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人DNase Ⅰ的表达、纯化及降解NETs活性研究
被引量：
2
1
作者
梁艺璇
吴洁
《中国药科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第1期93-99,共7页
为获得纯度较高的人脱氧核糖核酸酶Ⅰ(DNase Ⅰ)以研究其对中性粒细胞胞外诱捕网(neutrophil extracellulartraps,NETs)的降解作用,构建基因工程表达菌E. coli Rosetta (DE3)/p ET32a-His-DNase Ⅰ,乳糖诱导表达,经镍柱亲和纯化获得融...
为获得纯度较高的人脱氧核糖核酸酶Ⅰ(DNase Ⅰ)以研究其对中性粒细胞胞外诱捕网(neutrophil extracellulartraps,NETs)的降解作用,构建基因工程表达菌E. coli Rosetta (DE3)/p ET32a-His-DNase Ⅰ,乳糖诱导表达,经镍柱亲和纯化获得融合蛋白His-DNase Ⅰ。提取小鼠中性粒细胞,用佛波酯PMA刺激形成NETs,Sytox Green及荧光显微镜检测融合蛋白对NETs的降解活性。结果表明,成功构建人DNase Ⅰ基因克隆并在原核细胞中实现高效表达,纯化的His-DNase Ⅰ具备较高的核酸酶活性。本研究为进一步探究DNase Ⅰ的临床应用奠定了理论基础。
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关键词
脱氧核糖核酸酶Ⅰ
中性粒细胞胞外诱捕网
分离纯化
His标签
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职称材料
微生物疫苗在1型糖尿病中的应用
被引量：
1
2
作者
贺冬梅
尤琪
吴洁
《中国药科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第2期158-164,共7页
1型糖尿病(T1DM)是由抗原特异性T淋巴细胞对β细胞靶向破坏,引起胰岛素绝对缺乏而导致的自身免疫性疾病,患者需终身进行胰岛素治疗,其发病机制尚不完全清楚,但多项数据显示感染性疾病发病率的下降伴随着过敏和自身免疫疾病发病率的上升...
1型糖尿病(T1DM)是由抗原特异性T淋巴细胞对β细胞靶向破坏,引起胰岛素绝对缺乏而导致的自身免疫性疾病,患者需终身进行胰岛素治疗,其发病机制尚不完全清楚,但多项数据显示感染性疾病发病率的下降伴随着过敏和自身免疫疾病发病率的上升,因而推测环境因素在T1DM的发生中起到重要作用。现已有多种细菌、寄生虫、病毒及其成分在动物模型中被证明可以预防T1DM,因此,通过微生物疫苗进行早期免疫刺激,进而诱导自身免疫耐受,有望成为预防T1DM安全有效的新方法。本文对临床和动物研究中的1型糖尿病微生物疫苗进行综述,主要从微生物的灭活疫苗、减毒活疫苗、亚单位疫苗、核酸疫苗和活载体疫苗进行概述,并讨论了各类疫苗可能的作用机制。
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关键词
1型糖尿病
微生物疫苗
免疫耐受
进展
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职称材料
题名
人DNase Ⅰ的表达、纯化及降解NETs活性研究
被引量：
2
1
作者
梁艺璇
吴洁
机构
中国
药科
大学
生命科学
与
技术
学院
酶工程
实验室
出处
《中国药科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第1期93-99,共7页
基金
国家自然科学基金资助项目(No.81673340)
江苏省自然科学基金资助项目(No.BK20161462)~~
文摘
为获得纯度较高的人脱氧核糖核酸酶Ⅰ(DNase Ⅰ)以研究其对中性粒细胞胞外诱捕网(neutrophil extracellulartraps,NETs)的降解作用,构建基因工程表达菌E. coli Rosetta (DE3)/p ET32a-His-DNase Ⅰ,乳糖诱导表达,经镍柱亲和纯化获得融合蛋白His-DNase Ⅰ。提取小鼠中性粒细胞,用佛波酯PMA刺激形成NETs,Sytox Green及荧光显微镜检测融合蛋白对NETs的降解活性。结果表明,成功构建人DNase Ⅰ基因克隆并在原核细胞中实现高效表达,纯化的His-DNase Ⅰ具备较高的核酸酶活性。本研究为进一步探究DNase Ⅰ的临床应用奠定了理论基础。
关键词
脱氧核糖核酸酶Ⅰ
中性粒细胞胞外诱捕网
分离纯化
His标签
Keywords
deoxyribonuclease I
neutrophil extracellular traps
separation and purification
His-tag
分类号
Q789 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
微生物疫苗在1型糖尿病中的应用
被引量：
1
2
作者
贺冬梅
尤琪
吴洁
机构
中国
药科
大学
生命科学
与
技术
学院
酶工程
实验室
出处
《中国药科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第2期158-164,共7页
基金
国家自然科学基金资助项目(No.81673340
No.81172973)
江苏高校优势学科建设工程资助项目(PAPD)~~
文摘
1型糖尿病(T1DM)是由抗原特异性T淋巴细胞对β细胞靶向破坏,引起胰岛素绝对缺乏而导致的自身免疫性疾病,患者需终身进行胰岛素治疗,其发病机制尚不完全清楚,但多项数据显示感染性疾病发病率的下降伴随着过敏和自身免疫疾病发病率的上升,因而推测环境因素在T1DM的发生中起到重要作用。现已有多种细菌、寄生虫、病毒及其成分在动物模型中被证明可以预防T1DM,因此,通过微生物疫苗进行早期免疫刺激,进而诱导自身免疫耐受,有望成为预防T1DM安全有效的新方法。本文对临床和动物研究中的1型糖尿病微生物疫苗进行综述,主要从微生物的灭活疫苗、减毒活疫苗、亚单位疫苗、核酸疫苗和活载体疫苗进行概述,并讨论了各类疫苗可能的作用机制。
关键词
1型糖尿病
微生物疫苗
免疫耐受
进展
Keywords
type 1 diabetes mellitus
microbial vaccines
immune tolerance
advances
分类号
R392 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人DNase Ⅰ的表达、纯化及降解NETs活性研究
梁艺璇
吴洁
《中国药科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019
2
下载PDF
职称材料
2
微生物疫苗在1型糖尿病中的应用
贺冬梅
尤琪
吴洁
《中国药科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018
1
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职称材料
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