CRISPR/Cas9的原理及其在疾病治疗中的研究进展 被引量：11

1

作者 王亮 赵同标 《发育医学电子杂志》 2017年第1期35-44,共10页

规律成簇间隔短回文重复序列（clustered regularly interspaced short palindromic repeats,CRISPR）及其相关Cas9蛋白介导的新一代基因编辑技术具有操作容易、成本低廉的优势,可实现精确高效的基因编辑功能,包括定点插入、定点敲除及... 规律成簇间隔短回文重复序列（clustered regularly interspaced short palindromic repeats,CRISPR）及其相关Cas9蛋白介导的新一代基因编辑技术具有操作容易、成本低廉的优势,可实现精确高效的基因编辑功能,包括定点插入、定点敲除及定点突变等,已广泛用于多种动植物的基因编辑。 展开更多

关键词 治疗 疾病 编辑功能 重复序列 定点突变 基因 动植物

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体细胞重编程研究进展 被引量：11

2

作者 李鑫 王加强 周琪 《中国科学：生命科学》 CSCD 北大核心 2016年第1期4-15,共12页

多细胞生物个体的分化细胞均通过一系列动态调控机制维持其稳态,不同类型分化细胞之间的转化在自然条件下不会自发发生.通过实验手段可以逆转细胞分化的进程使之改变状态,从一种基因表达谱转换成另一套表达谱,从而实现细胞类型的转化也... 多细胞生物个体的分化细胞均通过一系列动态调控机制维持其稳态,不同类型分化细胞之间的转化在自然条件下不会自发发生.通过实验手段可以逆转细胞分化的进程使之改变状态,从一种基因表达谱转换成另一套表达谱,从而实现细胞类型的转化也即重编程.目前已知可以通过4种不同途径,即核移植、细胞融合、胞质孵育及诱导多能干细胞,将终末分化的体细胞重编程为类胚胎干细胞的多能性干细胞状态,而后者具有发育成为动物个体所有细胞的能力.由于细胞重编程的过程能够将细胞命运逆转成为具有再生能力干细胞的状态,因此,这一领域的系列发现为再生医学、疾病个体化治疗及药物筛选提供了巨大的前景. 展开更多

关键词 体细胞重编程 核移植 细胞融合 诱导多能干细胞

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胚胎植入研究的进展与展望 被引量：10

3

作者 王海滨 《生命科学》 CSCD 2017年第1期31-42,共12页

胚胎与母体子宫第一次亲密接触并相互对话,进而建立起直接生理联系的过程被称为胚胎植入。这一过程的正常发生与否决定着胚胎能否继续发育和最终的妊娠结局。正常育龄妇女每个月经周期妊娠成功率只有30%左右,其中近70%的妊娠失败被认为... 胚胎与母体子宫第一次亲密接触并相互对话,进而建立起直接生理联系的过程被称为胚胎植入。这一过程的正常发生与否决定着胚胎能否继续发育和最终的妊娠结局。正常育龄妇女每个月经周期妊娠成功率只有30%左右,其中近70%的妊娠失败被认为是发生在胚胎植入环节。胚胎植入的成功发生需要具有植入能力的囊胚和处于接受态的子宫之间同步互作并建立起直接的生理联系。在临床的辅助生殖诊疗中,尽管形态正常的胚胎移植到子宫中,妊娠的成功率也只有50%左右,这其中子宫接受态的异常被认为是一个很关键的、急需克服的限制因素。反之,更为可靠的胚胎质量判断标准是辅助生殖治疗研究中的另一个关键问题。针对子宫接受态建立和囊胚激活这两个决定胚胎植入成败的关键事件,阐述了胚胎植入领域近年来的研究进展,介绍了国内科学家在该领域所做的贡献,同时简要探讨了本领域发展面临的问题以及出路,以使读者能明晰胚胎植入这一重要生理过程发生的分子基础以及该领域面临的挑战和未来发展方向。 展开更多

关键词 胚胎植入 子宫接受态 囊胚激活

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CRISPR/Cas9介导RB1基因敲除及其在鸡前脂肪细胞分化、增殖中的功能研究 被引量：9

4

作者 张琦 黄娇娇 +4 位作者 杨彩侠 王宇祥 张慧 赵建国 李辉 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期1775-1784,共10页

旨在研究RB1基因在鸡前脂肪细胞分化和增殖过程中的功能,本研究利用CRISPR/Cas9系统在鸡前脂肪细胞中敲除RB1基因,检测鸡前脂肪细胞的分化和增殖能力及相关标志基因的表达水平。结果表明,CRISPR/Cas9系统能够有效介导RB1基因的敲除并引... 旨在研究RB1基因在鸡前脂肪细胞分化和增殖过程中的功能,本研究利用CRISPR/Cas9系统在鸡前脂肪细胞中敲除RB1基因,检测鸡前脂肪细胞的分化和增殖能力及相关标志基因的表达水平。结果表明,CRISPR/Cas9系统能够有效介导RB1基因的敲除并引起RB1基因翻译的提前终止,敲除效率可以达到10%。油红O提取比色和CCK-8的结果显示,敲除RB1基因后,鸡前脂肪细胞的分化能力减弱、增殖能力增强;qRT-PCR结果显示,RB1基因敲除之后脂肪细胞分化标志基因G0S2、FAS、A-FABP的mRNA表达水平下降,尤其是G0S2基因的表达水平在前脂肪细胞分化的各个阶段都表现为显著的下降。同时RB1基因敲除还引起细胞周期相关基因CyclinD1、E2F1、Ki67、PCNA的mRNA表达水平升高。初步推断,RB1基因可能是调控鸡前脂肪细胞分化和增殖的关键调节因子。 展开更多

关键词 CRISPR/Cas9 RB1 鸡 脂肪沉积 分化 增殖

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胎盘屏障建立与维持的机制 被引量：9

5

作者 郑婉珊 胡晓倩 +1 位作者 王雁玲 曹彬 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期115-124,共10页

胎盘是妊娠期维持胎儿正常生长发育和母亲健康的临时性器官,直接介导了母胎之间的对话。胎盘防御屏障功能的建立与维持是正常妊娠维持的重要基础,一方面,胎盘发挥了抑制母体对胎儿免疫排斥的作用,同时,胎盘需要抵抗致病微生物的感染。... 胎盘是妊娠期维持胎儿正常生长发育和母亲健康的临时性器官,直接介导了母胎之间的对话。胎盘防御屏障功能的建立与维持是正常妊娠维持的重要基础,一方面,胎盘发挥了抑制母体对胎儿免疫排斥的作用,同时,胎盘需要抵抗致病微生物的感染。本文从胎盘发育的角度出发,从细胞学、免疫学等多重领域探讨了胎盘防御屏障建立及功能维持的细胞和分子机制,重点介绍了胎盘合体滋养层细胞抗感染的作用方式,包括细胞自噬、外泌体途径、细胞连接及细胞骨架等;同时介绍了胎盘屏障功能异常与子宫内感染尤其是TORCH致病微生物感染的致病关联。 展开更多

关键词 胎盘屏障 滋养层细胞 子宫内感染 TORCH

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基因组编辑技术在猪遗传改良中的应用 被引量：8

6

作者 黄娇娇 曹春伟 +1 位作者 郑国民 赵建国 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期1078-1089,共12页

核酸酶介导的基因组编辑技术大幅度提高了编辑真核细胞基因组的能力,给生命科学领域带来了革命性地发展,也给猪的遗传改良带来了全新的契机。本文介绍了基因组编辑技术尤其是CRISPR/Cas9系统的发展以及各种天然存在的和人为改造的Cas9... 核酸酶介导的基因组编辑技术大幅度提高了编辑真核细胞基因组的能力,给生命科学领域带来了革命性地发展,也给猪的遗传改良带来了全新的契机。本文介绍了基因组编辑技术尤其是CRISPR/Cas9系统的发展以及各种天然存在的和人为改造的Cas9变体的作用特点;汇总了利用基因组编辑技术提高猪生产性能,尤其是改善猪肉品质和抵抗病毒感染的研究进展;分析了目前利用基因组编辑技术推进猪遗传改良所面临的挑战;最后,展望了基于基因组编辑技术的猪遗传改良和品种培育的发展趋势。 展开更多

关键词 猪 基因组编辑 遗传改良

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胎儿死亡的胎盘病理 被引量：8

7

作者 刘明 王雁玲 《中国实用妇科与产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期1151-1157,共7页

人类胎盘是一个妊娠期的临时器官,对胎儿发育和正常妊娠的维持起重要作用。妊娠期间,胎盘在母体和胎儿间建立沟通的桥梁,为胎儿提供营养物质,进行气体交换和废物清除,并建立免疫耐受环境,保障半异体胎儿不被母体排斥;胎盘还可作为妊娠... 人类胎盘是一个妊娠期的临时器官,对胎儿发育和正常妊娠的维持起重要作用。妊娠期间,胎盘在母体和胎儿间建立沟通的桥梁,为胎儿提供营养物质,进行气体交换和废物清除,并建立免疫耐受环境,保障半异体胎儿不被母体排斥;胎盘还可作为妊娠期重要的内分泌器官,协调胎儿发育及母体多器官的妊娠适应性应答。胎盘发育不良往往导致胎儿生长异常及多种妊娠并发症,严重情况下可导致胎儿死亡。文章阐述了生理状况下人类胎盘的结构和功能,描述了因胎儿生长受限(FGR)、子痫前期(PE)、妊娠期糖尿病(GDM)等造成胎儿死亡的胎盘病理特征,进而展望通过靶向胎盘干预妊娠期疾病的可能前景。 展开更多

关键词 胎盘发育 胎儿死亡 胎盘病理 妊娠并发症

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人胚胎干细胞来源的视网膜色素上皮细胞质量控制研究 被引量：7

8

作者 纳涛 王磊 +5 位作者 郝捷 张可华 韩晓燕 周琪 王柳 袁宝珠 《生命科学》 CSCD 北大核心 2018年第3期248-260,共13页

人视网膜色素上皮细胞(retinal pigment epithelial cells,RPEs)移植是目前被认为最有希望延缓或治愈视网膜变性疾病的治疗策略,而由人胚胎干细胞诱导分化来源的RPE细胞(human embryonic stem cells-derived RPE,hESC-RPEs)可为RPEs移... 人视网膜色素上皮细胞(retinal pigment epithelial cells,RPEs)移植是目前被认为最有希望延缓或治愈视网膜变性疾病的治疗策略,而由人胚胎干细胞诱导分化来源的RPE细胞(human embryonic stem cells-derived RPE,hESC-RPEs)可为RPEs移植提供数量充足、质量可控的细胞来源。为确保hESC-RPEs临床应用的安全性、有效性和稳定性,这类细胞在临床前研究阶段需满足明确的细胞鉴别特征、RPEs基本生物学特征、微生物学安全性、生物学安全性及生物学有效性的总体质量要求,而每一类总体质量要求是由多个关键质量属性要求组成。考虑到人ESCs来源因素,hESC-RPEs细胞生物学安全性需考虑终未分化的RPEs中的hESCs残留问题。现就hESC-RPEs细胞总体质量要求及各相关质量属性进行讨论,目的是帮助在我国建立临床研究用hESC-RPEs质量控制评价体系,和探索适合于所有hESCs诱导分化细胞临床前阶段质量评价的基本方法。 展开更多

关键词 视网膜色素上皮细胞 胚胎干细胞 种子细胞 质量控制 干细胞治疗

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器官衰老与退行性病变研究 被引量：6

9

作者 毕诗佳 李兰竹 +5 位作者 杨远涵 丁英杰 王翠 张维绮 曲静 刘光慧 《中国基础科学》 2021年第6期1-17,共17页

衰老是伴随增龄而出现的机体功能衰退的过程,涉及器官、组织、细胞和分子等多个层面,呈现基因组不稳定、干细胞耗竭、细胞间通信改变等特征。全身系统性组织器官的再生能力下降易诱发机体衰老及衰老相关疾病的发生。本文揭示器官退行性... 衰老是伴随增龄而出现的机体功能衰退的过程,涉及器官、组织、细胞和分子等多个层面,呈现基因组不稳定、干细胞耗竭、细胞间通信改变等特征。全身系统性组织器官的再生能力下降易诱发机体衰老及衰老相关疾病的发生。本文揭示器官退行性变化的机制,解析衰老对器官稳态的影响,构建衡量器官健康状态的指标体系,研究干预器官衰老,以推动人类衰老与再生的基础和转化医学研究,实现衰老相关疾病的精准诊断和科学干预,提高和保障老年群体的身心健康。 展开更多

关键词 器官衰老 衰老与再生 衰老干预 健康老龄化

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小鼠性别决定过程中性腺体细胞分化的调控 被引量：5

10

作者 岑常活 陈敏 +2 位作者 姜璘 侯晓晖 高飞 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期20-30,共11页

哺乳动物的性腺由生殖细胞和体细胞共同形成,性别决定前的性腺具有双向分化的潜能,性腺中体细胞的分化决定其发育为睾丸或卵巢。这一分化过程受到多种因子的精细调控。其中SRY、SOX9、SOX3、SOX8、SOX10、FGF9/FGFR2、PGD2、AMH和DMRT1... 哺乳动物的性腺由生殖细胞和体细胞共同形成,性别决定前的性腺具有双向分化的潜能,性腺中体细胞的分化决定其发育为睾丸或卵巢。这一分化过程受到多种因子的精细调控。其中SRY、SOX9、SOX3、SOX8、SOX10、FGF9/FGFR2、PGD2、AMH和DMRT1等参与睾丸的发育和分化,而FOXL2、CTNNB1、RSPO1、WNT4、Follistatin、ERα/β和BMP2则在卵巢发育过程中发挥关键作用。如果这些分子调控网络受到内源性或外源性因子的破坏,则会引起两性发育紊乱,甚至导致雄性向雌性或雌性向雄性的性别逆转。本文以小鼠模型为例,阐述了在性别决定过程中体细胞命运决定以及谱系分化的分子调控网络。 展开更多

关键词 性别分化 性别决定 生殖细胞 体细胞

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人类胎盘滋养层细胞的分化与妊娠相关疾病 被引量：5

11

作者 王红梅 杜美蓉 《生命科学》 CSCD 2017年第1期15-20,共6页

胎儿发育过程中,胎盘既作为胎儿寄生于母体的中介,又在一定程度上充当胎儿的肾脏、肝脏、胃肠道以及呼吸、内分泌和免疫等系统,对母体和胎儿孕期,甚至终生的健康至关重要。然而,胎盘却是了解的最少的人类器官。随着现代生物学技术的发展... 胎儿发育过程中,胎盘既作为胎儿寄生于母体的中介,又在一定程度上充当胎儿的肾脏、肝脏、胃肠道以及呼吸、内分泌和免疫等系统,对母体和胎儿孕期,甚至终生的健康至关重要。然而,胎盘却是了解的最少的人类器官。随着现代生物学技术的发展,人类对胎盘的认识正在从简单的组织结构层面上升到细胞、分子层面,并逐渐走向组学和系统生物学时代。人类对胎盘认识的深入必将为改善妊娠结局提供重要的理论基础和技术路径。 展开更多

关键词 人类胎盘 滋养层细胞 妊娠相关疾病

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子痫前期的基础研究进展 被引量：5

12

作者 蔚欣 王雁玲 《中华产科急救电子杂志》 2021年第3期129-132,共4页

子痫前期(preeclampsia,PE)是发病率较高的严重妊娠综合征,是导致母儿死亡的主要原因,全世界每年超过7万名产妇和50万名胎儿死于PE[1]。有关PE病因学仍有较多的学说和争议,但目前较为公认胎盘发育障碍是PE的核心病理基础[1]。越来越多... 子痫前期(preeclampsia,PE)是发病率较高的严重妊娠综合征,是导致母儿死亡的主要原因,全世界每年超过7万名产妇和50万名胎儿死于PE[1]。有关PE病因学仍有较多的学说和争议,但目前较为公认胎盘发育障碍是PE的核心病理基础[1]。越来越多的研究也表明,需从母体因素和胎盘因素多角度的全面认识PE的发病机制。 展开更多

关键词 子痫前期 母体因素 基础研究进展 胎盘因素 病因学 胎盘发育 发病机制 病理基础

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胎盘发育和子痫前期 被引量：3

13

作者 朱玥霖 李倩倩 +1 位作者 王雁玲 邵璇 《生物医学转化》 2022年第4期22-29,共8页

胎盘是妊娠期间胎儿和母体之间的桥梁,具有血流灌注、物质交换、免疫耐受和妊娠适应性调节等功能,对保障胎儿发育和母体健康发挥关键作用。胎盘发育不良与子痫前期等妊娠疾病密切相关。在本文中,我们总结了人类滋养层细胞分化和胎盘功... 胎盘是妊娠期间胎儿和母体之间的桥梁,具有血流灌注、物质交换、免疫耐受和妊娠适应性调节等功能,对保障胎儿发育和母体健康发挥关键作用。胎盘发育不良与子痫前期等妊娠疾病密切相关。在本文中,我们总结了人类滋养层细胞分化和胎盘功能单元构建的最新研究进展,并讨论了可能导致子痫前期发病的因素。 展开更多

关键词 胎盘 胎盘功能单元 滋养层细胞 多细胞互作 子痫前期

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RBFOX2缺失抑制雄性小鼠的减数分裂起始

14

作者 闫琳 陈建 +1 位作者 宁岩 韩春生 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期4108-4122,共15页

减数分裂起始是配子发生的关键步骤。目前人们已经发现了一些减数分裂起始所必需的基因,但是对于该过程的调控基因及其作用机制还知之甚少。本实验室先前建立了精原干细胞(spermatogonial stem cells,SSCs)体外培养以及体外诱导减数分... 减数分裂起始是配子发生的关键步骤。目前人们已经发现了一些减数分裂起始所必需的基因,但是对于该过程的调控基因及其作用机制还知之甚少。本实验室先前建立了精原干细胞(spermatogonial stem cells,SSCs)体外培养以及体外诱导减数分裂起始的技术体系,为更好地探究减数分裂起始调控基因及作用机理提供了良好的条件。实验室前期研究发现RNA结合蛋白RBFOX2可能调控减数分裂起始,然而RBFOX2在生殖细胞的减数分裂起始过程中的功能及作用机制还需深入研究。本研究利用慢病毒介导的转基因技术产生了RBFOX2敲降的精原干细胞系;发现RBFOX2敲降后,精原干细胞的自我更新、增殖以及分化未发生显著变化,但是减数分裂无法启动,分化型精原细胞发生明显凋亡。这一结果进一步显示了RNA结合蛋白在雄性动物减数分裂起始中的重要功能。 展开更多

关键词 RBFOX2 精原干细胞 减数分裂起始 减数分裂

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胎盘发育研究的突破与展望 被引量：4

15

作者 邵璇 王雁玲 《中华围产医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期694-697,共4页

成功妊娠并孕育健康后代有赖于发育完善的胎盘,胎盘发育障碍是多种妊娠并发症的主要诱因。胎盘是迄今认识最为不足的器官,其形成、发育和功能调节机制,及其与妊娠并发症的分子关联还远未阐明,因而是探究生命孕育机制研究中最为薄弱的一... 成功妊娠并孕育健康后代有赖于发育完善的胎盘,胎盘发育障碍是多种妊娠并发症的主要诱因。胎盘是迄今认识最为不足的器官,其形成、发育和功能调节机制,及其与妊娠并发症的分子关联还远未阐明,因而是探究生命孕育机制研究中最为薄弱的一个环节。随着现代生物学技术的发展,人类对胎盘的认识正在从简单的组织结构层面上升到细胞、分子层面,并逐渐走向组学和系统生物学时代。近年来,胎盘发育领域的研究取得了多项开创性成果。本文将分析近期胎盘发育相关的突破性成果,介绍这一领域重要的国际资助计划,并展望未来的发展前景。 展开更多

关键词 胎盘形成 卫生计划资助 妊娠并发症

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胎盘发育与母胎健康 被引量：4

16

作者 王雁玲 《生命科学》 CSCD 2017年第1期21-30,共10页

胎盘是妊娠期保证胎儿正常生长发育的临时性器官,是胎儿与母体进行营养和气体交换的唯一渠道。胎盘发育异常不仅会造成胎儿发育障碍和多种妊娠疾病,还可影响母体乃至后代的远期健康。深入了解胎盘发育的生理特征及其调控机理,阐释胎盘... 胎盘是妊娠期保证胎儿正常生长发育的临时性器官,是胎儿与母体进行营养和气体交换的唯一渠道。胎盘发育异常不仅会造成胎儿发育障碍和多种妊娠疾病,还可影响母体乃至后代的远期健康。深入了解胎盘发育的生理特征及其调控机理,阐释胎盘发育障碍在妊娠相关疾病发生过程中的作用机制,进而探讨靶向胎盘的妊娠疾病的防治策略,对全面提高人类生殖健康水平、出生人口素质乃至终生的健康水平都具有深远的意义。首先简介胎盘发育过程中滋养层细胞分化及对母体子宫螺旋动脉的改建过程;分析胎盘发育不良与子痫前期等妊娠疾病的关系;进而阐述胎盘发育过程中,母体肝脏、肾脏、循环系统、免疫系统以及凝血系统的妊娠适应性调节;最后简单阐述胎盘发育不良对母婴远期健康的影响。对上述问题的整体认识会大力推进妊娠维持及母胎健康研究领域产生新的突破。 展开更多

关键词 胎盘发育 妊娠适应性 妊娠相关疾病 母胎健康

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哺乳动物早期胚胎发育研究进展和伦理 被引量：3

17

作者 王红梅 《生物医学转化》 2020年第1期35-42,共8页

早期胚胎发育关乎生命健康本源。解析人类早期胚胎发育调控机制可从源头提升人口健康,提高人口素质,从而促进经济社会可持续发展。然而,受限于技术和伦理,人类早期胚胎发育调控机制尚未得到全面解析。近年来,随着哺乳动物胚胎体外培养... 早期胚胎发育关乎生命健康本源。解析人类早期胚胎发育调控机制可从源头提升人口健康,提高人口素质,从而促进经济社会可持续发展。然而,受限于技术和伦理,人类早期胚胎发育调控机制尚未得到全面解析。近年来,随着哺乳动物胚胎体外培养和“类胚胎”等技术的发展,人类进入解开自身早期胚胎发育之谜的最好时代,同时也迎来了新一轮伦理挑战。本文系统地回顾了以啮齿类和灵长类为主的哺乳动物早期胚胎发育领域的研究进展,探讨了人类胚胎研究相关的伦理争议,展望了早期胚胎发育研究的发展方向,希冀为人类认知早期胚胎发育事件和出生缺陷及多种发育源性疾病的发病机制与诊疗提供新思路和新手段。 展开更多

关键词 早期胚胎发育 原肠运动 器官发育 胚胎体外培养 类胚胎 伦理思考

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干细胞治疗脊髓损伤研究进展 被引量：3

18

作者 陈刚 吴骏 +1 位作者 祝贺 于天飞 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期88-92,共5页

脊髓损伤后的常规治疗手段是在有效时间内进行手术缓减外力压迫,防止脊髓神经进一步受损。细胞替代治疗理论上可治愈脊髓损伤,不同类型细胞可从各角度产生治疗作用,包括损伤后的脊髓轴突再生、神经元再建和轴突髓鞘化等,进而促进功能恢... 脊髓损伤后的常规治疗手段是在有效时间内进行手术缓减外力压迫,防止脊髓神经进一步受损。细胞替代治疗理论上可治愈脊髓损伤,不同类型细胞可从各角度产生治疗作用,包括损伤后的脊髓轴突再生、神经元再建和轴突髓鞘化等,进而促进功能恢复。对近年来干细胞治疗脊髓损伤研究中的最新结果进行了概述,以期为干细胞治疗脊髓损伤的研究提供参考。 展开更多

关键词 脊髓损伤 干细胞 细胞移植 细胞治疗

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维生素D对母胎界面肾素的调节作用研究 被引量：1

19

作者 陈春艳 郑丽彬 +3 位作者 王雁玲 李珣 张雪芹 曹彬 《四川大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期1021-1027,共7页

目的探讨子痫前期(preeclampsia,PE)病理过程中维生素D对母胎界面局部肾素血管紧张素系统(reninangiotensin system,RAS)的调节作用及机制。方法用RT-PCR和Western blot检测正常妊娠和重症PE胎盘蜕膜中肾素mRNA和蛋白的表达;体外使用活... 目的探讨子痫前期(preeclampsia,PE)病理过程中维生素D对母胎界面局部肾素血管紧张素系统(reninangiotensin system,RAS)的调节作用及机制。方法用RT-PCR和Western blot检测正常妊娠和重症PE胎盘蜕膜中肾素mRNA和蛋白的表达;体外使用活性与非活性维生素D处理正常蜕膜组织48 h,用RT-PCR和Western blot检测肾素和维生素D去活化酶CYP24A1的表达;分离纯化并用细胞免疫化学染色鉴定正常蜕膜基质细胞和腺上皮细胞,用RT-PCR分别检测两种细胞以及蜕膜组织中维生素D相关分子mRNA的表达;在体外使用活性与非活性维生素D分别处理两种细胞,用RT-PCR和Western blot检测肾素和维生素D去活化酶CYP24A1的表达;使用PKA通路激动剂forskolin或抑制剂H89处理蜕膜腺上皮细胞,探讨蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)通路与维生素D在肾素表达调控过程中的相互作用。结果肾素的mRNA和蛋白质水平在重症PE胎盘蜕膜中的表达较正常对照升高(P<0.05);维生素D处理可使正常蜕膜组织中肾素表达下调(P<0.05),CYP24A1表达增加(P<0.001);从蜕膜组织中成功分离蜕膜基质细胞和腺上皮细胞,相比于蜕膜基质细胞,腺上皮细胞内维生素D相关分子mRNA水平与蜕膜组织更相似;活性或非活性维生素D处理使腺上皮细胞肾素表达抑制(P<0.05),但是蜕膜基质细胞中肾素表达不受影响,两种维生素D处理使两类细胞中的CYP24A1均上调(P<0.001);活性维生素D可以显著抑制forskolin对肾素的上调作用,并可与H89协同抑制肾素表达。结论PE患者胎盘蜕膜肾素表达上调,母胎界面局部RAS系统的活化可能参与PE的发病;维生素D可以特异性地在人蜕膜腺上皮细胞中通过与PKA通路竞争下调肾素表达,补充维生素D可能对PE的临床干预具有潜在价值。 展开更多

关键词 维生素D 子痫前期 肾素 蜕膜

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CLEC2D/CD161分子相互作用调节蜕膜自然杀伤细胞的免疫杀伤功能 被引量：3

20

作者 谈程 范蒙洁 +4 位作者 贾文通 马烨灵 陈敦金 李蓉 王雁玲 《中华围产医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期704-711,共8页

目的研究孕早期CLEC2D/CD161分子相互作用对蜕膜自然杀伤细胞(decidual natural killer cell,dNK)免疫杀伤功能的调节作用,并探讨其与复发性流产发病的关联。方法2018年10月至2019年5月,孕6~10周的正常妊娠(n=16)及复发性流产(n=6)蜕膜... 目的研究孕早期CLEC2D/CD161分子相互作用对蜕膜自然杀伤细胞(decidual natural killer cell,dNK)免疫杀伤功能的调节作用,并探讨其与复发性流产发病的关联。方法2018年10月至2019年5月,孕6~10周的正常妊娠(n=16)及复发性流产(n=6)蜕膜组织取自北京大学第三医院妇产科。通过免疫荧光确定CLEC2D及CD161分子在早孕蜕膜中的分布。从早孕蜕膜中分离培养dNK,对dNK与JEG-3分别用CD161抗体阻断(blocking CD161,B-CD161)及CLEC2D小干扰RNA(siCLEC2D)敲降处理。经过共培养后,用细胞杀伤实验检测dNK的杀伤性。组间数据比较采用t检验。结果(1)CLEC2D主要分布于表达于绒毛外滋养层细胞(extravillous trophoblast,EVT)中,CD161主要表达于dNK中。并且CD161阳性的dNK和CLEC2D阳性的EVT在蜕膜中相邻分布,存在发生相互作用的空间位置条件。(2)B-CD161组效靶比40∶1、20∶1、10∶1及5∶1的靶细胞裂解率分别为(59.12±4.56)%、(25.96±5.44)%、(13.60±8.94)%和(12.53±8.94)%,其对照组IgG组对应效靶比靶细胞裂解率为(20.01±1.96)%、(8.51±1.32)%、(3.24±0.75)%和(3.82%±1.92)%。效靶比40∶1和20∶1时,裂解率均高于相应对照组(t=13.922,P<0.01;t=5.403,P<0.05);而10∶1和5∶1时,2组差异无统计学意义。siCLEC2D组效靶比40∶1、20∶1、10∶1和5∶1的靶细胞裂解率分别为(43.37±2.01)%、(32.99±2.08)%、(23.47±1.36)%和(11.48±0.37)%,其阴性对照组对应效靶比的靶细胞裂解率分别为(15.54±1.46)%、(13.84±1.68)%、(9.94±3.01)%和(5.50±0.99)%,2组之间各效靶比的裂解率差异均有统计学意义(t值分别为19.402、12.400、7.093和9.842,P值均< 0.01)。siCLEC2D组dNK杀伤性相关因子颗粒酶B的表达较阴性对照组升高。(3)复发性流产和正常妊娠蜕膜组织中CLEC2D的表达并无明显差异。复发性流产病例dNK中CD161的阳性率低于正常妊娠组。复发性流产dNK的杀伤性水平高于正常dNK。结论在早孕期蜕膜中,EVT可通过CLEC2D与dNK 展开更多

关键词 流产 习惯性 蜕膜 杀伤细胞 天然 受体 细胞表面 外源凝集素类 C型 NK细胞凝集素样受体亚家族B

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