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题名金环蛇蛇毒中的一种新型胰蛋白酶抑制剂(英文)
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作者
卢祥云
王爱丽
杨海龙
赖仞
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机构
常熟理工学院生物系
南京农业大学生命科学学院农业部微生物环境工程重点实验室
中国科学院昆明动物研究所动物模型与人类疾病机理重点实验室动物毒素室
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出处
《中国天然药物》
SCIE
CAS
CSCD
2008年第2期153-158,共6页
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基金
中华人民共和国科学技术部资助项目(2006BAD06B07)~~
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文摘
目的:从金环蛇蛇毒中分离纯化名为bungaruskunin 1的一种新型胰蛋白酶抑制剂,并从其毒腺的cDNA文库中克隆出该胰蛋白酶抑制剂的cDNA全序列。方法:通过Sephadex G-50,CM-Sephadex C-25,HPLC,RP-HPLC(C4 col-umn)方法分离纯化bungaruskunin 1。样品的丝氨酸蛋白酶抑制剂活性则是在室温条件下50mmol·L-1Tris-HCl,pH7.8的缓冲液中通过对显色底物的水解抑制作用来检测的。金环蛇毒腺RNA用TRIZOL提取,并用SMARTM PCR cDNA syn-thesis kit(Clontech)建成cDNA文库。根据其信号肽的保守区域合成引物从该文库中扩增出bungaruskunin 1的cDNA全序列,进行胶回收,酶连到pMD18-T载体中转化测序。结果:bungaruskunin1的前体由83个氨基酸组成,其中信号肽含有24个氨基酸,成熟肽即:bungaruskunin 1含有59个氨基酸。bungaruskunin 1的cDNA序列与从红腹伊澳蛇Pseudechis porphy-riacus中分离纯化得到的丝氨酸蛋白酶抑制剂blackelin的cDNA序列的相似性高达64%。bungaruskunin 1是一种含有保守Kunitz端的Kuntiz蛋白酶抑制剂家族的一员,从而能够抑制蛋白酶和弹性酶的活性。在cDNA文库中,我们同时还筛选到了2种新的β-bungarotoxin B链的序列。结论:这些发现很好地证明了蛇中Kunitz/BPTI胰蛋白酶抑制剂和毒性神经的家族可能起源于共同的祖先。
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关键词
蛇毒
丝氨酸蛋白酶抑制剂
KUNITZ
金环蛇
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Keywords
Snake venom
Serine protease inhibitor
Kunitz
Bungarusfasciatus
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分类号
R977.3
[医药卫生—药品]
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