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宫颈癌细胞中ΔNp63α的MicroRNA表达谱及其对hsa-let-7b-3p的调控机制 被引量:4
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作者 宋伟国 钱莉莉 +5 位作者 吴大保 申震 朱靖 程勇 肖卫华 周颖 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 2018年第3期138-143,共6页
目的在宫颈鳞癌细胞中筛选出ΔNp63α显著调控的mi RNAs,并探讨其对宫颈癌细胞功能的影响。方法通过mi RNA芯片技术筛选出ΔNp63α过表达的Si Ha细胞株(Si Ha/p63)中差异明显的mi RNAs,并进行q RT-PCR验证;通过q RT-PCR在沉默ΔNp63α的... 目的在宫颈鳞癌细胞中筛选出ΔNp63α显著调控的mi RNAs,并探讨其对宫颈癌细胞功能的影响。方法通过mi RNA芯片技术筛选出ΔNp63α过表达的Si Ha细胞株(Si Ha/p63)中差异明显的mi RNAs,并进行q RT-PCR验证;通过q RT-PCR在沉默ΔNp63α的ME-180细胞株(ME-180/Shp63)中检测差异表达的mi RNAs,并选择差异较显著的hsa-let-7b-3p作为研究对象;向Si Ha细胞中转染hsa-let-7b-3p刺激剂,通过生长曲线、Western blot以及流式细胞仪检测hsa-let-7b-3p对Si Ha细胞增殖及凋亡的影响。结果 (1)在ΔNp63α过表达的Si Ha细胞株中,筛选出10个变化较显著的mi RNAs;(2)在ΔNp63α沉默的ME-180细胞中,筛选出5个与上述变化趋势一致的mi RNAs;(3)hsa-let-7b-3p过表达抑制Si Ha细胞的增殖;(4)hsa-let-7b-3p过表达促进Si Ha细胞的凋亡。结论宫颈癌细胞株中,mi RNA hsalet-7b-3p的表达与ΔNp63α的表达呈正相关,且可以有效抑制细胞增殖,其作用机制可能与诱导细胞周期阻滞和促进细胞凋亡相关。 展开更多
关键词 ΔNp63α 子宫颈癌 miRNA hsa-let-7b-3p 增殖 凋亡
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子宫颈癌细胞中STAT3对ΔNp63α的转录调控机制研究 被引量:1
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作者 钱莉莉 宋伟国 +5 位作者 王娟 申震 吴大保 肖卫华 单革 周颖 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2018年第1期35-40,共6页
目的探讨ΔNp63α在子宫颈癌细胞株中的转录调控机制。方法通过生物信息学分析ΔNp63α可能转录调控因子,构建ΔNp63α启动子报告基因质粒,在HEK293T及子宫颈癌细胞中通过报告基因检测ΔNp63α及细胞信号转导与转录激活因子(STAT3)对ΔN... 目的探讨ΔNp63α在子宫颈癌细胞株中的转录调控机制。方法通过生物信息学分析ΔNp63α可能转录调控因子,构建ΔNp63α启动子报告基因质粒,在HEK293T及子宫颈癌细胞中通过报告基因检测ΔNp63α及细胞信号转导与转录激活因子(STAT3)对ΔNp63α转录水平的调控。通过STAT3的激活剂及抑制剂,检测子宫颈癌细胞株中ΔNp63α的蛋白表达情况。通过Western blot检测ΔNp63α的表达水平对子宫颈癌细胞株中P-STAT3的表达影响。结果 (1)成功构建了含ΔNp63α启动子的质粒并通过酶切及测序验证;(2)荧光素酶报告基因检测系统显示ΔNp63α、STAT3均可以激活ΔNp63α启动子的表达;(3)Western blot结果显示:STAT3激活剂及抑制剂分别可以激活或抑制ΔNp63α蛋白的表达水平;(4)Western blot结果显示:ΔNp63α蛋白的过表达或沉默可以抑制子宫颈癌细胞株中STAT3的磷酸化,而对正常细胞株HEK293T没有相应的调控作用。结论子宫颈癌细胞株中STAT3可以正性调控ΔNp63α的表达,而ΔNp63α的表达上调负反馈抑制STAT3的磷酸化,推测ΔNp63α可能通过与STAT3的复杂调控机制影响肿瘤细胞的恶性生物学行为。 展开更多
关键词 子宫颈癌 ΔNp63α STAT3 IL-6
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