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CD44v6表达与大肠癌预后的相关性研究 被引量：6
1
作者 李升平 王吉甫 +3 位作者 张昌卿 潭卫民 刘锦怀 潘邦敏 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第4期294-295,共2页
目的探讨CD44v6表达与大肠癌预后的关系。方法对156例大肠癌存档石蜡组织标本进行重新切片,采用CD44v6鼠单克隆抗体进行免疫组化染色(LSAB法)。结果 CD44v6表达与年龄、性别、肿瘤大小、部位、组织类型无关;CD44v6阳性表达率在Dukes C/... 目的探讨CD44v6表达与大肠癌预后的关系。方法对156例大肠癌存档石蜡组织标本进行重新切片,采用CD44v6鼠单克隆抗体进行免疫组化染色(LSAB法)。结果 CD44v6表达与年龄、性别、肿瘤大小、部位、组织类型无关;CD44v6阳性表达率在Dukes C/D期较Dukes A、B期高,有肿瘤转移及术后复发者较无肿瘤转移和未复发者高;CD44v6表达阳性者术后生存率较表达阴性者低,Cox模型生存分析,CD44v6未能进入最终的回归方程。结论 CD44v6在大肠癌转移和复发中可能具有一定的作用,但尚不能作为预测大肠癌预后的独立的生物学指标。 展开更多
关键词 大肠肿瘤 CD44V6 抗原 预后
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单克隆抗人B型红细胞抗体NAN123
2
作者 萧锡宾 张昌卿 +3 位作者 张胜乐 冯凯涛 叶永照 陈爱楣 《单克隆抗体通讯》 CSCD 1991年第4期60-62,共3页
NAN 123单克隆抗体能凝集人B型红细胞,凝集反应能被2 ^(-6)M的蜜二糖或 2 ^(-2)M的半和糖完全阻断。类似的结果在以CNE_2细胞为靶抗原的ELISA反应中也可观察到。实验提示,NAN123抗体对B血型抗原末端的α-D-半乳糖有选择性识别能力。
关键词 单克隆抗体 抗B抗体 B型红细胞
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流式细胞仪的发展历史及其原理和应用进展 被引量：40
3
作者 魏熙胤 牛瑞芳 《现代仪器》 2006年第4期8-11,共4页
流式细胞分析(flow cytometry FCM),即流式细胞术,是用流式细胞仪(flow cytome-ter FCM)测量液相中悬浮细胞或微粒的一种现代分析技术。它是众多不同学术背景、不同科技领域相结合的结晶。它是物理学、生物学、医学等综合运用的产物。... 流式细胞分析(flow cytometry FCM),即流式细胞术,是用流式细胞仪(flow cytome-ter FCM)测量液相中悬浮细胞或微粒的一种现代分析技术。它是众多不同学术背景、不同科技领域相结合的结晶。它是物理学、生物学、医学等综合运用的产物。本文就流式细胞术的发展历史、流式细胞仪的原理及在各领域的应用进行综述,阐明现代流式细胞术由于结合单克隆抗体技术、定量荧光细胞化学技术,使其在生物学、临床医学、药物学、材料学等众多研究领域中的应用有更加突飞猛进的发展。 展开更多
关键词 流式细胞术(FCM) 历史 原理 应用
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晚期非小细胞肺癌循环血管内皮细胞水平的研究 被引量：27
4
作者 黄纯 李凯 +9 位作者 魏熙胤 牛瑞芳 孙燕 王金万 朱允中 徐丽焱 刘晓晴 高红军 周静敏 王秀问 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第10期780-783,共4页
目的分析晚期非小细胞肺癌(NSCLC)患者治疗前后外周血中循环血管内皮细胞(CEC)的变化,探讨CEC在NSCLC中的应用价值。方法采用NP方案联合内皮抑素(治疗组)及单用NP方案(对照组)治疗晚期NSCLC 67例,流式细胞法检测治疗前后外周血CEC数量... 目的分析晚期非小细胞肺癌(NSCLC)患者治疗前后外周血中循环血管内皮细胞(CEC)的变化,探讨CEC在NSCLC中的应用价值。方法采用NP方案联合内皮抑素(治疗组)及单用NP方案(对照组)治疗晚期NSCLC 67例,流式细胞法检测治疗前后外周血CEC数量及细胞角蛋白(CK)水平。结果治疗组临床有效率为44．4％,对照组为27．3％(P=0．176);治疗组临床受益率为80．0％,对照组为50．0％(P=0．012)。治疗组肿瘤进展时间(TTP)为146．7 d,对照组为91．1 d (P=0．061)。当TTP的cut-off值>170时,两组TTP比较,差异有统计学意义(cut-off值=170,P= 0．034;cut-off值=180,P=0．009)。治疗组CEC平均下降(0．29±0．47)％,对照组平均下降(0．01±0．43)％(P=0．033)。全部患者治疗前CEC与CK水平呈正相关(r=0．381,P=0．013),治疗后亦呈正相关(r=0．450,P=0．004)。结论化疗联合血管靶向治疗晚期NSCLC优于单用化疗,CEC是一个较好的预测疗效的指标。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 循环血管内皮细胞
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胃癌患者术前NLR PLR RDW值与病理参数的关系 被引量：25
5
作者 贾静 陈颖 +4 位作者 林露 王淋 陈德东 叶星明 陈燕 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期78-82,共5页
目的:研究外周血中性粒细胞与淋巴细胞比值(neutrophil-to-lymphocyte ratio,NLR)、血小板与淋巴细胞比值(platelet-tolymphocyte ratio,PLR)、红细胞分布宽度(red blood cell distribution width,RDW)与胃癌患者术后临床病理参数之间... 目的:研究外周血中性粒细胞与淋巴细胞比值(neutrophil-to-lymphocyte ratio,NLR)、血小板与淋巴细胞比值(platelet-tolymphocyte ratio,PLR)、红细胞分布宽度(red blood cell distribution width,RDW)与胃癌患者术后临床病理参数之间的关系。方法:回顾性分析福建省肿瘤医院2012年2月至2014年12月初诊入院手术的434例胃癌患者术前全血细胞计数及术后病理资料,同时选取年龄及性别匹配的342例慢性萎缩性胃炎患者及309例健康对照者进行对比分析。结果:胃癌组NLR、PLR和RDW的中位数值显著高于胃炎及正常对照组(P<0.000 1)。Kruskal-Wallis相关分析显示患者NLR、PLR及RDW值随着病理分期的进展逐步升高(NLR、PLR:P<0.000 1;RDW:P<0.05),但与肿瘤分化程度和肿瘤生长部位无显著相关。多因素回归分析结果表明NLR和PLR是肿瘤病理分期和T分期的独立相关因素(P<0.000 1)。ROC曲线分析结果显示NLR和PLR对术前预判胃癌T分期有一定诊断疗效。结论:胃癌患者术前NLR及PLR值与胃癌TNM分期密切相关,可作为术前分期预判的非特异性标志物。 展开更多
关键词 胃癌 TNM分期 中性粒细胞与淋巴细胞比值 血小板与淋巴细胞比值 红细胞分布宽度
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乳腺癌多药耐药细胞MCF-7/ADR中Twist的表达与EMT现象的实验研究 被引量：14
6
作者 张飞 史玉荣 +5 位作者 张霖 张斌 魏熙胤 杨毅 席广民 牛瑞芳 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期361-365,共5页
目的:观察乳腺癌多药耐药细胞MCF-7/ADR中Twist表达及上皮-间质转化现象,探讨其与MCF-7/ADR侵袭转移能力增强的相关性。方法:分别以RT-PCR法、链霉亲和素-生物素酶复合物(Strept avidin biotin complex,SABC)免疫组织化学方法和Western ... 目的:观察乳腺癌多药耐药细胞MCF-7/ADR中Twist表达及上皮-间质转化现象,探讨其与MCF-7/ADR侵袭转移能力增强的相关性。方法:分别以RT-PCR法、链霉亲和素-生物素酶复合物(Strept avidin biotin complex,SABC)免疫组织化学方法和Western blot法检测乳腺癌细胞系MCF-7及其多药耐药株MCF-7/ADR中介导EMT发生的转录因子Twist、上皮性标记基因E-钙粘素(E-cadherin)和间质性标记基因N-钙粘素(N-cadherin)表达的改变情况。结果:亲本细胞MCF-7中E-cadherin mRNA的表达和蛋白水平的表达均为阳性,Twist和N-cadherin表达阴性;多药耐药株MCF-7/ADR中E-cadherin mRNA和蛋白表达缺失,而在亲本细胞MCF-7中不表达的Twist和N-cadherin表达阳性。结论:在多药耐药乳腺癌细胞MCF-7/ADR中,其侵袭力增强可能与Twist介导的EMT发生有关。 展开更多
关键词 乳腺癌 多药耐药 EMT 转移
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肺癌脑转移分子机制的研究进展 被引量：15
7
作者 李晓霞 李文良 马勇杰 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 北大核心 2013年第5期387-391,共5页
目的:总结肺癌脑转移的机制及近年的研究进展。方法:应用PubMed、Medline数据库检索系统,以"肺癌、脑转移和血管生成"等为关键词,检索2000-01-2012-06年的相关文献。纳入标准:1)肺癌脑转移;2)血管生成;3)分子机制。根据纳入... 目的:总结肺癌脑转移的机制及近年的研究进展。方法:应用PubMed、Medline数据库检索系统,以"肺癌、脑转移和血管生成"等为关键词,检索2000-01-2012-06年的相关文献。纳入标准:1)肺癌脑转移;2)血管生成;3)分子机制。根据纳入标准分析文献34篇。结果:多种机制、多个环节参与肺癌脑转移瘤的发生和进展:肺癌脑转移瘤组织及脑转移瘤微血管内皮细胞中高度开放钙激活钾(KCa)通道,可作为血-脑瘤屏障(BTB)通透性调节的作用靶点;VEGF-C通过增强肿瘤和特异器官的亲和性并促进癌细胞向淋巴管方向运动,实现肺癌脑转移的发生进展;神经递质受体与神经元的相互作用促进肺癌细胞至脑的转移;CXCL12/CXCR4的表达能易化癌细胞穿越血脑屏障(BBB);抑癌基因、癌胚抗原和基质金属蛋白酶等相关蛋白的异常表达与肺癌脑转移相关。结论:肺癌脑转移机制是复杂的,深入探究肺癌脑转移的相关因素及发生发展机制,不但为临床药物研制提供新的思路,也将对延长患者生存时间和提高生存质量等具有重要意义。 展开更多
关键词 肺肿瘤 血管生成 脑转移 综述文献
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重组人血管内皮抑制素对小鼠肿瘤和心肌中血管结构及血管生成相关因子表达的影响 被引量：13
8
作者 张翠翠 李凯 +3 位作者 魏熙胤 陈程 袁静 王晶 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期415-420,共6页
目的观察重组人血管内皮抑制素对小鼠肿瘤及心肌中微血管影响的差异。方法40只小鼠随机分为空白对照组（未荷瘤，生理盐水100ml／d）、药物对照组（未荷瘤，重组人血管内皮抑制素400μg／d）、模型组（荷瘤，生理盐水100μl／d）和实验... 目的观察重组人血管内皮抑制素对小鼠肿瘤及心肌中微血管影响的差异。方法40只小鼠随机分为空白对照组（未荷瘤，生理盐水100ml／d）、药物对照组（未荷瘤，重组人血管内皮抑制素400μg／d）、模型组（荷瘤，生理盐水100μl／d）和实验组（荷瘤，重组人血管内皮抑制素400μg／d），分别处理28d。实验前后称量小鼠体重，测量移植瘤体积。采用免疫组化法检测小鼠心脏和移植瘤组织中基质金属蛋白酶（MMP）-2、MMP-9、缺氧诱导因子1α（HIF—1α）以及血管内皮生长因子（VEGF）蛋白的表达情况，计数微血管密度（MVD）。以CD34与Masson双染法观察微血管结构的变化。结果实验组小鼠肿瘤体积的增加值为（48．18±37．31）mm^3，低于模型组[（113．80±73．27）mm^3，P〈0．05]；各组小鼠体重变化的差异无统计学意义（P〉0．05）。应用重组人血管内皮抑制素后，移植瘤组织中MMP-9和VEGF蛋白的表达显著降低，移植瘤组织中MMP-2、HIF-1α以及心肌组织中MMP-2、MMP-9、HIF—1α和VEGF蛋白的表达均无显著变化；移植瘤组织的MVD显著降低，胶原覆盖血管的比例升高，而心肌组织的MVD和结构几乎无变化。结论重组人血管内皮抑制素可通过下调移植瘤组织中MMPs和VEGF蛋白的表达，降低MVD，抑制移植瘤的生长，并可使移植瘤血管趋向成熟，但不能降低心肌组织中MMPs的表达和成熟血管的MVD。 展开更多
关键词 重组人血管内皮抑制素 移植瘤组织 心肌组织 微血管 小鼠
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Girdin蛋白调控恶性胶质瘤细胞凋亡的研究 被引量：9
9
作者 王静 丁婷 +3 位作者 刘晓丽 李文良 谷峰 马勇杰 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期733-736,共4页
目的观察抑制恶性胶质瘤LN229细胞中Girdin蛋白的表达对细胞凋亡的影响，并探讨其分子机制。方法利用小RNA干扰（siRNA）技术，沉默LN229细胞中Girdin的表达，得到实验组克隆（siardin／LN229），阴性对照组命名为scr／LN229。采用Weste... 目的观察抑制恶性胶质瘤LN229细胞中Girdin蛋白的表达对细胞凋亡的影响，并探讨其分子机制。方法利用小RNA干扰（siRNA）技术，沉默LN229细胞中Girdin的表达，得到实验组克隆（siardin／LN229），阴性对照组命名为scr／LN229。采用Westemblot技术检测Girdin、细胞色素c（Cyt—C）及Bad蛋白水平的变化。利用增殖实验、噻唑蓝（MTT）比色法检测LN229细胞的存活率；应用流式细胞术检测线粒体释放的Cyt—C量的变化。建立成瘤模型（每组20只），观察Girdin降表达对移植瘤生长情况的影响。结果siRNA技术有效沉默了LN229细胞中Girdin的表达。增殖实验显示siGirdin／LN229细胞增殖能力下降（P〈0．05），至第6天时实验组细胞数为（15．08±1．17）×10^4；对照组为（53．93±6．26）×10^4。MTr实验发现siGirdin／LN229细胞的存活率明显下降（P〈0．05），第5天时实验组为（323．15±57．01）％；对照组为（640．67±59．66）％。流式检测显示siGirdin／LN229细胞Cyt—C含量增加，平均荧光强度为12531．00±1412．98，对照组为183．67±41．55（P〈0．01）。分析Westernblot结果显示，siGirdin／LN229细胞Cyt—C、Bad的相对灰度值分别为3．57±0．43和4．78±1．03，均高于对照组Cyt—C、Bad的表达水平（相对灰度值分别为1．13±0．11、1．78±0．20）。体内实验证实Girdin降表达组肿瘤体积明显小于对照组（P〈0．05），至第7．5周时，siGirdiir／LN229组肿瘤体积为（36．42±2．00）mm3，对照组为（262．42±24．12）mm3。结论Girdin能够调控胶质瘤细胞LN229的凋亡，其调节细胞凋亡的机制可能与Cyt—C从线粒体释放及Bad的表达有关。 展开更多
关键词 胶质瘤 Girdin 脱噬作用
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cDNA文库构建方法的进展 被引量：4
10
作者 张霖 牛瑞芳 《生命的化学》 CAS CSCD 2002年第6期577-580,共4页
天津医科大学附属肿瘤医院中心实验室,天津
关键词 CDNA文库 构建方法 基因克隆 研究进展
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趋化因子受体4下调抑制乳腺癌转移的研究 被引量：9
11
作者 张霖 史玉荣 +3 位作者 魏熙胤 杨毅 牛瑞芳 姚智 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第11期1401-1403,共3页
目的采用RNA干扰(RNAi)技术封闭乳腺癌细胞趋化因子受体4(CXCR4)基因,观察封闭效果及癌细胞的体外侵袭能力的变化及转移相关基因的变化。方法设计3段siRNA,分别构建pSilencer封闭载体,转染高表达CXCR4基因的乳腺癌细胞系T47D,通过流式... 目的采用RNA干扰(RNAi)技术封闭乳腺癌细胞趋化因子受体4(CXCR4)基因,观察封闭效果及癌细胞的体外侵袭能力的变化及转移相关基因的变化。方法设计3段siRNA,分别构建pSilencer封闭载体,转染高表达CXCR4基因的乳腺癌细胞系T47D,通过流式细胞术及定量聚合酶链反应(PCR)的方法分别从蛋白水平和转录水平检测CXCR4表达率的改变;采用Matri- gel对转染后乳腺癌细胞体外侵袭能力的变化进行检测,应用定量PCR分析其他转移相关基因的变化。结果3组转染CXCR4-siRNA细胞定量PCR检测CXCR4抑制率分别为95.67%、85.94%、98.25%。流式细胞仪检测CXCR4表达率分别为4.95%、11.10%、5.53%,与转染Control-siRNA细胞比较差异有统计学意义(P<0.01)。3组封闭细胞的侵袭指数分别为0.037、0.290和0.188。封闭细胞E-钙黏蛋白(E-cad)表达有增加趋势,胰岛素样生长因子结合蛋白-5(IGFBP-5)表达有下降的趋势。结论CXCR4在乳腺癌转移中具有重要作用,mRNA具有强大的基因敲除能力,为肿瘤转移的基因治疗奠定实验基础。 展开更多
关键词 乳腺癌 趋化因子受体 小干扰RNA 转移
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血管内皮抑制素对Calu-6裸鼠移植瘤的生物学效应 被引量：8
12
作者 王晶 黄纯 +4 位作者 魏熙胤 战忠利 孙慧 杨毅 李凯 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期266-269,共4页
目的探讨血管内皮抑制素对Calu-6裸鼠移植瘤生长及新生血管形成的影响。方法在荷瘤裸鼠皮下注射不同剂量的血管内皮抑制素，观察注射后肿瘤体积的变化；应用免疫组化SABC法检测肿瘤组织中血管内皮生长因子（VEGF）、生存素（survivin）... 目的探讨血管内皮抑制素对Calu-6裸鼠移植瘤生长及新生血管形成的影响。方法在荷瘤裸鼠皮下注射不同剂量的血管内皮抑制素，观察注射后肿瘤体积的变化；应用免疫组化SABC法检测肿瘤组织中血管内皮生长因子（VEGF）、生存素（survivin）和环氧化酶-2（COX-2）蛋白的表达以及微血管密度（MVD）的变化；流式细胞术检测循环血管内皮细胞（CECs）的含量；应用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）和实时定量PCR检测外周血中CDl46和CDl05mRNA的表达。结果经血管内皮抑制素治疗后，荷瘤鼠肿瘤体积明显减小；肿瘤组织中VEGF、survivin和COX-2蛋白的表达以及MVD均下降，且各治疗组与阳性对照组间的差异均有统计学意义（均P〈0．05）；外周血中CECs、CDl46和CDl05mRNA的含量均明显下降；活化CECs的含量与肿瘤组织中survivin和VEGF的表达以及MVD的变化均呈正相关。结论血管内皮抑制素可通过下调移植瘤中VEGF、survivin和COX-2蛋白的表达以及减少MVD抑制肿瘤生长；活化CECs将可能作为理想的预测抗血管形成治疗预后的标记物应用于临床。 展开更多
关键词 血管内皮抑制素 循环血管内皮细胞 生存素 血管内皮生长因子 微血管 密度
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结肠癌肝转移与CXCR1/CXCL8信号传导通路关系的研究 被引量：7
13
作者 张忠国 牛瑞芳 +1 位作者 孙宝存 郝希山 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 2008年第13期1010-1013,共4页
目的:探讨趋化因子受体与配体(CXCR1/CXCL8)信号通路在结肠癌肝转移中的作用。方法:分析高分化、非转移性结肠癌细胞株(colon205)与低分化、肝转移结肠癌细胞株(lovo)、结肠癌原发灶及肝转移灶、正常结肠黏膜及肝组织中CXCR1的表达;分析... 目的:探讨趋化因子受体与配体(CXCR1/CXCL8)信号通路在结肠癌肝转移中的作用。方法:分析高分化、非转移性结肠癌细胞株(colon205)与低分化、肝转移结肠癌细胞株(lovo)、结肠癌原发灶及肝转移灶、正常结肠黏膜及肝组织中CXCR1的表达;分析CXCR1/CXCL8对瘤细胞增殖、侵袭能力、细胞骨架及迁移的影响。结果:正常结肠黏膜、高分化与低分化结肠腺癌中CXCR1的表达率分别为2.214%、6.652%和5.198%;正常肝组织、肝转移灶CXCR1表达率为2.728%和22.62%;lovo、colon205胞膜CXCR1表达率为3.15%和6.67%;CX-CL8刺激48h,胞膜CXCR1表达率分别为50.45%和4.93%;CXCL8刺激前、后lovo细胞的增殖能力分别为3.27%和24.17%;CXCL8刺激后,lovo细胞F-actin表现出解聚-聚合状态的改变,聚合程度呈时间性递增,高聚合状态表现在刺激后的72h;CXCR1/CXCL8作用前、后的lovo细胞侵袭数分别为6.39±1.8和74.2±13.28(P<0.01),趋化运动细胞数分别为18.53±5.59和89.67±6.16(P<0.05)。结论:在CX-CL8作用下,肝转移瘤细胞高表达CXCR1;CXCR1/CXCL8促进肝转移瘤细胞的生长、增殖,诱导肝转移性结肠癌细胞的定向迁移,CXCR1/CXCL8信号通路在结肠癌归巢性迁移过程中发挥作用。 展开更多
关键词 结肠肿瘤 肿瘤转移 受体 趋化因子 信号传导
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Ku蛋白表达与鼻咽癌细胞放射敏感性关系初探 被引量：6
14
作者 朱小东 曲颂 +2 位作者 黎丹戎 曹骥 张玮 《中华放射医学与防护杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期128-131,共4页
目的探讨不同放射敏感性鼻咽癌细胞株CNE-1（鼻咽高分化鳞癌细胞株）、CNE-2（鼻咽低分化鳞癌细胞株）中DNA依赖蛋白激酶（DNA—PK）的调节亚基Ku70、Ku80基因的表达与鼻咽癌细胞放射敏感性的关系。方法通过克隆形成实验测定CNE-1、CNE-... 目的探讨不同放射敏感性鼻咽癌细胞株CNE-1（鼻咽高分化鳞癌细胞株）、CNE-2（鼻咽低分化鳞癌细胞株）中DNA依赖蛋白激酶（DNA—PK）的调节亚基Ku70、Ku80基因的表达与鼻咽癌细胞放射敏感性的关系。方法通过克隆形成实验测定CNE-1、CNE-2不同剂量的存活分数，并用线性二次模型拟合剂量存活曲线求出放射生物学参数α、β、SF2、MID值，以及四氮唑蓝比色分析法（MTT法）检测^60Co γ射线4Gy照射后的细胞群体生长情况，以评价两株细胞的放射敏感性。逆转录实时荧光定量PCR技术（RT-FQ-PCR）检测照射前、后不同时间及不同剂量CNE-1、CNE-2细胞mRNA水平Ku70、Ku80基因的定量表达。结果CNE-1在各个剂量点的存活分数均比CNE-2高，MID值分别为2．78、1．61，SF2值分别为0．627、0．341；4Gy照射后的存活率分别为88．2％、72．3％；RT-FQ-PCR显示两株细胞中均有Ku70、Ku80基因的表达，其相对表达量之比分别为1．76±0．54（P=0．07）、13．82±3．78（P=0．004），Ku80基因在CNE-2细胞中存在剂量依赖关系。结论实验验证了CNE-2比CNE-1对射线更敏感，Ku80基因的表达与鼻咽癌细胞的放射敏感性有关。 展开更多
关键词 鼻咽癌细胞系 KU蛋白 放射敏感性
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DNA-PKcs表达与鼻咽癌细胞株放射敏感性的关系 被引量：6
15
作者 曲颂 朱小东 +2 位作者 黎丹戎 张玮 曹骥 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期237-240,共4页
目的探讨不同放射敏感性鼻咽癌细胞株CNE-1(鼻咽高分化鳞癌细胞株)和CNE-2(鼻咽低分化鳞癌细胞株)中DNA依赖蛋白激酶(DNA-PK)的催化亚基DNA-PKcs基因的表达与鼻咽癌细胞放射敏感性的关系。方法通过克隆形成实验测定CNE-1、CNE-2不同剂... 目的探讨不同放射敏感性鼻咽癌细胞株CNE-1(鼻咽高分化鳞癌细胞株)和CNE-2(鼻咽低分化鳞癌细胞株)中DNA依赖蛋白激酶(DNA-PK)的催化亚基DNA-PKcs基因的表达与鼻咽癌细胞放射敏感性的关系。方法通过克隆形成实验测定CNE-1、CNE-2不同剂量的存活分数,并用线性二次模型拟合剂量存活曲线求出放射生物学参数α、β、SF2、MID值,以及四氮唑蓝比色分析法(MTT法)检测60Co-γ线4Gy照射后12h细胞的存活率,以评价两株细胞的放射敏感性。逆转录实时荧光定量PCR技术(RT-FQ-PCR)检测照射前、后不同时间及不同剂量CNE-1、CNE-2细胞mRNA水平DNA-PKcs基因的定量表达。结果CNE-1在各个剂量点的存活分数均比CNE-2高,MID值分别为2.78、1.61,SF2值分别为0.627、0.341;4Gy照射后12h的存活率分别为88.2%、72.3%;RT-FQ-PCR显示两株细胞中均有DNA-PKcs基因的表达,其相对表达量之比为7.54±2.71(t=4.17,P=0.014),表达差异有统计学意义,DNA-PKcs基因在CNE-2细胞中存在时间、剂量依赖关系。结论实验验证了CNE-2比CNE-1对射线更敏感,DNA-PKcs基因的表达与鼻咽癌细胞的放射敏感性有关。 展开更多
关键词 鼻咽癌细胞 实时荧光定量PCR DNA-PKCS 放射敏感性
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流式细胞仪检测甘草多糖对小鼠S-180肉瘤的凋亡诱导作用 被引量：8
16
作者 史玉荣 魏熙胤 +2 位作者 杨毅 牛瑞芳 宋飞 《现代仪器》 2005年第4期30-32,36,共4页
随着单克隆抗体及标记技术的发展,流式细胞术(FlowCytometry,FCM)检测细胞凋亡技术已广为使用,为探讨中药甘草多糖抑瘤作用及其机制,本文应用流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡,结果表明甘草多糖抑制肿瘤生长可能与诱导细胞凋亡有关。
关键词 流式细胞术 甘草多糖 S-180肉瘤 凋亡 细胞凋亡 诱导作用 流式细胞仪 检测 肉瘤 小鼠
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肝细胞癌在血中微小转移的检测 被引量：8
17
作者 牛瑞芳 杨毅 +2 位作者 魏熙胤 郝继辉 黄建英 《中华消化杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第9期543-545,共3页
目的　肝细胞癌患者术后复发常是术前不能检出微转移灶或术中瘤细胞释放入血之故。建立早期检出肝细胞癌 (HCC)血中微小转移的方法并评价其临床意义。方法　采用巢式RT PCR检测肝细胞特异白蛋白 (ALB)mRNA和甲胎蛋白 (AFP)mRNA在HCC患... 目的　肝细胞癌患者术后复发常是术前不能检出微转移灶或术中瘤细胞释放入血之故。建立早期检出肝细胞癌 (HCC)血中微小转移的方法并评价其临床意义。方法　采用巢式RT PCR检测肝细胞特异白蛋白 (ALB)mRNA和甲胎蛋白 (AFP)mRNA在HCC患者外周血有核细胞成分及组织标本中的表达情况。并以肝癌细胞系HepG2 、SMMC772 1,乳腺癌细胞MCF 7作为阳性、阴性对照。结果　在肝组织 ,无论是癌、癌旁还是正常组织 ,ALBmRNA的表达均为阳性 (8/8) ;而AFPmRNA在癌组织7/8例表达 ,癌旁 5 /8例表达。外周血表达的情况为 :同一组标本ALBmRNA的阳性率为 75 .6 % (34 /4 5 ,P <0 .0 1) ,AFPmRNA的阳性率为 5 7.8% (2 6 /4 5 ,P <0 .0 1)。在有肝外转移和无肝外转移分组中 ,ALBmRNA和AFPmRNA的表达分别为 10 0 .0 % ,5 4.2 %和 90 .5 % ,2 9.2 %。结论　在HCC患者外周血有核细胞成分中检测ALBmRNA和AFPmRNA的表达 ,是预测转移、复发的简捷手段 ,若ALB与AFP二者联合使用 。 展开更多
关键词 肝细胞癌 血中微小转移 白蛋白MRNA 甲胎蛋白MRNA RT-PCR 临床意义
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胃癌中组织因子途径抑制剂2的表达及其与预后和肿瘤血管生成模式的相关性研究 被引量：6
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作者 冷雪 孙保存 +5 位作者 臧凤琳 赵秀兰 刘志勇 魏熙胤 张艳辉 张立华 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期433-438,共6页
目的:探讨胃癌中组织因子途径抑制剂2(tissue factor pathway inhibitor 2,TFPI-2)表达的临床意义及其与患者预后的关系,分析TFPI-2表达与胃癌组织中内皮依赖性血管和血管生成拟态的相关性。方法:采用免疫组化对187例胃癌标本进行TFPI-... 目的:探讨胃癌中组织因子途径抑制剂2(tissue factor pathway inhibitor 2,TFPI-2)表达的临床意义及其与患者预后的关系,分析TFPI-2表达与胃癌组织中内皮依赖性血管和血管生成拟态的相关性。方法:采用免疫组化对187例胃癌标本进行TFPI-2蛋白表达检测,分析其与临床病理参数的关系。通过CD34免疫组化染色评价肿瘤组织微血管密度,CD34/PAS双重染色观察胃癌中血管生成拟态的分布特征。结果:胃癌组织中TFPI-2阳性表达率约为48.1%(90/187),TFPI-2蛋白表达与肿瘤分化程度、TNM分期、淋巴结转移、浸润深度及远处转移有关,而与患者性别、年龄、肿瘤部位、肿瘤最大径及临床分期无关。KaplanMeier分析表明与低、中表达组相比,TFPI-2高表达组患者总生存期和无瘤生存期明显延长。TFPI-2与血管生成模式相关性分析显示,在所有胃癌组织中TFPI-2与内皮依赖性血管呈负相关,与血管生成拟态无关。在中、高分化胃癌组织中,TFPI-2与内皮依赖性血管呈负相关,与血管生成拟态无关。在低分化胃癌中TFPI-2与血管生成拟态呈正相关。结论:随着肿瘤恶性程度的增加TFPI-2蛋白表达有所降低,TFPI-2表达与胃癌预后密切相关。在分化程度较高的胃癌组织中,TFPI-2通过抑制内皮依赖性血管,抑制肿瘤浸润和转移,具有抑制胃癌进展的作用;在恶性程度较高的低分化胃癌中,TFPI-2促进血管生成拟态的形成,提示TFPI-2在胃癌血管生成模式中可能起到双向调节作用。 展开更多
关键词 胃癌 TFPI-2 浸润 转移 血管生成拟态 内皮依赖性血管
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热疗对人宫颈癌Hela细胞凋亡的影响 被引量：5
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作者 史玉荣 李丰彤 +3 位作者 于满 魏熙胤 牛瑞芳 杨毅 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2004年第9期496-498,共3页
目的:观察不同加温温度对人宫颈癌Hela细胞凋亡的影响。方法:人宫颈癌Hela细胞株常规方法培养,采用水浴加热法(温度为41℃、42.5℃、43.5℃、)对细胞进行加温处理,处理后继续培养24h。用流式细胞仪检测细胞凋亡,单细胞凝胶电泳(singlece... 目的:观察不同加温温度对人宫颈癌Hela细胞凋亡的影响。方法:人宫颈癌Hela细胞株常规方法培养,采用水浴加热法(温度为41℃、42.5℃、43.5℃、)对细胞进行加温处理,处理后继续培养24h。用流式细胞仪检测细胞凋亡,单细胞凝胶电泳(singlecellgelelectrophoresis,SCGE)法检测DNA受损状态。结果:随着温度的增加细胞凋亡率增加,42.5℃、43.5℃加温1h后细胞凋亡率最高分别为30.7%和34.6,坏死细胞分别为13.2%和29.6%。单细胞凝胶电泳发现42.5℃加温1h后40.0%的细胞有DNA损伤,43.5℃加温1h后80.0%以上的细胞DNA损伤,而41℃加温处理1h后仅有20.0%细胞DNA受损。结论:单独加温处理1h可诱导细胞凋亡,并导致细胞DNA损伤。 展开更多
关键词 宫颈癌 HELA细胞 热疗 细胞凋亡 细胞培养 DNA损伤
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MTA1在卵巢癌中的表达及其对卵巢癌细胞侵袭转移影响的研究 被引量：6
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作者 田菁 肖会廷 +2 位作者 冯慧 鞠宝辉 郝权 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2012年第21期1619-1622,共4页
目的:研究转移相关基因1(metastasis-associated-gene1,MTA1)表达与卵巢癌发生发展转移的关系,研究MTA1对卵巢癌侵袭转移能力的影响,并探讨抑制卵巢癌侵袭转移的潜在靶点。方法:免疫组织化学法检测110例卵巢癌组织中MTA1的蛋白表达水平... 目的:研究转移相关基因1(metastasis-associated-gene1,MTA1)表达与卵巢癌发生发展转移的关系,研究MTA1对卵巢癌侵袭转移能力的影响,并探讨抑制卵巢癌侵袭转移的潜在靶点。方法:免疫组织化学法检测110例卵巢癌组织中MTA1的蛋白表达水平,分析MTA1蛋白表达与卵巢癌分化程度、临床分期及与腹腔转移的关系。并通过脂质体介导方法,将特异性siRNA表达载体psilenter2.0-MTA1-siRNA转染入人卵巢癌细胞系HO-8910PM,采用RT-PCR以及Western blot检测特异性siRNA对MTA1mRNA及蛋白表达的抑制效果。应用划痕损伤实验及Transwell实验检测MTA1对卵巢癌细胞侵袭转移能力的影响。结果:MTA1随卵巢癌组织学分化程度的升高而降低,呈负相关,MTA1的表达随着FIGO分期期别的增加而增加,呈正相关,MTA1的表达随卵巢癌腹腔转移而增加,呈正相关。RT-PCR及Western blot结果显示,siRNA成功抑制卵巢癌细胞系HO-8910PM中MTA1的表达。划痕损伤实验显示转染后划痕损伤愈合明显减慢,迁移率明显降低,Transwell体外侵袭实验结果显示,转染后穿膜细胞百分率显著降低(P<0.05)。结论:MTA1表达水平的增高与卵巢癌的分化程度、临床分期及远处转移密切相关,体外研究显示抑制MTA1在卵巢癌细胞中的表达,使细胞生长、侵袭及转移能力均受到抑制,提示MTA1在卵巢癌的远处侵袭转移过程中发挥重要作用,可能成为卵巢癌基因治疗的潜在靶点。 展开更多
关键词 MTA1 卵巢癌 SIRNA 侵袭 转移
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