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伤寒Vi多糖疫苗的接种反应及其免疫效果 被引量：6
1
作者 周伟忠 曾明 +2 位作者 潘红星 张建彬 朱凤才 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2008年第5期425-427,共3页
目的观察伤寒Vi多糖疫苗的接种反应及免疫效果。方法采用随机、双盲、对照设计的原则,评价观察组和对照组疫苗接种后的反应发生率、抗体阳转率和抗体几何平均滴度(GMT)。结果疫苗接种后观察组和对照组全身反应总发生率分别为2.04%(11/5... 目的观察伤寒Vi多糖疫苗的接种反应及免疫效果。方法采用随机、双盲、对照设计的原则,评价观察组和对照组疫苗接种后的反应发生率、抗体阳转率和抗体几何平均滴度(GMT)。结果疫苗接种后观察组和对照组全身反应总发生率分别为2.04%(11/540)和2.59%(7/270),均为轻度反应;局部反应发生率分别为3.52%(19/540)和4.07%(11/270)。伤寒Vi抗体阳转率分别为88.37%和85.46%,GMT分别为1∶134.31和1∶125.40,两者差异均无显著意义。结论伤寒Vi多糖疫苗在5岁以上人群接种后反应率低,免疫效果好。 展开更多
关键词 伤寒VI多糖疫苗 接种反应 免疫效果
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第二套梅毒螺旋体抗体诊断试剂国家参考品的研制 被引量：2
2
作者 曾明 王薇 +3 位作者 幺山山 王斌 蒋志宾 计国欣 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2006年第4期397-399,共3页
目的研制第二套梅毒螺旋体抗体诊断试剂国家参考品。方法从国内11省市几十万名供血员中筛选出871份样品,以多种试剂对其进行复核,对备选参比品样品再进行免疫荧光吸收法检测,并对人类免疫缺陷病毒抗体、乙型肝炎病毒抗体、丙型肝炎病毒... 目的研制第二套梅毒螺旋体抗体诊断试剂国家参考品。方法从国内11省市几十万名供血员中筛选出871份样品,以多种试剂对其进行复核,对备选参比品样品再进行免疫荧光吸收法检测,并对人类免疫缺陷病毒抗体、乙型肝炎病毒抗体、丙型肝炎病毒抗体、类风湿因子及非特异性抗体进行检测。根据样品复检及确证结果,选定30份样品,分装并分发至11个实验室,进行会同标定。结果已制备出第二套梅毒螺旋体抗体诊断试剂国家参考品,并建立了相应的质量标准。结论第二套梅毒螺旋体抗体诊断试剂国家参考品已被国家有关部门批准正式使用。 展开更多
关键词 梅毒螺旋体 抗体 诊断试剂 国家参考品
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国内甲型副伤寒沙门菌疫苗株的16S rRNA基因序列分析 被引量：2
3
作者 么山山 王薇 +3 位作者 计国欣 梁昊宇 王斌 曾明 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2008年第7期595-597,共3页
目的对我国4株用于或拟用于疫苗生产的甲型副伤寒沙门菌的16S rRNA基因进行序列分析,考察其保守性和差异。方法提取4株菌基因组DNA,以16S rDNA通用引物进行PCR扩增,并对产物进行克隆及测序。结果4株菌均可扩增出约1500bp的目的基因片段... 目的对我国4株用于或拟用于疫苗生产的甲型副伤寒沙门菌的16S rRNA基因进行序列分析,考察其保守性和差异。方法提取4株菌基因组DNA,以16S rDNA通用引物进行PCR扩增,并对产物进行克隆及测序。结果4株菌均可扩增出约1500bp的目的基因片段,测序结果表明,4株菌中16S rDNA核苷酸序列一致性达99.77%。结论选择保守性高的16S rDNA区段进行序列测定,以防止种子批的变异,便于对疫苗生产用种子进行质量控制。 展开更多
关键词 疫苗 甲型副伤寒沙门菌 16S RDNA RRNA 序列
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梅毒螺旋体特异抗原TP0684的克隆和表达 被引量：1
4
作者 肖洁 郭刚 +3 位作者 曾明 邹全明 钟情 张卫军 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2007年第4期248-251,共4页
目的克隆并表达梅毒螺旋体外膜蛋白TP0684,为研制早期诊断试剂盒提供依据。方法PCR法扩增TP0684编码基因。T-A克隆后构建表达质粒pET-22b(+)-TP0684,经酶切鉴定后,转化E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达,表达产物经Western blot鉴定。结果... 目的克隆并表达梅毒螺旋体外膜蛋白TP0684,为研制早期诊断试剂盒提供依据。方法PCR法扩增TP0684编码基因。T-A克隆后构建表达质粒pET-22b(+)-TP0684,经酶切鉴定后,转化E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达,表达产物经Western blot鉴定。结果PCR法扩增出了1212bp的目的片段,原核表达质粒pET-22b(+)-TP0684酶切鉴定正确,测序结果与GenBank上公布的该基因的CDS序列完全一致。转化E.coli BL21(DE3)后,IPTG诱导目的蛋白表达率为25%,SDS-PAGE初步测定目的蛋白的相对分子质量约43000,Western blot证实该蛋白能与梅毒患者阳性血清发生特异性反应。结论所表达的TP0684重组蛋白具有良好的免疫反应性,为进一步研究梅毒血清学诊断试剂奠定了基础。 展开更多
关键词 梅毒密螺旋体 外膜蛋白 基因克隆 表达
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幽门螺杆菌尿素酶B亚单位基因的克隆及其高效表达 被引量：1
5
作者 朱卫华 李生迪 +1 位作者 宣俊文 陈翠萍 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2008年第9期771-773,共3页
目的克隆幽门螺杆菌尿素酶B亚单位(UreB)基因,构建原核表达载体,并进行高效表达。方法以幽门螺杆菌基因组DNA为模板,PCR扩增UreB基因,双酶切后,与质粒pET-22b(+)连接,构建表达载体pET-22b(+)/UreB,分别转化E.coliBL21(DE3)、Origam(iDE3... 目的克隆幽门螺杆菌尿素酶B亚单位(UreB)基因,构建原核表达载体,并进行高效表达。方法以幽门螺杆菌基因组DNA为模板,PCR扩增UreB基因,双酶切后,与质粒pET-22b(+)连接,构建表达载体pET-22b(+)/UreB,分别转化E.coliBL21(DE3)、Origam(iDE3)和Rossetta(DE3),经IPTG诱导后,进行SDS-PAGE和Western blot分析。结果经酶切及测序,证明幽门螺杆菌UreB基因的原核表达载体构建正确。3种重组菌的诱导表达产物经SDS-PAGE分析,均可见相对分子质量为64000的目的蛋白条带,Rossetta(DE3)重组菌目的蛋白表达量最高,约占菌体蛋白的35%。Western blot结果表明,表达的目的蛋白具有良好的反应原性。结论已成功克隆了幽门螺杆菌UreB基因,并在大肠杆菌Rossetta(DE3)中获得了高效表达。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 尿素酶B亚单位 克隆 原核表达
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幽门螺杆菌尿素酶B亚单位特异性抗体检测方法的建立与评价 被引量：1
6
作者 王斌 邹全明 +6 位作者 朱凤才 计国欣 毛旭虎 刘开云 鲁东水 李亮 曾明 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2006年第5期527-529,共3页
目的建立并评价幽门螺杆菌(Hp)尿素酶B亚单位(UreB)特异性抗体的检测方法。方法应用纯化的重组HpUreB作为包被抗原,建立检测HpUreB特异性抗体的ELISA间接法。以Hp抗体Western blot检测作为“金标准”,评价所建立方法的真实性和可靠性。... 目的建立并评价幽门螺杆菌(Hp)尿素酶B亚单位(UreB)特异性抗体的检测方法。方法应用纯化的重组HpUreB作为包被抗原,建立检测HpUreB特异性抗体的ELISA间接法。以Hp抗体Western blot检测作为“金标准”,评价所建立方法的真实性和可靠性。结果检测血清特异性IgG的灵敏度为100·0%,特异度为97·7%,阳性预测值为97·2%,阴性预测值为100·0%,约登指数为0·977,符合率为98·7%,试验的一致率为98·5%;检测血清中总的特异性Ig灵敏度为97·1%,特异度为95·3%,阳性预测值为94·4%,阴性预测值为97·6%,约登指数为0·925,符合率为96·2%,试验的一致率为97·8%;检测唾液中特异性sIgA的灵敏度为96·2%,特异度为94·5%,阳性预测值为89·3%,阴性预测值为98·1%,约登指数为0·907,符合率为95·1%,试验的一致率为97·5%;检测粪便标本中的特异性sIgA的灵敏度为92·0%,特异度为90·2%,阳性预测值为85·2%,阴性预测值为94·9%,约登指数为0·822,符合率为90·9%,试验的一致率为98·6%,CV值均小于15%。结论该检测方法真实性、可靠性、重复性良好,能满足临床标本检测的要求。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 尿素酶B亚单位 特异性抗体
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梅毒螺旋体特异性抗原TpN47基因片段的克隆与表达 被引量：1
7
作者 王宪灵 张卫军 +3 位作者 邹全明 曾明 罗萍 郭刚 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2008年第4期281-284,共4页
目的在大肠埃希菌中表达梅毒螺旋体（Tp）TpN47（68-410aa）重组蛋白。方法采用PCR法从Tp全基因组中扩增TpN47（202—1230bp）片段，T-A克隆后构建原核表达质粒pET-22b（＋）-TpN47，经酶切鉴定后转化E coli BL21（DE3），IPTG诱导表达... 目的在大肠埃希菌中表达梅毒螺旋体（Tp）TpN47（68-410aa）重组蛋白。方法采用PCR法从Tp全基因组中扩增TpN47（202—1230bp）片段，T-A克隆后构建原核表达质粒pET-22b（＋）-TpN47，经酶切鉴定后转化E coli BL21（DE3），IPTG诱导表达，表达产物经Ni^2＋亲和层析柱纯化，Westem blot鉴定其免疫反应性。结果PCR法扩增出约1000bp的目的片段，原核表达质粒pET-22b（＋）-TpN47经酶切鉴定正确，表达的蛋白约占菌体总蛋白的43％，相对分子质量约为39000，以包涵体形式存在。经纯化后蛋白纯度达95％以上，Western blot证实该蛋白能与梅毒患者阳性血清发生特异性反应。结论所表达的TpN47重组蛋白具有良好的免疫反应性，为开发临床检测效果更好的梅毒诊断试剂盒奠定了实验基础。 展开更多
关键词 梅毒密螺旋体 特异性抗原 基因克隆 表达
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