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掌叶半夏提取物的有效部位对宫颈癌细胞株HPVE6和P53基因表达的影响 被引量:12
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作者 李桂玲 夏晴 +2 位作者 陈松华 归绥琪 徐丛剑 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期110-113,共4页
目的:观察中药掌叶半夏提取物的有效部位(PE)对CaSki和HeLa细胞人乳头瘤病毒(HPV)E6基因和P53基因表达的影响,进一步阐明PE的抑癌机制。方法:0.15mg/mL的PE作用于CaSki和HeLa细胞24h后,采用RT-PCR方法检测两种细胞HPVE6和P53 mRNA表达... 目的:观察中药掌叶半夏提取物的有效部位(PE)对CaSki和HeLa细胞人乳头瘤病毒(HPV)E6基因和P53基因表达的影响,进一步阐明PE的抑癌机制。方法:0.15mg/mL的PE作用于CaSki和HeLa细胞24h后,采用RT-PCR方法检测两种细胞HPVE6和P53 mRNA表达的变化,采用Western Blot检测CaSki和HeLa细胞HPVE6、P53蛋白表达的变化。结果:0.15mg/mL的PE作用24h后CaSki和HeLa细胞HPVE6 mRNA和蛋白的表达均明显下降,而P53mRNA和蛋白的表达均明显上升(P<0.05,P<0.01)。结论:PE可以明显抑制CaSki和HeLa宫颈癌细胞株HPVE6基因的表达、促进其P53基因的表达,这可能是PE抗宫颈癌作用的关键环节。 展开更多
关键词 掌叶半夏提取物的有效部位 宫颈癌 CaSki细胞株 HELA细胞株 人乳头瘤病毒E6 P53
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掌叶半夏提取物的有效部位对CaSki的促凋亡作用机制研究 被引量:10
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作者 李桂玲 归绥琪 +4 位作者 夏晴 陈松华 葛锡锐 林理根 叶阳 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期449-452,共4页
目的:前期的研究已证实中药掌叶半夏提取物的有效部位(pinellia extract fraction,PE)对体外培养的宫颈癌细胞株CaSki和HeLa有促凋亡作用,通过本次研究进一步明确PE对CaSki的促凋亡作用机制。方法:采用RT-PCR方法检测0.15g/L的PE作用24h... 目的:前期的研究已证实中药掌叶半夏提取物的有效部位(pinellia extract fraction,PE)对体外培养的宫颈癌细胞株CaSki和HeLa有促凋亡作用,通过本次研究进一步明确PE对CaSki的促凋亡作用机制。方法:采用RT-PCR方法检测0.15g/L的PE作用24h后CaSki细胞Bcl-2和Bax mRNA表达的变化,采用Western Blot检测0.15g/LPE作用24h后CaSki细胞Bcl-2、Bax蛋白表达的变化。结果:0.15g/L的PE作用24h后CaSki细胞Bcl-2 mRNA和蛋白的表达均明显下降,而Bax mRNA和蛋白的表达均明显上升。结论:PE对CaSki宫颈癌细胞株促凋亡作用之一是抑制Bcl-2基因的表达、促进Bax基因的表达。这为进一步研究PE的抗宫颈癌作用机制以及新药的研制开发奠定了一定的实验基础。 展开更多
关键词 掌叶半夏提取物的有效部位 凋亡 宫颈癌 CaSki细胞株 BCL-2 BAX
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掌叶半夏有效提取物单独或与顺铂联合对体外培养宫颈癌HeLa细胞的作用 被引量:8
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作者 李桂玲 归绥琪 +2 位作者 朱德厚 陈松华 叶阳 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期869-872,共4页
目的观察中药掌叶半夏有效提取物(PE)对体外培养宫颈癌HeLa细胞的作用,以及PE对HeLa细胞对顺铂(DDP)敏感性的影响,以期寻找药物治疗宫颈癌更完善的途径。方法体外培养宫颈癌HeLa细胞,分别用PE、DDP及DDP+PE处理细胞;用倒置相差显微镜观... 目的观察中药掌叶半夏有效提取物(PE)对体外培养宫颈癌HeLa细胞的作用,以及PE对HeLa细胞对顺铂(DDP)敏感性的影响,以期寻找药物治疗宫颈癌更完善的途径。方法体外培养宫颈癌HeLa细胞,分别用PE、DDP及DDP+PE处理细胞;用倒置相差显微镜观察细胞生长及摄影,MTT法检测细胞活性,流式细胞术检测细胞凋亡。结果PE及DDP对宫颈癌HeLa细胞的生长均表现出明显的抑制作用,低剂量PE可加强DDP对HeLa细胞的抑制作用;流式细胞术检测结果显示PE作用后HeLa细胞呈现出凋亡,且随着作用时间的延长,凋亡细胞的比例明显增加。结论PE对宫颈癌HeLa细胞有明显的抑制生长和促凋亡作用,同时能提高HeLa细胞对顺铂的敏感性。 展开更多
关键词 掌叶半夏 宫颈癌 HELA细胞株 生长抑制 凋亡
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人结合上皮细胞体外培养与冻存方法的改良 被引量:5
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作者 李树波 李德懿 葛锡锐 《上海口腔医学》 CAS CSCD 2007年第3期263-267,共5页
目的:改良人结合上皮(junctional epithelium,JE)细胞的分离培养及冻存方法。方法:取正畸拔除的牙周组织健康的前磨牙,沿龈缘剪去冠方1mm左右的沟内上皮,用无菌11号刀片紧贴牙面刮下、剪碎JE组织,简化培养操作步骤。取第2代JE细胞,加入... 目的:改良人结合上皮(junctional epithelium,JE)细胞的分离培养及冻存方法。方法:取正畸拔除的牙周组织健康的前磨牙,沿龈缘剪去冠方1mm左右的沟内上皮,用无菌11号刀片紧贴牙面刮下、剪碎JE组织,简化培养操作步骤。取第2代JE细胞,加入冻存液,按设定的降温程序(从0℃开始,以每分钟下降1.5℃速度下降至-18℃,保持5min;再以每分钟下降20℃的速度降至-80℃,然后投入-196℃液氮罐)冻存细胞,40℃水浴复苏,进一步研究JE细胞的形态、增殖、鉴定及复苏后存活率等生物学活性。结果:不用Dispase冷消化,采用0.1%胰蛋白酶-0.02%EDTA消化,同样可成功地培养人JE细胞;JE细胞复苏后的存活率为(93.87±3.11)%,生长状况良好,与第2代细胞相似;免疫细胞化学染色显示,培养的JE细胞角蛋白-19(cytokeratin-19,CK19)表达强阳性,而波形丝蛋白(vimentin)表达也为阳性。结论:改良的JE分离培养与冻存方法可行,JE表型在体内和体外并非完全一致,可能与细胞生长的底物有关。 展开更多
关键词 结合上皮 细胞培养 细胞冻存 免疫细胞化学
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