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移植PEDF-hUCMSCs在治疗大鼠视网膜色素变性的作用
被引量:
2
1
作者
闻慧
闫晓河
+2 位作者
朱远飞
旷龙昊
阿洛丹
《国际眼科杂志》
CAS
北大核心
2018年第8期1374-1380,共7页
目的:探讨移植色素上皮衍生因子(pigment epithelialderived factor,PEDF)蛋白修饰人脐带来源间充质干细胞(human umbilical cord-derived mesenchymal stem cells,hUCMSCs)在治疗大鼠视网膜色素变性的作用。方法:分离和培养hUCMSCs,以P...
目的:探讨移植色素上皮衍生因子(pigment epithelialderived factor,PEDF)蛋白修饰人脐带来源间充质干细胞(human umbilical cord-derived mesenchymal stem cells,hUCMSCs)在治疗大鼠视网膜色素变性的作用。方法:分离和培养hUCMSCs,以PEDF重组慢病毒转染hUCMSCs。实验RCS大鼠(royal college of surgeon rat,RCS)随机分为3组干预,每组8只。实验组视网膜下腔注射PEDF-hUCMSCs;hUCMSCs对照组注射等量hUCMSCs,PBS对照组注射等量PBS。注射后4、8wk观察视网膜电图(electroretinogram,ERG),检测视网膜外核层厚度,观察绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)了解细胞的存活情况,通过视网膜切片免疫荧光染色观察其在体吞噬功能,通过MERTK蛋白的表达检测重建吞噬能力来评价疗效。结果:携带PEDF基因的重组慢病毒载体,能高效感染hUCMSCs,感染后的hUCMSCs进行传代培养,慢病毒可延长目的基因在细胞内的表达。移植后8wk视功能上ERG中b波幅值实验组明显高于对照组,移植后4、8wk形态学上视网膜外核层(outer nuclear layer,ONL)厚度实验组均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。移植后4、8wk时GFP染色发现转染PEDF慢病毒的hUCMSCs细胞均能在视网膜下腔存活,视网膜切片行免疫荧光染色显示移植的PEDF-hUCMSCs对感光细胞脱落的外节碎片有吞噬作用。移植后4、8wk时MERTK蛋白的表达检测实验组蛋白条带灰度值明显高于对照组,提示实验组中MERTK蛋白表达也明显增加,RPE重建吞噬能力提高。结论:移植PEDF蛋白修饰hUCMSCs对RCS大鼠视网膜有保护作用。
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关键词
色素上皮衍生因子
慢病毒载体
人脐带间充质干细胞
视网膜色素变性
下载PDF
职称材料
题名
移植PEDF-hUCMSCs在治疗大鼠视网膜色素变性的作用
被引量:
2
1
作者
闻慧
闫晓河
朱远飞
旷龙昊
阿洛丹
机构
中国
广东省
深圳市
眼科医院
眼底病
区
深圳
眼科学
重点
实验室
深圳市
眼外伤
治疗
与
干细胞
定向
分化
公共服务
平台
暨南大学
附属
深圳
眼科医院
西南
大学
生命
科学
学院
出处
《国际眼科杂志》
CAS
北大核心
2018年第8期1374-1380,共7页
基金
深圳市未来产业专项资金技术开发项目(No.CXZZ20140905095554702)~~
文摘
目的:探讨移植色素上皮衍生因子(pigment epithelialderived factor,PEDF)蛋白修饰人脐带来源间充质干细胞(human umbilical cord-derived mesenchymal stem cells,hUCMSCs)在治疗大鼠视网膜色素变性的作用。方法:分离和培养hUCMSCs,以PEDF重组慢病毒转染hUCMSCs。实验RCS大鼠(royal college of surgeon rat,RCS)随机分为3组干预,每组8只。实验组视网膜下腔注射PEDF-hUCMSCs;hUCMSCs对照组注射等量hUCMSCs,PBS对照组注射等量PBS。注射后4、8wk观察视网膜电图(electroretinogram,ERG),检测视网膜外核层厚度,观察绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)了解细胞的存活情况,通过视网膜切片免疫荧光染色观察其在体吞噬功能,通过MERTK蛋白的表达检测重建吞噬能力来评价疗效。结果:携带PEDF基因的重组慢病毒载体,能高效感染hUCMSCs,感染后的hUCMSCs进行传代培养,慢病毒可延长目的基因在细胞内的表达。移植后8wk视功能上ERG中b波幅值实验组明显高于对照组,移植后4、8wk形态学上视网膜外核层(outer nuclear layer,ONL)厚度实验组均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。移植后4、8wk时GFP染色发现转染PEDF慢病毒的hUCMSCs细胞均能在视网膜下腔存活,视网膜切片行免疫荧光染色显示移植的PEDF-hUCMSCs对感光细胞脱落的外节碎片有吞噬作用。移植后4、8wk时MERTK蛋白的表达检测实验组蛋白条带灰度值明显高于对照组,提示实验组中MERTK蛋白表达也明显增加,RPE重建吞噬能力提高。结论:移植PEDF蛋白修饰hUCMSCs对RCS大鼠视网膜有保护作用。
关键词
色素上皮衍生因子
慢病毒载体
人脐带间充质干细胞
视网膜色素变性
Keywords
pigment epithelium - derived factor
lentiviral vector
human umbilical cord mesenchymal stem cells
retinitis pigmentosa
分类号
R779.6 [医药卫生—眼科]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
移植PEDF-hUCMSCs在治疗大鼠视网膜色素变性的作用
闻慧
闫晓河
朱远飞
旷龙昊
阿洛丹
《国际眼科杂志》
CAS
北大核心
2018
2
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