度保守序列GGANXXXXGY和TGI/TNPARSL/FGAAI/VI/VF/YN。与拟南芥AQP基因家族的系统进化分析表明,GoAQP属于PIP1亚型AQP蛋白。Real-Time PCR检测结果表明,GoAQP基因在根中表达量最高,茎中表达量最少;且受NaCl和PEG胁迫表达上调,NaCl表达呈双峰分布。因此GoAQP基因可能参与了东方山羊豆耐盐性调控。同时成功构建超表达载体pCAMBIA-1302-GoAQP,为转基因验证基因功能创造了基础。 展开更多

关键词 东方山羊豆 水通道蛋白基因 表达分析 表达载体构建

下载PDF 职称材料

东方山羊豆脱水蛋白基因的克隆及初步分析 被引量：6

11

作者 李玉坤 王学敏 +5 位作者 王赞 李俊 Vladimir C Nikolay D 孙桂枝 高洪文 《草业学报》 CSCD 北大核心 2012年第1期176-183,共8页

采用SMART RACE方法,从东方山羊豆盐诱导抑制性差减杂交cDNA文库中分离到了一个脱水蛋白(GoDHN)基因。该基因cDNA全长1 169bp,开放阅读框843bp,编码281个氨基酸,编码的蛋白质分子量为28.71kDa。经实时荧光定量PCR分析,GoDHN基因在东方... 采用SMART RACE方法,从东方山羊豆盐诱导抑制性差减杂交cDNA文库中分离到了一个脱水蛋白(GoDHN)基因。该基因cDNA全长1 169bp,开放阅读框843bp,编码281个氨基酸,编码的蛋白质分子量为28.71kDa。经实时荧光定量PCR分析,GoDHN基因在东方山羊豆的茎和叶中表达量明显高于根中表达量,并且基因表达受ABA、NaCl和PEG的诱导,随着诱导时间的增加,表达量呈持续增长趋势。这些结果表明,DHN基因在东方山羊豆的抗逆性中可能起到重要的调控作用。本研究成功构建了pCAMBIA1302-DHN植物表达载体,为下一步转基因研究奠定了基础。 展开更多

关键词 东方山羊豆 脱水蛋白基因 基因克隆 实时荧光定量PCR 植物表达载体

下载PDF 职称材料

东方山羊豆盐诱导抑制差减杂交文库构建及其表达序列标签分析 被引量：3

12

作者 宋清晓 王学敏 +5 位作者 高洪文 Dzyubenko Nikolay Chapurin Vladimir 韩永增 杨冬梅 李玉坤 《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期777-783,共7页

为筛选东方山羊豆盐诱导差异性基因,以250 mmol/L NaCl处理的东方山羊豆cDNA为实验组,未经诱导刺激的为驱动组,利用抑制性消减杂交技术(SSH)构建消减文库并对其部分阳性克隆进行了ESTs序列分析。该消减文库克隆的重组率为92%,插入片段... 为筛选东方山羊豆盐诱导差异性基因,以250 mmol/L NaCl处理的东方山羊豆cDNA为实验组,未经诱导刺激的为驱动组,利用抑制性消减杂交技术(SSH)构建消减文库并对其部分阳性克隆进行了ESTs序列分析。该消减文库克隆的重组率为92%,插入片段大部分集中在0.2～1kb之间。随机挑取500个克隆进行测序及同源性分析,获得258个cleanESTs,经聚类、拼接,去除冗余序列,共获得132个Unigene,其中含有32个contigs和100个singlets,该文库的冗余度为24%。对其进行功能预测及分类,得到大量参与信号转导、转录调控、渗透和代谢调节、机体防御以及光作用等过程的相关基因。随机选择非重复的4个差异表达的序列设计引物,以半定量PCR方法验证其消减效率,结果显示,诱导组的表达量显著高于非诱导组,表明该文库有较高质量,且所采用的技术手段有助于快速发现东方山羊豆新功能基因。 展开更多

关键词 东方山羊豆 盐诱导 抑制消减杂交 ESTS RT-PCR

下载PDF 职称材料

东方山羊豆GoGID基因表达载体构建及紫花苜蓿转化 被引量：4

13

作者 李俊 温红雨 +3 位作者 高洪文 Dzyubenko Nikolay Chapurin Vladimir 王学敏 《草地学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期167-172,共6页

根据已经克隆得到的东方山羊豆赤霉素受体(GoGID)基因,扩增编码区cDNA。以pBI121为基础载体,采用酶切连接法,构建植物超表达载体pBI121-GoGID。酶切鉴定表明:目的基因已经正确插入载体中,超表达载体构建成功。采用CaCl_2冻融法将重组载... 根据已经克隆得到的东方山羊豆赤霉素受体(GoGID)基因,扩增编码区cDNA。以pBI121为基础载体,采用酶切连接法,构建植物超表达载体pBI121-GoGID。酶切鉴定表明:目的基因已经正确插入载体中,超表达载体构建成功。采用CaCl_2冻融法将重组载体转入农杆菌菌株中。以叶片为外植体,采用农杆菌介导的愈伤组织培养法,转化紫花苜蓿(Medicage sativa),得到抗性苗。对载体携带的nptⅡ基因、GUS基因进行PCR检测均成阳性,表明目的基因已成功导入紫花苜蓿基因组中。同时对转基因植株进行Southern-blot及RT-PCR检测,并均得到目的条带。本研究为进一步分析GoGID基因对紫花苜蓿生物量影响奠定了基础。 展开更多

关键词 东方山羊豆 赤霉素受体 紫花苜蓿 遗传转化

下载PDF 职称材料