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排溢法ELISA,一种改进的二步法标记免疫实验技术 被引量：2
1
作者 李方和 张春燕 +2 位作者 李佩珊 李时君 陈妍 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期1110-1113,共4页
目的:建立一种简便的血清HBsAg检测二步法标记免疫试验。方法:在既往G6ELISA的基础上建立血清HB-sAg检测排溢法ELISA,采用系列稀释实验对方的相对显色强度,敏感性,及其对Hooks效应的拮抗能力进行考核,将其用于对一组临床标本的检测,并... 目的:建立一种简便的血清HBsAg检测二步法标记免疫试验。方法:在既往G6ELISA的基础上建立血清HB-sAg检测排溢法ELISA,采用系列稀释实验对方的相对显色强度,敏感性,及其对Hooks效应的拮抗能力进行考核,将其用于对一组临床标本的检测,并与经典二步法及一步法ELISA进行比较。结果:在大致相同的实验条件下排溢法,二步法及一步法ELISA三者实验信号的强度大致相当;其敏感性分别为19.2、12.6及14.5pg/ml。当被检标本HBsAg浓度在37.5μg/ml时一步法ELISA开始显现Hooks效应,至2400μg/ml时测值已接近阈值;而排溢法及经典二步法ELISA两者对Hooks效应则表现出相似的拮抗。对231例临床标本进行检测,112例高滴度阳性标本(经稀释实验证实)中出现中重度Hooks效应者一步法ELISA17例,占15.2%,而排溢法及其二步法ELISA则未见Hooks效应的影响。结论:在保证实验结果的前提下,排溢法ELISA在操作程度简化上与一步法相当,但可完全克服Hooks现象的干扰。 展开更多
关键词 标记免疫检测技术 ELISA 一步法ELISA HBSAG Hooks效应
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呼吸道合胞病毒疫苗及疫苗研究和开发新方法
2
作者 杨爽(综述) 方志正(审校) 《国际生物制品学杂志》 CAS 2010年第4期195-200,共6页
呼吸道合胞病毒（respiratory syncytial virus,RSV）是造成婴幼儿、老年人、免疫抑制者等免疫功能低下的人群呼吸道感染的最常见原因之一.RSV是一种单股负链RNA病毒,研究和开发RSV疫苗已有40多年的历史.最初儿童接种福尔马林灭活疫苗... 呼吸道合胞病毒（respiratory syncytial virus,RSV）是造成婴幼儿、老年人、免疫抑制者等免疫功能低下的人群呼吸道感染的最常见原因之一.RSV是一种单股负链RNA病毒,研究和开发RSV疫苗已有40多年的历史.最初儿童接种福尔马林灭活疫苗后再次感染RSV会出现病情加重的情况;减毒活疫苗在遗传稳定性上存在问题;以纯化的F蛋白和G蛋白研制的部分亚单位疫苗已进入临床试验阶段,尚存在一些需要解决的问题.某些DNA疫苗在动物模型上表现出良好的免疫原性,但由于生物安全的问题,DNA疫苗的应用前景尚不清楚.目前应用反向遗传学技术研制新的BSV疫苗已显示良好的应用前景. 展开更多
关键词 呼吸道合胞病毒 疫苗 反向遗传学
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系统生物学在生物制品宿主细胞蛋白检测中的应用
3
作者 杜洪桥(综述) 严家新(审校) 《国际生物制品学杂志》 CAS 2010年第5期260-263,共4页
新版《中国药典》对生物制品的质量要求更高，其中对生物制品宿主细胞蛋白（host cell protein，HCP）残留量的限制也更严格。新兴的系统生物学（包括蛋白质组学、基因组学和生物信息学）已在HCP的研究中获得了广泛应用。此文综述系统... 新版《中国药典》对生物制品的质量要求更高，其中对生物制品宿主细胞蛋白（host cell protein，HCP）残留量的限制也更严格。新兴的系统生物学（包括蛋白质组学、基因组学和生物信息学）已在HCP的研究中获得了广泛应用。此文综述系统生物学在生物制品HCP鉴定和评估中的应用。 展开更多
关键词 蛋白质组学 基因组学 生物信息学 宿主细胞蛋白
原文传递
ELISA差减分析--一种简便实用的免疫逃逸变异HBsAg检测新方法 被引量：1
4
作者 李方和 李佩珊 +4 位作者 刘静华 彭静 张春燕 黄永国 陈妍 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期642-645,654,共5页
目的:立足现有实验技术与试剂,建立一项血清免疫逃逸变异HBsAg检测的新方法。方法:以市售ELISA试剂筛选其检测信号在灰区范围的HBV感染者;采用2种不同免疫逃逸变异HBsAg检测能力的ELISA试剂对选留血清进行检测,以"ELISA差减分析&qu... 目的:立足现有实验技术与试剂,建立一项血清免疫逃逸变异HBsAg检测的新方法。方法:以市售ELISA试剂筛选其检测信号在灰区范围的HBV感染者;采用2种不同免疫逃逸变异HBsAg检测能力的ELISA试剂对选留血清进行检测,以"ELISA差减分析"方式确认免疫逃逸变异HBsAg阳性者;以中和实验及雅培化学发光试剂验证检测结果的特异性;并对部分免疫逃逸变异HBsAg阳性者以PCR及直接测序做HBV DNA分析。结果:自10231例受检者中筛选HBsAgELISA检测信号灰区标本244例;复核检测显示G6ELISA、市售ELISA两者对野生HBsAg检测敏感性分别为0.0625ng/ml,与0.125ng/ml;检测阳性率分别为16.80%(G6ELISA)及5.73%(市售ELISA)。ELISA差减分析确定免疫逃逸变异HBsAg阳性者27例,阳性率为11.07%。对部分免疫逃逸变异HBsAg阳性血清做进一步考核,抗HBs中和强度为(84.07%±6.32%),中和率100%(13/13);雅培化学发光试剂复核阳性率为94.4%(17/18,阳性者中包括两份单项G6-ELISA检测最低阳性信号标本);HBV DNA阳性率36.9%(7/19),略低于同期HBsAg低信号阳性者(6/14,42.9%,P<0.05);直接测序发现其中"a"区变异3例,分别为P142L、T126A及M133T/K160T;S蛋白亲水区非"a"决定簇变异1例,变异类型为L109Q。结论:ELISA差减分析法能有效地用于部分免疫逃逸变异HBsAg的临床诊断,其诊断能力视所依托试剂免疫逃逸变异检测能力不同而有显著差别。 展开更多
关键词 乙肝病毒 基因变异 HBSAG 免疫逃逸变异 ELISA
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