目的从亚洲带绦虫成虫cDNA质粒文库中识别并预测自吞噬相关蛋白（autophagy related protein3-like,APG3）基因,并将该基因进行克隆表达,为进一步研究其生物学功能提供基础依据。方法利用生物信息网站及其他分析软件包,分析该蛋白质理...目的从亚洲带绦虫成虫cDNA质粒文库中识别并预测自吞噬相关蛋白（autophagy related protein3-like,APG3）基因,并将该基因进行克隆表达,为进一步研究其生物学功能提供基础依据。方法利用生物信息网站及其他分析软件包,分析该蛋白质理化特性等,并将其克隆到原核表达质粒pET-28a（＋）中,经PCR、双酶切及测序鉴定之后诱导表达,表达产物通过十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）进行鉴定。结果该基因全长为1 331 bp,编码区为92-1099,编码335个氨基酸,理论分子量、等电点分别为37 498.5 Da和4.71。PCR、双酶切及DNA测序结果均表明pET-28a（＋）-Ta APG3重组质粒构建成功。经过尿素破包涵体法得到纯化蛋白。结论发现亚洲牛带绦虫APG3基因,成功构建重组原核表达质粒并表达出融合蛋白。展开更多
