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土槿皮乙酸诱导脑胶质瘤细胞株U87阻滞于M期并发生凋亡 被引量:5
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作者 何露 温创宇 +3 位作者 王慧慧 杨湘玲 刘焕亮 李中 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期1574-1578,共5页
目的:通过研究土槿皮乙酸对脑胶质瘤细胞株U87增殖与凋亡的影响,探讨土槿皮乙酸对脑胶质瘤的潜在应用价值。方法:用不同浓度土槿皮乙酸处理U87细胞,并于不同时点观察细胞形态改变;采用MTS法对U87细胞进行细胞活力测定;采用流式细胞术和W... 目的:通过研究土槿皮乙酸对脑胶质瘤细胞株U87增殖与凋亡的影响,探讨土槿皮乙酸对脑胶质瘤的潜在应用价值。方法:用不同浓度土槿皮乙酸处理U87细胞,并于不同时点观察细胞形态改变;采用MTS法对U87细胞进行细胞活力测定;采用流式细胞术和Western blot法检测土槿皮乙酸对细胞周期的影响;采用Annexin V/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡;利用Western blot法检测caspase通路相关蛋白(cleaved PARP、caspase-3、procaspase-9和caspase-8)的变化情况。结果:土槿皮乙酸明显抑制脑胶质瘤U87细胞的活力,能使细胞阻滞于M期,并通过caspase通路诱导细胞发生凋亡。结论:土槿皮乙酸能使脑胶质瘤细胞株U87细胞阻滞于M期,并诱导其凋亡。 展开更多
关键词 脑胶质瘤 土槿皮乙酸 细胞周期 细胞活力 细胞凋亡
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粪便中SOX21基因甲基化检测在结直肠癌诊断中应用价值 被引量:6
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作者 刘相林 文加玲 +6 位作者 牛凤 赵荣淞 齐岩 傅新晖 赵霞 邹鸿志 王农荣 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 北大核心 2018年第24期1710-1715,共6页
目的 Y染色体性别决定区域相关高迁移率族盒21基因(sex-determining regio of Y chromosome related high-mobility-group box 21,SOX21)在结直肠癌组织中发生异常甲基化,然而该基因在结肠癌粪便标本中是否发生异常甲基化及其意义尚不... 目的 Y染色体性别决定区域相关高迁移率族盒21基因(sex-determining regio of Y chromosome related high-mobility-group box 21,SOX21)在结直肠癌组织中发生异常甲基化,然而该基因在结肠癌粪便标本中是否发生异常甲基化及其意义尚不清楚。本研究检测组织和粪便标本中SOX21基因启动子区甲基化水平,旨在评估甲基化的SOX21基因作为结直肠癌粪便基因检测标志物价值。方法选取2014-05-20-2015-02-26中山大学附属第六医院胃肠外科收治的105例结直肠癌患者的癌与癌旁正常组织,分别组成结直肠癌组和癌旁正常组。以及2014-04-03-2016-10-10收治的240例患者粪便标本,其中结直肠癌80例为结直肠癌组,腺瘤77例为腺癌组,正常83例为正常组。采用定量甲基化特异性聚合酶链式反应(quantitative methylation specific polymerase chain reaction,qMSP)技术检测SOX21基因甲基化水平,计算敏感性、特异性和ROC曲线下面积,并分析SOX21基因甲基化与结直肠癌患者临床病理特征之间关系。结果组织标本结果显示,肿瘤组织SOX21基因甲基化水平高于其对应癌旁组织,Z=8.679,P<0.001;当甲基化的SOX21特异性为97.1%(102/105)时,结直肠癌检出率为84.8%(89/105);ROC曲线下面积为0.930,95%CI为0.889~0.971;SOX21甲基化与年龄、性别、部位、TNM分期、肿瘤大小和分化程度无关联,均P>0.05。粪便标本结果显示,结直肠癌组和腺瘤组SOX21甲基化水平高于正常组,P<0.05。当甲基化的SOX21特异性为97.6%(81/83)时,对结直肠癌敏感性为80.0%(64/80),对腺瘤敏感性为33.8%(26/77);SOX21检测结直肠癌的ROC曲线下面积为0.926,95%CI为0.885~0.968,检测腺瘤的ROC曲线下面积为0.667,95%CI为0.583~0.751;SOX21基因对肿瘤检出率与肿瘤近、远端发生位置有关联,远端肿瘤检出率高,χ2=17.372,P<0.001,但与年龄、性别、TNM分期、肿瘤大小和分化程度无关联,P>0.05。结论在结直肠癌组织和粪便标本中,SOX21基� 展开更多
关键词 结直肠癌 DNA甲基化 Y染色体性别决定区域相关高迁移率族盒21基因 粪便
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错配修复缺陷对贝伐珠单抗治疗转移性结直肠癌的预后影响 被引量:5
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作者 凌家瑜 李唯伟 +6 位作者 张剑威 蔡月 胡华斌 黄美近 康亮 任东林 邓艳红 《肿瘤预防与治疗》 2019年第9期807-815,共9页
目的:探讨错配修复缺陷对贝伐珠单抗治疗转移性结直肠癌的预后影响。方法:回顾性分析2012年2月至2015年2月在中山大学附属第六医院应用贝伐珠单抗联合化疗和单纯化疗治疗转移性结直肠癌的患者资料,包括临床病理特征和随访信息,应用Kapla... 目的:探讨错配修复缺陷对贝伐珠单抗治疗转移性结直肠癌的预后影响。方法:回顾性分析2012年2月至2015年2月在中山大学附属第六医院应用贝伐珠单抗联合化疗和单纯化疗治疗转移性结直肠癌的患者资料,包括临床病理特征和随访信息,应用Kaplan-Meier生存曲线研究总生存时间(overall survival,OS)和临床病理特征的关系,通过多因素COX模型评估对贝伐珠单抗治疗转移性结直肠癌的预后影响因子。结果:纳入163例转移性结直肠癌患者,贝伐珠单抗联合化疗组95例,单纯化疗组68例。队列中123例患者检测错配修复(mismatch repair,MMR)状态,其中13例伴有错配修复缺陷(MMR-deficient,dMMR)。贝伐珠单抗联合化疗组,dMMR患者和无错配修复缺陷(mismatch repair-proficient,pMMR)患者的中位OS分别为41.0月和24.9月(HR=0.12, 95%CI:0.017~0.89,P=0.001),而单纯化疗组则出现相反的趋势,dMMR患者和pMMR患者中位OS分别为8.8月和19.7月(HR=11.26,95%CI:2.7~48.0,P<0.001)。多因素COX模型纳入年龄、CEA值、KRAS基因、MMR状态和治疗分组,MMR状态*治疗分组交互项是本队列晚期结直肠癌患者OS的独立影响因素(Pinteraction=0.037)。结论:与单纯化疗相比,dMMR的患者应用贝伐珠单抗联合化疗治疗转移性结直肠癌的患者总生存时间延长。 展开更多
关键词 贝伐珠单抗 转移性结直肠癌 总生存时间 错配修复
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α2-巨球蛋白减轻X射线所致人骨髓间充质干细胞成骨分化障碍 被引量:3
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作者 刘仰 孔祥波 +3 位作者 李洁 陈雪英 温创宇 房思炼 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期2032-2037,共6页
目的:初步探讨α2-巨球蛋白(α2M)对X射线导致的人骨髓间充质干细胞(h BMMSCs)成骨分化障碍的作用。方法:体外培养h BMMSCs,取第4代细胞经8 Gy X射线照射后,进行成骨诱导并以0.5和1.0 g/Lα2M分别作用于照射后的h BMMSCs。成骨诱导的第... 目的:初步探讨α2-巨球蛋白(α2M)对X射线导致的人骨髓间充质干细胞(h BMMSCs)成骨分化障碍的作用。方法:体外培养h BMMSCs,取第4代细胞经8 Gy X射线照射后,进行成骨诱导并以0.5和1.0 g/Lα2M分别作用于照射后的h BMMSCs。成骨诱导的第7天检测碱性磷酸酶(ALP)活性,RT-q PCR法检测Runt相关转录因子2(RUNX2)的mRNA表达;成骨诱导的第14天采用Western blot检测骨甘氨酸(OGN)的蛋白表达;成骨诱导的第21天采用茜素红染色法检测钙结节的形成情况。此外,正常培养的h BMMSCs于8 Gy X射线照射后加入α2M作用24 h,提取细胞检测超氧化物歧化酶(SOD)活力,Western blot检测含锰超氧化物歧化酶(Mn SOD)的蛋白表达。结果:h BMMSCs经8 Gy X射线照射后给予0.5和1.0 g/Lα2M处理,与未加入α2M的单独照射组比较,ALP活性、RUNX2的mRNA表达、OGN和Mn SOD的蛋白表达及SOD活力均升高,钙结节形成增多。结论:α2M可明显提高放射损伤后h BMMSCs的成骨分化能力,上调SOD活力和Mn SOD的蛋白表达水平。 展开更多
关键词 放射损伤 Α2-巨球蛋白 人骨髓间充质干细胞 成骨分化
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ZZ domain和APEX2融合蛋白的制备和应用
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作者 黄润庆 傅炀 邓艳红 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第7期639-644,共6页
目的基于免疫球蛋白结合结构域ZZ domain和过氧化物酶APEX2的融合表达,开发一种可以特异性结合免疫球蛋白且具有过氧化氢酶催化活性的新型免疫亲和检测试剂。方法将ZZ domain和APEX2融合表达蛋白——ZZ-APEX2在BL21(DE3)大肠杆菌进行大... 目的基于免疫球蛋白结合结构域ZZ domain和过氧化物酶APEX2的融合表达,开发一种可以特异性结合免疫球蛋白且具有过氧化氢酶催化活性的新型免疫亲和检测试剂。方法将ZZ domain和APEX2融合表达蛋白——ZZ-APEX2在BL21(DE3)大肠杆菌进行大量表达,并利用IBA公司的strep-Tactin纯化系统进行纯化。通过点印迹和Western blotting检测ZZ-APEX2催化过氧化氢分解并启动鲁米诺发光反应的能力。通过愈创木酚比色法测定ZZ-APEX2的过氧化氢酶活性。结果ZZ-APEX2可以在大肠杆菌中可溶性表达,而且可以通过strep-Tactin系统纯化获取。ZZ-APEX2在室温保存48 h和在-20℃保存2个月均保持着稳定的过氧化氢酶活性,并可以用于Western blotting实验。通过双倒数法作图发现,与常规羊抗兔IgG-HRP和羊抗鼠IgG-HRP二抗相比,ZZ-APEX2具有更大的Kcat(s;)值。结论成功开发了一种分子量小、特异性好、容易大量生产、无需实验动物和繁琐的HRP蛋白提纯步骤的新型免疫亲和检测试剂。 展开更多
关键词 ZZ domain APEX2 免疫亲和检测试剂
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代谢手术前后肥胖患者25羟基维生素D与甲状旁腺激素的变化
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作者 曹昕宇 王喆 +5 位作者 张念荣 张雯 周彪 聂云韬 王思奇 孟化 《中华临床营养杂志》 CAS CSCD 2022年第4期235-242,共8页
目的观察对比代谢手术前后肥胖患者25羟基维生素D[25-(OH)D]、甲状旁腺激素(PTH)等相关指标的变化情况,分析术后近期(3~6个月)及术后远期(12~24个月)这一动态平衡的改变。方法选取2018年1月至2020年1月在中日友好医院代谢减重中心接受... 目的观察对比代谢手术前后肥胖患者25羟基维生素D[25-(OH)D]、甲状旁腺激素(PTH)等相关指标的变化情况,分析术后近期(3~6个月)及术后远期(12~24个月)这一动态平衡的改变。方法选取2018年1月至2020年1月在中日友好医院代谢减重中心接受过代谢手术并在术后24个月进行过复查的肥胖患者,收集患者身高、体重、三围等体成分相关资料及空腹血糖、糖化血红蛋白、25-(OH)D、PTH、血清总钙、血清无机磷等实验室指标。并计算体重指数、腰臀比等。采用重复测量方差分析比较不同时间点患者的人体测量学指标变化情况。采用独立样本t检验比较两组间的参数差异。根据正态性采用单因素方差分析或Kruskal-Wallis检验比较多组间的参数差异。结果共纳入96例患者(男性33例,女性63例),其中合并糖尿病患者49例。76例(79.17%)术前存在25-(OH)D缺乏(<20μg/L),16例(16.67%)患者存在25-(OH)D不足(≥20μg/L且<30μg/L);23例(23.96%)患者存在术前PTH水平升高(>70 ng/L)。手术后,术后近期25-(OH)D水平较基线期上升(P=0.001),但在远期较近期(P<0.01)及术前下降(P=0.023);术后远期的PTH水平较近期有所上升(P=0.012),术后远期,11例患者的PTH水平高于正常值(>70 ng/L);术后血清无机磷水平在近、远期均较术前有所升高(均为P<0.01)。结论代谢手术患者术前的25-(OH)D水平总体不足,尽管在术后短期内有所上升,远期依然低于术前水平。部分患者在术后远期存在PTH继发性升高。代谢手术后的患者需要长期的术后营养补充和全面综合的营养管理。 展开更多
关键词 肥胖 代谢手术 25羟基维生素D 甲状旁腺激素
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利用TCGA数据库分析miR-196b在结直肠癌患者中的临床表达特征并探索miR-196b的体外抗5-FU作用 被引量:7
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作者 车佳 黄兰兰 +2 位作者 娄琼 杨湘玲 刘焕亮 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期152-157,共6页
目的:研究微小RNA(miR)-196b在结直肠癌患者中的表达及其临床意义,探讨过表达miR-196b的结直肠癌细胞对5-氟尿嘧啶(5-FU)的敏感性。方法:在癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)公共数据库下载结直肠癌患者miRNA测序数据及其... 目的:研究微小RNA(miR)-196b在结直肠癌患者中的表达及其临床意义,探讨过表达miR-196b的结直肠癌细胞对5-氟尿嘧啶(5-FU)的敏感性。方法:在癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)公共数据库下载结直肠癌患者miRNA测序数据及其对应的临床病理资料,运用SPSS 17.0分析miR-196b在结直肠癌患者中的表达水平以及临床特征;采用瞬时转染的方法在人结直肠癌HCT116细胞中过表达miR-196b,并用MTS法分析过表达miR-196b的细胞对5-FU药物敏感性的变化。结果:miR-196b高表达与结直肠癌患者淋巴结转移及TNM分期相关(P<0.05),与年龄和性别等无相关性。淋巴结转移和远处转移是直肠癌患者生存的独立影响因子(P<0.05),miR-196b的表达水平与患者生存状况无关。过表达miR-196b的HCT116细胞在不同浓度的5-FU作用下,细胞存活率均明显高于对照组(P<0.05)。结论:miR-196b可能是结直肠癌患者肿瘤分期和淋巴结转移的分子标志物,并可降低结直肠癌细胞对5-FU的敏感性。 展开更多
关键词 结直肠癌 癌症基因组图谱 微小RNA-196b 5-氟尿嘧啶 抗药性
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