真核细胞蛋白质翻译起始研究进展 被引量：2

1

作者 周培 杨力 +3 位作者 陈佳 李伯良 赵学明 张耀洲 《浙江工程学院学报》 2004年第4期312-315,共4页

在大量有关机制的研究基础上,针对真核蛋白质翻译起始,提出了核糖体沿mRNA滑动识别翻译起始位点的机制和核糖体从mRNA内部识别翻译起始位点的机制。

关键词 蛋白质翻译 真核细胞 研究进展 核蛋白质 核糖体 RNA 机制 起始 研究基础

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广西眼镜蛇蛇毒神经生长因子在大肠杆菌中的表达 被引量：4

2

作者 宋慧 张学荣 +2 位作者 周元聪 江涛 舒雨雁 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期265-270,共6页

目的采用基因工程技术,在大肠杆菌(E.coli)中表达广西眼镜蛇(黑眼镜蛇)蛇毒神经生长因子(NGF)成熟蛋白并检测其生物活性。方法将天然广西眼镜蛇蛇毒的NGF蛋白基因克隆至融合表达载体pET-40b(+)中,以C端融合了6个组氨酸的形式在E.coli BL... 目的采用基因工程技术,在大肠杆菌(E.coli)中表达广西眼镜蛇(黑眼镜蛇)蛇毒神经生长因子(NGF)成熟蛋白并检测其生物活性。方法将天然广西眼镜蛇蛇毒的NGF蛋白基因克隆至融合表达载体pET-40b(+)中,以C端融合了6个组氨酸的形式在E.coli BL21(DE3)通过异丙基硫代半乳糖苷诱导表达NGF蛋白。超声破菌后,将上清液经Ni^(2+)-NTA柱纯化,收集并冻干NGF融合蛋白,用蛋白印迹法分析其NGF抗原活性,并通过促PC12细胞生长法观察其生物活性。结果经蛋白印迹分析可知在38 ku处的条带具有NGF抗原活性。加入天然蛇毒NGF,生长轴突的PC12细胞为(83±3)%,重组品为(21±3)%,表明经纯化的融合蛋白具有NGF生物活力,但活性弱于天然蛇毒NGF。结论在大肠杆菌中可以表达出有活性的蛇毒NGF蛋白。 展开更多

关键词 眼镜蛇 蛇毒 神经生长因子 蛋白表达

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肾小球系膜细胞转化生长因子-β_1基因启动子中氧化低密度脂蛋白应答元件的研究 被引量：4

3

作者 周钦 王远程 +3 位作者 兰洋 赵昀 陆长德 吴兆龙 《肾脏病与透析肾移植杂志》 CAS CSCD 2002年第3期232-235,共4页

目的 :了解在氧化低密度脂蛋白 (Ox LDL)刺激下 ,转化生长因子 β1(TGF β1)基因启动子中顺式作用元件的应答情况。研究在大鼠肾系膜细胞中 ,Ox LDL对TGF β1基因启动子转录活性的影响作用。　 方法 :用聚合酶链反应 (PCR)、酶切和亚克... 目的 :了解在氧化低密度脂蛋白 (Ox LDL)刺激下 ,转化生长因子 β1(TGF β1)基因启动子中顺式作用元件的应答情况。研究在大鼠肾系膜细胞中 ,Ox LDL对TGF β1基因启动子转录活性的影响作用。　 方法 :用聚合酶链反应 (PCR)、酶切和亚克隆的方法 ,构建出 5个TGF β1启动子缺失体—虫荧光素酶 (luciferase)报告基因 ,利用其瞬时转染系膜细胞并检测luciferase相对活性。　 结果 :在Ox LDL(10 0mg/L)刺激下 ,luciferase的活性 12h即出现 ,并于 36h达到平台期。对Ox LDL刺激的应答 ,TGF β1启动子 15 5 0到 845之间可能存在着增强子 , 6 2 9到 4 2 2之间则可能有抑制子。计算机软件分析表明 ,前者内有一转录激活蛋白 1(AP 1)精确识别位点。　 结论 :在大鼠肾系膜细胞TGF β1基因启动子中 ,AP 1结合序列 (TGAGTCA)可能是应答Ox LDL的顺式作用元件。Ox LDL上调TGF β1的表达至少部分是通过AP 1蛋白来介导的 ,且Ox LDL可能通过蛋白激酶C(PKC)信号通路激活AP 1从而正调控TGF β1基因的转录过程。 展开更多

关键词 肾小球系膜细胞 氧化低密度脂蛋白 转化生长因子-Β1 虫荧光素酶报告基因

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波尔山羊的超数排卵研究 被引量：4

4

作者 贾敏 吴建军 郭家友 《畜禽业》 2002年第11期10-12,共3页

在不同季节、应用不同FSH剂量对不同年龄、是否经产、不同体重以及不同利用次数的55头次波尔山羊进行超数排卵处理(其中10头波尔山羊为重复使用)。结果表明:在繁殖季节,应用FSH总剂量为200～300IU,年龄为2～5岁,经产的波尔山羊超排效果... 在不同季节、应用不同FSH剂量对不同年龄、是否经产、不同体重以及不同利用次数的55头次波尔山羊进行超数排卵处理(其中10头波尔山羊为重复使用)。结果表明:在繁殖季节,应用FSH总剂量为200～300IU,年龄为2～5岁,经产的波尔山羊超排效果好。每头平均获卵20.75枚。重复超数排卵的波尔山羊也具有较好的超排效果:第一次平均获卵21.9枚,第二次平均获卵17.8枚。 展开更多

关键词 波尔山羊 超数排卵 胚胎移植

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它莫西芬对绒毛膜癌细胞株JAR补体调节蛋白表达的影响 被引量：1

5

作者 辛云碧 陈松华 +1 位作者 归绥琪 葛锡锐 《上海免疫学杂志》 CSCD 北大核心 2003年第1期20-23,共4页

为探索抗肿瘤药物Tamoxifen对绒毛膜癌细胞株JAR表面补体调节蛋白表达的影响 ,实验以绒毛膜癌细胞株JAR为研究对象 ,用流式细胞术和RT PCR分别检测Tamoxifen作用前后JAR细胞补体调节蛋白在蛋白质和mRNA水平的表达。结果显示 :在 10 6MT... 为探索抗肿瘤药物Tamoxifen对绒毛膜癌细胞株JAR表面补体调节蛋白表达的影响 ,实验以绒毛膜癌细胞株JAR为研究对象 ,用流式细胞术和RT PCR分别检测Tamoxifen作用前后JAR细胞补体调节蛋白在蛋白质和mRNA水平的表达。结果显示 :在 10 6MTamoxifen作用 3d后 ,JAR细胞补体调节蛋白DAF和CD5 9的蛋白质表达水平明显降低 ,而MCP无明显改变 ;在 10 6MTamoxifen作用 2 4h后 ,JAR细胞DAF和CD5 9mRNA表达水平分别降低 88%和 6 0 %。提示Tamoxifen可能通过降低DAF和CD5 9的表达 。 展开更多

关键词 TAMOXIFEN 补体调节蛋白 绒毛膜癌 JAR

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波尔山羊批量胚胎移植 被引量：2

6

作者 贾敏 吴建军 郭家友 《畜禽业》 2002年第10期Y002-Y003,共2页

波尔山羊是一种著名的肉用山羊品种。为了提高波尔山羊繁殖效率,本试验采用激素处理经产母波尔山羊,超数排卵,经与纯种公波尔山羊配种,手术从输卵管中冲出发育至2～8细胞的胚胎,再经手术移回同步发情的受体山东奶山羊输卵管内,妊娠产仔... 波尔山羊是一种著名的肉用山羊品种。为了提高波尔山羊繁殖效率,本试验采用激素处理经产母波尔山羊,超数排卵,经与纯种公波尔山羊配种,手术从输卵管中冲出发育至2～8细胞的胚胎,再经手术移回同步发情的受体山东奶山羊输卵管内,妊娠产仔。结果:(1)超排50头次波尔山羊(其中12头重复使用),获1179枚早期胚胎,其中2细胞以上的胚胎占84.8%(1000/1179);(2)移植480头受体;受体羊最终怀孕率56.25%(270/480),共产仔334头,其中产双胎的受体有64只,占妊娠羊数的23.7%(64/270);(3)羔羊出生重平均为(3.8±0.86)kg,最重达7.2kg。以上结果表明,每头次波尔山羊经过超数排卵、胚胎移植,平均可产6.68(344/50)头羔羊,若1年内1头波尔羊重复2次可获得13.4头羊羔,与常规育种相比极大地提高了纯种波尔山羊的繁殖速度。 展开更多

关键词 波尔山羊 胚胎移植 超数排卵 同步发情 快繁技术

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乙肝病毒核心抗原DNA疫苗诱导小鼠抗原特异性CD8^+T细胞动态变化和动态分布

7

作者 张炜 董生福 +3 位作者 孙淑惠 汪垣 李光地 瞿涤 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期379-383,共5页

目的 :研究乙肝病毒核心抗原 (HBcAg)DNA疫苗诱导的细胞免疫应答。方法 :用表达乙肝病毒核心抗原N端1 4 4个氨基酸的重组质粒DNA(简称pHBc1 4 4 ) 1 0 0 μg免疫C5 7BL 6小鼠 ,用细胞内细胞因子染色技术检测小鼠体内抗原特异性CD8+ T细... 目的 :研究乙肝病毒核心抗原 (HBcAg)DNA疫苗诱导的细胞免疫应答。方法 :用表达乙肝病毒核心抗原N端1 4 4个氨基酸的重组质粒DNA(简称pHBc1 4 4 ) 1 0 0 μg免疫C5 7BL 6小鼠 ,用细胞内细胞因子染色技术检测小鼠体内抗原特异性CD8+ T细胞的动态变化。结果 :pHBc1 4 4免疫后抗原特异性CD8+ T细胞逐渐增多 ,在初次免疫的第 1 4天出现第一个免疫应答高峰 ,此后抗原特异性CD8+ T细胞数量逐渐下降进入免疫记忆期并在 1年内维持在稳定水平。加强免疫后在第 1 0天抗原特异性CD8+ T细胞数量达到高峰 ,约是初次免疫应答高峰的 2倍 ,此后抗原特异性CD8+ T细胞数量逐渐下降 ,但下降的速度比初次免疫应答减缓。结论 :pHBc1 4 展开更多

关键词 乙肝病毒核心抗原 DNA疫苗

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重组腺病毒介导的hTGF-β_1基因增加兔髓核组织蛋白多糖合成的研究 被引量：1

8

作者 肖剑 贾连顺 +5 位作者 潘欣 程岚 王琪 顾一骅 吴海山 戚中田 《中华外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期392-393,共2页

关键词 重组腺病毒介导 hTGF-β1基因 兔 髓核组织 蛋白多糖 基因转染 转化生长因子Β1

原文传递

日本血吸虫保护性单克隆抗体SSj14识别模拟表位的筛选及其免疫原性分析

9

作者 傅志强 蔡学忠 +5 位作者 刘金明 石耀军 李浩 吴祥甫 蔡幼民 林矫矫 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期645-649,共5页

为分析日本血吸虫保护性单抗SSj14的模拟表位,观察其免疫保护作用,利用SSj14单抗筛选富集噬菌体的随机六肽库,应用免疫印迹法确定阳性克隆并分析其核苷酸序列,采用竞争ELISA法分析阳性克隆的抗原性,用筛选的阳性噬菌体克隆免疫小鼠进行... 为分析日本血吸虫保护性单抗SSj14的模拟表位,观察其免疫保护作用,利用SSj14单抗筛选富集噬菌体的随机六肽库,应用免疫印迹法确定阳性克隆并分析其核苷酸序列,采用竞争ELISA法分析阳性克隆的抗原性,用筛选的阳性噬菌体克隆免疫小鼠进行日本血吸虫病免疫保护试验,计算减虫效果,并用ELISA法检测小鼠免疫前后的特异性抗体水平。结果显示,经3轮富集筛选后,免疫印迹法鉴定到4个阳性克隆,它们对SSj14单抗的抑制率分别为20.0%、40.8%、58.6%、61.5%,并分别在小鼠中诱导了7.42%、9.43%、11.74%、22.30%的减虫率。用噬菌体克隆免疫的小鼠均产生了较高水平的特异性抗体。结果表明,筛选到的阳性噬菌体克隆和SSj14单抗有较高的亲和力,并诱导了抗小鼠日本血吸虫的部分保护效果。 展开更多

关键词 日本血吸虫 噬菌体展示 SSj14单抗 模拟表位

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Th1/Th2极化:实验性自身免疫性葡萄膜炎 被引量：8

10

作者 王燕平 李晓玉 孙兵 《上海免疫学杂志》 CSCD 北大核心 2001年第6期382-384,共3页

辅助性T细胞可以根据其分泌的细胞因子而分为Th1和Th2两种不同的亚群 ,实验性自身免疫性葡萄膜炎 (EAU )是一种Th1细胞亚群介导的自身免疫性疾病模型 ,在EAU的发病机制中 ,Th1主要表现为促进疾病进展 ,而Th2则主要表现为对疾病的负调控。

关键词 T细胞亚群 实验性 自身免疫性葡萄膜炎 TH1 TH2 动物模型

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神经干细胞的基础研究及其对神经系统疾病的治疗前景 被引量：1

11

作者 沈琰 《中华国际医学杂志》 2001年第4期341-343,共3页

关键词 神经系统疾病 治疗 神经干细胞 发育 移植 神经再生

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利用噬菌体随机9肽库筛选寻常型天疱疮抗原模拟表位

12

作者 黄丽群 姚刚 +3 位作者 薛峰 潘萌 孙兵 郑捷 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期683-685,共3页

目的利用噬菌体随机9肽库筛选寻常型天疱疮抗原桥粒芯糖蛋白3（desmoglein，Dsg3）模拟表位，加深对寻常型天疱疮发病机制的认识。方法通过大肠杆菌表达Dsg3的胞外结构域1和2（extracellular domain，EC1-2）和谷胱甘肽转移酶（GST）的... 目的利用噬菌体随机9肽库筛选寻常型天疱疮抗原桥粒芯糖蛋白3（desmoglein，Dsg3）模拟表位，加深对寻常型天疱疮发病机制的认识。方法通过大肠杆菌表达Dsg3的胞外结构域1和2（extracellular domain，EC1-2）和谷胱甘肽转移酶（GST）的融合蛋白，从寻常型天疱疮患者血清中纯化与EC1-2特异结合的多克隆抗体，对噬菌体随机线九肽库和环九肽库进行亲和筛选，阳性噬菌体展示肽经ELISA和竞争性ELISA验证。结果经过两轮亲和筛选，与自身抗体结合的噬菌体明显富集，免疫筛查、验证后得到3个阳性噬菌体展示肽，ELISA检测显示它们与患者血清反应，而不与正常人血清反应，竞争性ELISA检测显示它们可以抑制寻常型天疱疮患者血清与重组蛋白EC1-2的结合。结论利用噬菌体随机9肽库筛选到3个与寻常性天疱疮密切相关的模拟表位。 展开更多

关键词 肽库 天疱疮 桥粒芯糖蛋白质3 表位

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