吗啡对坐骨神经钳夹伤大鼠脊髓Ⅱ板层初级传入纤维终末突触重建的影响

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作者 聂俊辉 曾园山 +3 位作者 吴金浪 李晓滨 张伟 陈穗君 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期368-372,共5页

目的　探讨吗啡能否促进大鼠受损伤的初级传入纤维终末在脊髓Ⅱ板层再生及其突触重建。　方法　采用电镜定量方法计数吗啡组、生理盐水组和纳络酮吗啡组坐骨神经损伤后 15d和 30d ,L4脊髓Ⅱ板层背根无髓传入纤维来源的Ⅰ型复合终末、背... 目的　探讨吗啡能否促进大鼠受损伤的初级传入纤维终末在脊髓Ⅱ板层再生及其突触重建。　方法　采用电镜定量方法计数吗啡组、生理盐水组和纳络酮吗啡组坐骨神经损伤后 15d和 30d ,L4脊髓Ⅱ板层背根无髓传入纤维来源的Ⅰ型复合终末、背根有髓传入纤维来源的Ⅱ型复合终末和由中间神经元轴突和下行传导束轴突形成的简单终末。　结果　吗啡组大鼠脊髓Ⅱ板层的Ⅰ型复合终末数比生理盐水组和纳络酮吗啡组明显增多 ,然而 ,Ⅱ型复合终末却比生理盐水组和纳络酮吗啡组少。 3组大鼠脊髓Ⅱ板层的突触性终末总数 ,复合终末数和简单终末数没有差异。　结论　吗啡能够促进大鼠脊髓Ⅱ板层受损伤的初级无髓传入纤维终末再生及其突触重建 ,这可能通过阿片受体介导。 展开更多

关键词 吗啡 纳络酮 坐骨神经钳夹伤 脊髓Ⅱ板层 初级传人纤维 突触重建 大鼠

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雪旺细胞移植促进全横断脊髓损伤的修复 被引量：2

2

作者 吴立志 曾园山 等 《解剖学研究》 CAS 2002年第1期76-77,共2页

关键词 雪旺细胞移植 脊髓损伤 修复

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灵芝孢子和一氧化氮合酶抑制剂对大鼠脊髓损伤后背核、红核神经元存活及轴突再生的影响 被引量：12

3

作者 马钦桃 曾园山 +1 位作者 张伟 陈穗君 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期597-603,共7页

目的探讨灵芝孢子和一氧化氮合酶(NOS)抑制剂(L-NNA)联合应用能否促进脊髓半横断后受损伤的背核和红核神经元存活及其轴突再生。方法30只成年雌性大鼠被分为对照组、L-NNA组、灵芝孢子低剂量组、灵芝孢子低剂量+L-NNA组、灵芝孢子高剂... 目的探讨灵芝孢子和一氧化氮合酶(NOS)抑制剂(L-NNA)联合应用能否促进脊髓半横断后受损伤的背核和红核神经元存活及其轴突再生。方法30只成年雌性大鼠被分为对照组、L-NNA组、灵芝孢子低剂量组、灵芝孢子低剂量+L-NNA组、灵芝孢子高剂量组和灵芝孢子高剂量+L-NNA组。灵芝孢子高剂量+L-NNA组动物在T11脊髓段半横断后注射L-NNA和胃饲高剂量灵芝孢子。结果脊髓半横断后30 d,对照组L1脊髓损伤侧背核神经元数量减少,NOS表达阳性。L-NNA组和灵芝孢子低剂量组损伤侧背核神经元增加,但NOS表达降低。灵芝孢子低剂量+L-NNA组和灵芝孢子高剂量组损伤侧背核神经元明显增加,NOS表达显著降低。灵芝孢子高剂量+L-NNA组损伤侧背核神经元最多,NOS表达最低,而且有些神经元胞体被荧光金标记。对照组和L-NNA组损伤侧红核神经元密度降低。灵芝孢子低剂量组和灵芝孢子低剂量+L-NNA组损伤侧红核神经元密度提高。灵芝孢子高剂量组和灵芝孢子高剂量+L-NNA组损伤侧红核神经元密度明显提高。结论灵芝孢子和L-NNA都能促进脊髓半横断后受损伤背核神经元的存活,两者联合应用能更好地促进受损伤的背核神经元存活及其轴突再生。灵芝孢子也能促进受损伤的红核神经元存活。 展开更多

关键词 脊髓损伤 背核 红核 神经元存活 灵芝孢子 N-硝基左旋精氨酸甲酯 大鼠

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施万细胞对植入大鼠脊髓损伤区内的神经干细胞存活和分化的影响 被引量：7

4

作者 丁英 曾园山 +3 位作者 吴立志 郭家松 李海标 陈穗君 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期589-593,共5页

目的　探讨施万细胞对植入损伤脊髓内的神经干细胞的存活及其分化的影响。　方法　分离和克隆新生大鼠海马组织的神经干细胞 ;同时获取坐骨神经和臂丛神经 ,从中分离和纯化施万细胞。在移植前先用核荧光 (Hoechst33342 )标记神经干细胞... 目的　探讨施万细胞对植入损伤脊髓内的神经干细胞的存活及其分化的影响。　方法　分离和克隆新生大鼠海马组织的神经干细胞 ;同时获取坐骨神经和臂丛神经 ,从中分离和纯化施万细胞。在移植前先用核荧光 (Hoechst33342 )标记神经干细胞。实验组为神经干细胞和施万细胞联合移植入大鼠脊髓半横断处 ,对照组为单独神经干细胞移植。应用免疫组织化学和酶组织化学技术 ,在移植后 7d、14d、2 1d和 30d分别观察神经干细胞的存活和分化情况。　结果　实验组的神经干细胞比对照组迁移的更远 ,分化为神经丝蛋白染色阳性神经元样细胞的数量比对照组的多 ,并且有较长的突起长出。在 30d实验组中 ,移植的神经干细胞有部分呈乙酰胆碱酯酶(AchE)染色阳性。而在对照组中 ,移植区内仅有少数呈AchE染色弱阳性的神经干细胞。　结论　在脊髓损伤处 ,施万细胞可促进移植的神经干细胞存活、迁移和向神经元样细胞分化 ;有些神经元样细胞能长出较长的突起 ,有些呈现乙酰胆碱酯酶活性。 展开更多

关键词 施万细胞 脊髓损伤 神经干细胞 细胞移植 细胞分化

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一种快速、经济、省时的施万细胞体外培养和纯化方法 被引量：6

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作者 张雪宝 曾园山 陈穗君 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期628-630,共3页

目的探讨一种快速、简单、经济的施万细胞(SCs)培养和纯化方法,为SCs体内移植研究提供稳定及可靠的细胞来源。方法选用SD乳鼠,取坐骨神经和臂丛神经,用单细胞双酶消化法和半植块单酶消化法培养SCs。结果用同样多的组织材料,半植块单酶... 目的探讨一种快速、简单、经济的施万细胞(SCs)培养和纯化方法,为SCs体内移植研究提供稳定及可靠的细胞来源。方法选用SD乳鼠,取坐骨神经和臂丛神经,用单细胞双酶消化法和半植块单酶消化法培养SCs。结果用同样多的组织材料,半植块单酶消化法所获得的SCs比单细胞双酶消化法所获细胞至少多两倍,省时40min。免疫组织化学染色显示,获得的施万细胞96%以上呈S-100阳性。结论用半植块单酶消化法培养SCs,可以在短时间内获得足够数量和足够纯度的SCs。 展开更多

关键词 施万细胞 细胞培养 单酶消化法 大鼠

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吗啡备用根大鼠脊髓组织神经营养活性物质的分离纯化和生物活性测定 被引量：4

6

作者 李春燕 曾园山 +1 位作者 顾熊飞 陈穗君 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期144-150,共7页

目的　分离纯化吗啡备用根大鼠脊髓组织提取液 ,以期获得某些神经营养活性物质。　方法　应用SephacrylS 2 0 0HR凝胶层析、高效液相色谱 (HPLC)和组织培养等技术分离和检测神经营养活性物质。　结果　备用根大鼠脊髓组织提取液能够促... 目的　分离纯化吗啡备用根大鼠脊髓组织提取液 ,以期获得某些神经营养活性物质。　方法　应用SephacrylS 2 0 0HR凝胶层析、高效液相色谱 (HPLC)和组织培养等技术分离和检测神经营养活性物质。　结果　备用根大鼠脊髓组织提取液能够促进体外培养的鸡胚背根节 (DRG)神经突起的生长 ;吗啡作用的大鼠脊髓组织提取液也具有同样的作用 ,但备用根大鼠和吗啡作用的大鼠脊髓组织提取液在促神经突起生长作用方面并没有明显的差异。吗啡备用根大鼠脊髓组织提取液具有明显的神经营养活性作用。吗啡备用根大鼠脊髓组织提取液的SephacrylS 2 0 0HR凝胶层析Ⅱ峰洗脱液和Ⅳ峰洗脱液能够促进DRG神经突起的生长。经SDS PAGE分析 ,Ⅱ峰洗脱液呈现 1条分子量约为 6 5kD的蛋白质主带 ,Ⅳ峰洗脱液的蛋白质成分较为复杂。应用HPLC对凝胶层析Ⅳ峰洗脱液作进一步的分离 ,发现HPLCA峰洗脱液能够促进DRG神经突起的生长。经SDS PAGE显示 ,A峰洗脱液的两条蛋白质主带分子量分别为 30kD和 18kD。　结论　吗啡备用根大鼠脊髓组织提取液中具有神经营养活性作用的物质可能是分子量约为 6 5kD、30kD和 展开更多

关键词 吗啡 备用根模型 神经营养活性物质 脊髓组织培养 高效液相色谱 动物实验

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灵芝孢子降低维甲酸诱导的孕鼠胚胎神经管畸形的发生 被引量：1

7

作者 熊轶 曾园山 +2 位作者 张伟 陈穗君 钟志强 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期231-237,共7页

目的探讨灵芝孢子能否促进受维甲酸诱导,而停滞在G0/G1期的胚胎神经管神经上皮细胞重新进入细胞周期循环,继续增殖和分化,减少神经管畸形的发生。方法于实验对照组和灵芝孢子组小鼠孕期胚胎(E)7.75d时一次性胃饲全反式维甲酸,造成这两... 目的探讨灵芝孢子能否促进受维甲酸诱导,而停滞在G0/G1期的胚胎神经管神经上皮细胞重新进入细胞周期循环,继续增殖和分化,减少神经管畸形的发生。方法于实验对照组和灵芝孢子组小鼠孕期胚胎(E)7.75d时一次性胃饲全反式维甲酸,造成这两组孕鼠的胚胎出现神经管畸形。然后,给予灵芝孢子组孕鼠胃饲灵芝孢子溶液。在孕期E10.5d时取出两组孕鼠的胚胎,分别计数胚胎的神经管畸形发生率。应用免疫荧光组织化学染色和流式细胞仪检测胚胎神经管神经上皮的巢蛋白(nestin)表达情况。应用DNA定量荧光染色和RT-PCR技术检测胚胎神经管依赖细胞周期蛋白激酶2(Cdk2)mRNA和Cdk4 mRNA的转录。结果灵芝孢子组孕鼠胚胎的神经管畸形发生率显著低于实验对照组。神经管神经上皮细胞表达nestin的百分率也明显大于实验对照组。实验对照组孕鼠胚胎的神经管细胞在G0/G1期的比例则显著高于灵芝孢子组,但是实验对照组神经管细胞S期的比例低,低于灵芝孢子组形态正常的胚胎神经管细胞。RT-PCR检测发现,灵芝孢子组孕鼠胚胎神经管细胞能够正常转录Cdk4 mRNA,而实验对照组则低转录Cdk4 mRNA。结论灵芝孢子能够减少维甲酸诱导的妊娠小鼠孕期E10.5d胚胎神经管畸形的发生。 展开更多

关键词 灵芝孢子 维甲酸 神经管畸形 巢蛋白 依赖细胞周期蛋白激酶 胚胎 小鼠

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施万细胞对大鼠脊髓半横切后背核神经元存活及其表达NOS的影响

8

作者 张燕青 曾园山 +2 位作者 吴立志 李海标 陈穗君 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期67-72,共6页

目的　探讨移植的施万细胞对大鼠脊髓半横切后背核神经元存活及其表达NOS的影响。　方法　5 0只成年SD大鼠被分为实验组和对照组。在胸 11脊髓段半横切后立即在损伤处移植入施万细胞。　结果　脊髓半横切后 ,15d和 2 5d对照组L1脊髓段... 目的　探讨移植的施万细胞对大鼠脊髓半横切后背核神经元存活及其表达NOS的影响。　方法　5 0只成年SD大鼠被分为实验组和对照组。在胸 11脊髓段半横切后立即在损伤处移植入施万细胞。　结果　脊髓半横切后 ,15d和 2 5d对照组L1脊髓段损伤侧背核神经元的存活数均比未损伤侧的明显减少。存活的神经元胞体出现明显皱缩 ,有些神经元呈现NADPH d阳性。 15d和 2 5d施万细胞组L1脊髓段损伤侧背核神经元的存活数则比同期对照组的明显增加 ,表达NOS的存活神经元数也随之增多。但存活的神经元胞体仍然是皱缩的。　结论　移植的SCs可促进受损伤的背核神经元存活及其表达NOS 。 展开更多

关键词 脊髓半横切 施万细胞 背核 神经元存活 一氧化氮合酶 大鼠 脊髓外伤

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人神经营养素-3受体TrkC基因重组腺病毒载体的表达和生物学活性检测

9

作者 王俊梅 曾园山 +2 位作者 黄文林 熊轶 王延华 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期520-524,共5页

目的探讨人神经营养素-3受体TrkC基因重组腺病毒载体(Adeno-TrkC)在神经干细胞内的表达及其对神经干细胞的生物活性作用。方法用RT-PCR检测Adeno_TrkC感染的293细胞的TrkCmRNA含量。用免疫细胞化学和Westernblotting检测Adeno-TrkC感染... 目的探讨人神经营养素-3受体TrkC基因重组腺病毒载体(Adeno-TrkC)在神经干细胞内的表达及其对神经干细胞的生物活性作用。方法用RT-PCR检测Adeno_TrkC感染的293细胞的TrkCmRNA含量。用免疫细胞化学和Westernblotting检测Adeno-TrkC感染的神经干细胞表达TrkC受体蛋白。在体外培养条件下,观察人神经营养素-3(NT-3)对感染了Adeno-TrkC的神经干细胞分化为神经元样细胞和星形胶质样细胞的影响。结果在Adeno-TrkC感染的293细胞和神经干细胞中检测到TrkCmRNA和TrkC受体蛋白,且表达产物和其配体NT-3结合后能使体外培养的神经干细胞更多地分化为神经元样细胞,分化率达到55.2%,均高于其他对照组。结论Adeno_TrkC能在神经干细胞内表达TrkC受体蛋白,这种TrkC受体蛋白具有促进神经干细胞分化为神经元样细胞活性的作用,这为进一步应用NT-3和TrkC联合进行基因治疗中枢神经损伤研究奠定了基础。 展开更多

关键词 TRKC 重组腺病毒 基因表达 神经干细胞 分化 WESTERN BLOTTING

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雪旺细胞和MK801对大鼠脊髓半横切后背核神经元存活及其表达NOS的影响

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作者 张燕青 曾园山 等 《解剖学研究》 CAS 2002年第1期75-75,共1页

关键词 雪旺细胞 MK801 脊髓半横切 背核神经元 存活 表达 NOS

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神经干细胞移植对大鼠全横断性脊髓损伤修复的影响 被引量：1

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作者 郭家松 曾园山 +2 位作者 李海标 丁英 陈穗君 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期316-316,共1页

关键词 神经干细胞移植 大鼠 全横断性脊髓损伤 修复

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体外诱导的皮肤源性神经干细胞在大鼠受损伤脊髓内的存活和分化 被引量：1

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作者 张伟 曾园山 +2 位作者 陈雅云 吴武田 陈穗君 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期394-394,共1页

关键词 神经干细胞来源 急性脊髓损伤 成纤维细胞生长因子 体外诱导 分化 大鼠 皮肤 无血清培养液 脊髓内

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