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K562及K562/VCR对长春新碱诱导凋亡的敏感性 被引量：4
1
作者 朱玉胜 吕元 +4 位作者 林果为 杨正洪 吕沅冈 张荣兴 胡晓武 《上海医科大学学报》 CSCD 1999年第3期191-193,共3页
研究人类白血病细胞株Ｋ５６２及耐长春新碱的Ｋ５６２变异株Ｋ５６２／ＶＣＲ对长春新碱诱导凋亡的敏感性的差异，以探讨抗凋亡在白血病多药耐药性（ＭＤＲ）中的作用。方法将Ｋ５６２及Ｋ５６２／ＶＣＲ分别用浓度为０、０．００１、... 研究人类白血病细胞株Ｋ５６２及耐长春新碱的Ｋ５６２变异株Ｋ５６２／ＶＣＲ对长春新碱诱导凋亡的敏感性的差异，以探讨抗凋亡在白血病多药耐药性（ＭＤＲ）中的作用。方法将Ｋ５６２及Ｋ５６２／ＶＣＲ分别用浓度为０、０．００１、０．０１０μｇ／ｍｌ的长春新碱诱导２４ｈ，用流式细胞仪ＰＩ染色法、ＴＵＮＥＬ法及ＥＬＩＳＡ法分别进行细胞凋亡检测。结果经浓度为０、０．００１μｇ／ｍｌ长春新碱诱导后，Ｋ５６２细胞凋亡率分别为（４．１０±０．１７）％、（１３．３０±３．７４）％，而Ｋ５６２／ＶＣＲ细胞凋亡率分别为（３．６１±０．６９）％、（９．０６±４．２４）％，统计学显示两者差异无显著性（ｎ＝３，Ｐ＞０．０５）。而长春新碱浓度达０．０１０μｇ／ｍｌ时，Ｋ５６２及Ｋ５６２／ＶＣＲ细胞凋亡率分别为（３６．４８±６．７０）％、（１０．４５±３．７１）％，两者差异有极显著意义（ｎ＝３，Ｐ＜０．０１）。ＴＵＮＥＬ及ＥＬＩＳＡ检测结果与此类似。结论Ｋ５６２及Ｋ５６２／ＶＣＲ对长春新碱诱导细胞凋亡的敏感性不同，耐药细胞对药物诱导细胞凋亡的抵抗性增强可能在白血病ＭＤＲ发生中有重要作用。 展开更多
关键词 白血病 多药耐药性 长春新碱 细胞凋亡
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细胞培养中支原体污染的去除 被引量：2
2
作者 吕沅冈 喻峰 +1 位作者 朱德厚 葛锡锐 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1995年第6期426-429,共4页
在运用细胞培养手段的生物学研究和生物工程产品中,支原体污染仍是一个颇为棘手的问题。11株人的细胞SPC—A1、K562、HUT-102、BT—325、6T—CEM、NKM—45、CNE、HL—60、QGY—7701、QZG、人羊膜细胞;3株小鼠细胞P388—1、YAC—1、P815;... 在运用细胞培养手段的生物学研究和生物工程产品中,支原体污染仍是一个颇为棘手的问题。11株人的细胞SPC—A1、K562、HUT-102、BT—325、6T—CEM、NKM—45、CNE、HL—60、QGY—7701、QZG、人羊膜细胞;3株小鼠细胞P388—1、YAC—1、P815;1株绒猴细胞B95—8;和一株杂交瘤QKT3等,已污染了支原体的细胞经MC—210 1μg/ml处理7天,支原体污染全部转阴性。去除了支原体的细胞株经一年的培养、传代、冻存复苏,多次支原体检测始终阴性。对去除了支原体的SPC—A1、K562、HUT—102、B95—8等细胞株测试了其相关特性,均未见受影响。人为用口腔支原体、猪鼻支原体、精氨酸支原体分别感染小鼠骨髓瘤Sp2/0和非洲绿猴肾细胞株Vero,然后经MC—210处理,支原体全部去除,且不影响Sp2/0在制备杂交瘤时的融合率和抗体的分泌。 展开更多
关键词 细胞培养 支原体 去除 MC-210
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用Ciprofloxacin去除传代细胞株中的支原体污染的研究 被引量：3
3
作者 陈如颖 喻峰 朱德厚 《细胞生物学杂志》 CSCD 1995年第2期90-93,共4页
在应用细胞培养手段的生物学研究和生物工程产品中,支原体污染仍是一个非常棘手的问题。对Vero和SP 2/0-Ag 14等细胞,应用Ciprofloxacin,10μg/ml处理14天,支原体检测全部转阴,经4个月的培养、传代、冻存、复苏,每次支原体检测均保持阴... 在应用细胞培养手段的生物学研究和生物工程产品中,支原体污染仍是一个非常棘手的问题。对Vero和SP 2/0-Ag 14等细胞,应用Ciprofloxacin,10μg/ml处理14天,支原体检测全部转阴,经4个月的培养、传代、冻存、复苏,每次支原体检测均保持阴性。对去除了支原体的Vero和LSC-116细胞株,测试了其生长特征和功能,均未见受影响。 展开更多
关键词 细胞培养 支原体去除 CIPROFLOXACIN
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HeLa细胞和BHK细胞实验交叉污染消涨规律的探讨 被引量：1
4
作者 张荣兴 林晓旭 朱德厚 《细胞生物学杂志》 CSCD 1994年第4期188-191,共4页
本文用抗中间丝蛋白的免疫荧光染色和细胞在不同条件下的生长曲线测定,对HeLa细胞和BHK-21细胞实验交叉污染系统中两种细胞的消涨规律进行了初步探讨。结果表明:当BHK-21细胞实验污染HeLa细胞后,其消涨趋势总是BHK-21细胞不断被HeLa细... 本文用抗中间丝蛋白的免疫荧光染色和细胞在不同条件下的生长曲线测定,对HeLa细胞和BHK-21细胞实验交叉污染系统中两种细胞的消涨规律进行了初步探讨。结果表明:当BHK-21细胞实验污染HeLa细胞后,其消涨趋势总是BHK-21细胞不断被HeLa细胞所淘汰。其主要原因是HeLa细胞的生长速率明显比BHK-21细胞高,其次是HeLa细胞可能能分泌某种抑制BHK-21细胞生长的因子,而两种细胞的营养竞争可能对BHK-21细胞的被淘汰不是主要原因。 展开更多
关键词 HELA细胞 BHK细胞 污染 细胞系
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凋亡调节蛋白的表达与K562/VCR多药耐药性的关系
5
作者 朱玉胜 吕元 +3 位作者 林果为 张荣兴 杨正洪 吕沅冈 《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期32-34,共3页
目的　探讨K5 6 2 /VCR细胞中凋亡调节蛋白表达的变化与其多药耐药性 (MDR)的关系。方法　通过免疫细胞化学法和免疫印迹法 (westernblot)对凋亡调节蛋白Bcl- 2、Bcl -XL、Bax、Bak在多药耐药细胞K5 6 2 /VCR和药物敏感细胞K5 6 2中的... 目的　探讨K5 6 2 /VCR细胞中凋亡调节蛋白表达的变化与其多药耐药性 (MDR)的关系。方法　通过免疫细胞化学法和免疫印迹法 (westernblot)对凋亡调节蛋白Bcl- 2、Bcl -XL、Bax、Bak在多药耐药细胞K5 6 2 /VCR和药物敏感细胞K5 6 2中的表达进行分析。结果　抗凋亡调节蛋白Bcl- 2、Bcl-XL 在K5 6 2 /VCR细胞中的表达阳性率分别为 (4 0 .0± 8.0 ) %和 (6 0 .0± 10 .0 ) % ,在K5 6 2细胞中为 (1.0± 0 .3) %和 (2 0 .0± 4.0 ) % ,阳性率差异均具有显著性 (n =3,P <0 .0 5 )。促凋亡调节蛋白Bax在以上两种细胞中的表达程度无明显区别。促凋亡调节蛋白Bak在两种细胞中均不表达或表达程度极低。结论　抗凋亡调节蛋白 (Bcl- 2、Bcl-XL)在K5 6 2 /VCR细胞MDR发生中可能发挥重要作用 ,而促凋亡调节蛋白Bax、Bak可能不起主要作用。 展开更多
关键词 多药耐药性 白血病 凋亡调节蛋白 K562/VCR
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表面表位包埋法制备肿瘤表面抗原P185^(neuc-erbB-2)单克隆抗体及其性质研究 被引量：10
6
作者 王琛 李昀 +9 位作者 李平 刘兢 杨正洪 吕源冈 朱德厚 张荣兴 姚阳 吴强 管伟宁 杨枫 《中国免疫学杂志》 CSCD 北大核心 2000年第10期539-541,546,共4页
目的 :细胞表面表位包埋法 (SEM)是一种选择细胞表面特定的表达分子制备单克隆抗体的新途径。由于P185 neu c erbB 2 是乳腺癌及其他肿瘤的一个重要表面标志 ,这个研究旨在应用SEM法制备特异性好 ,灵敏度高的P185单克隆抗体并分析其特... 目的 :细胞表面表位包埋法 (SEM)是一种选择细胞表面特定的表达分子制备单克隆抗体的新途径。由于P185 neu c erbB 2 是乳腺癌及其他肿瘤的一个重要表面标志 ,这个研究旨在应用SEM法制备特异性好 ,灵敏度高的P185单克隆抗体并分析其特性以便于临床。方法 :采用细胞表面表位包埋法免疫BALB C小鼠 ,常规杂交瘤技术进行细胞融合 ,ELISA法测定 ,有限稀释法克隆化。结果 :筛选得到 3株能稳定分泌抗人癌基因erbB 2产物P185蛋白的McAb杂交瘤细胞。经间接免疫过氧化物酶染色和流式细胞术分析证明该McAb特异性与P185阳性细胞膜结合 ,而不与结构类似的EGFR膜阳性细胞结合。免疫印迹实验证明这些McAb特异地与P185蛋白结合 ,病理切片免疫组化结果证明该单抗对乳腺癌组织呈特异膜阳性反应。结论 :SEM法制备的肿瘤表面抗原P185的McAb杂交瘤具有很好的用于临床诊断肿瘤抗原P185的价值及工程化改造的前景。 展开更多
关键词 单克隆抗体 细胞表面表位包埋法 肿瘤表面抗原
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ELISA法定量检测长春新碱诱导的K562及K562/VCR凋亡 被引量：4
7
作者 朱玉胜 吕元 +4 位作者 林果为 张荣兴 吕沅冈 杨正洪 顾静文 《上海医学》 CAS CSCD 北大核心 1999年第2期122-123,共2页
细胞凋亡是一种不同于细胞坏死的细胞死亡方式，具有特殊的形态学及生物化学特征。其生物化学变化主要表现为内源性核酸内切酶的激活。它依赖于Ｃａ２＋、Ｍｇ２＋的核酸内切酶从核小体间连接处将双链ＤＮＡ切断，形成以１８０ｂｐ为最... 细胞凋亡是一种不同于细胞坏死的细胞死亡方式，具有特殊的形态学及生物化学特征。其生物化学变化主要表现为内源性核酸内切酶的激活。它依赖于Ｃａ２＋、Ｍｇ２＋的核酸内切酶从核小体间连接处将双链ＤＮＡ切断，形成以１８０ｂｐ为最小单位的ＤＮＡ片断，经琼脂糖电泳分... 展开更多
关键词 肿瘤细胞凋亡 长春新碱 ELISA K562
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抗卵巢上皮癌单克隆抗体的制备和鉴定 被引量：1
8
作者 陈亚宝 吕元 +2 位作者 杨正洪 朱德厚 张荣兴 《上海医学检验杂志》 1997年第4期209-210,共2页
以人的浆液性卵巢上皮癌细胞系HO－8910为抗原，制备分泌抗卵巢癌单克隆抗体的杂交瘤，经间接免疫荧光组化鉴定证实。制备的单克隆抗体0C1C3与HO-8910呈强阳性反应，与其他肿瘤细胞系则无反应或反应极弱。在冰冻切片中，单克隆抗体OC1C... 以人的浆液性卵巢上皮癌细胞系HO－8910为抗原，制备分泌抗卵巢癌单克隆抗体的杂交瘤，经间接免疫荧光组化鉴定证实。制备的单克隆抗体0C1C3与HO-8910呈强阳性反应，与其他肿瘤细胞系则无反应或反应极弱。在冰冻切片中，单克隆抗体OC1C3与卵巢恶性肿瘤呈强阳性反应（7／8），与绒癌有部分交叉反应（1／2），与正常卵巢和胚胎组织无反应。结果表明OC1C3是卵巢恶性肿瘤的一种特异性抗原的单克隆抗体。为进一步改善卵巢恶性肿瘤的免疫诊断方法提供了有利的基础。 展开更多
关键词 单克隆抗体 卵巢癌 制备 鉴定
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抗p185单克隆抗体的制备及其在乳腺癌诊断中的应用
9
作者 姚阳 官伟宁 +7 位作者 吴强 杨枫 刘兢 王琛 李昀 杨正洪 吕沅冈 朱德厚 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第5期394-394,共1页
关键词 乳腺癌 诊断 抗p185单克隆抗体 制备
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