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小柴胡汤对D-GalN/LPS诱导的虎龙杂交石斑鱼肝细胞损伤的保护作用 被引量：2
1
作者 邹翠云 陈小晶 +5 位作者 邬颖欣 黄锦雄 谭小红 胡心月 甘松永 吴锦辉 《南方水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期66-73,共8页
为探讨小柴胡汤对虎龙杂交石斑鱼(Epinephelus lanceolatus♂×E.fuscoguttatus♀)化学性肝细胞损伤的免疫功能影响,用D-氨基半乳糖(D-GalN,20 mmol·L^(–1))和脂多糖(LPS,1μg·mL^(–1))作用肝细胞24 h构建虎龙杂交石斑... 为探讨小柴胡汤对虎龙杂交石斑鱼(Epinephelus lanceolatus♂×E.fuscoguttatus♀)化学性肝细胞损伤的免疫功能影响,用D-氨基半乳糖(D-GalN,20 mmol·L^(–1))和脂多糖(LPS,1μg·mL^(–1))作用肝细胞24 h构建虎龙杂交石斑鱼肝细胞损伤模型,用不同质量浓度的小柴胡汤(100、200和400μg·mL^(–1))对肝细胞进行前处理[D-氨基半乳糖联合脂多糖(DGalN/LPS)损伤前加药],通过CCK-8法检测肝细胞活力,HE染色观察肝细胞形态,收集细胞上清液检测炎症因子INFγ、COX-2和PGE2的含量,以及细胞沉淀中凋亡和免疫相关基因的表达。结果表明,小柴胡汤可以提高肝细胞的成活率,不同程度地抑制D-GalN/LPS损伤引起的肝细胞培养上清液中INF-γ活性以及COX-2和PGE2含量的升高,降低细胞内乳酸脱氢酶(LDH)、谷草转氨酶(AST)和谷丙转氨酶(ALT)活性以及细胞凋亡率,对肝细胞结构具有明显的保护作用;同时显著抑制凋亡相关基因caspase-3、caspase-9和P53的上调,促进免疫相关基因TLR3的上调。数据统计分析显示,添加200μg·mL^(–1)小柴胡汤组的抑制效果最明显。综合以上结果,小柴胡汤对虎龙杂交石斑鱼化学性肝损伤有一定的保护作用,可预防肝脏疾病的发生和发展,为鱼类保肝药物研究提供了新的见解。 展开更多
关键词 小柴胡汤 虎龙杂交石斑鱼 D-GalN/LPS 肝细胞损伤
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罗氏沼虾几丁质酶3B基因的克隆及其在蜕皮周期中的表达 被引量：8
2
作者 叶成凯 卢志杰 +5 位作者 Sarath Babu V 张晓君 刘晓丹 赵丽娟 潘淦 林蠡 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期751-762,共12页
罗氏沼虾的生长发育及繁殖都与蜕皮紧密相关。几丁质酶是甲壳动物在蜕皮过程中最重要的酶之一。本研究对罗氏沼虾蜕皮周期外观特征和腹肢刚毛进行了观察描述,克隆并分析了罗氏沼虾的几丁质酶Ⅲ基因(MrChi3B),制备了几丁质酶Ⅲ蛋白的多... 罗氏沼虾的生长发育及繁殖都与蜕皮紧密相关。几丁质酶是甲壳动物在蜕皮过程中最重要的酶之一。本研究对罗氏沼虾蜕皮周期外观特征和腹肢刚毛进行了观察描述,克隆并分析了罗氏沼虾的几丁质酶Ⅲ基因(MrChi3B),制备了几丁质酶Ⅲ蛋白的多克隆抗体,研究了其在蜕皮周期中的表达。罗氏沼虾几丁质酶基因cDNA的开放阅读框为1 143 bp,编码380个氨基酸,大小为41.91 ku。通过氨基酸序列比对发现,MrChi3B与日本沼虾几丁质酶基因(Chi3B)的同源性最高,为94%。MrChi3B含有一个糖苷键水解酶家族18的催化域。实时定量PCR (qRT-PCR)和蛋白印迹法(WB)检测结果显示,MrChi3B在罗氏沼虾多个组织中均有表达,但是不同组织中的表达有差异。在蜕皮期之后,其在胃、表皮和肌肉中的表达量显著上升。在胃中其表达量在蜕皮间期达到最高;在表皮和肌肉中其表达量在蜕皮后期达到最高;肠中的表达量在蜕皮前期和蜕皮期有所上升;眼柄期的表达量在所有蜕皮期都偏低。本研究结果为进一步研究几丁质酶的功能提供参考依据。 展开更多
关键词 罗氏沼虾 几丁质酶 基因克隆 蜕皮周期 表达
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罗氏沼虾谷氨酰胺合成酶基因的克隆与表达 被引量：5
3
作者 卢志杰 叶成凯 +5 位作者 Sarath Babu V 张晓君 刘晓丹 赵丽娟 潘淦 林蠡 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期549-562,共14页
谷氨酰胺合成酶(glutamine synthetase, GS)是一种广泛分布在动植物体内的酶,并参与细胞多种代谢调控。在甲壳动物中,GS在能量代谢和渗透压调节过程中起着重要作用。实验克隆了罗氏沼虾GS基因。GS基因cDNA全长1 965 bp,开放读码框(ORF)... 谷氨酰胺合成酶(glutamine synthetase, GS)是一种广泛分布在动植物体内的酶,并参与细胞多种代谢调控。在甲壳动物中,GS在能量代谢和渗透压调节过程中起着重要作用。实验克隆了罗氏沼虾GS基因。GS基因cDNA全长1 965 bp,开放读码框(ORF)为1 086 bp,编码361个氨基酸(aa),分子量大小为40.75 ku,等电点为5.81。进化树分析发现,罗氏沼虾GS基因与凡纳滨对虾、斑节对虾和中国明对虾GS聚为一支,氨基酸相似性达到95%。氨基酸多序列比对分析结果显示,罗氏沼虾GS属于无脊椎动物分支的GSⅡ群,有5个保守区域。实验对罗氏沼虾GS蛋白进行表达并制备了多克隆抗体。采用荧光定量PCR技术(qRT-PCR)和免疫印迹(Western blot)对罗氏沼虾蜕壳前后的不同组织GS表达进行检测。qRT-PCR结果显示,GS基因在所检测的8个组织中均有表达;蜕壳前,其相对表达量顺序为:肝胰脏>肌肉>胃>肠>鳃>心脏>脑>血淋巴。蜕壳后和蜕壳前GS基因在组织中的差异表达比较结果显示,除了在肝胰脏表达下调外,其他7个组织都表达升高,其相对表达量的差异顺序为:脑>鳃>胃>肠>肌肉>心脏>血淋巴。Westernblot结果显示,蜕壳后GS蛋白在鳃和肌肉组织表达量上调,与其mRNA表达一致。此外,罗氏沼虾蜕壳后肝胰脏GS酶的活性和谷氨酰胺的含量下调,而其在鳃、肌肉和血淋巴中上调,结果与其基因表达一致。研究表明,GS基因在不同组织中表达的差异可能和罗氏沼虾的能量代谢、渗透压调节有关。 展开更多
关键词 罗氏沼虾 谷氨酰胺合成酶 组织表达 蜕壳
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壳寡糖对鱼类肠道健康影响的研究进展 被引量：1
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作者 陈志龙 黄垚 +2 位作者 施斐 秦真东 林蠡 《饲料研究》 CAS 北大核心 2023年第20期153-158,共6页
壳寡糖是由N-乙酰-D-葡萄糖胺以β-(1, 4)糖苷键结合而成的带正电荷阳离子碱性低聚糖,是聚合度小于20%、分子量小于3 200 Da、水溶性好、易于吸收的小分子寡糖,可通过物理、化学和酶解法水解制备。与甲壳素和壳聚糖相比,壳寡糖具有更好... 壳寡糖是由N-乙酰-D-葡萄糖胺以β-(1, 4)糖苷键结合而成的带正电荷阳离子碱性低聚糖,是聚合度小于20%、分子量小于3 200 Da、水溶性好、易于吸收的小分子寡糖,可通过物理、化学和酶解法水解制备。与甲壳素和壳聚糖相比,壳寡糖具有更好的生物安全性、生物降解性和生物相容性。壳寡糖作为水产饲料添加剂和免疫刺激剂,具有增强水产动物生长性能、提高免疫功能、抑制肠道病原微生物、降低胆固醇等功能。文章从壳寡糖的制备方法、生物学活性、鱼类肠道健康等方面进行综述,以期为深入研究壳寡糖在水产养殖中的应用提供参考。 展开更多
关键词 壳寡糖 鱼类 肠道健康 制备方法 生物活性 免疫刺激
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贝莱斯芽孢杆菌LG37全基因组测序分析及无机氮代谢相关候选基因的筛选 被引量：1
5
作者 刘广鑫 董晏君 +7 位作者 赵丽娟 邓益琴 程长洪 马红玲 江建军 冯娟 郭志勋 林蠡 《南方水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期57-67,共11页
前期研究发现贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)LG37可高效同化无机氮,但其机理尚不清楚。为解读其高效同化无机氮的机理,结合三代PacBio RS II和二代Illumina HiSeq 2000测序技术对贝莱斯芽孢杆菌LG37进行全基因组测序,在此基础上利... 前期研究发现贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)LG37可高效同化无机氮,但其机理尚不清楚。为解读其高效同化无机氮的机理,结合三代PacBio RS II和二代Illumina HiSeq 2000测序技术对贝莱斯芽孢杆菌LG37进行全基因组测序,在此基础上利用NR、KEGG、eggNOG、GO和CARD数据库进行序列注释、分析,并通过本地Blast+对无机氮代谢相关基因进行挖掘。测序结果表明:1)贝莱斯芽孢杆菌LG37的基因组为3929697 bp的环状染色体,GC含量为46.5%,包含3854个蛋白质编码基因、86个tRNA基因和27个rRNA基因。2)共筛选出无机氮代谢相关候选基因94个,主要涉及编码感应蛋白、转录调控因子、转运蛋白、氧化还原酶和同化酶等,并对这些基因的GO功能进行了注释分析。综上,LG37全基因组测序及无机氮代谢相关基因的分析为芽孢杆菌降低养殖水体中无机氮的研究提供了基因水平数据,为芽孢杆菌微生态制剂降低水体中无机氮的应用研究提供了理论依据。 展开更多
关键词 贝莱斯芽孢杆菌 全基因组测序 无机氮 代谢通路
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弓形革囊星虫组织结构和超微结构观察 被引量：1
6
作者 李凤麟 赵丽娟 +4 位作者 沈海洋 杨光 吴灶和 秦真东 林蠡 《动物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期867-874,共8页
弓形革囊星虫(Phascolosoma arcuatum)是近年兴起的水产养殖品种,目前已形成一定养殖规模,但是其生物学特性相关的研究只有零星报道。本文主要采用石蜡切片苏木精-伊红(H.E)染色和扫描电镜方法对弓形革囊星虫的整体形态和各主要器官的... 弓形革囊星虫(Phascolosoma arcuatum)是近年兴起的水产养殖品种,目前已形成一定养殖规模,但是其生物学特性相关的研究只有零星报道。本文主要采用石蜡切片苏木精-伊红(H.E)染色和扫描电镜方法对弓形革囊星虫的整体形态和各主要器官的结构进行研究。结果表明,弓形革囊星虫主要由吻部和躯干部构成,躯干部有乳突分布;吻部由触手和项器构成,伸长可达躯干部的两倍,具有感光性。其消化系统由口、食道、肠、肛门四个部分构成,不同部分的肌肉组织存在明显差异;收吻肌一端与吻相连,另一端分成4支,分别连于背部两侧(背收吻肌)和腹部两侧(腹收吻肌);食道贴于收吻肌,后连接肠。肠分为肠下回环与肠上回环,肠上回环与肠下回环缠绕盘旋,肠上回环后接直肠。直肠具有盲囊,后连接肛门;两条肾管分布在腹侧。 展开更多
关键词 弓形革囊星虫 组织 形态结构 超微结构
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