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LAMP方法鉴定玫瑰冠基因型研究 被引量:1
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作者 贡继尚 占雅婷 +4 位作者 崔芳芳 吴有平 黄艳明 刘杰 许继国 《中国家禽》 北大核心 2023年第4期8-13,共6页
为了建立快捷的玫瑰冠等位基因分型方法,试验基于LAMP技术,设计特异性引物,在结合浊度法与金属离子指示剂法等方法下,对玫瑰冠等位基因分型进行可行性研究。结果显示:三组引物中,Rose1-1无特异性,Rose4-1和Rose4-2具有一定的特异性,其中... 为了建立快捷的玫瑰冠等位基因分型方法,试验基于LAMP技术,设计特异性引物,在结合浊度法与金属离子指示剂法等方法下,对玫瑰冠等位基因分型进行可行性研究。结果显示:三组引物中,Rose1-1无特异性,Rose4-1和Rose4-2具有一定的特异性,其中Rose4-1在利用HNB作为染料,不添加环引物时的体系组合,可以在24个已知基因型的个体中准确筛选出纯合子与杂合子个体。结果表明,通过LAMP技术进行玫瑰冠个体基因分型具有可行性,同时也为优化其他性状的分子标记辅助选择提供了有益参考。 展开更多
关键词 玫瑰冠 基因分型 LAMP 丝羽乌骨鸡
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鸡增殖型与肥大型软骨细胞差异表达基因筛选
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作者 贡继尚 李袁飞 +4 位作者 许继国 柴学文 马荆鄂 杨艳北 饶友生 《中国家禽》 北大核心 2023年第7期19-27,共9页
为研究家禽软骨细胞分化过程中的差异基因,寻找家禽胫骨软骨发育不良发生的相关基因和通路,研究基于GEO数据库下载家禽软骨细胞分化的基因表达谱芯片数据进行生物信息学分析。结果显示:共筛选出292个差异基因,其中40个上调,252个下调;... 为研究家禽软骨细胞分化过程中的差异基因,寻找家禽胫骨软骨发育不良发生的相关基因和通路,研究基于GEO数据库下载家禽软骨细胞分化的基因表达谱芯片数据进行生物信息学分析。结果显示:共筛选出292个差异基因,其中40个上调,252个下调;差异基因的GO富集主要在细胞成分活动的调节、趋化性、细胞间黏附和细胞黏附分子结合等过程,KEGG信号通路分析主要在ECM受体相互作用、黏着斑等通路富集;PPI网络分析筛选出APP、SPP1、TF和LAMB14个核心基因,并结合RT-PCR技术对核心基因进行表达谱验证,与预测的结果一致,均表现在增殖型软骨细胞中表达下调。研究表明,从GEO18568数据中分析筛选出的4个核心基因,在增殖型软骨细胞分化为肥大型软骨细胞过程中均发挥正向调控作用。 展开更多
关键词 软骨细胞 增殖型 肥大型 差异基因
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AR与VIPR1蛋白在不同表型鸡冠的免疫组织化学与比较组织学研究 被引量:1
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作者 贡继尚 周敏 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2022年第3期15-18,129,共5页
为了研究下丘脑-垂体-性腺(HPG)轴相关基因雄激素受体(AR)与血管活性肠肽受体1(VIPR1)对鸡冠发育的影响,试验采用免疫组织化学和比较组织学方法对17羽不同冠型的16周龄宁都黄公鸡的鸡冠组织中AR与VIPR1蛋白的表达规律进行了研究。结果表... 为了研究下丘脑-垂体-性腺(HPG)轴相关基因雄激素受体(AR)与血管活性肠肽受体1(VIPR1)对鸡冠发育的影响,试验采用免疫组织化学和比较组织学方法对17羽不同冠型的16周龄宁都黄公鸡的鸡冠组织中AR与VIPR1蛋白的表达规律进行了研究。结果表明:AR与VIPR1蛋白在不同冠型中均有免疫组织化学阳性表达,宁都黄公鸡细齿冠AR与VIPR1蛋白免疫组织化学阳性细胞比率显著低于其他冠型(P<0.05),倒冠AR与VIPR1蛋白的免疫组织化学阳性细胞比率均显著高于其他冠型(P<0.05),并且在鸡冠窦状血管网内皮细胞及生发层细胞中具有较高免疫组织化学阳性反应。鸡冠中间层由于胶原纤维网较为松散,其中散乱分布的成纤维细胞具有AR和VIPR1蛋白的免疫组织化学阳性反应;几种冠型外周层均有血管分布,并具有AR与VIPR1蛋白的免疫组织化学阳性反应,相对于其他冠型细齿冠生发层中血管分布较少。说明AR与VIPR1蛋白的表达水平对鸡冠血管的诱导及扩张具有一定的影响,同时可能对外周层细胞具有迁移趋化作用,从而间接影响了鸡冠生发层的发展趋势,形成不同冠型。 展开更多
关键词 鸡冠 雄激素受体 血管活性肠肽受体1 免疫组织化学 表达定位 比较组织学
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宁都黄公鸡不同冠型组织学及BMP2表达定位研究
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作者 贡继尚 周敏 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 2021年第8期123-126,共4页
为了研究成熟期鸡冠不同表型与骨形态发生蛋白2(Bone Morphogenetic Protein 2,BMP2)之间的关系,实验选取16周龄不同冠型的宁都黄鸡公鸡,量取鸡冠性状指标,利用苏木素伊红染色(Hematoxylin-Eosin staining,HE)观察不同冠型组织学差异,... 为了研究成熟期鸡冠不同表型与骨形态发生蛋白2(Bone Morphogenetic Protein 2,BMP2)之间的关系,实验选取16周龄不同冠型的宁都黄鸡公鸡,量取鸡冠性状指标,利用苏木素伊红染色(Hematoxylin-Eosin staining,HE)观察不同冠型组织学差异,通过免疫组织化学方法观察BMP2在不同冠型中的表达。结果表明:宁都黄鸡公鸡细齿冠的冠高、冠长、冠厚的指标均显著低于其他冠型,外周真皮层的血管均比其他冠型少,且外周层与中间层较为致密,而肥厚冠、三叉冠和双叉冠的外周层中小静脉呈扩大状态,可形成窦状血管网,中间层较为松散;BMP2在细齿冠中的表达量极显著高于其他冠型,在生发层的表达是由深层向浅层逐渐降低,且BMP2可在鸡冠血管内皮细胞中表达。说明BMP2对鸡冠的分化发育具有负调控作用,对鸡冠血管的分化具有一定影响。 展开更多
关键词 鸡冠 BMP2 比较组织学
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鸡青黄脚和白色羽性状分子选育研究 被引量:1
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作者 柴学文 贡继尚 +5 位作者 崔芳芳 康昭风 武艳平 周敏 孙雪梅 许继国 《广东农业科学》 CAS 2023年第11期132-138,共7页
【目的】鸡的胫色和羽色作为品种的特征性状是新品种选育的重要性状。通过分子生物学手段对鸡育种生产中的青黄脚和白色羽性状进行分析,探究其形成机制并建立相关的分子标记辅助选择方案。【方法】采用候选基因的方法,将BCO2基因作为鸡... 【目的】鸡的胫色和羽色作为品种的特征性状是新品种选育的重要性状。通过分子生物学手段对鸡育种生产中的青黄脚和白色羽性状进行分析,探究其形成机制并建立相关的分子标记辅助选择方案。【方法】采用候选基因的方法,将BCO2基因作为鸡青黄脚形成的候选基因,以青黄脚、青脚和黄脚个体为材料,通过测序对BCO2基因上的目的位点进行分型,分析该位点与不同性状间的关系。分别将编码扩展基因座e、显性白基因座I和隐性白基因座C的MC1R、PMEL17和TYR基因作为白色羽相关候选基因,以隐性白羽洛克鸡、快大型白羽肉鸡、合成隐性白品系和杂交后代白羽个体为试验材料,通过测序和PCR检测对相关候选突变进行分型,分析相关基因多态性与性状的关系。【结果】(1)青黄脚性状是由真皮层黑色素和胫部黄色鳞片相互作用的结果,BCO2基因突变是青黄脚性状形成的关键,342 bp处的突变位点可用于相关性状的分子标记辅助选择,淘汰CT基因型个体即可达到纯化目的;(2)合成隐性白品系的隐性白基因座为cc,后代白色羽不是因隐性白突变所致;(3)杂交白羽后代均携带PMEL17基因编码的显性白等位基因I,全部为杂合子基因型Ii;(4)杂交白羽后代均携带MC1R基因编码的E和E^(R)等位基因;(5)显性白突变等位基因I、E和ER均来自快大型白羽肉鸡。【结论】青黄脚性状是由控制表皮颜色的BCO2基因上的突变导致,342 bp位点可用于针对该性状的分子标记辅助选择;白色羽形成与隐性白突变无关,主要是由编码显性白等位基因I的PMEL17突变导致。 展开更多
关键词 青黄脚 白色羽 分子标记辅助选择 BCO2 TYR PMEL17 MC1R
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鸡精液稀释液的筛选及优化
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作者 孙雪梅 王海波 +1 位作者 柴学文 许继国 《养禽与禽病防治》 2023年第6期41-43,共3页
本文选购了4款经典的商品化公鸡精液稀释液A、B、C、D,以28周龄左右的天山草鸡商品代种鸡为研究对象,分别测定4种精液稀释液对精液质量的影响。结果显示,不同稀释液对精子活力的影响较大(P<0.01),D款精液稀释液相比效果最好。通过比... 本文选购了4款经典的商品化公鸡精液稀释液A、B、C、D,以28周龄左右的天山草鸡商品代种鸡为研究对象,分别测定4种精液稀释液对精液质量的影响。结果显示,不同稀释液对精子活力的影响较大(P<0.01),D款精液稀释液相比效果最好。通过比较温度、时间、稀释倍数、浓度对鸡精子活力、受精率的影响,从而为D款精液稀释液的使用提供合理参数。结果显示:原精、1:1、1:2和1:3稀释后进行人工授精,受精率无明显差异;按1:1稀释,40℃水浴保存下,可延长授精作业时间至1.5h。研究结果为该地区种鸡人工授精技术提供了参考依据。 展开更多
关键词 鸡精液稀释 保护剂 人工授精 精子活力
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文昌鸡白麻羽性状与SLC45A2多态性关系 被引量:4
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作者 何艺平 陈杰 +1 位作者 高鑫凤 许继国 《广东农业科学》 CAS 2019年第10期99-103,共5页
【目的】研究文昌鸡白麻羽性状的遗传规律,鉴定与白麻羽性状相关的基因变异,为文昌鸡白麻羽群体的利用以及白麻羽性状的分子标记辅助选择提供参考。【方法】利用正反交试验探索白麻羽性状的遗传规律;根据白麻羽性状的特点结合前人研究结... 【目的】研究文昌鸡白麻羽性状的遗传规律,鉴定与白麻羽性状相关的基因变异,为文昌鸡白麻羽群体的利用以及白麻羽性状的分子标记辅助选择提供参考。【方法】利用正反交试验探索白麻羽性状的遗传规律;根据白麻羽性状的特点结合前人研究结果,选取SLC45A2基因为候选基因,利用重测序的方法筛选外显子区域内的变异;并重点验证外显子区域的错义突变和无义突变与白麻羽性状的关系。【结果】黄麻羽个体与白麻羽个体正反交试验结果表明,白麻羽性状相对于黄麻羽呈伴性隐性遗传。试验以白麻羽和黄麻个体为DNA模板,扩增了SLC45A2上的7个外显子区域,结果共筛选到5个SNP,其中3个位于外显子上,2个为错义突变(c.a74g和c.g1154c),1个为同义突变(c.c561t)。以文昌鸡白麻羽群体的文昌鸡和非白麻羽性状的文昌鸡、霸王山鸡、清远麻鸡、杏花鸡、红色原鸡为材料,验证上述错义突变,结果显示c.g1154c位点与白麻羽性状完全连锁。【结论】白麻羽性状呈现伴性隐性遗传,c.g1154c可能是白麻羽性状的致因突变。 展开更多
关键词 文昌鸡 白麻羽 SLC45A2基因 银色羽基因座
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