目的研究外膜蛋白CarO的表达、序列突变与鲍曼不动杆菌对亚胺培南敏感性的关系。方法收集鲍曼不动杆菌8株,E-test鉴定亚胺培南敏感性;用脉冲场凝胶电泳(PFGE)鉴定菌株同源性;PCR法检验CarO基因,并进行序列分析;Real time PCR法检验CarO ...目的研究外膜蛋白CarO的表达、序列突变与鲍曼不动杆菌对亚胺培南敏感性的关系。方法收集鲍曼不动杆菌8株,E-test鉴定亚胺培南敏感性;用脉冲场凝胶电泳(PFGE)鉴定菌株同源性;PCR法检验CarO基因,并进行序列分析;Real time PCR法检验CarO mRNA的表达;SDS电泳法比较CarO蛋白的表达。结果本实验发现4株耐药菌株CarO序列同源性高;所有菌株中均存在CarO基因,但亚胺培南敏感及耐药菌株基因序列相似性仅87%,敏感菌株与耐药菌株均有CarO mRNA基因表达,且两者表达水平差异无统计学意义;SDS电泳也发现其基因序列不同者CarO蛋白分子量不同。结论 CarO基因序列改变可能与鲍曼不动杆菌对亚胺培南敏感性的变化有关。展开更多
目的:研究光动力法(photodynamic therapy,PDT)处理后,用酸洗法获取C6胶质瘤细胞的抗原肽,制备树突状细胞(dendritic cell,DC)疫苗,诱导细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL)在体外杀伤C6细胞的活性,以及PDT对C6胶质瘤细胞免...目的:研究光动力法(photodynamic therapy,PDT)处理后,用酸洗法获取C6胶质瘤细胞的抗原肽,制备树突状细胞(dendritic cell,DC)疫苗,诱导细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL)在体外杀伤C6细胞的活性,以及PDT对C6胶质瘤细胞免疫原性的直接影响。方法:自大鼠骨髓分离DC前体细胞于体外诱导、扩增获得成熟DC。C6细胞经PDT处理后,对尚贴壁的细胞以酸洗法获取其表面抗原,从上清液中提取全细胞抗原,未作PDT处理的C6细胞以酸洗或冻融法提取抗原。分别以这4种抗原致敏DC,制成DC疫苗接种SD大鼠后,取脾作CTL的体外杀伤活性测定。结果:用PDT处理后酸洗法获得的抗原刺激DC成熟的能力最强,它制备的DC疫苗诱导的CTL的体外杀伤率最高,为(95.5±1.6)%,而光照后上清组为(90.2±2.4)%,酸洗组为(73.3±2.7)%,冻融组为(63.6±4.9)%,PBS对照组为0。结论:PDT能直接增强肿瘤细胞的免疫原性,用酸洗法获取PDT处理后的肿瘤细胞的抗原肽制备DC疫苗是一种有前景的新方法。展开更多
文摘目的:研究光动力法(photodynamic therapy,PDT)处理后,用酸洗法获取C6胶质瘤细胞的抗原肽,制备树突状细胞(dendritic cell,DC)疫苗,诱导细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL)在体外杀伤C6细胞的活性,以及PDT对C6胶质瘤细胞免疫原性的直接影响。方法:自大鼠骨髓分离DC前体细胞于体外诱导、扩增获得成熟DC。C6细胞经PDT处理后,对尚贴壁的细胞以酸洗法获取其表面抗原,从上清液中提取全细胞抗原,未作PDT处理的C6细胞以酸洗或冻融法提取抗原。分别以这4种抗原致敏DC,制成DC疫苗接种SD大鼠后,取脾作CTL的体外杀伤活性测定。结果:用PDT处理后酸洗法获得的抗原刺激DC成熟的能力最强,它制备的DC疫苗诱导的CTL的体外杀伤率最高,为(95.5±1.6)%,而光照后上清组为(90.2±2.4)%,酸洗组为(73.3±2.7)%,冻融组为(63.6±4.9)%,PBS对照组为0。结论:PDT能直接增强肿瘤细胞的免疫原性,用酸洗法获取PDT处理后的肿瘤细胞的抗原肽制备DC疫苗是一种有前景的新方法。
