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小干扰RNA沉默血管内皮生长因子对ACHN肾癌细胞黏附、侵袭及迁移的影响 被引量：5
1
作者 张志强 于德新 +5 位作者 黄韵 方卫华 江山 施浩强 廖贵益 陈磊 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期1947-1949,共3页
目的观察小干扰RNA（siRNA）沉默血管内皮生长因子（VEGF）对ACHN肾细胞癌细胞生物学行为的影响。方法化学合成针对VEGF的小干扰RNA，实验分4组，转染后收集细胞，通过蛋白印迹方法检测VEGF的表达，噻唑蓝（MTY）比色法、细胞黏附实验... 目的观察小干扰RNA（siRNA）沉默血管内皮生长因子（VEGF）对ACHN肾细胞癌细胞生物学行为的影响。方法化学合成针对VEGF的小干扰RNA，实验分4组，转染后收集细胞，通过蛋白印迹方法检测VEGF的表达，噻唑蓝（MTY）比色法、细胞黏附实验、划痕实验及Transwell法测定细胞的增殖、黏附、迁移及侵袭能力。结果siRNA1～2组VEGF表达水平明显低于空白对照组及阴性对照组；在24、48、72h，siRNA1—2的增殖抑制率均高于空白对照组及阴性对照组（P〈0．05），其中以siRNA2组最为显著；与空白对照组比较，siRNA1—2组的细胞黏附数量明显下降[（81．5±3．1）％比（40．54-2．6）％、P〈0．05，（81．5±3．1）％比（22．5±2．4）％、P〈0．05]，其中以siRNA2组最为明显；siRNA1～2组的细胞迁移数量明显下降（162±9比81±5，P〈0．05；162-1-9比38±4，P〈0．05）；siRNA1—2组细胞侵袭能力明显下降（P〈0．05），且siRNA2组的细胞侵袭能力明显低于siRNA1组（P〈0．05）。结论VEGF基因在肾细胞癌细胞黏附、迁移和侵袭中发挥着重要作用；以靶向VEGF的siRNA转染肾细胞癌细胞，可抑制肾细胞癌细胞黏附、迁移和侵袭能力。 展开更多
关键词 RNA干扰 肾细胞癌 血管内皮生长因子 侵袭
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单细胞双重巢式PCR扩增X、Y染色体STS、AMEL同源序列行性连锁遗传病诊断 被引量：1
2
作者 郑圣霞 刘雨生 +6 位作者 陈大蔚 童先宏 吴丽敏 何国平 杨琼 许波 史庆华 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期244-247,共4页
目的在单细胞水平建立一种简便、快速、高准确性的胎儿性连锁遗传疾病诊断方法，为无创性产前诊断性连锁遗传病和植入前遗传学诊断提供一定的理论与方法学依据。方法提取男女单个淋巴细胞各150例，共300个细胞。随机分成3组，每组男女... 目的在单细胞水平建立一种简便、快速、高准确性的胎儿性连锁遗传疾病诊断方法，为无创性产前诊断性连锁遗传病和植入前遗传学诊断提供一定的理论与方法学依据。方法提取男女单个淋巴细胞各150例，共300个细胞。随机分成3组，每组男女细胞各50个，双重巢式PCR技术在单细胞水平同时扩增X-类固醇硫酸脂酶基因（steroid sulfatase gene，STS）／Y-假基因和牙釉质基因（amelogenin gene，AMEL），对照组用单重巢式PCR技术在单细胞水平分别扩增两基因，比较单、双重巢式PCR技术在单细胞水平的扩增率及性别诊断正确率。结果单重巢式PCR扩增男性细胞STS和AMEL的扩增率和性别诊断正确率分别是84％、76％和84％、84％；而双重巢式PCR技术同时扩增上述基因的扩增率和性别诊断正确率分别为98％、96％。后者与前两者相比扩增率和性别诊断正确率均明显提高，差异均有统计学意义（P〈0．05，P〈0．01）。结论在单细胞水平性连锁遗传疾病诊断中，双重巢式PCR技术较单重巢式PCR技术具有较高的扩增率及正确率，并有助于发现等位基因脱扣。该法在无创性单基因伴性遗传病的产前诊断和植入前遗传学诊断中具有较高的实际应用价值。 展开更多
关键词 单细胞 双重巢式PCR X-类固醇硫酸脂酶基因/Y-假基因 牙釉质基因 产前诊断
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槲皮素对人肾癌细胞株细胞增殖、侵袭及其VEGF表达的影响 被引量：9
3
作者 范宗荣 张志强 +5 位作者 于德新 黄韵 方卫华 江山 施浩强 廖贵益 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2012年第8期887-890,共4页
目的研究槲皮素对人肾癌细胞株(ACHN)细胞增殖、侵袭力的影响,并探讨其可能机制。方法体外培养ACHN细胞,加入不同浓度的槲皮素进行处理后,用MTT比色分析法检测细胞增殖抑制率,采用涂有Matrigel胶的Tr-answell小室模型对传代培养的ACHN... 目的研究槲皮素对人肾癌细胞株(ACHN)细胞增殖、侵袭力的影响,并探讨其可能机制。方法体外培养ACHN细胞,加入不同浓度的槲皮素进行处理后,用MTT比色分析法检测细胞增殖抑制率,采用涂有Matrigel胶的Tr-answell小室模型对传代培养的ACHN细胞进行体外侵袭检测,以Western blot法检测ACHN细胞内血管内皮生长因子(VEGF)的表达。结果不同浓度的槲皮素均能抑制ACHN细胞的增殖,并有明显的浓度和时间依赖性(P<0.05);Tr-answell试验结果显示,与空白对照组比较,槲皮素处理组肾癌细胞侵袭能力明显下降;槲皮素处理组VEGF蛋白表达水平均明显低于空白对照组,且呈浓度依赖性。结论槲皮素可明显抑制ACHN细胞的增殖、侵袭力,其机制可能与下调VEGF表达有关。 展开更多
关键词 肾细胞癌 槲皮素 增殖 侵袭 血管内皮生长因子
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卵母细胞发育停滞 被引量：5
4
作者 唐洁 许波 +3 位作者 江小华 陈大蔚 侯贺礼 史庆华 《生殖医学杂志》 CAS 2009年第3期211-214,共4页
大多数哺乳动物的卵原细胞在胎儿期进入减数分裂，如小鼠卵原细胞在妊娠第13．5天，人卵原细胞在胚胎第8周即开始减数分裂。经过减数分裂Ⅰ（MeiosisI，MI）前期的细线期、偶线期和粗线期后，双线期的卵母细胞被颗粒细胞前体细胞包裹，... 大多数哺乳动物的卵原细胞在胎儿期进入减数分裂，如小鼠卵原细胞在妊娠第13．5天，人卵原细胞在胚胎第8周即开始减数分裂。经过减数分裂Ⅰ（MeiosisI，MI）前期的细线期、偶线期和粗线期后，双线期的卵母细胞被颗粒细胞前体细胞包裹，形成原始卵泡。性成熟后，原始卵泡启动生长发育，单层扁平颗粒细胞变成立方形，形成初级卵泡。初级卵泡发育过程中，颗粒细胞通过增殖由一层变成多层， 展开更多
关键词 卵母细胞 减数分裂成熟 生理性停滞 病理性停滞
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免疫荧光染色技术制备人联会复合体的观察
5
作者 段涛 杨庆岭 +1 位作者 王刘 于德新 《中国男科学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期36-38,共3页
目的检测减数分裂前期Ⅰ的人精母细胞联会复合体形态组成和遗传重组特征。方法利用表面铺展技术结合免疫荧光染色，分别标记联会复合体，侧轴、重组位点和着丝粒，电镜观察减数分裂前期Ⅰ各阶段的联会复合体。结果电镜下观察到减数分裂... 目的检测减数分裂前期Ⅰ的人精母细胞联会复合体形态组成和遗传重组特征。方法利用表面铺展技术结合免疫荧光染色，分别标记联会复合体，侧轴、重组位点和着丝粒，电镜观察减数分裂前期Ⅰ各阶段的联会复合体。结果电镜下观察到减数分裂前期Ⅰ的细线期、偶线期和粗线期阶段联会复合体。计算减数分裂前期各阶段细胞的比例。结论表面铺展技术结合免疫荧光染色可以用于人精母细胞联会复合体的制备及观察。 展开更多
关键词 联会复合体 精母细胞 减数分裂
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人精母细胞减数分裂重组异常对非梗阻性无精子症患者病理结果影响的初步研究
6
作者 赵连明 姜辉 +5 位作者 洪锴 陆敏 唐文豪 毛加明 杨庆岭 马潞林 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 2013年第5期425-428,共4页
目的:初步探讨人精母细胞减数分裂重组异常对非梗阻性无精子症患者病理结果的影响。方法:6例非梗阻性无精子症患者,经过睾丸穿刺活检取得睾丸组织。每例患者的睾丸组织1式2份,1份用于病理检查,另1份用于免疫荧光染色,观察联会复合体的情... 目的:初步探讨人精母细胞减数分裂重组异常对非梗阻性无精子症患者病理结果的影响。方法:6例非梗阻性无精子症患者,经过睾丸穿刺活检取得睾丸组织。每例患者的睾丸组织1式2份,1份用于病理检查,另1份用于免疫荧光染色,观察联会复合体的情况,同源染色体上重组位点的数目。寻找重组异常与病理结果之间的关系。结果:6例非梗阻性无精子症患者的病理结果显示:3例患者生精小管基底膜增厚,3例患者生精小管基底膜萎缩。生精小管萎缩的3例患者每个细胞常染色体上存在MLH1,数量范围是30～50个,而生精小管基底膜增厚的3例患者每个细胞常染色体上存在MLH1,数量范围是10～50个。结论:同源染色体重组频率波动范围的增大可能是导致患者生精小管基底膜增厚乃至管腔闭塞的原因之一。 展开更多
关键词 无精子症 病理 重组 减数分裂
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