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乳腺癌多药耐药细胞MCF-7/ADR中Twist的表达与EMT现象的实验研究 被引量:14
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作者 张飞 史玉荣 +5 位作者 张霖 张斌 魏熙胤 杨毅 席广民 牛瑞芳 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期361-365,共5页
目的:观察乳腺癌多药耐药细胞MCF-7/ADR中Twist表达及上皮-间质转化现象,探讨其与MCF-7/ADR侵袭转移能力增强的相关性。方法:分别以RT-PCR法、链霉亲和素-生物素酶复合物(Strept avidin biotin complex,SABC)免疫组织化学方法和Western ... 目的:观察乳腺癌多药耐药细胞MCF-7/ADR中Twist表达及上皮-间质转化现象,探讨其与MCF-7/ADR侵袭转移能力增强的相关性。方法:分别以RT-PCR法、链霉亲和素-生物素酶复合物(Strept avidin biotin complex,SABC)免疫组织化学方法和Western blot法检测乳腺癌细胞系MCF-7及其多药耐药株MCF-7/ADR中介导EMT发生的转录因子Twist、上皮性标记基因E-钙粘素(E-cadherin)和间质性标记基因N-钙粘素(N-cadherin)表达的改变情况。结果:亲本细胞MCF-7中E-cadherin mRNA的表达和蛋白水平的表达均为阳性,Twist和N-cadherin表达阴性;多药耐药株MCF-7/ADR中E-cadherin mRNA和蛋白表达缺失,而在亲本细胞MCF-7中不表达的Twist和N-cadherin表达阳性。结论:在多药耐药乳腺癌细胞MCF-7/ADR中,其侵袭力增强可能与Twist介导的EMT发生有关。 展开更多
关键词 乳腺癌 多药耐药 EMT 转移
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Girdin蛋白调控恶性胶质瘤细胞凋亡的研究 被引量:9
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作者 王静 丁婷 +3 位作者 刘晓丽 李文良 谷峰 马勇杰 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期733-736,共4页
目的观察抑制恶性胶质瘤LN229细胞中Girdin蛋白的表达对细胞凋亡的影响,并探讨其分子机制。方法利用小RNA干扰(siRNA)技术,沉默LN229细胞中Girdin的表达,得到实验组克隆(siardin/LN229),阴性对照组命名为scr/LN229。采用Weste... 目的观察抑制恶性胶质瘤LN229细胞中Girdin蛋白的表达对细胞凋亡的影响,并探讨其分子机制。方法利用小RNA干扰(siRNA)技术,沉默LN229细胞中Girdin的表达,得到实验组克隆(siardin/LN229),阴性对照组命名为scr/LN229。采用Westemblot技术检测Girdin、细胞色素c(Cyt—C)及Bad蛋白水平的变化。利用增殖实验、噻唑蓝(MTT)比色法检测LN229细胞的存活率;应用流式细胞术检测线粒体释放的Cyt—C量的变化。建立成瘤模型(每组20只),观察Girdin降表达对移植瘤生长情况的影响。结果siRNA技术有效沉默了LN229细胞中Girdin的表达。增殖实验显示siGirdin/LN229细胞增殖能力下降(P〈0.05),至第6天时实验组细胞数为(15.08±1.17)×10^4;对照组为(53.93±6.26)×10^4。MTr实验发现siGirdin/LN229细胞的存活率明显下降(P〈0.05),第5天时实验组为(323.15±57.01)%;对照组为(640.67±59.66)%。流式检测显示siGirdin/LN229细胞Cyt—C含量增加,平均荧光强度为12531.00±1412.98,对照组为183.67±41.55(P〈0.01)。分析Westernblot结果显示,siGirdin/LN229细胞Cyt—C、Bad的相对灰度值分别为3.57±0.43和4.78±1.03,均高于对照组Cyt—C、Bad的表达水平(相对灰度值分别为1.13±0.11、1.78±0.20)。体内实验证实Girdin降表达组肿瘤体积明显小于对照组(P〈0.05),至第7.5周时,siGirdiir/LN229组肿瘤体积为(36.42±2.00)mm3,对照组为(262.42±24.12)mm3。结论Girdin能够调控胶质瘤细胞LN229的凋亡,其调节细胞凋亡的机制可能与Cyt—C从线粒体释放及Bad的表达有关。 展开更多
关键词 胶质瘤 Girdin 脱噬作用
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水通道蛋白4调控恶性胶质瘤细胞凋亡的研究 被引量:3
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作者 丁婷 王静 +3 位作者 刘晓丽 付丽 马勇杰 谷峰 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期730-732,共3页
目的观察抑制胶质瘤细胞LN229中水通道蛋白4(AQP4)的表达对胶质瘤细胞凋亡的影响,探讨其分子机制。方法利用小RNA干扰(siRNA)技术稳定转染恶性胶质瘤细胞株LN229并得到细胞克隆(实验组siAQP4/LN229和对照组scr/LN229),Western... 目的观察抑制胶质瘤细胞LN229中水通道蛋白4(AQP4)的表达对胶质瘤细胞凋亡的影响,探讨其分子机制。方法利用小RNA干扰(siRNA)技术稳定转染恶性胶质瘤细胞株LN229并得到细胞克隆(实验组siAQP4/LN229和对照组scr/LN229),Westernblot技术检测AQP4的蛋白表达;噻唑蓝(MTr)比色法检测细胞的存活率;流式细胞术(FCM)检测细胞色素C(Cyt—C)含量的变化.并用Westernblot检测Cyt—C、bcl-2及Bad的变化。建立裸鼠皮下成瘤模型,接种siAQP4/LN229和ser/LN229两组细胞(每组20只),观察AQP4降表达对移植瘤生长的影响。结果稳定转染LN229筛选出AQP4降表达的稳定克隆(clone2),与对照组比较AQP4的表达明显降低,MTr比色法分别检测在6d内两组细胞的存活率,第6天存活率分别为:scr/LN229组(587.00±4.68)%,siAQP4/N229组(317.00±26.30)%,差异有统计学意义(P〈0.05);应用流式细胞术检测发现Cyt-C的平均荧光强度分别为scr/LN229组(57.20±16.64),siAQP4/LN229组(468.80±46.90),差异有统计学意义(P〈0.05);在蛋白水平上,siAQP4/LN229组Cyt—C含量的相对灰度值(1.62±0.16)较scr/LN229组(0.83±0.29)显著升高,siAQP4/LN229组Bad含量(1.30±0.24)较scr/LN229组(0.56±0.21)显著增加,而siAQP4/LN229组bcl-2含量(0.53±0.03)较scr/LN229组(0.73±0.12)的表达明显降低(P〈0.05)。裸鼠皮下成瘤实验显示第6周时,成瘤平均体积分别为对照组(402.67±34.27)mm3,实验组(65.15±32.12)mm。,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论AQP4能够调控胶质瘤细胞LN229的凋亡,其调节机制可能与Cyt—C的释放及凋亡相关基因Bad和bcl-2有关。 展开更多
关键词 胶质瘤 AQP4 脱噬作用
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PICK-1蛋白在多种肿瘤中的表达及在乳腺癌的临床意义 被引量:1
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作者 张斌 曹文枫 +6 位作者 刘岩雪 张飞 李小莉 林辉 焦振山 曹旭晨 郝希山 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期397-403,共7页
目的:主要探讨乳腺浸润性癌组织中PICK-1蛋白的表达与该肿瘤临床病理、其他生物学指标以及患者预后的相关性。方法:采用组织芯片免疫组织化学染色方法检测496例乳腺浸润性癌组织中PICK-1、ER、PR、HER2/neu、TlMP-1等蛋白的表达情况及... 目的:主要探讨乳腺浸润性癌组织中PICK-1蛋白的表达与该肿瘤临床病理、其他生物学指标以及患者预后的相关性。方法:采用组织芯片免疫组织化学染色方法检测496例乳腺浸润性癌组织中PICK-1、ER、PR、HER2/neu、TlMP-1等蛋白的表达情况及表达间的相关性,以及PICK-1蛋白在不同分子亚型乳腺癌中的表达情况及对预后的影响。结果:PICK-1蛋白在乳腺癌组织中的表达率为27.22%,肿瘤细胞中PICK-1的高表达与淋巴结受累和高组织学分级相关(P均<0.001),且与HER2/neu表达相关(P<0.001),而与雌孕激素受体状态无关(P>0.05),同时该蛋白的表达与TIMP-1表达呈正相关(P=0.002)。PICK-1蛋白表达与患者总生存期缩短相关,分层分析显示PICK-1仅对淋巴结阳性患者的预后有影响,同时对HER2/neu不同状态患者的影响不同,其中对三阴性乳腺癌(HR-HER-)预后影响最大。单因素分析显示乳腺肿瘤直径、组织学分级、淋巴结状态、HR状态、HER2/neu表达、TIMP-1表达、肿瘤细胞表达PICK-1均是有意义的预后指标;但多因素分析显示仅肿瘤直径、组织学分级、淋巴结状态、HER2/neu袁达和PICK-1表达是独立的预后因素。结论:PICK-1蛋白与浸润性乳腺癌的侵袭和转移特性相关,同时有可能作为患者预后不良的指标,尤其是对于三阴性乳腺癌的预后意义更为显著。 展开更多
关键词 PICK-1 乳腺浸润性癌 组织芯片 预后HER2/neu
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乳腺癌脑转移与Slit/Robo信号通路的关系 被引量:2
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作者 谷峰 王冰冰 +2 位作者 李文良 付丽 马勇杰 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期949-950,共2页
乳腺癌患者发生脑转移的几率逐年呈上升趋势,临床上乳腺癌脑转移的机率可高达30%,从诊断乳腺癌到发现脑转移的中位时间为34个月。由于脑转移瘤患者其原发乳腺癌多为晚期,且脑转移瘤大多为实质性,易复发,如果未得到及时的治疗,其... 乳腺癌患者发生脑转移的几率逐年呈上升趋势,临床上乳腺癌脑转移的机率可高达30%,从诊断乳腺癌到发现脑转移的中位时间为34个月。由于脑转移瘤患者其原发乳腺癌多为晚期,且脑转移瘤大多为实质性,易复发,如果未得到及时的治疗,其自然病程是进展性神经恶化,平均生存期为1~2个月,因此乳腺癌脑转移成为促进乳腺癌患者死亡的一个重要因素。 展开更多
关键词 乳腺癌患者 脑转移瘤 信号通路 ROBO SLIT 原发乳腺癌 平均生存期 中位时间
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