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表没食子儿茶素没食子酸酯缓解高频刺激诱导的雌性小鼠慢性原发性疼痛 被引量：2
1
作者 唐源 金冬梅 +5 位作者 揭英桃 林震嘉 熊媖 彭湘格 周利君 谈智 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期221-228,共8页
【目的】初步探究表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对高频刺激(HFS)诱导雌性小鼠慢性原发性疼痛的镇痛作用及其机制。【方法】采用10 V的HFS(波宽0.5 ms,100 Hz,4串,每串持续1 s,间隔10 s)左后肢坐骨神经建立雌性小鼠慢性原发性疼痛模型... 【目的】初步探究表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对高频刺激(HFS)诱导雌性小鼠慢性原发性疼痛的镇痛作用及其机制。【方法】采用10 V的HFS(波宽0.5 ms,100 Hz,4串,每串持续1 s,间隔10 s)左后肢坐骨神经建立雌性小鼠慢性原发性疼痛模型。将小鼠随机分为假手术组、溶剂(生理盐水)+HFS组、不同浓度EGCG+HFS组(每组4~5只)。手术前1 h,鞘内注射10μL溶剂或EGCG(10、20、50、200μmol/L)。采用后爪机械撤足阈值(PWT)和镇痛效率评价EGCG的治疗效果。最后用免疫荧光法检测腰段脊髓蛋白表达,探讨其可能的作用机制。【结果】与溶剂HFS组比较,EGCG鞘内注射剂量依赖性缓解雌性小鼠HFS引起的机械痛敏,其最大镇痛效率达84.95%。EGCG还可阻断疼痛雌性小鼠同侧腰段脊髓背角c-Fos(神经元兴奋性标记物)阳性神经元数量以及降钙素基因相关肽(CGRP+)终末、Iba1(小胶质细胞标记物)、GFAP(星形胶质细胞标记物)表达的增加。【结论】鞘内注射EGCG可通过抑制脊髓背角突触前CGRP终末增加、突触后神经元兴奋性以及胶质细胞激活,对HFS诱导的慢性原发性疼痛产生镇痛作用。 展开更多
关键词 慢性原发性疼痛 表没食子儿茶素没食子酸酯 高频刺激 C-FOS 降钙素基因相关肽
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鞘内注射2R,6R-HNK缓解雌性小鼠的神经病理性疼痛
2
作者 刘安然 林震嘉 +5 位作者 彭湘格 李莹 郑钰凡 谈智 周利君 冯霞 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期607-616,共10页
【目的】初步探究鞘内注射2R,6R-羟化去甲氯胺酮(2R,6R-HNK)对慢性神经病理性疼痛(CNP)的镇痛作用及其机制。【方法】采用坐骨神经选择性损伤(SNI)诱导的CNP模型。将雌性小鼠随机分不同组:假手术或SNI术后3周或术前30 min/1 d给予溶剂、... 【目的】初步探究鞘内注射2R,6R-羟化去甲氯胺酮(2R,6R-HNK)对慢性神经病理性疼痛(CNP)的镇痛作用及其机制。【方法】采用坐骨神经选择性损伤(SNI)诱导的CNP模型。将雌性小鼠随机分不同组:假手术或SNI术后3周或术前30 min/1 d给予溶剂、2R,6R-HNK、S-ketamine(10 mg/kg腹腔注射或7、21μmol/L鞘内注射)(每组3~7只)。采用机械缩足阈值(PWT)和镇痛效率评估2R,6R-HNK的治疗或预防效果。再用免疫荧光和RT-PCR方法检测背根神经节(DRG)和脊髓背角中蛋白转录及表达水平,并探讨其可能的作用机制。【结果】鞘内注射2R,6R-HNK剂量依赖地缓解雌性小鼠SNI建模3周的双侧机械痛敏;其中21μmol/L 2R,6R-HNK的镇痛效率达峰时间为2 d,峰值为(75.32±7.69)%。预先鞘内2R,6R-HNK还能延迟SNI诱导双侧机械痛敏产生2~3 d。机制上,2R,6R-HNK预处理不仅显著抑制SNI引起的双侧DRG和脊髓背角浅层神经元异常兴奋,还下调DRG内降钙素基因相关肽(CGRP)及脑源性神经生长因子(BDNF)的高表达。【结论】鞘内注射2R,6R-HNK通过抑制上行痛觉通路神经元异常兴奋并下调DRG神经元CGRP和BDNF表达从而对CNP产生镇痛作用。 展开更多
关键词 神经病理性疼痛 2R 6R-羟化去甲氯胺酮 背根神经节 降钙素基因相关肽
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L-茶氨酸局部给药抑制皮肤神经末梢的异常生长缓解小鼠银屑病瘙痒 被引量：1
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作者 揭英桃 林震嘉 +5 位作者 张珺 谈智 许雅南 熊媖 唐源 周利君 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期161-170,共10页
【目的】观察L-茶氨酸是否在咪喹莫特(IMQ)诱导的银屑病小鼠中具有止痒作用并初步探讨机制。【方法】将IMQ软膏局部应用于小鼠背部皮肤建立银屑病模型;L-茶氨酸经口服(10 mg/kg·d)或病损皮肤局部涂抹(50、125、250 mmol/L,2次/d)... 【目的】观察L-茶氨酸是否在咪喹莫特(IMQ)诱导的银屑病小鼠中具有止痒作用并初步探讨机制。【方法】将IMQ软膏局部应用于小鼠背部皮肤建立银屑病模型;L-茶氨酸经口服(10 mg/kg·d)或病损皮肤局部涂抹(50、125、250 mmol/L,2次/d)进行防治处理。采用抓挠等自发性行为学测试检测治疗效果;并运用免疫荧光染色(IF)、Western Blot(WB)及原代背根神经节(DRG)神经元培养技术探讨相关机制。【结果】口服L-茶氨酸对IMQ诱导的瘙痒无明显作用,但病损皮肤局部应用明显改善银屑病模型小鼠皮肤不舒适感诱发的舔或咬及畏缩等自发性行为,并呈浓度依赖性。IF和WB结果显示,L-茶氨酸不仅能抑制模型小鼠皮肤TNF-α过表达,还能阻止β3-tubulin神经纤维的异常生长和瘙痒相关分子瞬态受体电位香草酸1(TRPV1)的上调。体外实验进一步证实L-茶氨酸能浓度依赖性地直接抑制IMQ引起的CGRP+、β3-tubulin+神经突起异常生长。【结论】局部应用L-茶氨酸通过抑制皮肤神经纤维的异常生长缓解小鼠银屑病模型的皮肤瘙痒不适感。因此,L-茶氨酸局部给药可成为治疗银屑病慢性瘙痒的一种潜在方法。 展开更多
关键词 银屑病 瘙痒 L-茶氨酸 肿瘤坏死因子-Α 神经末梢异常生长
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星形胶质细胞-小胶质细胞的交互对话在神经炎症中的双重作用 被引量：17
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作者 郭壮 周利君 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2021年第18期2432-2436,共5页
中枢神经系统(central nervous system,CNS)中的胶质细胞不仅是营养支持细胞,同时也是重要的神经炎症反应细胞。急性炎症反应一般有利于组织损伤的修复、细胞碎屑和病原体的清除。而慢性神经炎症是各种疾病的危险因素,如神经退行性疾病... 中枢神经系统(central nervous system,CNS)中的胶质细胞不仅是营养支持细胞,同时也是重要的神经炎症反应细胞。急性炎症反应一般有利于组织损伤的修复、细胞碎屑和病原体的清除。而慢性神经炎症是各种疾病的危险因素,如神经退行性疾病。星形胶质细胞和小胶质细胞是介导CNS神经炎症最重要的两类胶质细胞。它们不仅会发生动态的表型变化,分泌细胞因子;而且两者之间都存在着紧密的交互对话(crosstalk)。本综述将首先介绍星形胶质细胞和小胶质细胞研究的新近进展,并重点介绍两者交互对话在脑内神经炎症中的双重作用。最后将详细讨论它们对神经退行性疾病的影响。分析这一动态调控关系有助于更深层次地认识神经炎症对机体的双重作用,为防治神经退行性病变等神经系统疾病提供全新的视角。 展开更多
关键词 星形胶质细胞 小胶质细胞 交互对话 神经炎症 神经退行性疾病
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原发性灼口综合征的研究进展 被引量：5
5
作者 李莹 李清 +2 位作者 王璇 周利君 谈智 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2022年第19期2486-2490,共5页
原发性灼口综合征(burning mouth syndrome,BMS)是以舌部为主要发病部位,持续(慢性)或反复口腔烧灼感为主要症状,但无明显临床损害和组织学改变、无明确病因的慢性顽固性黏膜疼痛疾病。由于其流行病学、病因和发病机制尚不清楚,目前缺... 原发性灼口综合征(burning mouth syndrome,BMS)是以舌部为主要发病部位,持续(慢性)或反复口腔烧灼感为主要症状,但无明显临床损害和组织学改变、无明确病因的慢性顽固性黏膜疼痛疾病。由于其流行病学、病因和发病机制尚不清楚,目前缺乏诊断金标准和有效的治疗方法。本文从BMS命名和归类的演变、病理机制、诊断方法(问卷调查、影像学检查、血清或唾液测试)以及治疗性诊断等方面进行综述。随着临床实践和研究的深入,BMS病理机制的了解和诊断检测方法的正确使用有望受益。 展开更多
关键词 灼口综合征 病因学 发病机理 生物学标志物 治疗
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持续血浆趋化因子C-X-C基序配体12增加导致疼痛的慢性化 被引量：4
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作者 张辉 麦春林 +7 位作者 许雅南 林震嘉 揭英桃 熊媖 唐源 刘先国 谈智 周利君 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2020年第16期2171-2176,共6页
目的探讨外周神经损伤后血浆趋化因子C-X-C基序配体12(CXCL12)的变化及其在疼痛慢性痛化中的作用。方法采用Western blot和ELISA法检测保留性神经损伤(SNI)经典慢性疼痛模型前后血浆CXCL12时程变化;通过实验观察正常小鼠尾静脉注射外源... 目的探讨外周神经损伤后血浆趋化因子C-X-C基序配体12(CXCL12)的变化及其在疼痛慢性痛化中的作用。方法采用Western blot和ELISA法检测保留性神经损伤(SNI)经典慢性疼痛模型前后血浆CXCL12时程变化;通过实验观察正常小鼠尾静脉注射外源性CXCL12的痛行为学变化,及静脉注射CXCL12中和抗体对CXCL12与SNI诱导机械痛敏的影响。结果Western blot结果表明SNI 1 d后血浆CXCL12蛋白明显增多,并持续至SNI 9 d;ELISA数据显示血浆CXCL12浓度从对照(35.10±4.11)pg/mL升高到SNI 1d(90.8±8.33)pg/mL(P<0.05)、并持续增加至SNI 21 d(161.20±18.88)pg/mL,P<0.0001。连续9 d静脉注射CXCL12(1.0~5.0 ng/mL,200μL)剂量依赖性引起双侧机械痛觉过敏;而中和血浆CXCL12能缓解静脉注射CXCL12及SNI诱导的双侧机械痛敏。结论血浆CXCL12的持续增加是疼痛慢性化至关重要的因素。 展开更多
关键词 神经病理性疼痛 保留性神经损伤 CXCL12 中和抗体
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皮下注射巨噬细胞集落刺激因子诱导机械痛超敏的性别二态性 被引量：2
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作者 彭湘格 林震嘉 +5 位作者 张辉 冷世泽 唐源 郑钰凡 谈智 周利君 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期395-402,共8页
【目的】通过正常小鼠皮下注射巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)来研究其对疼痛行为的影响是否存在性别差异,并初步探讨其机制。【方法】将30只10周龄C57 BL/6J小鼠随机分为三组(每组10只,雌雄各半):牛血清白蛋白对照组(BSA,0.3μg)、低剂量... 【目的】通过正常小鼠皮下注射巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)来研究其对疼痛行为的影响是否存在性别差异,并初步探讨其机制。【方法】将30只10周龄C57 BL/6J小鼠随机分为三组(每组10只,雌雄各半):牛血清白蛋白对照组(BSA,0.3μg)、低剂量M-CSF组(L M-CSF,0.075μg)、高剂量M-CSF组(H M-CSF,0.3μg)。分别于左大腿内侧皮下注射50μL BSA或M-CSF,每日1次,连续3 d。给药前后采用von-Frey机械敏感性测试检测各组小鼠的机械撤足阈值(PWT)。再用免疫荧光染色法观察皮肤离子钙结合衔接蛋白1(Iba1),L5-L6 DRG及腰段脊髓背角中降钙素基因相关肽(CGRP)、磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK)的表达变化。【结果】在雌性小鼠中,只有高剂量M-CSF引起显著的机械痛超敏,而在雄性小鼠中两个剂量都引起明显痛觉异常。机制上,高剂量M-CSF诱导雌性小鼠皮下巨噬细胞大量聚集(Iba1标识);雄性小鼠巨噬细胞呈浓度依赖性增多,但没有雌性小鼠明显。在DRGs中,p-ERK与CGRP表达增多也存在类似的性别差异。值得注意的是,CGRP在雄性小鼠DRG的神经纤维中显著升高。相应地,脊髓背角浅层的p-ERK与CGRP+末梢在M-CSF处理后显著增多,且雄性小鼠多于雌性小鼠。【结论】皮下注射M-CSF诱发的机械性痛觉超敏存在性别二态性,并与外周巨噬细胞扩增和伤害性通路敏化的差异性变化有关。 展开更多
关键词 痛觉超敏 性别二态性 巨噬细胞 巨噬细胞集落刺激因子 降钙素基因相关肽
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一种手动解离、免疫磁珠分选加TIC培养液改良的小鼠原代海马小胶质细胞培养法
8
作者 许雅南 周利君 +4 位作者 揭英桃 麦春林 张珺 林震嘉 谈智 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期883-893,共11页
本文旨在研究手动解离、免疫磁珠分选加TIC培养液改良原代小胶质细胞的培养方法,获得高活性、高纯度且与在体状态更接近的小鼠海马原代小胶质细胞,以用于小胶质细胞的相关研究。选取2~4周龄SPF级C57BL/6J小鼠,PBS灌注后取海马组织剪碎,... 本文旨在研究手动解离、免疫磁珠分选加TIC培养液改良原代小胶质细胞的培养方法,获得高活性、高纯度且与在体状态更接近的小鼠海马原代小胶质细胞,以用于小胶质细胞的相关研究。选取2~4周龄SPF级C57BL/6J小鼠,PBS灌注后取海马组织剪碎,使用成年鼠脑组织解离试剂盒手动解离海马组织,获得单细胞悬液,再经去碎片试剂去除髓鞘等组织碎片。在4℃孵育CD11b免疫磁珠15 min后,细胞悬液经免疫磁珠细胞分选(magnetic activated cell sorting, MACS)两次过柱提高小胶质细胞纯度。将分选后细胞离心重悬,种在多聚赖氨酸包被后的24孔培养板中,用完全培养基或TIC培养液(以TGF-β、IL-34和胆固醇为主要营养成分的无血清培养基)培养4 d后进行其他检测。结果显示:(1)使用成年鼠脑组织解离试剂盒手动解离可得到含有(56.03±2.10)%活细胞的单细胞悬液;(2)与免疫抗体包被筛选法(immunopanning)相比,经过MACS两步分选后,可得到更多且纯度高达(86.20±0.68)%的小胶质细胞;(3)使用TIC培养液培养4 d后,可获得分枝状、形态类似静息状态的原代小胶质细胞;(4) q RT-PCR检测显示,与完全培养基培养相比,TIC培养液培养的小胶质细胞在4 d和7 d后TNF-α、IL-1β及CCL2 m RNA表达水平更接近急性分离后的小胶质细胞。上述结果提示,采用手动解离海马组织,经MACS两步分选及TIC培养后,可以获得高纯度、高活性且接近在体静息状态的小胶质细胞。 展开更多
关键词 小胶质细胞 海马 磁珠分选 原代培养 细胞因子
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