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环境样品中DNA的分离纯化和文库构建 被引量：24
1
作者 王啸波 唐玉秋 +3 位作者 王金华 黄仪秀 陈润生 黄力 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期133-140,共8页
采用研磨 /冻融和SDS/蛋白酶K热处理等理化方法 ,直接从性质不同的环境样品中提取和纯化混合基因组DNA。所获得纯品DNA的产量为每克样品 2～ 1 6μg。对纯品DNA进行限制性内切酶处理后 ,构建了以pUC1 8为载体的DNA文库。建库效率为从每... 采用研磨 /冻融和SDS/蛋白酶K热处理等理化方法 ,直接从性质不同的环境样品中提取和纯化混合基因组DNA。所获得纯品DNA的产量为每克样品 2～ 1 6μg。对纯品DNA进行限制性内切酶处理后 ,构建了以pUC1 8为载体的DNA文库。建库效率为从每克环境样品获得约 1 0 3～ 1 0 4 个含 3～ 8kb外源随机插入片段的克隆。通过DNA序列测定和基因注释 ,对从文库中随机选取的克隆进行了分析 ,发现外源插入片段均含序列未见报道的新基因。本文所做的尝试对于保存。 展开更多
关键词 环境样品 DNA分离纯化 混合基因组 DNA文库 未培养微生物
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环境微生物培养新技术的研究进展 被引量：39
2
作者 王保军 刘双江 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期6-17,共12页
遍布于地球上各种生境中的微生物具有丰富的物种多样性。迄今为止,能够在实验室条件下培养的微生物仅仅是其中的一小部分,微生物物种的绝大多数还都难以在现有培养技术和条件下进行繁殖和生长。人们把那些尚未在实验室获得培养生长的微... 遍布于地球上各种生境中的微生物具有丰富的物种多样性。迄今为止,能够在实验室条件下培养的微生物仅仅是其中的一小部分,微生物物种的绝大多数还都难以在现有培养技术和条件下进行繁殖和生长。人们把那些尚未在实验室获得培养生长的微生物称之为未培养微生物(Uncultured microorganisms)。本文概述了一些制约微生物培养生长的影响因素,重点介绍了近年来出现的一些新颖独特的环境微生物培养技术和方法,包括稀释培养法、高通量培养技术、模拟自然环境的扩散盒技术、土壤基质膜装置、细胞微囊包埋技术等。此外,本文还总结了通过改善微生物培养条件、设计开发新型的微生物培养基等方面取得的令人瞩目的进展。这些新颖培养技术和培养方法的出现,显著提高了微生物的可培养性,发现和鉴定了许多新的微生物物种,极大地丰富了可培养微生物的多样性和微生物资源,并为深入研究和开发微生物奠定了良好的资源研究基础。 展开更多
关键词 环境微生物 未培养微生物 新培养技术
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宏基因组测序病原微生物检测生物信息学分析规范化管理专家共识 被引量：31
3
作者 中华医学会检验医学分会 鲁辛辛 +6 位作者 胡松年 王玫 贺子龙 杨继勇 谷丽 隋文君 王成彬 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第9期799-807,共9页
宏基因组测序(mNGS)在新发突发传染病以及常规检验阴性的感染性疾病诊断中发挥了重要作用。近期,国内相继发表了多个共识阐述了临床应用及实验室规范,但生物信息分析程序及方法也是mNGS重要环节,而目前学界尚未有一致的认识。为提高临床... 宏基因组测序(mNGS)在新发突发传染病以及常规检验阴性的感染性疾病诊断中发挥了重要作用。近期,国内相继发表了多个共识阐述了临床应用及实验室规范,但生物信息分析程序及方法也是mNGS重要环节,而目前学界尚未有一致的认识。为提高临床对mNGS结果的理解,本共识根据国内外的发展现状,结合国内测序实验室常规做法,阐述生物信息学分析的规范化管理内容。 展开更多
关键词 宏基因组下一代测序 病原微生物 生物信息学 规范化 共识
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茚虫威的作用机制与抗性研究进展 被引量：29
4
作者 李富根 艾国民 +2 位作者 李友顺 朱春雨 高希武 《农药》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期558-560,572,共4页
茚虫威是二嗪类杀虫剂,具有独特的作用机制,对鳞翅目害虫具有卓越的杀虫活性。茚虫威通过触杀和胃毒方式进入昆虫体内,代谢为杀虫活性更强的N-去甲氧羰基代谢物(DCJW),不可逆阻断钠离子通道。研究表明昆虫具有对茚虫威产生高水平抗性的... 茚虫威是二嗪类杀虫剂,具有独特的作用机制,对鳞翅目害虫具有卓越的杀虫活性。茚虫威通过触杀和胃毒方式进入昆虫体内,代谢为杀虫活性更强的N-去甲氧羰基代谢物(DCJW),不可逆阻断钠离子通道。研究表明昆虫具有对茚虫威产生高水平抗性的风险。概述了茚虫威的作用机制、抗性选育、抗性监测、交互抗性、抗性机理等方面的研究进展。 展开更多
关键词 茚虫威 杀虫剂 作用机制 抗药性
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药用植物内生放线菌的生物活性及菌株D62的代谢产物分析 被引量：27
5
作者 刘宁 张辉 +3 位作者 郑文 黄英 王海彬 雒文军 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期823-827,共5页
利用琼脂移块法及WST-8法分别对分离自西双版纳药用植物的165株内生放线菌进行了抗菌、抗肿瘤活性测定。结果显示,超过42%的菌株对病原菌表现出拮抗活性,且对病原真菌的总体拮抗活性明显强于土壤放线菌;78%的菌株表现出抗肿瘤活性,且大... 利用琼脂移块法及WST-8法分别对分离自西双版纳药用植物的165株内生放线菌进行了抗菌、抗肿瘤活性测定。结果显示,超过42%的菌株对病原菌表现出拮抗活性,且对病原真菌的总体拮抗活性明显强于土壤放线菌;78%的菌株表现出抗肿瘤活性,且大部分菌株(54.5%)具有强抗肿瘤活性。选取其中对真菌及肿瘤细胞均有高抑制活性的菌株D62,并对其次生代谢产物进行了进一步的研究,共分离得6个化合物,分别是Antimycin A4a(1),Antimycin A7a(2)、Antimycin A2a(3)、Antimycin A1a(4)、10-hydroxy-10-methyl-dodec-2-en-1,4-olide(5)及6-(2-(4-aminophenyl)-2-oxoethyl)-3,5-dimethyl-tetrahydropyran-2-one(6),其中化合物6为新化合物。以上结果表明药用植物内生放线菌作为一类新的微生物资源具有很好的开发潜力。 展开更多
关键词 内生放线菌 抗菌活性 抗肿瘤活性 次生代谢产物 新化合物
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荷斯坦奶牛瘤胃微生物元基因组BAC文库的构建与分析 被引量：27
6
作者 朱雅新 王加启 +4 位作者 马润林 黄力 董志扬 毛爱军 罗淑萍 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期213-216,共4页
采用未培养技术和脉冲场电泳技术直接从瘤胃微生物提取到大小在2Mb左右混合微生物DNA,经HindⅢ不完全酶切获得50～100kbDNA片段,将其连接在pCC1BAC载体上,转化E.coliEPI300,得到瘤胃微生物BAC文库,经对文库的鉴定分析,该文库的平均插入... 采用未培养技术和脉冲场电泳技术直接从瘤胃微生物提取到大小在2Mb左右混合微生物DNA,经HindⅢ不完全酶切获得50～100kbDNA片段,将其连接在pCC1BAC载体上,转化E.coliEPI300,得到瘤胃微生物BAC文库,经对文库的鉴定分析,该文库的平均插入片段54.5kb,空载体率小于2%,库容837Mb,共保存15360个克隆。通过对该文库进行部分酶活性筛选,获得具有淀粉酶活性的克隆16个;纤维素酶活性的克隆26个,而且能降解纤维素的克隆中25个呈现多酶活性。这些结果表明该文库具有重要研究价值。 展开更多
关键词 瘤胃微生物 细菌人工染色体文库 筛选
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海藻糖代谢途径相关基因及生物工程 被引量：16
7
作者 任媛媛 刘景芳 +1 位作者 戴秀玉 向华 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期821-824,共4页
关键词 海藻糖 基因 生物合成 生物工程 代谢途径
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乳链菌肽(nisin)抗性机制的研究进展 被引量：20
8
作者 初晓东 林宇恒 +2 位作者 孙志增 还连栋 钟瑾 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期1129-1134,共6页
乳链菌肽（nisin）是某些乳酸乳球菌产生的一种羊毛硫细菌素。其对包括食品腐败菌和致病菌在内的许多革兰氏阳性菌具有强烈的抑制作用,是目前世界上唯一被允许用作食品添加剂的细菌素。nisin的广泛使用虽未引发大范围的抗性,但在自然界... 乳链菌肽（nisin）是某些乳酸乳球菌产生的一种羊毛硫细菌素。其对包括食品腐败菌和致病菌在内的许多革兰氏阳性菌具有强烈的抑制作用,是目前世界上唯一被允许用作食品添加剂的细菌素。nisin的广泛使用虽未引发大范围的抗性,但在自然界或实验室的选择压力下,某些非nisin产生菌也获得了抵御nisin攻击的抗性机制。nisin抗性机制通常涉及两种方式,即非特异性的生理适应机制和特异性蛋白酶介导的主动防御机制。本文综述了近年来nisin抗性机制的研究进展。 展开更多
关键词 乳链菌肽 抗性 nisin抗性蛋白(NSR)
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人胰岛素基因在乳酸菌中的表达及其对非肥胖糖尿病(NOD)小鼠的作用 被引量：15
9
作者 陈思维 钟瑾 还连栋 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期987-991,共5页
为实现人胰岛素基因在乳酸菌中的表达及探索其用作口服疫苗治疗Ⅰ型糖尿病(T1DM)的可行性,首先将人胰岛素基因密码子替换为乳酸菌偏爱密码子,同时在A,B链序列间加入连接短肽序列,经引物退火拼接合成人胰岛素基因。克隆至乳酸菌表达载体... 为实现人胰岛素基因在乳酸菌中的表达及探索其用作口服疫苗治疗Ⅰ型糖尿病(T1DM)的可行性,首先将人胰岛素基因密码子替换为乳酸菌偏爱密码子,同时在A,B链序列间加入连接短肽序列,经引物退火拼接合成人胰岛素基因。克隆至乳酸菌表达载体中后,利用电击转化法实现了带信号肽SPUsp45的人胰岛素基因在乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)MG1363和干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)ATCC27092中的表达。Western blot检测显示重组胰岛素位于细胞壁上,当菌体生长到OD600为0.4时达到最大表达量。用含有表达重组人胰岛素的Lactobacillus caseiATCC27092/pSW501菌体饲喂非肥胖糖尿病(NOD)小鼠,发现可刺激小鼠产生特异性抗体,同时使与免疫耐受相关的细胞因子IL-4水平明显升高(38.583±2.083pg/mL,P<0.05),提示其对NOD小鼠产生免疫耐受有一定的作用,为研制乳酸菌口服疫苗防治T1DM的可行性进行了有益的探索。 展开更多
关键词 胰岛素 干酪乳杆菌 乳酸乳球菌 表达 非肥胖糖尿病(NOD)小鼠
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放线菌与枯草芽孢杆菌的共培养及其对活性次生代谢产物的影响 被引量：17
10
作者 黄兵 刘宁 +1 位作者 黄英 陈劲春 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期932-940,共9页
为探讨共培养对放线菌产生活性次生代谢产物的影响,结合抗菌活性测定及HPLC-PDA分析,研究了22株放线菌的单培养及其与枯草芽孢杆菌的共培养发酵代谢产物的差异,并选取抗菌活性较强的链霉菌FXJ2.014进一步研究其代谢产物。发现FXJ2.014、... 为探讨共培养对放线菌产生活性次生代谢产物的影响,结合抗菌活性测定及HPLC-PDA分析,研究了22株放线菌的单培养及其与枯草芽孢杆菌的共培养发酵代谢产物的差异,并选取抗菌活性较强的链霉菌FXJ2.014进一步研究其代谢产物。发现FXJ2.014、FXJ1.296、AS4.1252三株菌与枯草芽孢杆菌共培养时产生其在相同条件下单培养时没有的物质,其中链霉菌FXJ2.014单培养时主要产生醌霉素A,共培养时产物中增加了醌霉素结构类似物FXJ2.014-HB。进一步的抗菌、抗肿瘤活性测定结果表明,两者的生物活性有较显著的差异,且FXJ2.014-HB对多种肿瘤细胞系的抑制活性普遍弱于高毒性的醌霉素A,为有潜力的细胞毒性较小的抗生素。共培养是一条很有希望的发掘放线菌活性次生代谢产物的新途径。 展开更多
关键词 放线菌 枯草芽孢杆菌 共培养 链霉菌 活性次生代谢产物 醌霉素
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黑曲霉pepB基因缺失菌株的构建及其功能分析 被引量：12
11
作者 孙晶 李景鹏 +2 位作者 王敖全 唐国敏 王华明 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期766-770,共5页
以黑曲霉 (Aspergillusniger)GICC2 773基因组DNA为模板 ,用PCR方法分别扩增pepB基因中的上游约 1 4kb和下游约 1 3kb两段DNA序列 ,将此两段序列按同一方向分别插入质粒pMW1中潮霉素抗性基因 (hph)表达单元的 5′和 3′端 ,构建成重组质... 以黑曲霉 (Aspergillusniger)GICC2 773基因组DNA为模板 ,用PCR方法分别扩增pepB基因中的上游约 1 4kb和下游约 1 3kb两段DNA序列 ,将此两段序列按同一方向分别插入质粒pMW1中潮霉素抗性基因 (hph)表达单元的 5′和 3′端 ,构建成重组质粒pMW1 pepB ,用于通过同源重组靶向破坏基因组中的pepB基因。同源重组则采用原生质体 PEG方法 ,将酶切pMW1 pepB得到的线性片段转化A .nigerGICC2 773菌株 ,通过潮霉素选择平板得到 6 2个Hgy抗性转化子 ,然后采用PCR方法从这些抗性转化子中筛选到 1个由于同源重组产生的pepB基因缺失突变菌株pepB2 9。功能分析显示该突变株的酸性蛋白酶活性有明显下降 。 展开更多
关键词 黑曲霉 pepB基因缺失 同源重组 外源蛋白
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植物叶片内生放线菌的分离、分类与拮抗活性 被引量：15
12
作者 古强 刘宁 +3 位作者 邱旦恒 刘志恒 黄英 何亮 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期778-782,共5页
以四川采集的芍药和北京采集的三叶草的叶片为材料,经表面消毒程序后,分离出内生放线菌15株。通过表观特征比较和BOX-PCR基因指纹图谱分析的方法,将分离出的放线菌归并于12个不同的基因型,其中6个来自芍药,6个来自三叶草。结合16S rRNA... 以四川采集的芍药和北京采集的三叶草的叶片为材料,经表面消毒程序后,分离出内生放线菌15株。通过表观特征比较和BOX-PCR基因指纹图谱分析的方法,将分离出的放线菌归并于12个不同的基因型,其中6个来自芍药,6个来自三叶草。结合16S rRNA基因序列分析可知,分离菌株除C4、C5属于假诺卡氏菌外,其余的13株都是链霉菌;菌株C12与最近模式种的16S rRNA基因序列相似性较低,为96.6%。对分离菌株的抗菌活性实验表明,有11株在一个或一个以上的测试中呈阳性;其中6株对植物致病菌立枯丝核菌有明显抗性,占阳性菌株的55%。 展开更多
关键词 内生放线菌 分离 BOX-PCR 分类 拮抗活性
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创制现代草产品加工科技体系保障大粮食安全 被引量：15
13
作者 王天威 钟瑾 《中国科学院院刊》 CSSCI CSCD 北大核心 2021年第6期675-684,共10页
构建生态草牧业科技体系是新时代“大粮食安全观”和“生态优先、绿色发展国家战略”的技术支撑,也是立足国内大循环的迫切需求。科学制草可有效链接起前端的种草和后端的养畜环节,使草牧业真正形成产业链条。然而,我国饲草加工贮存方... 构建生态草牧业科技体系是新时代“大粮食安全观”和“生态优先、绿色发展国家战略”的技术支撑,也是立足国内大循环的迫切需求。科学制草可有效链接起前端的种草和后端的养畜环节,使草牧业真正形成产业链条。然而,我国饲草加工贮存方面存在的损失大、营养提升有限、草产品质量和安全控制难等一系列重要瓶颈问题,以及草产业发展方面面临的标准化、商品化、产业化、市场化、智能化程度不够等问题限制了优质草产业的健康发展,造成的“草畜两张皮”局面极大影响了生态草牧业核心产业链条的形成和健康发展。文章从草产业发展的战略需求、草产品加工亟待突破的理论及技术瓶颈等方面进行了论述,提出了科学制草促进草产业发展的具体建议,为提升我国草产品加工技术水平,打通草牧业全产业链条,打造优质草产业,实现草畜产业链高度耦合提供理论依据和可行途径。 展开更多
关键词 科学制草 草产品 草产业 技术瓶颈 产业链条
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不同生境放线菌的卤化酶基因分析及其对卤代产物筛选的意义 被引量：15
14
作者 高鹏 郗丽君 +2 位作者 朴玉华 阮继生 黄英 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期1367-1373,共7页
【目的】在基因水平上分析并比较陆地来源与海洋来源的放线菌产生卤化代谢产物的潜力。【方法】基于依赖黄素腺嘌呤二核苷酸的卤化酶基因筛选,从经过表型去重复的70株陆地来源和71株海洋来源的放线菌中,通过PCR筛选获得卤化酶基因片段,... 【目的】在基因水平上分析并比较陆地来源与海洋来源的放线菌产生卤化代谢产物的潜力。【方法】基于依赖黄素腺嘌呤二核苷酸的卤化酶基因筛选,从经过表型去重复的70株陆地来源和71株海洋来源的放线菌中,通过PCR筛选获得卤化酶基因片段,并进行测序鉴定;通过卤化酶氨基酸序列的系统发育分析,比较不同来源放线菌的卤化酶序列,以及海洋链霉菌和小单孢菌的卤化酶序列。另外,对卤化酶阳性菌株进行了聚酮合酶和非核糖体多肽合成酶基因的检测。【结果】本研究中36.6%的海洋放线菌具有卤化酶基因,其阳性率远高于本研究所涉及的陆地放线菌(14.3%);其中海洋链霉菌的卤化酶基因阳性率高达69.0%,而海洋小单孢菌的卤化酶阳性率仅为14.3%。86.1%的卤化酶阳性菌株具有聚酮合酶和/或非核糖体多肽合成酶基因。本研究获得的海洋来源的卤化酶序列与已知的卤化酶序列存在明显差异,在进化树上形成几个新的分支;其中链霉菌间的卤化酶序列相似性较高,而小单孢菌间的卤化酶序列差异较大。【结论】海洋来源的放线菌,尤其是海洋链霉菌,可作为未来获得新卤化活性物质的一类重要微生物资源。 展开更多
关键词 卤化酶 基因筛选 海洋放线菌 陆地放线菌 链霉菌 小单孢菌
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城市污水处理厂活性污泥生物泡沫研究进展 被引量：14
15
作者 宋阳 姜成英 +1 位作者 王爱杰 刘双江 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期1954-1970,共17页
城市污水处理厂运行过程中一旦发生活性污泥生物泡沫,就会影响污泥沉降和处理厂运行效能,对出水水质、作业安全和公共健康带来一系列挑战。生物泡沫是自活性污泥法诞生以来长期困扰污水处理厂运行的难题。生物泡沫的形成需要气泡、表面... 城市污水处理厂运行过程中一旦发生活性污泥生物泡沫,就会影响污泥沉降和处理厂运行效能,对出水水质、作业安全和公共健康带来一系列挑战。生物泡沫是自活性污泥法诞生以来长期困扰污水处理厂运行的难题。生物泡沫的形成需要气泡、表面活性物质和疏水物质等3点基本的要素,在其中主要富集了诺卡氏型丝状细菌(Nocardio formfilamentous bacteria)和微丝菌(Candidatus Microthrix parvicella)这两种类型微生物。多种环境和运行因素包括温度、溶解氧、pH、污泥龄、特别是营养物质种类和浓度等均会对这些丝状微生物的生长产生影响。抑制丝状细菌生长的常用控制策略包括选择器、生长动力学控制、投加化学药剂以及噬菌体等方法,通过降低两类丝状细菌在生化池中的浓度以期消除生物泡沫现象。本文总结了生物泡沫的类型、成因、表征生物泡沫程度的指标、影响生物泡沫的环境因素以及常用的调控策略的原理及优缺点等,尽可能全面地介绍活性污泥生物泡沫的研究现状,并探讨未来研究方向和控制策略,期望能够为今后研究活性污泥微生物和污水处理厂运行调控提供有价值的参考。 展开更多
关键词 城市污水处理厂 活性污泥 生物泡沫 诺卡氏型丝状细菌 微丝菌
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应用响应面法优化发酵培养基提高达托霉素产量 被引量：14
16
作者 张昊月 郭正彦 +1 位作者 吕志堂 陈义华 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期113-122,共10页
【背景】达托霉素来自玫瑰孢链霉菌NRRL 11379的发酵产物,是重要的临床用抗生素。其原始产生菌发酵周期长,影响达托霉素的生产效率。本实验室前期在天蓝色链霉菌中重构了达托霉素的生物合成途径,有效地缩短了发酵周期,但重组菌株K10中... 【背景】达托霉素来自玫瑰孢链霉菌NRRL 11379的发酵产物,是重要的临床用抗生素。其原始产生菌发酵周期长,影响达托霉素的生产效率。本实验室前期在天蓝色链霉菌中重构了达托霉素的生物合成途径,有效地缩短了发酵周期,但重组菌株K10中达托霉素发酵产量很低,制约了后续的研究和开发。【目的】利用响应面法优化产达托霉素的重组菌天蓝色链霉菌K10的发酵培养基组分,获得达托霉素高产的发酵培养基配方。【方法】采用单因素实验、Plackett-Burman试验、最陡爬坡试验和响应面法设计优化达托霉素发酵培养基,使用Design Expert 8.0对实验数据进行分析。【结果】培养基各成分中影响达托霉素产量的3个主要因素是糊精、酵母提取物和酪蛋白,其最佳浓度分别为25.11、2.20和2.00 g/L。在此条件下,达托霉素产量达到15.30 mg/L,较原始培养基产量提高了2.17倍。【结论】实验获得了达托霉素产量明显提高的天蓝色链霉菌K10发酵培养基配方,为达托霉素的后续研究提供可靠支撑。 展开更多
关键词 达托霉素 Plackett-Burman试验 最陡爬坡试验 响应面法
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乳链菌肽前体基因(nisZ)在乳酸乳球菌中的克隆和表达 被引量：11
17
作者 陈秀珠 胡海菁 +1 位作者 杨巍 还连栋 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第3期285-290,共6页
用ＰＣＲ技术从克隆有完整乳链菌肽生物合成基因簇（来自于乳链菌肽高产菌株Ｌ． ｌａｃｔｉｓ ＡＬ２）的重组噬菌体λＨＪ－３中扩增了编码乳链菌肽的前体基因，与ｐＭＧ３６ｅ连接得到重组质粒ｐＨＪ２０１，用电击转化法将ｐＨＪ２... 用ＰＣＲ技术从克隆有完整乳链菌肽生物合成基因簇（来自于乳链菌肽高产菌株Ｌ． ｌａｃｔｉｓ ＡＬ２）的重组噬菌体λＨＪ－３中扩增了编码乳链菌肽的前体基因，与ｐＭＧ３６ｅ连接得到重组质粒ｐＨＪ２０１，用电击转化法将ｐＨＪ２０１转化到Ｌ ｌａｃｔｉｓ ＮＺ９８００中，经活性测定和Ｔｒｉｃｉｎｅ－ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳证实乳链菌肽前体基因获得了功能表达．ＤＮＡ序列分析表明乳链菌肽高产菌株Ｌ ｌａｃｔｉｓ ＡＬ２产生的是ＮｉｓｉｎＺ．发现ｐＨＪ２０１在Ｌ ｌａｃｔｉｓ ＮＺ９８００中有良好的稳定性。 展开更多
关键词 乳酸乳球菌 乳链菌肽前体基因 基因克隆 表达
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产环氧化物水解酶的黑曲霉菌种分离和发酵条件的研究 被引量：7
18
作者 沙倩 杨柳 +3 位作者 王建军 郑国钧 吴襟 孙万儒 《菌物系统》 CSCD 北大核心 2001年第4期494-502,共9页
从土壤中筛选出一株能将苯基环氧乙烷立体选择性水解为R-苯基乙二醇的环氧化物水解酶的黑曲霉SQ-6。对其产酶发酵条件进行了研究,最佳碳、氮源分别为2.0%蔗糖和2.0%玉米浆,最适初始pH为4.0,该酶不需诱导,同时还研究了其他发酵条件对产... 从土壤中筛选出一株能将苯基环氧乙烷立体选择性水解为R-苯基乙二醇的环氧化物水解酶的黑曲霉SQ-6。对其产酶发酵条件进行了研究,最佳碳、氮源分别为2.0%蔗糖和2.0%玉米浆,最适初始pH为4.0,该酶不需诱导,同时还研究了其他发酵条件对产酶的影响。使用含酶细胞进行底物苯基环氧乙烷转化,产物(R)-苯基乙二醇转化率为41%,ee值为99%。 展开更多
关键词 立体选择性 苯基环氧乙烷 R-苯基乙二醇 环氧化物水解酶 黑曲霉 菌种分离 发酵
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天蓝色链霉菌调控基因-tcrA功能的初步研究 被引量：6
19
作者 柳金满 杨克迁 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期33-37,T0001,共6页
天蓝色链霉菌的开放阅读框SCO5433编码一个含有TPR(Tetratricopeptide repeat)结构域的调控蛋白。该基因的阻断突变株表现出孢子颜色加深和色素产量增加的表型变化。孢子颜色的加深在以葡萄糖或甘露醇为碳源的MM培养基上表现明显;色素... 天蓝色链霉菌的开放阅读框SCO5433编码一个含有TPR(Tetratricopeptide repeat)结构域的调控蛋白。该基因的阻断突变株表现出孢子颜色加深和色素产量增加的表型变化。孢子颜色的加深在以葡萄糖或甘露醇为碳源的MM培养基上表现明显;色素产量的增加在以甘露醇为碳源的MM培养基和MS培养基上表现最为明显;插片培养结合光学显微镜观察并没有发现突变株在形态分化上有显著变化;这些发现预示着可能存在一个SCO5433参与的调控途径,在一定条件下,这一途径对天蓝色链霉菌次级代谢可能起着负调控作用,而与形态分化无关。 展开更多
关键词 SCO5433 TPR 次级代谢
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高产纤维素酶的拟康宁木霉菌株8985固态发酵条件优化 被引量：9
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作者 李鹏 陈秀珍 庄文颖 《菌物学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期743-758,共16页
木霉是重要的产纤维素酶真菌,在其可利用性评价筛选过程中,获得了一株在实验室条件下高产纤维素酶的拟康宁木霉菌株8985。采用响应面法对8985产纤维素酶的固态发酵条件进行了研究,以滤纸酶活为响应值,通过Plackett-Burman设计对11个因... 木霉是重要的产纤维素酶真菌,在其可利用性评价筛选过程中,获得了一株在实验室条件下高产纤维素酶的拟康宁木霉菌株8985。采用响应面法对8985产纤维素酶的固态发酵条件进行了研究,以滤纸酶活为响应值,通过Plackett-Burman设计对11个因素进行了筛选,包括温度、湿度、发酵时间、K_(2)HPO_(4)、(NH_(4))_(2)SO_(4)、Tween-80、麸皮添加量、CaCl_(2)、MgSO_(4)、乳糖和pH;分析结果表明,影响产酶的3个关键因素分别为发酵时间、K_(2)HPO_(4)浓度和麸皮添加量。进而采用最陡爬坡试验逼近3个关键因素的最大响应区域,采用Box-Behnken设计建立数学模型,获得最佳产酶条件为:发酵5d、K_(2)HPO_(4) 5.18g/L、麸皮添加量0.281g/g,滤纸酶活性可达7.00IU/g,与理论值7.03IU/g接近,是优化前的1.37倍,是菌株里氏木霉QM9414该酶活的2.92倍。研究结果为木霉菌种资源的利用提供了有价值的科学信息。 展开更多
关键词 响应面法 拟康宁木霉 滤纸酶 固态发酵
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