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胰十二指肠切除术后并发症的多学科诊疗
1
作者 杜飞 郑希彦 +6 位作者 王少平 庄鹏 王晓玲 李浩 古东冬 周红 史宪杰 《亚洲外科手术病例研究》 2021年第4期57-64,共8页
目的:探讨胰十二指肠切除术后并发症的多学科治疗。方法:回顾性分析中山大学附属第八医院2021年3月收治的胰十二指肠术后患者的临床资料,该患者术后出现胰漏、乳糜漏、切口裂开感染、多重耐药感染合并感染性休克。结果:该患者外院行胰... 目的:探讨胰十二指肠切除术后并发症的多学科治疗。方法:回顾性分析中山大学附属第八医院2021年3月收治的胰十二指肠术后患者的临床资料,该患者术后出现胰漏、乳糜漏、切口裂开感染、多重耐药感染合并感染性休克。结果:该患者外院行胰十二指肠切除术,我院经积极抗感染、切口负压引流、肠内外营养支持,辅以抑酶、补充人血白蛋白、纠正水电解质及酸碱失衡,最终好转出院。结论:胰十二指肠切除术后并发症处理棘手,需要多学科协作治疗。 展开更多
关键词 胰十二指肠切除术 并发症 多学科诊疗
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CRISPR/Cas9系统靶向沉默Fas基因在肝衰竭细胞凋亡机制中的作用 被引量：2
2
作者 庄鹏 李志莹 罗敏虹 《热带医学杂志》 CAS 2019年第4期434-437,共4页
目的探讨利用CRISPR/Cas9敲除系统沉默Fas基因介导的细胞凋亡在肝衰竭发生机制的作用。方法构建靶向Fas基因的CRISPR/Cas系统(pX330-Fas-G1)质粒并转染HepG2细胞(设非转染细胞HepG2为对照组),提取DNA后T7E1酶切法检测突变体;Western blo... 目的探讨利用CRISPR/Cas9敲除系统沉默Fas基因介导的细胞凋亡在肝衰竭发生机制的作用。方法构建靶向Fas基因的CRISPR/Cas系统(pX330-Fas-G1)质粒并转染HepG2细胞(设非转染细胞HepG2为对照组),提取DNA后T7E1酶切法检测突变体;Western blotting检测Fas蛋白的表达。刀豆素A药物处理后MTT法检测细胞增殖,克隆增生法检测细胞增生,AnnexinV/PI荧光双染分析细胞凋亡情况。结果 T7E1酶切分析显示,pX330-Fas-G1质粒的Guide RNA在Fas基因组上产生了有效切割,切割效率为50%;同时Western blotting检测结果显示,pX330-Fas-G1质粒转染至HepG2细胞后,与空白质粒pX330-GFP组比较,Fas蛋白的表达降低,差异有统计学意义(P<0.01)。经刀豆素A药物诱导细胞凋亡后,MTT法测定pX330-Fas-G1质粒转染的HepG2细胞组活力值为(68.0±5.0)%,高于非转染细胞组的(51.5±5.8)%,差异有统计学意义(P<0.05);克隆增生法检测结果显示,pX330-Fas-G1质粒转染的HepG2细胞组在细胞克隆形成数量为(128.8±5.1),高于非转染组的(100.0±9.3),差异有统计学意义(P<0.05)。给予刀豆素A药物处理诱导细胞凋亡后,通过Annexin V和PI双染色,采用流式细胞技术检测显示,经pX330-Fas-G1质粒转染后的细胞组有10.0%的细胞为凋亡细胞,低于对照组细胞的33.3%,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 CRISPR/Cas9系统可通过下调Fas基因的表达来抑制细胞凋亡的进展,为临床开展急性肝衰竭的基因治疗提供理论依据和技术支持。 展开更多
关键词 CRISPR/Cas9 FAS 凋亡 肝衰竭
原文传递
慢性乙型肝炎病毒感染免疫耐受期的研究进展
3
作者 曾繁敬 庄鹏 《现代消化及介入诊疗》 2022年第12期1602-1605,共4页
乙型肝炎病毒感染是全球最常见的肝脏疾病之一。近年来,国内外指南关于慢性乙型肝炎免疫耐受期的定义存在一些争议,虽然国内外指南不推荐对慢性乙型肝炎免疫耐受期患者抗病毒治疗,但近年来有多项研究提示免疫耐受期患者存在肝脏炎性损... 乙型肝炎病毒感染是全球最常见的肝脏疾病之一。近年来,国内外指南关于慢性乙型肝炎免疫耐受期的定义存在一些争议,虽然国内外指南不推荐对慢性乙型肝炎免疫耐受期患者抗病毒治疗,但近年来有多项研究提示免疫耐受期患者存在肝脏炎性损伤和纤维化,且有肝癌或死亡高风险,因此多位学者倾向于对免疫耐受期患者积极规范抗病毒治疗。最近流行病学调查发现,我国慢性乙型肝炎免疫耐受期人群基数庞大。本文对慢性乙型肝炎病毒感染免疫耐受期的定义、是否抗病毒治疗、肝纤维化评估的无创检查指标进行综述,以提高对慢性乙型肝炎免疫耐受期的认识,为未来慢性乙型肝炎的临床诊断、治疗和预后研究奠定基础。 展开更多
关键词 乙型肝炎 免疫耐受 抗病毒治疗 无创检查指标
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Fas通过抑制Wnt/β-catenin信号通路激活调控肝癌细胞增殖 被引量：1
4
作者 曾繁敬 李志莹 +3 位作者 伍芷菁 张文苑 李浩 庄鹏 《热带医学杂志》 CAS 2023年第6期733-738,759,共7页
目的探究肿瘤坏死因子受体超族成员6(Fas)调控肝癌细胞株增殖的潜在分子机制。方法收集正常肝细胞LO2和肝癌细胞株Hep3B、Huh7、PLC/PRF/5、Bel-7402、SMMC-7721、HepG2和SK-hep1,实时荧光定量PCR法检测Fas基因表达,运用癌症基因组图谱(... 目的探究肿瘤坏死因子受体超族成员6(Fas)调控肝癌细胞株增殖的潜在分子机制。方法收集正常肝细胞LO2和肝癌细胞株Hep3B、Huh7、PLC/PRF/5、Bel-7402、SMMC-7721、HepG2和SK-hep1,实时荧光定量PCR法检测Fas基因表达,运用癌症基因组图谱(TCGA)数据库分析Fas基因表达与肝癌的关系,设计特异性靶向Fas的siRNA,敲低肝癌细胞中Fas基因的表达,通过噻唑蓝(MTT)实验和克隆形成实验检测细胞增殖能力,用流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期分布,双荧光素酶实验检测β-连环蛋白(β-catenin)介导的T细胞因子(TCF)/淋巴增强子(LEF)转录活性,蛋白质印迹法检测β-catenin蛋白表达水平,实时荧光定量PCR法检测无翅型MMTV整合位点家族成员(Wnt)/β-catenin信号通路下游靶基因八聚体结合转录因子3/4(Oct3/4);G1/S-特异性周期蛋白-D1(CCND1);血管内皮生长因子(VEGF);B细胞特异性莫洛氏鼠白血病病毒插入位点-1(Bmi)的表达。结果TCGA肝癌样品中Fas基因表达谱结果显示,肝癌组织Fas mRNA水平显著低于正常肝组织,差异有统计学意义(P<0.001);同时随着肝癌病程的进展Fas基因的表达逐渐下调,且Fas高表达患者的生存率显著高于低表达患者,差异有统计学意义(P<0.05);肝癌细胞Hep3B、Huh7、PLC/PRF/5、Bel-7402、SMMC-7721中Fas基因表达显著低于正常肝细胞LO2,差异均有统计学意义(t=19.20、19.16、19.20、12.81、7.58,P均<0.05)。与siRNA阴性对照(si-NC)组比较,肝癌细胞HepG2和SMMC-7721转染si-Fas后(si-Fas组)Fas基因表达显著下调,差异均有统计学意义(t=25.20、42.63,P均<0.05);克隆形成明显增多,差异均有统计学意义(t=3.97、3.76,P均<0.05);凋亡率显著降低,差异均有统计学意义(t=4.76、16.54,P均<0.05);G2/M细胞周期占比更低,差异均有统计学意义(t=11.31、4.09,P均<0.05)。机制研究发现,与si-NC组比较,HepG2和SMMC-7721细胞si-Fas组中Wnt/β-catenin信号通路核心蛋白β-catenin蛋白表达上 展开更多
关键词 FAS WNT/Β-CATENIN信号通路 肝癌
原文传递
CRISPR/Cas9沉默Fas可抑制急性肝衰竭细胞线粒体自噬及减轻线粒体损伤 被引量：1
5
作者 伍芷菁 张文苑 +1 位作者 许智淇 庄鹏 《新发传染病电子杂志》 2023年第3期7-11,共5页
目的 探讨凋亡相关因子(Fas/CD95)在急性肝衰竭疾病进展中的作用及机制。方法 构建刀豆蛋白A诱导的急性肝衰竭小鼠动物模型,通过透射电子显微镜及免疫印迹检测了急性肝衰竭肝细胞内的线粒体自噬发生;在小鼠尾静脉输注靶向Fas基因的CRISP... 目的 探讨凋亡相关因子(Fas/CD95)在急性肝衰竭疾病进展中的作用及机制。方法 构建刀豆蛋白A诱导的急性肝衰竭小鼠动物模型,通过透射电子显微镜及免疫印迹检测了急性肝衰竭肝细胞内的线粒体自噬发生;在小鼠尾静脉输注靶向Fas基因的CRISPR/Cas9质粒,随后予以刀豆蛋白A诱发急性肝衰竭,检测小鼠肝组织急性损伤情况及肝细胞内线粒体自噬及线粒体损伤的变化,同时体外转染靶向Fas的CRISPR/Cas质粒到细胞内,刀豆蛋白A诱导HepG2肝细胞损伤,验证Fas敲除后对线粒体自噬和线粒体损伤的影响。结果 刀豆蛋白A可诱导小鼠急性肝衰竭,透射电镜观察发现肝细胞中发生了线粒体自噬,肝细胞内p62蛋白水平降低,PINK1/Parkin的蛋白上调,Fas的表达上调;小鼠肝组织和体外肝细胞先予以PX330Fas质粒转染,再予以刀豆蛋白A诱导肝损伤后,LC3II/LC3I表达比值减低,p62蛋白的表达得到恢复,线粒体蛋白COX4I1和线粒体DNA含量的水平下降,Fas表达下调,与转染空白质粒的对照组相比,差异均有统计学意义。结论 CRISPR/Cas9沉默Fas抑制急性肝衰竭进展及肝细胞内线粒体自噬的发生和线粒体损伤,从而减轻急性肝衰竭的细胞死亡,为临床开展急性肝衰竭的新治疗策略提供了新依据和新靶点。 展开更多
关键词 急性肝衰竭 线粒体 自噬 死亡受体Fas/CD95 线粒体损伤
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