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大鼠脂肪干细胞生物学特性的研究 被引量：13
1
作者 江丽 朱家恺 +2 位作者 刘小林 项鹏 余伟华 《中华显微外科杂志》 CSCD 北大核心 2007年第3期189-192,I0002,共5页
目的研究大鼠脂肪干细胞的生物学特性,为外周神经组织工程应用提供实验基础。方法从F344大鼠的脂肪组织分离得到脂肪干细胞,体外培养并扩增,倒置相差显微镜观察其形态、绘制生长曲线研究增殖能力,流式细胞仪检测表面标志,核型分析研究... 目的研究大鼠脂肪干细胞的生物学特性,为外周神经组织工程应用提供实验基础。方法从F344大鼠的脂肪组织分离得到脂肪干细胞,体外培养并扩增,倒置相差显微镜观察其形态、绘制生长曲线研究增殖能力,流式细胞仪检测表面标志,核型分析研究遗传学性能,最后以5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)进行体外标记。结果脂肪干细胞形态以梭形为主,CD11b、CD45、CD49d、CD80、CD86表达阴性,MHC I、MHCⅡ表达弱阳性,CD29、CD44、CD54的表达阳性。第11代以前的脂肪干细胞有较强的活力和增殖能力,体外培养至第10代,其细胞仍稳定为二倍体核型。BrdU可标记其核。结论脂肪干细胞具有较强的自我更新能力,其形态和表面标志均类似大鼠骨髓间充质干细胞。 展开更多
关键词 脂肪干细胞 细胞培养 大鼠
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血管内皮生长因子基因多态性与复发性自然流产的相关性研究 被引量：11
2
作者 李珠玉 游泽山 +4 位作者 苏秀梅 张秀明 李再仪 吴再归 江丽 《新医学》 2010年第9期578-581,共4页
目的:探讨血管内皮生长因子基因多态性(VEGF-1154 G/A)与中国南方妇女复发性自然流产(RSA)的相关性。方法:采用等位基因特异性扩增-聚合酶链反应法,检测271例RSA患者(RSA组)和250名健康妇女VEGF-1154 G/A多态位点基因型频率分布情况。结... 目的:探讨血管内皮生长因子基因多态性(VEGF-1154 G/A)与中国南方妇女复发性自然流产(RSA)的相关性。方法:采用等位基因特异性扩增-聚合酶链反应法,检测271例RSA患者(RSA组)和250名健康妇女VEGF-1154 G/A多态位点基因型频率分布情况。结果:RSA组和对照组VEGF-1154 G/A的3种基因型频率(GA、GG、AA)分别为39.5%、55.0%、5.5%和30.0%、67.2%、2.8%,两组3种基因型频率分布不相同,比较差异有统计学意义(P<0.05);RSA组和对照组等位基因频率(G、A)分别为74.7%、25.3%和82.2%、17.8%,携带A等位基因发生RSA的风险大于携带G等位基因(OR=1.562,95%CI1.157～2.109,P<0.01)。结论:VEGF-1154G/A多态性与中国南方妇女RSA的发病风险相关,携带A等位基因的孕妇发生RSA的危险性较高。 展开更多
关键词 血管内皮生长因子 基因多态性 复发性自然流产
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种植脂肪干细胞的去细胞神经修复坐骨神经缺损的实验研究 被引量：8
3
作者 江丽 朱家恺 +5 位作者 刘小林 牛晓锋 周丽华 梁英杰 戚剑 胡军 《中华显微外科杂志》 CSCD 北大核心 2008年第5期350-353,I0007,共5页
目的探讨脂肪干细胞（ADSCs）应用于组织工程化外周神经修复大鼠坐骨神经缺损的效果。方法48只体重200～220g的雌性F344大鼠随机分成6组，每组8只，分别用下面6种不同的实验组修复15mm长坐骨神经缺损。A组：种植ADSCs的去细胞神经；B组... 目的探讨脂肪干细胞（ADSCs）应用于组织工程化外周神经修复大鼠坐骨神经缺损的效果。方法48只体重200～220g的雌性F344大鼠随机分成6组，每组8只，分别用下面6种不同的实验组修复15mm长坐骨神经缺损。A组：种植ADSCs的去细胞神经；B组：种植诱导ADSCs的去细胞神经；C组：种植许旺细胞（SOs）的去细胞神经；D组：去细胞神经；E组：自体神经移植；F组：空白对照。通过神经电生理检测、荧光金逆行示踪、组织学检测和坐骨神经功能指数测定评价各组修复神经缺损的效果。结果术后12周，F组未见桥接物，A组和B组的神经电生理等各项指标均分别优于D组（P〈0．05或P〈0．01），与C组和E组间差异无统计学意义（P〉0．05）。结论初步结果显示ADSCs及诱导后ADSCs作为种子细胞，与去细胞神经构建的组织工程化外周神经移植体，能够修复外周神经缺损。 展开更多
关键词 脂肪干细胞 许旺细胞 组织工程 神经移植 显微外科
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复合异体脂肪干细胞的异种去细胞神经修复猕猴周围神经缺损 被引量：8
4
作者 黄喜军 朱庆棠 +6 位作者 江丽 郑灿镔 朱昭炜 路庆森 许银峰 顾立强 刘小林 《中华显微外科杂志》 CSCD 北大核心 2014年第1期48-55,共8页
目的 探讨复合异体脂肪干细胞（ADSCs）的去细胞异种神经修复猕猴桡神经缺损的效果.方法 于2010年3月至2012年5月,从雄性猕猴腘窝脂肪组织中分离出ADSCs,采用显微注射法将ADSCs种植在经化学萃取的去细胞猪胫神经上.用10只健康雌性猕猴,... 目的 探讨复合异体脂肪干细胞（ADSCs）的去细胞异种神经修复猕猴桡神经缺损的效果.方法 于2010年3月至2012年5月,从雄性猕猴腘窝脂肪组织中分离出ADSCs,采用显微注射法将ADSCs种植在经化学萃取的去细胞猪胫神经上.用10只健康雌性猕猴,制成15侧上臂桡神经25 mm缺损模型,分为A、B、C三组（5侧/组）,分别用复合了雄性猕猴ADSCs的去细胞猪胫神经、未复合ADSCs的去细胞猪胫神经、自体神经进行修复.术后5个月进行伸腕功能评定及电生理学检测,并取材作神经移植体和伸腕肌组织学检查. 结果 术后5个月A、B、C三组伸腕角度恢复率分别为（80.53±15.30）％、（69.06±7.02）％和（99.91±22.16）％,电生理学检测显示桡神经恢复电传导功能,组织学检查显示移植体内有再生神经纤维通过,各项检测指标显示A组的修复效果优于B组,而C组则优于A组和B组,但各组的差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 去细胞猪胫神经能有效修复猕猴25 mm长的桡神经缺损,复合异体ADSCs的去细胞猪胫神经其修复效果可能更优. 展开更多
关键词 去细胞神经 脂肪干细胞 异种移植 猕猴
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去细胞异种神经复合同种异体脂肪干细胞修复猕猴周围神经缺损的免疫反应研究 被引量：7
5
作者 黄喜军 朱庆棠 +6 位作者 江丽 郑灿镔 朱昭炜 路庆森 许银峰 顾立强 刘小林 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期993-1000,共8页
目的观察去细胞异种神经复合同种异体脂肪干细胞修复猕猴周围神经缺损后的全身及局部免疫排斥反应,评价该修复材料的安全性。方法健康成年雄性长白猪1只,体重48 kg,取胫神经制备去细胞异种神经;健康成年雄性猕猴1只,体重4.5 kg,分离培... 目的观察去细胞异种神经复合同种异体脂肪干细胞修复猕猴周围神经缺损后的全身及局部免疫排斥反应,评价该修复材料的安全性。方法健康成年雄性长白猪1只,体重48 kg,取胫神经制备去细胞异种神经;健康成年雄性猕猴1只,体重4.5 kg,分离培养脂肪干细胞;健康成年雌性猕猴10只,体重3～5 kg,制备25 mm长桡神经缺损动物模型,随机分为复合细胞组和无细胞组(n=5),前者采用去细胞异种神经复合第3代脂肪干细胞移植修复,后者采用去细胞异种神经移植修复。于术前及术后14、60、90 d抽取外周静脉血行淋巴细胞分析;术后5个月取材观察移植物组织免疫反应和神经再生情况,并与自体神经移植组作比较。结果复合细胞组与无细胞组术前及术后各时间点外周静脉血淋巴细胞数量、T淋巴细胞百分率及其数量、CD8+T淋巴细胞百分率、CD4+/CD8+T淋巴细胞比值间比较,差异均无统计学意义(P>0.05);术后14 d,复合细胞组CD4+T淋巴细胞百分率低于其余时间点,差异有统计学意义(P<0.05);同一时间点两组间比较,除术后14 d复合细胞组CD4+T淋巴细胞百分率低于无细胞组,差异有统计学意义(P<0.05)外,其余各时间点各指标组间比较差异均无统计学意义(P>0.05)。术后5个月,去细胞异种神经与周围组织有轻度粘连,神经外膜较自体神经厚,未见组织坏死、纤维瘢痕形成,移植物内见再生神经纤维,复合细胞组、无细胞组均有稀疏的CD3+、CD4+、CD8+、CD68+、CD163+T淋巴细胞散在分布,细胞浸润情况与自体神经移植组类似。结论去细胞异种神经移植修复猕猴周围神经缺损后未产生全身及局部免疫排斥反应;复合同种异体脂肪干细胞移植后也未发现免疫排斥反应,且术后早期可能抑制CD4+T淋巴细胞增殖。 展开更多
关键词 去细胞异种神经 脂肪干细胞 异种移植 同种异体移植 免疫反应 猕猴 猪
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原位交联透明质酸水凝胶的制备及体外生物相容性研究 被引量：7
6
作者 梁嘉碧 李俊 +4 位作者 汪婷 梁雨虹 邹学农 周光前 周治宇 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期767-771,共5页
目的制备原位交联透明质酸水凝胶,并初步评价其体外生物相容性。方法采用醇钠-酰氯法将丙烯酰氯与聚乙二醇反应,制得交联剂聚乙二醇二丙烯酸酯（polyethylene glycol acrylate,PEGDA）;采用傅里叶变换红外光谱仪和核磁共振光谱仪检测其... 目的制备原位交联透明质酸水凝胶,并初步评价其体外生物相容性。方法采用醇钠-酰氯法将丙烯酰氯与聚乙二醇反应,制得交联剂聚乙二醇二丙烯酸酯（polyethylene glycol acrylate,PEGDA）;采用傅里叶变换红外光谱仪和核磁共振光谱仪检测其分子结构。取透明质酸经化学修饰制备巯基化透明质酸（hyaluronic acid thiolation,HA-SH）,采用Ellman法检测其巯基含量并计算巯基化产率。采用PBS将HA-SH和PEGDA分别配制成一定浓度（W/V）溶液,其中HA-SH浓度为0.5%、1.0%及1.5%,PEGDA为2%、4%及6%,按照不同比例混合,获得原位交联透明质酸水凝胶,记录交联反应时间。取1.5%HA-SH、4%PEGDA制备的原位交联透明质酸水凝胶,以浸提法检测其细胞毒性;然后接种人BMSCs并培养72 h,荧光显微镜下观察细胞形态及生长情况,并行活/死细胞染色观察,评价材料生物相容性。结果傅里叶变换红外光谱仪分析显示,PEGDA中大多数羟基被丙烯酸酯基取代;核磁共振光谱仪分析显示,PEGDA在5-7 ppm出现3组表征丙烯酸酯基的特征峰。HA-SH的巯基化产率为65.4%。2%-6%PEGDA与0.5%-1.5%HA-SH经不同比例混合后,交联反应在2-70 min内完成;不同浓度及比例交联形成的水凝胶均呈透明状。透明质酸水凝胶浸提液细胞毒性分级为1级,满足生物医用材料的要求。培养72 h后,BMSCs在透明质酸水凝胶中分布均匀、生长良好,活/死细胞染色显示以绿染活细胞为主。结论原位交联透明质酸水凝胶具有细胞毒性低、体外生物相容性好、交联时间可控的优点,有望成为组织工程种子细胞载体或组织缺损填充材料。 展开更多
关键词 透明质酸 水凝胶 原位交联 生物相容性 组织工程支架
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富血小板血浆对大鼠许旺细胞生物学行为的影响 被引量：8
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作者 郑灿镔 朱庆棠 +5 位作者 刘小林 黄喜军 何彩凤 江丽 周翔 朱昭炜 《中华显微外科杂志》 CSCD 北大核心 2013年第2期137-143,共7页
目的观察不同浓度的富血小板血浆（PRP）对体外培养的许旺细胞（SCs）增殖、分泌功能及迁移的影响，探讨其促进周围神经再生的可能作用机制。方法从SD大鼠心脏穿刺取血，利用二次离心法制备PRP，对全血和PRP中血小板计数和血小板源性生... 目的观察不同浓度的富血小板血浆（PRP）对体外培养的许旺细胞（SCs）增殖、分泌功能及迁移的影响，探讨其促进周围神经再生的可能作用机制。方法从SD大鼠心脏穿刺取血，利用二次离心法制备PRP，对全血和PRP中血小板计数和血小板源性生长因子BB（PDGF—BB）和转化生长因子（TGF-B1）浓度测定；取3～5d龄的大鼠坐骨神经培养纯化SCs，将P1细胞分为实验组与对照组分别进行处理，实验组以含40．0％、20．0％、10．0％、5．0％和2．5％PRP的条件培养液干预，并设立空白对照组。于干预不同时间点采用CCK-8法测定SCs增殖活性情况，用实时荧光定量PCR方法检测细胞神经生长因子（NGF）和胶质细胞源神经营养因子（GDNF）mRNA表达的变化，ELISA检测SCs分泌NGF和GDNF的水平，Transwell小室检测各组SCs的迁移能力。结果PRP血小板回收率达65％，PDGF．BB和TGF-β1浓度明显高于血清（P〈0．01）；与空白对照组相比，低于20．0％浓度的PRP呈浓度依赖性促进SCs增殖和迁移，而40．0％浓度组细胞增殖和迁移受到抑制；SCs分泌的NGF和GDNF和其mRNA表达均较对照组明显增加，同样在低于20．0％浓度的范围内呈现量效关系，40．0％浓度组则显示抑制作用。结论PRP在适当浓度范围可以促进SCs的分裂增殖，合成分泌NGF和GDNF以及迁移的能力，具有潜在的促周围神经再生的作用。 展开更多
关键词 富血小板血浆 神经生长因子 许旺细胞 细胞增殖 细胞迁移 周围神经
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带孔克氏针与可吸收线固定髌骨横断骨折的生物力学评价 被引量：8
8
作者 艾昌淼 张勇华 +3 位作者 林勇 于滨生 陈建伟 徐栋梁 《实用骨科杂志》 2009年第12期906-908,共3页
目的与钢丝张力带相比较,观察预置带孔克氏针结合可吸收线张力带固定髌骨横断骨折的生物力学稳定性。方法取26个成人髌骨标本制成髌骨横断骨折模型,分成两组各13个髌骨,克氏针纵向贯穿髌骨后,分别以可吸收线和钢丝形成张力带固定,利用MT... 目的与钢丝张力带相比较,观察预置带孔克氏针结合可吸收线张力带固定髌骨横断骨折的生物力学稳定性。方法取26个成人髌骨标本制成髌骨横断骨折模型,分成两组各13个髌骨,克氏针纵向贯穿髌骨后,分别以可吸收线和钢丝形成张力带固定,利用MTS生物材料试验机行顶伸折曲和拉力破坏试验以测定其固定的稳定性。结果固定失效时最大压力和牵拉力,克氏针结合可吸收线组与克氏针结合钢丝组差异无显著性意义(P>0.05)。结论克氏针可吸收线张力带与克氏针钢丝张力带治疗髌骨骨折生物力学效果相当,临床上可相互替代使用。 展开更多
关键词 髌骨 骨折 内固定术 生物力学
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基于二次成像技术标志点获取和自动配准的长段周围神经功能束三维可视化关键技术研究 被引量：5
9
作者 张毅 刘小林 +4 位作者 钟映春 唐平 周家铭 戚剑 何彩凤 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期325-331,共7页
目的探讨四肢周围神经功能束三维可视化重建过程中的关键技术问题及解决方法,并验证其可行性。方法取自愿捐献新鲜成人尸体右上臂20cm尺神经标本。以4根成年女性头发作为标志线,连续横断面冰冻切片,厚15μm,层距0.5mm,共400张切片,行乙... 目的探讨四肢周围神经功能束三维可视化重建过程中的关键技术问题及解决方法,并验证其可行性。方法取自愿捐献新鲜成人尸体右上臂20cm尺神经标本。以4根成年女性头发作为标志线,连续横断面冰冻切片,厚15μm,层距0.5mm,共400张切片,行乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,AchE)染色;采用二次成像技术,以配置MSHTO MD90显微数码成像装置的Olympus Z61型体视显微镜于AchE染色前、后分别获取同一切片的2张全景图像,通过Photoshop图像处理软件图层叠加进行图像处理,获取含4个完整定位标志点的神经断面二维全景图像;以优化最小二乘支持向量机方法作为分类器自动识别处理图像,并利用空间变换方法实现自动配准,结合人工辅助获取功能束轮廓,通过Amira 4.1医学三维重建软件进行长段尺神经功能束三维重建,评估重建逆向还原效果。结果利用二次成像Photoshop图像处理软件处理同一张切片染色前、后的图像,图像轮廓吻合度良好,合成图像获得的标志点定位精确,操作简便快捷。优化最小二乘支持向量机方法识别精度高,误差率为8.250%;三维模型可直观观察神经内部不同性质功能束交叉融合的变化,其任意水平切割逆向还原基本吻合。结论基于二次成像技术和Photoshop图像处理软件图层处理技术的计算机自动配准可应用于长段周围神经的三维可视化重建,重建快捷,效果较好。 展开更多
关键词 周围神经 三维重建 功能束 关键技术 配准
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携带增强型绿色荧光蛋白的慢病毒载体转染大鼠脂肪干细胞 被引量：5
10
作者 李绍磊 刘云江 +4 位作者 牛晓峰 许银峰 易建华 杨有优 江丽 《中华显微外科杂志》 CSCD 北大核心 2014年第2期147-151,共5页
目的探索脂肪干细胞（ADSCs）的标记方法，观察增强型绿色荧光蛋白（EGFP）阳性ADSCs（EGFP—ADSCs）的体外活性、干细胞特性及体内短期活性。方法用携带增强型绿色荧光蛋白（eGFP）基因的慢病毒载体（Lv-eGFP）在感染复数（MOI）为0、1... 目的探索脂肪干细胞（ADSCs）的标记方法，观察增强型绿色荧光蛋白（EGFP）阳性ADSCs（EGFP—ADSCs）的体外活性、干细胞特性及体内短期活性。方法用携带增强型绿色荧光蛋白（eGFP）基因的慢病毒载体（Lv-eGFP）在感染复数（MOI）为0、1、5、25、50、100时，转染SD大鼠ADSCs12h，荧光显微镜及流式细胞仪检测转染效率和荧光强度；Mrrr法评价转染后细胞活性；EGFP—ADSCs分别行成脂分化及油红O检测、成骨分化及茜素红染色；将EGFP—ADSCs注射到去细胞神经构建组织工程化神经，修复大鼠坐骨神经缺损，术后1周取材进行冰冻切片观察细胞在体内存活情况。结果转染4d后，EGFP阳性率及荧光强度达到高峰；EGFP基因表达不随细胞传代而消失。MOI=0、1、5、25、50、100时，EGFP阳性转染率分别为0．13％、31．09％、75．33％、92．66％、96．70％、98．38％。实验组阳性率与对照组（MOI=0）选择相比，差异均有统计学意义（P〈0．05）；MOI=25、50、100时，组问阳性率差异无统计学意义（P〉0．05），但与MOI=1、5比时差异（P〈0．05）。MTT试验观察10d内MOI=25、50、100组细胞增值活性与非转染细胞差异无统计学意义（P〉0．05）。选择MOI=25作为最佳转染滴度进行后续实验。转染后ADSCs成骨、成脂分化20d，茜素红染色见橘红色钙沉积，油红O染色见橙红色脂滴。1周冰冻切片观察细胞于体内呈梭形，均匀分布。结论慢病毒载体转染EGFP基因不影响ADSCs活性及成骨成脂分化能力，能为组织工程化神经修复缺损提供示踪种子细胞的方法。 展开更多
关键词 脂肪干细胞 转染 绿色荧光蛋白 慢病毒载体 周围神经
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大鼠脂肪干细胞诱导分化为类许旺细胞的表型和功能特征 被引量：4
11
作者 江丽 朱家恺 +3 位作者 刘小林 项鹏 胡军 余伟华 《中华显微外科杂志》 CSCD 北大核心 2007年第6期430-432,I0003,共4页
目的研究大鼠脂肪干细胞(ADSCs)在体外分化为类许旺细胞的表型和功能特征,为外周神经组织工程应用提供实验基础。方法采用β-疏基乙醇、全反式视黄酸、forskolin、血小板源生长因子、碱性成纤维细胞生长因子和heregulin依次联合诱导,双... 目的研究大鼠脂肪干细胞(ADSCs)在体外分化为类许旺细胞的表型和功能特征,为外周神经组织工程应用提供实验基础。方法采用β-疏基乙醇、全反式视黄酸、forskolin、血小板源生长因子、碱性成纤维细胞生长因子和heregulin依次联合诱导,双重免疫荧光细胞化学法和Western blot鉴定神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和S-100蛋白等许旺细胞标志蛋白的表达,与原代背根神经节(DRG)感觉神经元共培养研究诱导后细胞的功能。结果诱导后ADSCs形态类似许旺细胞。双重免疫荧光细胞化学法显示S-100和GFAP的最高表达率分别为(78.08±6.08)%和(72.38±6.43)%,双重表达率为(60.76±6.43)%。Western blot显示诱导后细胞同时表达这两种蛋白。诱导后细胞能明显增加DRG神经元的突起向外生长。结论诱导后ADSCs的表型和功能特征证实大鼠ADSCs在体外可分化为类许旺细胞。 展开更多
关键词 脂肪干细胞 许旺细胞 神经元 表型
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两种门轴咬骨钳在双开门椎管扩大成形中开门角度及颈椎功能的比较
12
作者 孙俊 詹铭斌 +1 位作者 刘希哲 刘少喻 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2023年第27期4337-4344,共8页
背景:双开门椎管扩大成形是治疗颈椎多节段退行性脊髓病的常用术式,目前对于术中开门角度的预测和控制尚待进一步改进。目的:比较颈后路双开门椎管扩大成形术中两种不同角度门轴咬骨钳制作门轴时的开门角度与疗效。方法:回顾性分析2018... 背景:双开门椎管扩大成形是治疗颈椎多节段退行性脊髓病的常用术式,目前对于术中开门角度的预测和控制尚待进一步改进。目的:比较颈后路双开门椎管扩大成形术中两种不同角度门轴咬骨钳制作门轴时的开门角度与疗效。方法:回顾性分析2018年6月至2020年6月中山大学附属第七医院和中山大学附属第一医院收治的颈椎多节段退行性脊髓病患者的资料,共纳入57例,其中31例使用20°门轴咬骨钳,26例使用15°门轴咬骨钳。从功能性指标(改良日本骨科协会评分、目测类比评分)、影像学指标(椎板角度、椎管矢状径、门轴愈合情况)、术后并发症(轴性症状、C_(5)神经根麻痹)等方面对两组患者的术前、术后情况进行对比分析。结果与结论:①两组患者的术后改良日本骨科协会评分及术后目测类比评分差异无显著性意义;②两组患者的术后椎板角度均显著大于术前(P<0.01),且15°咬骨钳组的术后椎板角度(62.74±7.62)°显著小于20°咬骨钳组(68.55±8.71)°(P<0.01);15°咬骨钳组的术后椎管矢状径(13.52±2.16)mm显著小于20°咬骨钳组(15.39±2.85)mm(P<0.01);③术后4周时,15°咬骨钳组的门轴融合率要显著高于20°咬骨钳组(49%,35%,P<0.01);④两组患者术后并发症的发生率差异无显著性意义;⑤提示使用门轴咬骨钳时,可在术前对开门角度进行预测,并在术中准确控制术后椎板开门角度;相比于20°门轴咬骨钳,使用15°门轴咬骨钳制作门轴可将椎板角度扩大约25°,术后达到63°左右,避免椎板角度及椎管矢状径过大;15°门轴咬骨钳和20°门轴咬骨钳均可获得满意的减压效果,但15°门轴咬骨钳组的门轴愈合时间更短,有利于术后神经功能的恢复。 展开更多
关键词 颈椎椎管扩大成形术 双开门 门轴咬骨钳 开门角度 椎板角度 门轴愈合
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用于甲醛固定石蜡包埋组织的改良免疫荧光法 被引量：3
13
作者 侯昌禾 张阳春 +4 位作者 余世明 李子卿 翟齐毅 张紫机 盛璞义 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2012年第7期1188-1192,共5页
背景:甲醛固定石蜡包埋的标本易于保存,免疫荧光法定位定量能精确支持多种标记物。目的:建立适合于甲醛固定石蜡包埋组织的改良免疫荧光法。方法:将取自类风湿性关节炎和无骨性关节炎患者的滑膜血管翕和髋臼增生组织的石蜡切片进行常规... 背景:甲醛固定石蜡包埋的标本易于保存,免疫荧光法定位定量能精确支持多种标记物。目的:建立适合于甲醛固定石蜡包埋组织的改良免疫荧光法。方法:将取自类风湿性关节炎和无骨性关节炎患者的滑膜血管翕和髋臼增生组织的石蜡切片进行常规脱蜡复水,观察不同的柠檬酸缓冲液热修复时间、血清封闭时间、一抗浓度和荧光标记物在免疫荧光法中显色的差异。结果与结论:柠檬酸高温修复15min后滴加抗原修复液比单纯高温修复10～20min,组织结构保存更为完整,且背景染色无显著区别;选择体积分数10%二抗来源正常血清室温封闭40min作为最佳的抗原封闭条件,既可以保证良好的封闭效果,同时又不影响一抗和抗原位点结合;较高一抗浓度(10mg/L)能保证明显的荧光信号、低背景和可接受的成本。进行石蜡切片免疫荧光实验,并用普通荧光显微镜观察,应避免采用FITC等蓝色激发光、呈现绿色荧光信号的标记染料基团。提示柠檬酸高温修复15min后滴加抗原修复液,选择体积分数10%二抗来源正常血清室温封闭40min,较高一抗浓度,普通荧光显微镜观察可提高免疫荧光法的检测质量。 展开更多
关键词 石蜡包埋 甲醛固定 免疫荧光 免疫病理 标本 组织
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周围神经功能束二维全景图像配准定位标志点的获取 被引量：3
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作者 张毅 卢昊 +3 位作者 何彩风 戚剑 罗鹏 刘小林 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2010年第35期6567-6572,共6页
背景:实现二维图像的计算机自动配准是三维重建的关键步骤,目前针对神经断面二维图像自动配准软件开发要求图像具备4个完整定位标志点,此前二维全景图像完整定位标志点的获取这一关键技术问题未获得有效解决。目的:了解周围神经功能束... 背景:实现二维图像的计算机自动配准是三维重建的关键步骤,目前针对神经断面二维图像自动配准软件开发要求图像具备4个完整定位标志点,此前二维全景图像完整定位标志点的获取这一关键技术问题未获得有效解决。目的:了解周围神经功能束三维可视化重建中用于配准神经断面二维图像定位标志点获取的关键技术。方法:①取自愿捐献新鲜成人截肢坐骨神经标本,以4根成年女性头发作为标志线,横断面连续冰冻切片100张,片厚10μm,分别以普通玻片及防脱多聚赖氨酸涂层硅化玻片贴片进行AchE和苏木精-伊红染色,OLYMPUS-Z61型数码全景成像仪一次性获取全景图像,观察比较不同玻片及不同染色方法下头发标志线的贴片情况。②新鲜成人尸体上臂尺神经标本切片,于AChE染色前、后二次成像获取同一切片的两张全景图像,通过PhotoshopCS2图层叠加进行图像处理,获取含4个完整定位标志点的神经断面二维全景图像。结果与结论:①在染色后各组人发标志点脱失均较严重,各组间人发贴片数量级差异无显著性意义(P>0.05),100张图像的人发完整贴片率为1%,总体黏附率为22.5%,人发作为周围神经超薄冰冻组织切片标志点染色后完整贴片率很低,不同的染色方法和不同黏附性能的玻片对人发染色后的贴片率影响没有明显差别;染色前图像完整贴片率达98.0%,总体黏附率为99.5%,染色前人发标志点完整贴片率很高,不同曝光情况处理及染色前封固处理均显示标志点定位清晰。染色前后人发标志点数量差异有显著性意义(P<0.01)。②利用二次成像技术和Photoshop图层处理技术处理同一张切片染色前后的图像,图像轮廓吻合度良好,合成图像获得的标志点定位精确,操作简单快捷,可获取完整定位标志点用于配准。 展开更多
关键词 周围神经 功能束 二维全景图像 定位标志点 数字化医学
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环氧化酶-2抑制剂帕瑞昔布对吗啡镇痛耐受和吗啡诱导的大鼠痛觉过敏的抑制作用 被引量：4
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作者 李桥波 舒海华 +2 位作者 叶芳 黄文起 江丽 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期989-993,共5页
目的了解环氧化酶-2(COX-2)抑制剂帕瑞昔布在吗啡镇痛耐受与吗啡诱导的大鼠痛觉过敏上的作用。方法 (1)24只SD大鼠随机分为4组(n=6),分别腹腔内注射帕瑞昔布(5、10、20mg/kg)或等体积生理盐水,分别于药物注射前和注射后30、60min行压尾... 目的了解环氧化酶-2(COX-2)抑制剂帕瑞昔布在吗啡镇痛耐受与吗啡诱导的大鼠痛觉过敏上的作用。方法 (1)24只SD大鼠随机分为4组(n=6),分别腹腔内注射帕瑞昔布(5、10、20mg/kg)或等体积生理盐水,分别于药物注射前和注射后30、60min行压尾测试了解大鼠机械疼痛阈值并根据结果选择合适的亚镇痛剂量。(2)30只SD大鼠随机分为5组(n=6),各组分别皮下注射吗啡(10mg/kg)或等体积生理盐水,并于吗啡注射前15min腹腔内注射亚镇痛剂量帕瑞昔布(10mg/kg)或等体积生理盐水,连续给药14 d;其中3组分别于吗啡注射的全程14d(1～14d),前7d(1～7 d),后7 d(8～14d)注射帕瑞昔布。在每次给药前30 min和给药后60min分别对大鼠进行压尾测试,观察大鼠机械疼痛阈值改变。结果 (1)腹腔内注射帕瑞昔布5mg/kg和10mg/kg不会产生明显镇痛效应(P>0.05),可作为亚镇痛下剂量使用。(2)连续皮下注射吗啡可诱导大鼠产生机械痛觉过敏和吗啡镇痛耐受。(3)全程14d(1～14d)和前7d(1～7d)注射亚镇痛剂量帕瑞昔布可抑制吗啡诱导的痛觉过敏和吗啡镇痛耐受(P<0.01),而后7d(8～14d)注射帕瑞昔布则无明显抑制效果(P>0.05)。结论早期全程使用亚镇痛剂量的帕瑞昔布可抑制吗啡镇痛耐受与吗啡诱导的痛觉过敏。 展开更多
关键词 吗啡 环氧化酶-2 帕瑞昔布 耐受 痛觉过敏
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猪与人去细胞神经结构与成分的对比研究 被引量：2
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作者 何彩凤 朱庆棠 +7 位作者 江丽 胡军 吴捷欣 黎建文 杨俐敏 刘小林 顾立强 朱家恺 《实用手外科杂志》 2011年第1期39-42,46,共5页
目的 研究猪与人的周围神经脱细胞处理后其结构与成分的差别,为以猪去细胞神经替代人去细胞神经用于修复神经缺损作前期探索.方法 取健康成年猪和下肢截肢患者的胫神经,用化学去垢剂按一定程序进行脱细胞处理.通过大体观察、HE染色、甲... 目的 研究猪与人的周围神经脱细胞处理后其结构与成分的差别,为以猪去细胞神经替代人去细胞神经用于修复神经缺损作前期探索.方法 取健康成年猪和下肢截肢患者的胫神经,用化学去垢剂按一定程序进行脱细胞处理.通过大体观察、HE染色、甲苯胺蓝染色、免疫组织化学染色和透射电镜检查,比较猪与人的周围神经去细胞处理前后其结构、许旺细胞与轴突标志蛋白以及细胞外基质的变化.结果 经脱细胞处理后,猪与人的神经结构均略变疏松,仍保留较好的弹性和伸展性.显微镜下观察,两者均未见细胞或其碎屑残留,髓鞘消失,纤维性支架结构保持良好,S-100蛋白和神经丝蛋白（neurofilament,NF）的表达较处理前显著减弱,而层粘蛋白（laminin,LN）的表达无显著变化,神经基底膜管和神经组织的支持结构保留完好.与人去细胞神经比较,猪去细胞神经结构更疏松,神经束间细胞间质更丰富,但成分差异无显著性.结论 猪去细胞神经与人去细胞神经的结构和成分相近,可能取代人去细胞神经用于修复神经缺损. 展开更多
关键词 周围神经 化学萃取 组织学 猪 人
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颈椎开门椎板成形术使用不同工具制作门轴对开门角度的影响 被引量：1
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作者 蔚兰哲 崔尚斌 +2 位作者 魏富鑫 王乐 刘少喻 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2021年第2期224-227,230,共5页
目的探究颈椎后路开门椎管扩大成形术中使用20°尖嘴咬骨钳或高速微型磨钻两种不同工具制作门轴对椎板开门角度的影响。方法对我院脊柱外科收治的行颈椎后路开门椎管扩大成形术的患者进行前瞻性随访,根据术中门轴制作工具的不同分... 目的探究颈椎后路开门椎管扩大成形术中使用20°尖嘴咬骨钳或高速微型磨钻两种不同工具制作门轴对椎板开门角度的影响。方法对我院脊柱外科收治的行颈椎后路开门椎管扩大成形术的患者进行前瞻性随访,根据术中门轴制作工具的不同分为咬骨钳组和磨钻组,对所有患者术前及术后1周内拍摄颈椎计算机断层扫描(Computed Tomography,CT),分别测量术前与术后CT横断面上开门节段椎板与冠状面椎体的夹角,进行统计学分析。结果共纳入并完整随访40例患者,其中咬骨钳组23例,磨钻组17例。其中咬骨钳组术前开门节段椎板与冠状面平均夹角为(37.58±4.09)°,磨钻组为(36.19±3.92)°,无统计学差异(P=0.286),而术后咬骨钳组开门角度为(62.27±3.99)°,磨钻组为(67.17±3.48)°,具有明显差异(P<0.001)。此外,两组间患者椎板扩大角度、术前术后角度比、角度扩大率均具有统计学差异(P<0.01)。结论使用20°尖嘴咬骨钳制作门轴较之使用高速微型磨钻,可以更加精确控制开门角度,使其不至于过大,更加接近理想开门角。 展开更多
关键词 颈椎椎管扩大成形术 开门角度 尖嘴咬骨钳 高速微型磨钻
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复发性流产与夫妻双方绒毛血管内皮生长因子基因多态性的关系 被引量：2
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作者 李珠玉 游泽山 +4 位作者 苏秀梅 张秀明 李再仪 吴再归 江丽 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期85-89,共5页
【目的】探讨复发性自然流产(RSA)与中国南方夫妻双方及绒毛血管内皮生长因子基因多态性(-1154G>A)的关系。【方法】采用等位基因特异性扩增-聚合酶链反应方法,检测271对RSA夫妇和250名女性对照、200名男性对照、60例复发自然流产绒... 【目的】探讨复发性自然流产(RSA)与中国南方夫妻双方及绒毛血管内皮生长因子基因多态性(-1154G>A)的关系。【方法】采用等位基因特异性扩增-聚合酶链反应方法,检测271对RSA夫妇和250名女性对照、200名男性对照、60例复发自然流产绒毛及人工流产绒毛的VEGF基因-1154G>A多态位点基因型频率分布情况。【结果】在女方RSA组和对照组,VEGF基因-1154G/A的三种基因型频率(G/G、G/A、A/A)分布不相同,差异有统计学意义(P=0.012);女方RSA组和对照组等位基因频率(G、A)分别是74.7%、25.3%和82.2%、17.8%,女方携带A等位基因发生RSA的风险大于携带G等位基因(P=0.003,OR=1.562,95%CI=1.157-2.109)。在男方RSA组和对照组,VEGF基因-1154G/A的三种基因型频率及等位基因频率分布差异均无统计学意义(P分别为0.837、0.572)。在留取的绒毛RSA组和人工流产组,VEGF基因-1154G/A的三种基因型频率及等位基因频率分布差异均无统计学意义(P分别为0.708、0.757)。【结论】女方VEGF基因-1154G/A多态与中国南方复发性自然流产的发病风险相关,携带A等位基因增加复发性自然流产的发生,男方及绒毛VEGF基因-1154G/A多态与中国南方复发性自然流产的无相关性。由此推测,与胎儿VEGF-1154G/A多态性相比,母方VEGF-1154G/A多态性与RSA的关系可能更密切。 展开更多
关键词 血管内皮生长因子 基因多态性 复发性自然流产
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白细胞介素-1受体相关激酶-4在骨关节炎患者滑膜组织中的表达及意义 被引量：1
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作者 张阳春 肖建红 +2 位作者 杨兴 余世明 盛璞义 《中华关节外科杂志（电子版）》 CAS 2016年第3期75-78,共4页
目的探讨白介素-1受体相关激酶-4(IRAK-4)在骨关节炎(OA)患者滑膜组织中的表达及临床意义。方法 2012年1月至2014年6月选取中山大学附属第一医院下肢骨科住院患者30例,术前诊断明确,排除免疫系统紊乱、免疫功能缺陷及结缔组织病。30例... 目的探讨白介素-1受体相关激酶-4(IRAK-4)在骨关节炎(OA)患者滑膜组织中的表达及临床意义。方法 2012年1月至2014年6月选取中山大学附属第一医院下肢骨科住院患者30例,术前诊断明确,排除免疫系统紊乱、免疫功能缺陷及结缔组织病。30例患者分为OA组及对照组,其中OA患者行人工膝关节置换术15例,胫骨平台粉碎性骨折或(和)股骨髁粉碎性骨折行切开复位内固定手术共15例为非OA患者作为对照组,术中取膝关节滑膜组织进行免疫组化检测IRAK-4的表达,以及收集关节液检测白细胞介素-1(IL-1)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)炎性因子水平。两组间比较采用两独立样本的t检验,两组间阳性表达百分比采用Mann-Whitney U检验,P<0.05为差异有统计学意义。结果免疫组化结果显示OA患者IRAK-4表达明显高于对照组。在OA患者中滑膜组织IRAK-4蛋白呈100%强阳性表达,对照组中15例只有3例呈弱阳性表达,阳性表达率为20%,两组间比较具有统计学差异(P<0.01)。同时酶联免疫吸附检测(ELISA)显示OA患者关节液中IL-1与TNF-α的表达与对照组比较存在统计学差异(均P<0.001)。结论 OA患者滑膜组织高表达IRAK-4,作为Toll样受体/白细胞介素-1受体(TLR/IL-1R)信号途径的一个重要胞内激酶连接体,IRAK-4可能参与调控一系列炎性因子释放。 展开更多
关键词 骨关节炎 滑膜 白细胞介素1 肿瘤坏死因子Α
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PKH26标记法在组织工程神经种子细胞体内示踪中的应用 被引量：2
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作者 黎建文 李智勇 +4 位作者 朱庆棠 胡军 何彩凤 刘小林 江丽 《中华显微外科杂志》 CSCD 北大核心 2010年第1期34-37,I0005,共5页
目的探讨PKH26标记骨髓间充质干细胞（BMSCs）的效果及其应用于组织工程神经种子细胞体内示踪实验的可行性。方法取Wistar大鼠股骨和胫骨的骨髓，用全骨髓贴壁的方法分离、培养BMSCs。用PKH26荧光染料进行标记，荧光显微镜下观察标记效... 目的探讨PKH26标记骨髓间充质干细胞（BMSCs）的效果及其应用于组织工程神经种子细胞体内示踪实验的可行性。方法取Wistar大鼠股骨和胫骨的骨髓，用全骨髓贴壁的方法分离、培养BMSCs。用PKH26荧光染料进行标记，荧光显微镜下观察标记效果，流式细胞仪检测荧光标记率，MTT法测定细胞的活性，体外成脂和成骨诱导鉴定细胞的分化能力，并与未标记细胞进行比较；使用显微注射的方法将BMSCs植入去细胞神经支架内制备成组织工程神经，于体外培养3d、5d,7d、14d，行组织切片，观察BMSCs在支架内存活、迁移的情况。另外．将体外构建组织工程神经桥接Wistar大鼠坐骨神经15mm的缺损，于术后1周、d周、6周、8周取出移植物，行组织切片观察植入的BMSCs在支架内的存活情况。结果PKH26能有效地标记BMSCs，标记率达95％以上．标记后细胞活性及诱导成骨成脂分化能力与未标记细胞无明显差异。在体外培养的环境下，BMSCs能在去细胞神经支架里粘附生长，并沿着支架迁移；在体内外周围神经再生的微环境下，BMSCs可存活8周以上。结论PKH26荧光染料标记法是一种有效的标记BMSCs的方法．可用于组织工程神经种子细胞体内示踪的研究。 展开更多
关键词 组织工程 周围神经 骨髓间充质干细胞
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