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赭曲霉毒素A免疫学检测方法的研究 被引量：21
1
作者 江涛 李凤琴 +5 位作者 王环宇 田静 高秀芬 宫慧之 王玉平 计融 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期556-558,共3页
目的　建立敏感、特异和快速针对赭曲霉毒素A的酶联免疫吸附试验检测方法 ,研制具有我国自主知识产权的快速检测试剂盒。方法　利用B细胞杂交瘤技术 ,建立能够分泌抗赭曲霉毒素A单克隆抗体的杂交瘤细胞株 ,并获得抗赭曲霉毒素A单克隆抗... 目的　建立敏感、特异和快速针对赭曲霉毒素A的酶联免疫吸附试验检测方法 ,研制具有我国自主知识产权的快速检测试剂盒。方法　利用B细胞杂交瘤技术 ,建立能够分泌抗赭曲霉毒素A单克隆抗体的杂交瘤细胞株 ,并获得抗赭曲霉毒素A单克隆抗体。结果　建立赭曲霉毒素A的间接竞争抑制性酶联免疫吸附试验测定方法(ELISA)。该方法的最低检出浓度为 0 5ng/ml,线性范围 2～ 5 0 0ng/ml,线性方程Y =0 2 72X +1 0 7(r =0 9978)。方法的加标回收率为 79 0 %～ 119 7%。利用该方法对北京市售的大米、小麦样品进行检测。结果表明 ,小麦样品的污染率为 6 0 71% ,最大值为 8 2 6 μg/kg ;大米样品的污染率为 17 86 % ,最大值为 3 4 4 μg/kg。结论　该方法简单、快速、灵敏 。 展开更多
关键词 赭曲霉毒素A 酶联免疫吸附试验 单克隆抗体
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抗黄曲霉毒素M_1抗体制备及检测方法建立 被引量：12
2
作者 江涛 俞琼 +4 位作者 李敏 柳桢 郑佳 黄飚 计融 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期43-45,共3页
目的制备针对黄曲霉毒素M1的单克隆抗体并建立针对黄曲霉毒素M1的间接竞争酶联免疫吸附试验检测方法。方法利用B细胞杂交瘤技术。建立能分泌抗黄曲霉毒素M1单克隆抗体的杂交瘤细胞株，制备抗黄曲霉毒素M1单克隆抗体，建立间接竞争酶联... 目的制备针对黄曲霉毒素M1的单克隆抗体并建立针对黄曲霉毒素M1的间接竞争酶联免疫吸附试验检测方法。方法利用B细胞杂交瘤技术。建立能分泌抗黄曲霉毒素M1单克隆抗体的杂交瘤细胞株，制备抗黄曲霉毒素M1单克隆抗体，建立间接竞争酶联免疫吸附试验检测方法。结果研制出1株能特异性分泌抗黄曲霉毒素M1单克隆抗体的杂交瘤细胞株，命名为2F2。该单克隆抗体的Ig亚类为IgG1，亲和常数为2．8×10^-11mol／L。该抗体与黄曲霉毒素B1、黄曲霉毒素B2、黄曲霉毒素G1、黄曲霉毒素G2和黄曲霉毒素M2等结构类似物有微弱的交叉反应，具有较高的特异性。在此基础上建立了间接竞争酶联免疫吸附试验检测方法。该方法的最低检出浓度为0．07ng／ml。校正曲线的线性范围为0．02～2ng／ml，线性方程y=-0．4364x＋0．2693（R^2=0．9949）。方法的加标回收率为72．5％～131．3％。结论制备了具有高特异性和亲和力的抗黄曲霉毒素M1单克隆抗体，并建立了快速、灵敏的针对黄曲霉毒素M1的酶联免疫吸附试验检测方法。 展开更多
关键词 黄曲霉毒素M1 单克隆抗体 酶联免疫吸附试验
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抗总黄曲霉毒素单克隆抗体2G2 F(ab′)_2片段的特性 被引量：2
3
作者 柳桢 计融 +1 位作者 江涛 崔留欣 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2007年第1期26-29,共4页
目的:研究经无花果蛋白酶酶切后所得的抗总黄曲霉毒素单抗2G2F(ab′)2片段的特性,为研制开发特异性、灵敏度较高的黄曲霉毒素B1抗独特型单克隆、多克隆抗体提供科学依据。方法:在制备出抗总黄曲霉毒素单克隆抗体2G2株及其2G2F(ab′)2片... 目的:研究经无花果蛋白酶酶切后所得的抗总黄曲霉毒素单抗2G2F(ab′)2片段的特性,为研制开发特异性、灵敏度较高的黄曲霉毒素B1抗独特型单克隆、多克隆抗体提供科学依据。方法:在制备出抗总黄曲霉毒素单克隆抗体2G2株及其2G2F(ab′)2片段的基础上,采用非还原SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(非还原SDS-PAGE)和酶联免疫吸附法(ELISA)对单抗2G2及其F(ab′)2片段的特性进行研究并加以比较。结果:单抗2G2F(ab′)2片段和单抗2G2的相对分子质量分别为105000和180000。单抗2G2F(ab′)2片段和单抗2G2的比效价分别为3.33和1.25。单抗2G2F(ab′)2片段的最低检出限和达到50%竞争抑制率时的检出限分别为0.17μg/L和0.67μg/L,单抗2G2的分别为0.47μg/L和1.92μg/L。单抗2G2F(ab′)2片段的亲和力常数为2.95×10-9mol/L,单抗2G2的亲和力常数为1.52×10-10mol/L。结论:单抗2G2F(ab′)2片段灵敏度优于完整抗体,可利用其生产特异性和灵敏度较高的黄曲霉毒素B1抗独特型多克隆和单克隆抗体。 展开更多
关键词 黄曲霉毒素 单克隆抗体 (ab′)2
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