重组羧肽酶B在胰岛素原C肽制备工艺中的应用 被引量：6

1

作者 李素霞 田丽萍 +3 位作者 张晓彦 夏文超 龚毅 袁勤生 《华东理工大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期387-391,共5页

用RT-PCR方法克隆了大鼠羧肽酶原B的cDNA编码序列,将其重组到原核表达质粒pT7-473中,并在大肠杆菌中以包涵体方式获得高表达。SDS-PAGE电泳及灰度扫描显示表达量达菌体总蛋白的35%,表达产物融合了表达质粒上的6His。在变性条件下,经Ni-... 用RT-PCR方法克隆了大鼠羧肽酶原B的cDNA编码序列,将其重组到原核表达质粒pT7-473中,并在大肠杆菌中以包涵体方式获得高表达。SDS-PAGE电泳及灰度扫描显示表达量达菌体总蛋白的35%,表达产物融合了表达质粒上的6His。在变性条件下,经Ni-NTA柱纯化,得到羧肽酶原B,在复性液中进行稀释复性后,胰蛋白酶切得具酶活性的羧肽酶B,然后经DEAE-FF分离纯化获得较纯的羧肽酶B(28.5mg/L),比活为13.5u/mg。用RP-HPLC分析胰蛋白酶+羧肽酶B酶解胰岛素原C肽三聚体的酶解产物,证明该重组的羧肽酶B可替代提取的羧肽酶B应用于胰岛素原C肽的制备工艺中。 展开更多

关键词 羧肽酶原B 羧肽酶B 融合表达 分离纯化 胰岛素原C肽

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极端嗜热微生物分子伴侣蛋白研究与嗜热功能蛋白质的规模化制备技术研究 被引量：1

2

作者 张毅 《中国基础科学》 2009年第5期86-89,共4页

极端微生物是丰富的资源宝库,有着巨大的生物技术开发前景。本文从特殊功能蛋白质的发现与表征、结构与功能及潜在性应用,以及特殊功能蛋白质的规模化制备技术两个方面,对极端微生物的资源开发与利用进行了探讨。重点介绍了极端嗜热古菌... 极端微生物是丰富的资源宝库,有着巨大的生物技术开发前景。本文从特殊功能蛋白质的发现与表征、结构与功能及潜在性应用,以及特殊功能蛋白质的规模化制备技术两个方面,对极端微生物的资源开发与利用进行了探讨。重点介绍了极端嗜热古菌Pyrococcus furiosus分子伴侣蛋白系统的一些研究,并以P.furiosus胞外α-淀粉酶PFA为例,对工业生物技术领域重组蛋白质的规模化制备技术进行了讨论。 展开更多

关键词 极端微生物 分子伴侣蛋白 嗜热蛋白质 重组蛋白质的规模化制备技术

原文传递

反义DNA技术研究进展及其在动物学研究中的应用 被引量：1

3

作者 王凌燕 杨晓运 《中国比较医学杂志》 CAS 2003年第1期58-61,共4页

随着人类基因组计划的迅速推进 ,越来越多的基因被测序 ,对新基因功能的确定变得更为迫切。反义DNA技术由于它在多种生物体中的高效性、抑制基因表达的可逆性、相对的低成本和在疾病治疗上的潜力 ,在基因功能的研究中已受到了广泛的关... 随着人类基因组计划的迅速推进 ,越来越多的基因被测序 ,对新基因功能的确定变得更为迫切。反义DNA技术由于它在多种生物体中的高效性、抑制基因表达的可逆性、相对的低成本和在疾病治疗上的潜力 ,在基因功能的研究中已受到了广泛的关注。在这篇文章里 ,作者总结了反义DNA技术的进展及其在动物学研究中的应用。 展开更多

关键词 反义DNA技术 动物学 基因 反义寡聚脱氧核酸 反义DNA

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透明颤菌血红蛋白基因在产TRAIL蛋白大肠杆菌中的克隆表达

4

作者 杨凌超 孙爱友 +3 位作者 沈亚领 魏东芝 龚毅 马昱澍 《华东理工大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第8期925-929,共5页

为解决大肠杆菌高密度发酵生产TRA IL过程中的供氧矛盾,提高菌体的发酵密度,在大肠杆菌中引入透明颤菌血红蛋白基因(vgb)。聚合酶链反应(PCR)检验和CO差光谱法检验表明:vgb基因能够在C 600(pBV 220-TRA IL)中表达并受溶氧调控,重组菌CT... 为解决大肠杆菌高密度发酵生产TRA IL过程中的供氧矛盾,提高菌体的发酵密度,在大肠杆菌中引入透明颤菌血红蛋白基因(vgb)。聚合酶链反应(PCR)检验和CO差光谱法检验表明:vgb基因能够在C 600(pBV 220-TRA IL)中表达并受溶氧调控,重组菌CTV具有良好的遗传稳定性。3.7 L发酵罐实验表明:在同样的发酵条件下,含vgb基因的重组菌CTV的最高菌体密度为对照菌的1.64倍,达到50.6 g/L,乙酸积累为对照菌的55.6%,TRA IL蛋白产量提高了70%,达到2.8 g/L。 展开更多

关键词 透明颤菌血红蛋白基因(vgb) TRAIL 大肠杆菌 发酵 乙酸

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用不同实验小鼠品系建立精神分裂症的动物模型 被引量：28

5

作者 吴金华 邹洪 +3 位作者 于军 周雪东 谢青莲 金玫蕾 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期381-387,共7页

基于精神分裂症的谷氨酸功能紊乱假说,实验用N-甲基-D-天门冬氨酸(NMDA)非竞争性受体拮抗剂MK801(5-甲基二氢二苯并环庚稀亚氨马来酸或地卓西平马来酸盐)作用于实验小鼠,观察到类似精神分裂症的症状:移动加快(hyperloeomotion)和刻板性... 基于精神分裂症的谷氨酸功能紊乱假说,实验用N-甲基-D-天门冬氨酸(NMDA)非竞争性受体拮抗剂MK801(5-甲基二氢二苯并环庚稀亚氨马来酸或地卓西平马来酸盐)作用于实验小鼠,观察到类似精神分裂症的症状:移动加快(hyperloeomotion)和刻板性动作(stereotypy),建立了可用仪器测定的两项量化指标。根据作用于近交系BALB/c小鼠的MK801的剂量优化结果,用0.6 mg/kg体重的MK801剂量初步建立了精神分裂症小鼠模型,并用近交系C57BL/6小鼠成功重复了上述实验。进一步用系列剂量的MK801作用于远交群ICR小鼠,同样也诱发了类似精神分裂症的症状。用目前临床上常用的抗精神分裂症药物利培酮作用于已建立的BALB/c小鼠和C57BL/6小鼠的精神分裂症模型,结果表明利培酮能显著地抑制两品系模型小鼠的类似精神分裂症的症状。实验结果证明:用MK801作用于实验小鼠建立精神分裂症动物模型是可行的。 展开更多

关键词 精神分裂症 动物模型 MK801 移动加快 刻板性动作 利培酮

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我国实验动物科学带来的动物伦理及福利问题 被引量：31

6

作者 金玫蕾 《生命科学》 CSCD 2012年第11期1325-1329,共5页

实验动物是在一定条件下人工饲养繁殖,具有特定的生物学特性,用于科学研究的动物。实验动物是生命科学研究不可缺少的支撑条件,是为人类的健康和发展作出贡献和牺牲的生命体。实验动物科学包括实验动物和动物实验两个方面,是生命科学的... 实验动物是在一定条件下人工饲养繁殖,具有特定的生物学特性,用于科学研究的动物。实验动物是生命科学研究不可缺少的支撑条件,是为人类的健康和发展作出贡献和牺牲的生命体。实验动物科学包括实验动物和动物实验两个方面,是生命科学的重要分支。随着人类社会、经济和文化的发展,动物福利和动物伦理问题已经全面渗透到了实验动物科学乃至生命科学的各个领域之中。在我国,实验动物科学带来的伦理问题主要表现为:缺乏相应的法律法规,对虐杀实验动物的现象缺乏管理,违背实验动物伦理的技术操作现象依然存在,动物保护主义者和实验动物科学工作者之间的矛盾,等等。动物伦理学在中国出现的社会原因是:改革开放后经济的快速发展促使人们的观念转变,与国际的交往促进了东西方文化的交融,同时也是近十几年来教育的结果。近年来,我国实验动物科学领域内关于伦理问题和动物福利的研究进展迅速,实验动物纪念碑的出现和"3R"研究概念的传入是其主要表现。改善实验动物的生活条件,杜绝虐杀实验动物的现象,规范动物实验的技术操作,尽快制定和完善相关的法律法规,是进一步努力的目标;而落实组织措施,成立动物伦理委员会及专家组,加强与国际上的交流,推动"3R"研究的进展,扩大对社会的宣传,支持爱护动物的行为,注重与动物保护组织的理解及沟通等,是为达到这一目标应采取的措施。 展开更多

关键词 实验动物科学 伦理问题 动物福利

原文传递

分子伴侣过量表达对蛋白质分泌及可溶性的影响 被引量：10

7

作者 杨运桂 童芹 +4 位作者 郑卫东 钱友存 杨胜利 龚毅 mail.srcb.ac.cn 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 2000年第3期382-387,共6页

通过过量表达大肠杆菌分子伴侣 Sec B和 Gro EL,研究了它们对靶蛋白的分泌及可溶性的影响 .在过量表达 Sec B的宿主菌中 ,周质空间分泌蛋白总量较对照组提高了约 71 % ,GL- 7- ACA酰化酶在周质空间酶的活力较对照组提高了约 1 .5倍 ,碱... 通过过量表达大肠杆菌分子伴侣 Sec B和 Gro EL,研究了它们对靶蛋白的分泌及可溶性的影响 .在过量表达 Sec B的宿主菌中 ,周质空间分泌蛋白总量较对照组提高了约 71 % ,GL- 7- ACA酰化酶在周质空间酶的活力较对照组提高了约 1 .5倍 ,碱性磷酸酯酶在周质空间酶的活力较对照组提高了约 54% ;在过量表达 Gro EL的宿主菌中 ,周质分泌蛋白总量较对照组提高了约 52 % ,青霉素 G酰化酶在周质空间酶的活力较对照组提高了约 76% ,鲑鱼降钙素六聚体的可溶性组分的比例由原来的 45%增加到约 90 % ,而 MS2 -人白介素 - 3融合蛋白的包涵体有约 1 5%转变为可溶性组份 .上述结果表明 ,分子伴侣 Sec B和 Gro EL的过量表达促进了靶蛋白的分泌 ,Gro 展开更多

关键词 分子伴侣 分泌 可溶性表达 蛋白质 过量表达

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HRCA技术在转基因植物检测中的应用 被引量：15

8

作者 陶震 蔡兴锋 +3 位作者 颜志强 胡小波 杨胜利 龚毅 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期294-300,共7页

超分支滚环扩增技术 (Hyperbranchedrollingcycleamplification ,HRCA)在近几年中逐渐引起人们的注意 ,并越来越多的用于基础研究和实际检测中。在本文中我们对该技术在转基因植物检测中的应用情况作了较全面的探索 ;根据 4种转基因植... 超分支滚环扩增技术 (Hyperbranchedrollingcycleamplification ,HRCA)在近几年中逐渐引起人们的注意 ,并越来越多的用于基础研究和实际检测中。在本文中我们对该技术在转基因植物检测中的应用情况作了较全面的探索 ;根据 4种转基因植物中常用的外源基因或DNA片段设计了 4条锁式探针 (Padlockprobe) ,利用质粒pKK2 32 8中的一段序列作为锁式探针中的共同连接部分 ,并根据该共同的连接部分序列设计一对通用的HRCA引物 ;利用同位素标记的锁式探针对HRCA反应中的连接一步的特异性研究表明 ,只有当锁式探针和相应的检测靶DNA同时存在于连接体系中时 ,锁式探针才能被有效地进行连接 ,从线性分子变为环型分子 ,在没有相应靶DNA存在时锁式探针仅以线性形式存在 ;连接时间的研究表明 ,如果所检测的靶DNA是质粒或较短的DNA片段时 ,较短的连接时间 (5～ 10min)就可以取得理想的最终检测效果 ,如果检测的靶DNA是复杂的植物基因组DNA时 ,连接时间需要较大程度的延长 (30～ 6 0min)才能取得理想的最终检测结果 ;HRCA的反应时间研究表明 ,较长的反应时间可以明显增加最终产物的量 ;对BstDNA聚合酶大片段酶用量的研究表明 ,在其它条件不变的情况下酶的用量可以在较大的范围内变化 (0 .5u～ 4u)而不影响最终检测结果 ;? 展开更多

关键词 HRCA技术 转基因植物 检测 锁式探针

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PCR及其衍生技术在基因突变检测中的应用 被引量：11

9

作者 颜志强 杨胜利 龚毅 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期198-200,共3页

许多人类遗传性疾病及某些抗艾滋病药物的抗性乃至细菌对某些抗生素的抗药性通常源于基因突变。本文对近年来在基因突变检测中应用日益广泛的各种PCR衍生技术作一综述;重点介绍了错配PCR技术,以及我们实验室近期报道的一种快速检测喹诺... 许多人类遗传性疾病及某些抗艾滋病药物的抗性乃至细菌对某些抗生素的抗药性通常源于基因突变。本文对近年来在基因突变检测中应用日益广泛的各种PCR衍生技术作一综述;重点介绍了错配PCR技术,以及我们实验室近期报道的一种快速检测喹诺酮类药物耐药大肠杆菌的错配PCR方案。 展开更多

关键词 遗传性疾病 抗药性 基因突变 错配PCR 突变检测

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筛选神经系统基因功能的行为学检测平台的探索 被引量：6

10

作者 金玫蕾 莫韫 +8 位作者 刘留 郭宁 谢青莲 林桢 王星 李葆明 赵国屏 景乃禾 于雷 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期247-251,共5页

为大规模鉴定哺乳动物神经系统新基因的功能 ,利用反义核酸技术建立了一个小鼠行为学检测平台。从大鼠脑低丰度表达基因的cDNA亚库中挑选出在大鼠脑内表达的 2 0个基因 ,设计并合成了这些基因的小鼠同源基因的特异性反义核酸。用Hamilto... 为大规模鉴定哺乳动物神经系统新基因的功能 ,利用反义核酸技术建立了一个小鼠行为学检测平台。从大鼠脑低丰度表达基因的cDNA亚库中挑选出在大鼠脑内表达的 2 0个基因 ,设计并合成了这些基因的小鼠同源基因的特异性反义核酸。用Hamilton微量注射器将反义核酸注射到小鼠的侧脑室 ,并以注射生理盐水和随机序列核酸组作为对照。小鼠的行为学检测模型为 :考察日常代谢能力的摄食量 ,考察Locomotionactivity (移动 )的旷场行为 ,考察疼痛阈值的甩尾试验和记忆能力的步下法实验。结果显示 ,上述 2 0个基因中的 14个在不同行为学模型中与对照组有显著性差异。 展开更多

关键词 基因功能 动物行为学 反义核酸 cDNA亚库 神经系统 检测平台

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细胞色素P450酶系的异源表达研究 被引量：4

11

作者 程婕 龚毅 杨凌 《河北大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2006年第3期331-336,共6页

传统的药物代谢主要以实验动物为对象进行药物早期及临床研究,近几年来,结合生物化学与分子生物学的发展,药物早期代谢研究进入到药物体外代谢的研究阶段,主要围绕人肝内参与代谢的细胞色素P450家族展开.本文就近年来对此家族酶的异源... 传统的药物代谢主要以实验动物为对象进行药物早期及临床研究,近几年来,结合生物化学与分子生物学的发展,药物早期代谢研究进入到药物体外代谢的研究阶段,主要围绕人肝内参与代谢的细胞色素P450家族展开.本文就近年来对此家族酶的异源表达及其在药物代谢中的应用进行了综述. 展开更多

关键词 药物体外代谢 细胞色素P450s(CYPs) 异源表达 药物筛选

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人胸腺素α1在大肠杆菌中的融合表达 被引量：7

12

作者 修朝阳 周穗菁 +1 位作者 俞璎 陈常庆 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期541-545,共5页

利用基因工程表达的方法 ,在大肠杆菌中通过与GST蛋白融合的方式高效表达了胸腺素α1前体基因 ,随后经亲和层析和SP强阳离子树脂纯化相结合的方式 ,得到了胸腺素前体肽段 31肽和N 端未经乙酰化修饰的 2 8肽。融合蛋白表达量达到菌体总... 利用基因工程表达的方法 ,在大肠杆菌中通过与GST蛋白融合的方式高效表达了胸腺素α1前体基因 ,随后经亲和层析和SP强阳离子树脂纯化相结合的方式 ,得到了胸腺素前体肽段 31肽和N 端未经乙酰化修饰的 2 8肽。融合蛋白表达量达到菌体总蛋白的 35 %～ 40 % ,样品肽的产量也达到了约 2 0 0mg L(肽 发酵液 )的产量。经质谱测定 ,分子量分别为 336 6和 30 6 6。BalB C小鼠脾脏淋巴细胞体外测活表明 ,所构建的GST Tα1融合蛋白和纯化后的产物对于淋巴细胞具有比较明显的增殖作用 ,其中N 端未经乙酰化的 2 8肽产物与 31肽产物活性相近 。 展开更多

关键词 人胸腺素α1 大肠杆菌 融合表达

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微生物混合培养从D山梨醇产生维生素C前体——2-酮基-L-古龙酸 被引量：9

13

作者 尹光琳 林文楚 +1 位作者 乔春红 叶晴 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期709-715,共7页

氧化葡萄糖酸杆菌 (Gluconobacteroxydans)SCB3 2 9以D 山梨醇为底物培养时可产生微量 2 酮基 L 古龙酸 ;而葡萄糖酸杆菌 (Gluconobactersp .)SCB1 1 0能将D 山梨醇以较高效率转化为L 山梨糖 ,但不产 2 酮基 L 古龙酸。将两种微生物... 氧化葡萄糖酸杆菌 (Gluconobacteroxydans)SCB3 2 9以D 山梨醇为底物培养时可产生微量 2 酮基 L 古龙酸 ;而葡萄糖酸杆菌 (Gluconobactersp .)SCB1 1 0能将D 山梨醇以较高效率转化为L 山梨糖 ,但不产 2 酮基 L 古龙酸。将两种微生物在以山梨醇为底物的培养基中混合培养 ,其代谢产物经分离提纯后进行熔点测定、元素分析、红外吸收光谱测定等 ,确定其主要的代谢产物是 2 酮基 L 古龙酸。 展开更多

关键词 氧化葡萄糖酸杆菌SCB329 葡萄糖酸杆菌SCB10 D-山梨糖 2-酮基-L-古龙酸 混合培养 维生素C前体

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利用rDNA和ITS序列对1株裸甲藻的初步鉴定 被引量：8

14

作者 苟万里 刘东艳 +3 位作者 甄毓 辛泽毓 李荣秀 于志刚 《中国海洋大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期75-83,共9页

测定了 1株分离自青岛胶州湾海水样品、从形态上初步确定为裸甲藻属 (Gymnodiniumsp,编号为 GYN- 1 5)的核糖体基因 (r DNA)和转录单元内间隔区 (Internal Transcribed Spacer,ITS)序列 ,并利用该序列对该藻进行了初步鉴定。测定的序列... 测定了 1株分离自青岛胶州湾海水样品、从形态上初步确定为裸甲藻属 (Gymnodiniumsp,编号为 GYN- 1 5)的核糖体基因 (r DNA)和转录单元内间隔区 (Internal Transcribed Spacer,ITS)序列 ,并利用该序列对该藻进行了初步鉴定。测定的序列长 2 658bp,涵盖了小亚基 (smallsubunit,SSU) r DNA基因 3'端 1 747bp,ITS1 - 5.8S r DNA- ITS2全长和大亚基 (large subunit,LSU) r DNA基因 5'端 337bp。同源性分析该序列发现 GYN- 1 5与共生甲藻属 (Symbiodinium)中的 2个种 (Symbiodinium californium和 Gymnodinium varians)的对应序列具有很高的相似性 ;3株藻的各段 r DNA和 ITS序列的相似性均为 99%以上 ;以 SSU r DNA序列中的 3个可变区 (V1 +V2 +V3)和邻接法构建的系统树表明 ,GYN- 1 5与 S.californium和 G.varians构成 1个独立的新的子类群 ,该子类群属于共生甲藻属 ,而与各种裸甲藻的亲缘关系较远。根据这些结果可将GYN- 1 5初步鉴定为属于共生甲藻属。鉴于 GYN- 1 5和其它 2个种所构成的分支明显与 5个已知的子类群 (A,B,C,D,E)不同 ,因此将该分支命名为子类群 F。 展开更多

关键词 RDNA ITS序列 裸甲藻 序列相似性 系统树 共生甲藻 浮游植物

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BALB/c和C_(57)BL/6小鼠在基因功能检测中行为学的比较研究 被引量：9

15

作者 金玫蕾 刘留 +5 位作者 郭宁 莫韫 谢青莲 李葆明 赵国屏 景乃禾 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2001年第1期3-9,共7页

目的　探索BALB c和C57BL 6两个品系在有关实验中的不同作用。方法　选取了结合随机测序与生物信息学分析设计合成的神经系统表达的一些基因的反义核酸 (anti sense)中的 2个 ,用Hamilton微量注射器将其分别定量注射到BALB c和C57BL 6... 目的　探索BALB c和C57BL 6两个品系在有关实验中的不同作用。方法　选取了结合随机测序与生物信息学分析设计合成的神经系统表达的一些基因的反义核酸 (anti sense)中的 2个 ,用Hamilton微量注射器将其分别定量注射到BALB c和C57BL 6小鼠的侧脑室 ,并分别设注射生理盐水和随机序列核酸 (Scramble)的对照组。每一反义核酸实验组和对照组各注射 1 0只小鼠 ,之后观察实验组与对照组在不同行为学实验中的差异。小鼠的行为学检测模型为 :考察日常代谢能力的摄食量 ,考察Locomotionactivity(移动 )的旷场行为 ,考察疼痛阈值的甩尾试验和考察记忆能力的步下法实验。结果　注射No 1基因的反义核酸后 ,两品系的实验组均在测试记忆力的步下法 (Step -downTest)试验中表现出记忆力减弱 ,且与对照组差异明显 ,说明No 1基因的功能确与记忆相关。注射No 2基因的反义核酸后 ,在测试移动能力的旷场行为 (OpenFieldBehavior)试验中 ,BALB c实验组跨格、直立行为均比对照组明显减少 ,说明受此反义核酸影响显著 ,而C57BL 6实验组则与对照组无大的差异。此外 ,在生理盐水对照组和随机序列核酸对照组的实验中以及其他行为学模型的实验中 ,两品系也存在着一定的差异。结论　用遗传背景不同的多品系进行相关实验 。 展开更多

关键词 对照组 反义核酸 注射 行为学 实验 C57BL/6小鼠 基因 品系 摄食量 试验

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人血清白蛋白的仿生亲和配基研究 被引量：4

16

作者 杨金菊 王继武 +4 位作者 李永红 肖齐世 顾静 戴平 李荣秀 《中国药学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 2003年第10期801-804,共4页

目的　研究人白蛋白特异的仿生亲和配体和仿生亲和分离技术。方法　合成固定化亲和配体库 ,以人血浆为原料筛选 ,进行人白蛋白分离实验。结果　筛选出两个可以特异结合人血清白蛋白的亲和配体。其中 3 氨甲基吡啶配位体对白蛋白的一步... 目的　研究人白蛋白特异的仿生亲和配体和仿生亲和分离技术。方法　合成固定化亲和配体库 ,以人血浆为原料筛选 ,进行人白蛋白分离实验。结果　筛选出两个可以特异结合人血清白蛋白的亲和配体。其中 3 氨甲基吡啶配位体对白蛋白的一步纯化倍数为 18倍 ,回收率 87.5 %。结论　固定化 3 氨甲基吡啶可以特异结合人血清白蛋白。 展开更多

关键词 人血清白蛋白 亲和配基 亲和分离 3-氨甲基吡啶

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香樟树种子中两种Ⅱ型核糖体失活蛋白凝集素活性的研究 被引量：2

17

作者 杨海燕 李荣秀 刘望夷 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第7期650-654,共5页

从香樟树成熟的种子分离到两种新的Ⅱ型核糖体失活蛋白 :新丰毒蛋白和辛纳毒蛋白 .两者A链的分子质量虽然相差近一倍 ,但B链的分子质量相同 .Ⅱ型核糖体失活蛋白的A链是RNAN 糖苷酶 ,B链是凝集素 ,A链进入细胞表现毒性在很大程度上依赖... 从香樟树成熟的种子分离到两种新的Ⅱ型核糖体失活蛋白 :新丰毒蛋白和辛纳毒蛋白 .两者A链的分子质量虽然相差近一倍 ,但B链的分子质量相同 .Ⅱ型核糖体失活蛋白的A链是RNAN 糖苷酶 ,B链是凝集素 ,A链进入细胞表现毒性在很大程度上依赖于B链的糖结合活性和特异性 .对辛纳毒蛋白和新丰毒蛋白B链的凝集素活性进行了测定和比较 .红细胞凝集实验显示辛纳毒蛋白和新丰毒蛋白具有相同的细胞凝集活性 ,半抗原抑制实验发现它们都属于半乳糖型核糖体失活蛋白 ,荧光光谱法显示它们的糖结合常数也相同 . 展开更多

关键词 新丰毒蛋白 辛纳毒蛋白 凝集素 荧光光谱法

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细菌对氨基糖苷类抗生素产生抗性的机理及其控制策略 被引量：6

18

作者 周勤华 张毅 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 2004年第11期9-12,共4页

氨基糖苷类抗生素在治疗感染性疾病尤其是革兰氏阴性菌引起的严重感染方面起着重要作用 ,但是耐药菌株的出现较大地限制了此类抗生素的发展 ,因此 ,如何控制耐药性已经成为一项迫切需要解决的任务。细菌对氨基糖苷类抗生素产生抗性的机... 氨基糖苷类抗生素在治疗感染性疾病尤其是革兰氏阴性菌引起的严重感染方面起着重要作用 ,但是耐药菌株的出现较大地限制了此类抗生素的发展 ,因此 ,如何控制耐药性已经成为一项迫切需要解决的任务。细菌对氨基糖苷类抗生素产生抗性的机制很多 ,目前普遍接受的主要有三种 :1 通过减少对氨基糖苷类抗生素的摄取或减少药物在体内的累积而产生抗性。 2 通过改变核糖体结合位点而产生抗性。 3 通过表达氨基糖苷类抗生素修饰酶而产生抗性。目前细菌耐药性的控制主要集中在对原有氨基糖苷类抗生素进行改造或合成新的抗生素 ,开发氨基糖苷类抗生素修饰酶抑制剂。 展开更多

关键词 氨基糖苷类抗生素 治疗 修饰酶 细菌 过表达 严重感染 体内 抗性 累积 耐药菌株

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一种新的卡那霉素残留检测方法 被引量：5

19

作者 周勤华 张毅 杨胜利 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期84-90,共7页

氨基糖苷 3′- O磷酰基转移酶Ⅱa (APH( 3′) -Ⅱa)具有磷酸化卡那霉素的功能 ,通过突变使APH( 3′) Ⅱa的催化活性丧失 ,同时保留与底物卡那霉素结合的功能 ,由此获得的突变型APH( 3′) - Ⅱa具有类似于抗体的特异性结合与识别卡那... 氨基糖苷 3′- O磷酰基转移酶Ⅱa (APH( 3′) -Ⅱa)具有磷酸化卡那霉素的功能 ,通过突变使APH( 3′) Ⅱa的催化活性丧失 ,同时保留与底物卡那霉素结合的功能 ,由此获得的突变型APH( 3′) - Ⅱa具有类似于抗体的特异性结合与识别卡那霉素分子的作用。采用戊二醛交联二步法制备了卡那霉素 辣根过氧化物酶结合物 (Kan HRP) ,把纯化后的APH( 3′) - Ⅱa蛋白包被到 96孔聚苯乙烯板上 ,通过竞争性ELISA的方法建立了一种新的卡那霉素残留检测方法。通过该方法可以检测到卡那霉素的最低残留量为 1 μg ml。 展开更多

关键词 卡那霉素 突变型 转移酶 ELISA 抗体 HRP 糖苷 残留检测 特异性结合 氨基糖

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Tat蛋白及其内化作用 被引量：3

20

作者 杨永臣 袁崇刚 李荣秀 《生命的化学》 CAS CSCD 2001年第4期265-268,共4页

关键词 TAT蛋白 内化作用 HIV病毒感染

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