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展示KDR胞外区VEGF结合域的T4噬菌体对肺癌细胞增殖侵袭的抑制作用
1
作者 李嵚 何琳 +2 位作者 惠林萍 赵晨阳 于涛 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期14-20,共7页
目的:构建展示KDR的T4噬菌体并在细胞水平上检测其抑制肿瘤细胞增殖侵袭的作用及机制。方法:利用SOE-PCR的方法将KDR膜外区D2和D3与T4噬菌体小衣壳蛋白SOC基因融合并克隆到pET28b表达载体中,经IPTG诱导表达并纯化后,利用体外展示技术将... 目的:构建展示KDR的T4噬菌体并在细胞水平上检测其抑制肿瘤细胞增殖侵袭的作用及机制。方法:利用SOE-PCR的方法将KDR膜外区D2和D3与T4噬菌体小衣壳蛋白SOC基因融合并克隆到pET28b表达载体中,经IPTG诱导表达并纯化后,利用体外展示技术将重组KDR-SOC蛋白展示在T4噬菌体表面,得到T4-KDR噬菌体。MTT法检测T4-KDR噬菌体对肺癌A549细胞的增殖抑制作用,并采用Transwell法检测其对VEGF促侵袭作用的影响。RT-PCR法检测T4-KDR对MMP-2和MMP-9 mRNA水平的影响,并通过Western blot方法检测其对VEGF诱导ERK1/2磷酸化及其下游CyclinD1,p27,Bcl-2和Bax表达水平的影响。结果:KDR-SOC在大肠杆菌中稳定表达,展示KDR的T4-KDR噬菌体具有结合VEGF-165的能力,并显著抑制肿瘤细胞增殖和侵袭活性,降低MMP-2和MMP-9基因mRNA水平。Western blot结果表明T4-KDR噬菌体抑制VEGF诱导ERK1/2的磷酸化,降低CyclinD1及Bcl-2表达的同时,提高p27和Bax的表达。结论:展示KDR的T4噬菌体具有抑制肺癌细胞增殖和侵袭作用,其对MEK/ERK信号通路及其下游调控因子的影响是其作用的重要分子机制。 展开更多
关键词 T4噬菌体 增殖 侵袭 血管内皮生长因子受体-2 肺癌
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PCR技术检测食品中金黄色葡萄球菌肠毒素B基因 被引量：19
2
作者 邱阳 王刚 卢行安 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2004年第2期115-116,共2页
目的 :金黄色葡萄球菌B型肠毒素是污染食品引起食物中毒的主要原因之一 ,针对进出口食品卫生监测的需要 ,研究一种简便、快速、准确的实验方法。方法 :利用聚合酶链反应技术 (PCR)采用特异的模板探针引物进行杂交 ,最后通过电泳技术与... 目的 :金黄色葡萄球菌B型肠毒素是污染食品引起食物中毒的主要原因之一 ,针对进出口食品卫生监测的需要 ,研究一种简便、快速、准确的实验方法。方法 :利用聚合酶链反应技术 (PCR)采用特异的模板探针引物进行杂交 ,最后通过电泳技术与阳性对照进行比对 ,来判断阴阳性结果。结果 :本方法检出率高 ,每克样品中有 4个金黄色葡萄球菌即可检出 ,2 4小时即可报告结果。结论 :PCR方法检测食品中金黄色葡萄球菌肠毒素B基因快速、准确 ,检测周期短 ,既可提高检出率 ,又可节省检测时间。 展开更多
关键词 PCR技术 食品 金黄色葡萄球菌 肠毒素B 基因 食物中毒
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反义Bmi-1对Jurkat细胞的抑制作用 被引量：19
3
作者 刘卫红 孟秀香 +2 位作者 刘丹丹 单路娟 赵心宇 《中华血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第9期554-556,共3页
目的观察反义Bmi-1表达质粒在体外对T淋巴细胞白血病Jurkat细胞的生长抑制作用。方法选择Bmi-1基因起始密码子及与锌指结构对应的171bp核苷酸片段,反向连接于pLNCX2质粒上,得到反义Bmi-1表达质粒;通过脂质体转染将质粒导入Jurkat细胞中,... 目的观察反义Bmi-1表达质粒在体外对T淋巴细胞白血病Jurkat细胞的生长抑制作用。方法选择Bmi-1基因起始密码子及与锌指结构对应的171bp核苷酸片段,反向连接于pLNCX2质粒上,得到反义Bmi-1表达质粒;通过脂质体转染将质粒导入Jurkat细胞中,以G418进行筛选得到阳性克隆;以MTT法和体外集落形成实验检测反义Bmi-1表达质粒对Jurkat细胞增殖的抑制作用;用流式细胞术分析细胞周期;采用免疫荧光组化法检测反义Bmi-1对Jurkat细胞P16蛋白的上调作用。结果转染反义Bmi-1表达质粒组与对照组(空白对照及空质粒组)相比较,生长速度明显变慢,克隆形成能力明显下降,空白对照组Jurkat细胞集落数为(90.70±9.07)/103细胞,空质粒组Jurkat细胞集落数为(83.30±6.11)/103细胞,转染反义质粒组Jurkat细胞集落数为(56.00±5.56)/103细胞(P<0.01);P16蛋白表达也明显增强。结论反义Bmi-1对Jurkat细胞的体外生长具有明显的抑制作用,并上调了P16蛋白的表达。 展开更多
关键词 细胞系 Jurkat 寡核苷酸 反义 基因 Bmi-1 JURKAT细胞 生长抑制作用 转染反义 P16蛋白表达 T淋巴细胞白血病 体外集落形成 t细胞集落
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不同浓度碘对体外培养的人甲状腺细胞HLA-DR、CD_(40)、B7.1及Fas表达的影响 被引量：6
4
作者 李玉姝 单忠艳 +5 位作者 滕卫平 李静 郭晓临 王立娥 都姝妍 范晨玲 《中华内分泌代谢杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期474-477,共4页
目的　通过研究碘对正常人甲状腺细胞表面免疫相关抗原表达的影响 ,以期在靶细胞水平探讨碘在自身免疫性甲状腺疾病 (AITD)发生发展中的作用机制。方法　传代培养的正常人甲状腺细胞 ,单独以碘化钾刺激或与细胞因子干扰素 (IFN)γ、IFN... 目的　通过研究碘对正常人甲状腺细胞表面免疫相关抗原表达的影响 ,以期在靶细胞水平探讨碘在自身免疫性甲状腺疾病 (AITD)发生发展中的作用机制。方法　传代培养的正常人甲状腺细胞 ,单独以碘化钾刺激或与细胞因子干扰素 (IFN)γ、IFN α共同作用后 ,分析甲状腺细胞表面HLA DR抗原、粘附分子CD4 0 和B7.1分子 (CD80 )及Fas抗原的表达变化。结果　IFN γ能诱导正常人甲状腺细胞表达HLA DR ,碘不影响IFN γ的诱导作用 ;正常人甲状腺细胞表达CD4 0 分子 ,IFN γ能明显促进其表达 ,碘能够协同IFN γ的刺激作用 (P <0 .0 5 ) ;IFN α能刺激甲状腺细胞B7.1的表达 ;碘有增加IFN α诱导的甲状腺细胞B7.1表达的趋势 ;正常人甲状腺细胞表达Fas抗原 ,IFN γ能增强其表达 ,碘不影响甲状腺细胞表面Fas的表达。结论　碘可能通过细胞因子等的作用刺激甲状腺细胞CD4 0 和B7.1的表达 。 展开更多
关键词 自身免疫性甲状腺疾病 碘 体外培养 甲状腺细胞 HLA-DR CD40 B7.1 Fas
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应用二维电泳和质谱技术鉴定乳腺癌相关蛋白 被引量：5
5
作者 蔡鑫泽 乔莹 +3 位作者 陈洋 于爽 李丰 姜奕 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期23-27,共5页
目的通过比较人乳腺癌细胞MCF7和乳腺上皮细胞MCF10A的差异表达蛋白,以发现可能用于早期诊断的乳腺癌肿瘤标志物。方法体外培养人乳腺癌细胞MCF7和乳腺上皮细胞MCF10A,提取细胞总蛋白,进行二维凝胶电泳并比较分析,选择在乳腺癌细胞MCF7... 目的通过比较人乳腺癌细胞MCF7和乳腺上皮细胞MCF10A的差异表达蛋白,以发现可能用于早期诊断的乳腺癌肿瘤标志物。方法体外培养人乳腺癌细胞MCF7和乳腺上皮细胞MCF10A,提取细胞总蛋白,进行二维凝胶电泳并比较分析,选择在乳腺癌细胞MCF7中明显差异表达的蛋白点,进行质谱和生物信息学分析。结果建立了MCF7和MCF10A两种细胞系的二维凝胶电泳图谱,平均蛋白质点数分别为(960±44)和(1 128±29);对选择的35个差异表达蛋白质点进行质谱和生物信息学分析,鉴定了其中16个点,包括过氧化氢酶-6(PRDX6)、磷酸甘油酸激酶-1(PGK1)、60 kD热休克蛋白(CH60)、谷氨酰胺转移酶-2(TGM2)等。结论乳腺癌细胞MCF7相对于乳腺上皮细胞MCF10A的差异表达蛋白可能作为乳腺癌早期诊断和预后评价的候选肿瘤标志物。 展开更多
关键词 蛋白质组学 乳腺癌 肿瘤标志物 二维凝胶电泳
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儿童血脂水平及其危险因素分析 被引量：7
6
作者 赵淑英 董建民 +1 位作者 胡平成 王智纯 《中国公共卫生学报》 1992年第6期334-336,共3页
我们测定了530名儿童的血脂浓度并对与其有关的17种危险因素进行了逐步回归分析。结果表明,TG、Tch 均与儿童的年龄、性别、家族疾病史有密切关系,TG 和 Tch 还分别受儿童皮脂厚度及收缩压的影响;HDL-ch 受偏食肉类食物的影响较大。若... 我们测定了530名儿童的血脂浓度并对与其有关的17种危险因素进行了逐步回归分析。结果表明,TG、Tch 均与儿童的年龄、性别、家族疾病史有密切关系,TG 和 Tch 还分别受儿童皮脂厚度及收缩压的影响;HDL-ch 受偏食肉类食物的影响较大。若在儿童期对以上各因素适当的人为干预,可减少成人时心血管疾病的发生。 展开更多
关键词 血脂水平 危险因素 儿童少年卫生
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不同年龄组阴道炎患者阴道分泌物检查结果分析 被引量：6
7
作者 张婵 刘越坚 杨丽红 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2011年第9期846-847,共2页
目的对比分析不同年龄组女性阴道炎患者阴道清洁度和霉菌、滴虫、纤毛菌、线索细胞检出情况。方法对2 295例女性阴道炎患者按照年龄分组进行阴道分泌物涂片染色检查。结果 2 295例中阴道清洁度为Ⅲ～Ⅳ度占66.19%,霉菌、线索细胞、滴虫... 目的对比分析不同年龄组女性阴道炎患者阴道清洁度和霉菌、滴虫、纤毛菌、线索细胞检出情况。方法对2 295例女性阴道炎患者按照年龄分组进行阴道分泌物涂片染色检查。结果 2 295例中阴道清洁度为Ⅲ～Ⅳ度占66.19%,霉菌、线索细胞、滴虫和纤毛菌的检出率分别为25.22%、15.69%、0.74%和0.48%;50岁以上年龄组阴道清洁度Ⅲ度检出率较高;20岁以下年龄组Ⅳ度检出率较高;21～30年龄组霉菌检出率较高,41～50年龄组线索细胞和滴虫检出率较高,纤毛菌检出率在各组之间差异无统计学意义。结论大连地区女性阴道炎患者防治形势不容乐观;与年龄相关的生理原因及个人行为因素导致不同年龄组患者阴道感染病因的差异性。 展开更多
关键词 阴道清洁度 霉菌 线索细胞 滴虫
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晚期氧化蛋白产物通过p38丝裂原活化蛋白激酶通路促进ECV304细胞基质细胞衍生因子1α的表达 被引量：2
8
作者 史春虹 姜一农 +2 位作者 单路娟 魏明丽 路岩 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期761-764,共4页
目的观察晚期氧化蛋白产物对ECV304细胞基质细胞衍生因子1α表达的影响,并探讨其作用机制。方法牛血清白蛋白与次氯酸钠等量混合体外制备晚期氧化蛋白产物,RT-PCR法检测ECV304细胞基质细胞衍生因子1αmRNA的表达,Western Blotting法测... 目的观察晚期氧化蛋白产物对ECV304细胞基质细胞衍生因子1α表达的影响,并探讨其作用机制。方法牛血清白蛋白与次氯酸钠等量混合体外制备晚期氧化蛋白产物,RT-PCR法检测ECV304细胞基质细胞衍生因子1αmRNA的表达,Western Blotting法测定基质细胞衍生因子1α以及磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38MAPK)蛋白水平,以p38MAPK特异性阻断剂SB203580进行阻断实验,酶联免疫吸附法测定上清液中基质细胞衍生因子1α浓度。结果与对照组比较,200μmol/L晚期氧化蛋白产物处理ECV304细胞2h后基质细胞衍生因子1αmRNA及蛋白表达量显著升高(P均<0.05);基质细胞衍生因子1αmRNA表达量6h达高峰(P<0.01),之后逐渐下降,24h时与对照组比较差异无显著性;随时间的推移基质细胞衍生因子1α蛋白表达量逐渐升高,24h表达量最高(P<0.01)。晚期氧化蛋白产物作用15min后p38丝裂原活化蛋白激酶磷酸化水平明显增强(P<0.05),不同浓度(0.1μmol/L、1μmol/L、10μmol/L)SB203580降低了晚期氧化蛋白产物刺激下基质细胞衍生因子1α蛋白的表达(分别为618.85±60.12、500.98±69.47和359.97±59.81,P<0.05或0.01)。结论晚期氧化蛋白产物可诱导ECV304细胞基质细胞衍生因子1α表达,p38MAPK通路是介导这一作用的重要途径之一。 展开更多
关键词 晚期氧化蛋白产物 基质细胞衍生因子1Α ECV304 P38丝裂原活化蛋白激酶
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食管鳞癌Cyclin D1与细胞增殖关系的研究及意义 被引量：2
9
作者 马萍 宋敏 +1 位作者 陈冬 李莉 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2002年第2期139-141,236,共4页
目的　探讨食管鳞癌细胞中细胞周期素D1(CyclinD1)表达与细胞增殖的关系及意义。方法　应用免疫组织化学和流式细胞术检测 48例食管鳞癌组织中CyclinD1蛋白表达及DNA倍体、S期细胞比值、G2 /M期细胞比值。结果　 48例食管鳞癌中CyclinD... 目的　探讨食管鳞癌细胞中细胞周期素D1(CyclinD1)表达与细胞增殖的关系及意义。方法　应用免疫组织化学和流式细胞术检测 48例食管鳞癌组织中CyclinD1蛋白表达及DNA倍体、S期细胞比值、G2 /M期细胞比值。结果　 48例食管鳞癌中CyclinD1阳性表达率为 45 8%(2 2 / 48) ;DNA异倍体检出率为 5 0 %(2 4/ 48) ,CyclinD1阳性表达的标本中DNA异倍体的检出率为 6 8 2 %(15 / 2 2 ) ,显著高于CyclinD1阴性表达的标本 (33 3%,9/ 2 7,P <0 0 5 )。CyclinD1表达阳性的肿瘤中细胞周期G2 /M期的比值也明显高于CyclinD1表达阴性的肿瘤 (分别为 5 98± 4 87和 4 12± 2 70 ,P<0 0 5 )。结论　从观察结果推测CyclinD1的表达可以加速肿瘤细胞增殖。分析食管鳞癌CyclinD1、DNA倍体及不同时相的细胞增殖有助于帮助分析和判断病人的预后。 展开更多
关键词 食管鳞癌 CYCLIND1 细胞增殖 细胞周期素D1 DNA倍体
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端粒酶催化亚基 h-TRT 在胆囊良、恶性病变中的表达及意义 被引量：1
10
作者 王宁 郭仁宣 +2 位作者 宋茂民 傅庆国 陈洋 《中华肝胆外科杂志》 CAS CSCD 2001年第10期615-617,共3页
目的探讨端粒酶的催化亚基 h-TRT(human telomerase reverse transcriptase)在胆囊腺瘤恶变及不同病理分型、临床病理分期的胆囊癌以及胆囊良性病变中的表达及其意义。方法用原位杂交法检测 h-TRT 在胆囊良、恶性病变中的表达及特点。结... 目的探讨端粒酶的催化亚基 h-TRT(human telomerase reverse transcriptase)在胆囊腺瘤恶变及不同病理分型、临床病理分期的胆囊癌以及胆囊良性病变中的表达及其意义。方法用原位杂交法检测 h-TRT 在胆囊良、恶性病变中的表达及特点。结果 h-TRT 在胆囊恶性病变组中总的阳性率为81.3%,在不同组织分型中阳性率为50%～100%,在不同病理分期中阳性率为66.7%～100%;而在良性病变中无表达。h-TRT 在腺瘤恶变,低分化以及晚期胆囊癌中表达较强。结论 h-TRT 的表达与胆囊恶性病变密切相关,其表达与否与性别、年龄、组织分型和病理分期无关。h-TRT 的表达增强与腺瘤恶变,低分化以及晚期胆囊癌有关。h-TRT 可能对胆囊癌的诊断及治疗有一定指导意义。 展开更多
关键词 基因表达 胆囊肿瘤 端粒酶 h-TRT
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肺诺卡菌感染1例报告并文献复习 被引量：2
11
作者 邱阳 王刚 王晶 《中国误诊学杂志》 CAS 2007年第19期4456-4458,共3页
目的:探讨肺诺卡菌感染的临床表现、影像学特点及相关实验室诊断方法,提高对诺卡菌的认识,减少误诊。方法:报告1例肺诺卡菌感染患者的临床资料、影像学特点、实验室检验和治疗情况,并复习相关国内外文献。结果:该病临床无特异性,影像学... 目的:探讨肺诺卡菌感染的临床表现、影像学特点及相关实验室诊断方法,提高对诺卡菌的认识,减少误诊。方法:报告1例肺诺卡菌感染患者的临床资料、影像学特点、实验室检验和治疗情况,并复习相关国内外文献。结果:该病临床无特异性,影像学检查显示双肺多发空洞,结节状及片状高密度阴影,容易误诊,诊断主要依据细菌学检验。结论:诺卡菌病是由诺卡菌引起的一种少见但严重的感染,细菌学检验能提供准确的诊断依据。治疗主要采用复方磺胺甲恶唑,疗效显著。 展开更多
关键词 肺炎 细菌性/诊断/治疗 诺卡尔菌感染/诊断/治疗 误诊 人类 病例报告(文献类型)
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血清学检测在1型糖尿病诊断中的临床意义 被引量：2
12
作者 郭慧淑 蔡春玉 吴泰华 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第16期2524-2526,共3页
目的探讨糖尿病患者血清谷氨酸脱羧酶抗体(GAD-Ab)、胰岛细胞抗体(ICA)和胰岛素自身抗体(IAA)的联合检测在糖尿病分型中的临床意义。方法用ELISA法测定68例1型糖尿病(IDDM)、128例2型糖尿病(NIDDM)患者和50例正常人血清中GAD-Ab、ICA和... 目的探讨糖尿病患者血清谷氨酸脱羧酶抗体(GAD-Ab)、胰岛细胞抗体(ICA)和胰岛素自身抗体(IAA)的联合检测在糖尿病分型中的临床意义。方法用ELISA法测定68例1型糖尿病(IDDM)、128例2型糖尿病(NIDDM)患者和50例正常人血清中GAD-Ab、ICA和IAA。结果1型糖尿病组中GAD-Ab、ICA和IAA的阳性率分别为86.7%、35.2%和23.6%;2型糖尿病组中3种抗体的阳性率分别为9.3%、9.9%和10.8%;正常组中3种抗体均为阴性。1型糖尿病患者的GAD-Ab、ICA和IAA的阳性率都高于2型糖尿病患者(P<0.05)。结论测定GAD-Ab在糖尿病分型中优于ICA和IAA.;3种抗体的联合检测可提高1型糖尿病的检测率,具有重要的临床意义。 展开更多
关键词 糖尿病 血清学检查 谷氨酸脱羧酶抗体
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氟康唑体外诱导白假丝酵母菌耐药基因表达的研究 被引量：2
13
作者 张婵 庄肃军 +1 位作者 杨丽红 刘越坚 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2013年第8期911-913,共3页
目的对白假丝酵母菌耐药机制进行研究。方法将临床分离对氟康唑敏感的白假丝酵母菌种,经体外诱导产生耐药。半定量PCR检测敏感株、耐药株、回复敏感株多药耐药基因CDR1、CDR2、MDR1和转录调控因子TAC1编码基因表达水平的变化,并对TAC1... 目的对白假丝酵母菌耐药机制进行研究。方法将临床分离对氟康唑敏感的白假丝酵母菌种,经体外诱导产生耐药。半定量PCR检测敏感株、耐药株、回复敏感株多药耐药基因CDR1、CDR2、MDR1和转录调控因子TAC1编码基因表达水平的变化,并对TAC1编码基因进行测序。结果与敏感株和回复敏感株比较,耐药株CDR1、CDR2相对表达量增高,发现1株TAC1N977D氨基酸置换。结论氟康唑体外诱导白假丝酵母菌产生耐药的机制与CDR1、CDR2表达相关。TAC1基因突变在诱导耐药中的机制有待进一步研究。 展开更多
关键词 白假丝酵母菌 CDR1 CDR2 TAC1
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晚期氧化蛋白产物通过ERK通路促进ECV304细胞基质细胞衍生因子-1α的表达
14
作者 史春虹 姜一农 +3 位作者 单路娟 路岩 张英 高彦国 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 2013年第2期142-146,共5页
目的:观察晚期氧化蛋白产物(AOPP)对ECV304细胞基质细胞衍生因子1α(SDF-1α)表达的影响,并探讨其作用机制。方法:牛血清白蛋白(BSA)与次氯酸钠等量混合体外制备AOPP-BSA,不同浓度AOPP-BSA作用后以RT-PCR法检测ECV304细胞SDF-1αmRNA的... 目的:观察晚期氧化蛋白产物(AOPP)对ECV304细胞基质细胞衍生因子1α(SDF-1α)表达的影响,并探讨其作用机制。方法:牛血清白蛋白(BSA)与次氯酸钠等量混合体外制备AOPP-BSA,不同浓度AOPP-BSA作用后以RT-PCR法检测ECV304细胞SDF-1αmRNA的表达,Western-blot法测定SDF-1α以及磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK)蛋白水平,阻断实验中先以不同浓度的ERK特异性阻断剂U0126与ECV304孵育1 h,然后与AOPP-BSA共同孵育24 h,酶联免疫吸附法测定上清液中SDF-1α蛋白浓度。结果:AOPP呈浓度依赖性的促进ECV304细胞SDF-1αmRNA表达及蛋白合成增加(P均<0.01),200μmol/LAOPP-BSA作用15 min后ERK1/2磷酸化水平明显增强(P<0.01),阻断ERK1/2通路显著抑制AOPP对ECV304细胞SDF-1α蛋白合成的促进作用(P<0.05)。结论:AOPP可诱导ECV304细胞SDF-1α的表达,ERK1/2通路是介导这一作用的重要途径之一。 展开更多
关键词 晚期氧化蛋白产物 基质细胞衍生因子let ECV304
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肠三叶因子在内毒素致幼鼠肠损伤中的作用及意义 被引量：13
15
作者 李军 许玲芬 +3 位作者 孙梅 李强 高红 姜卫国 《中国当代儿科杂志》 CAS CSCD 2006年第5期425-428,共4页
目的探讨内毒素(LPS)致幼鼠肠损伤中二胺氧化酶(DAO)及肿瘤坏死因子(TNF-α)的变化及基因重组肠三叶因子(rITF)的保护作用,为临床治疗提供实验依据。方法Wistar幼鼠10日龄96只分为3组,A组:生理盐水对照组;B组:LPS组;C组:LPS+rITF组,每... 目的探讨内毒素(LPS)致幼鼠肠损伤中二胺氧化酶(DAO)及肿瘤坏死因子(TNF-α)的变化及基因重组肠三叶因子(rITF)的保护作用,为临床治疗提供实验依据。方法Wistar幼鼠10日龄96只分为3组,A组:生理盐水对照组;B组:LPS组;C组:LPS+rITF组,每组32只。以生理盐水(1mL/kg),EcoliO55:B5(1mL/kg)、rITF(0.1mL/只、配制浓度5g/L)腹腔注射后2,6,24,72h断头处死动物,取动静脉混合血,测血DAO活性。留取肠组织,免疫组化法检测TNF-α蛋白含量,PCR法检测TNF-αmRNA表达。同时作电镜观测肠组织超微结构变化。结果B组血浆DAO活性自LPS作用后2h即开始升高,至6h达到最高值,较A组差异有显著性(1.519±0.13U/Lvs1.081±0.04U/L,P<0.01),72h仍持续高值;C组血浆DAO活性较B组明显下降(P<0.01或P<0.05);与A组6h比较差异有显著性(P<0.01),其余各时间点差异无显著性(P>0.05);B组TNF-α积分光密度含量明显高于A组,以LPS作用后6h达高峰(37247.64±3387.59vs6191.02±482.32,P<0.01),C组TNF-α含量较B组明显降低,但仍高于A组(P<0.01);TNF-αmRNA在A组各时间点有微弱的表达,在B组各时间点表达明显增强,较A组差异显著(P<0.01);而C组各时间点表达明显减少,较B组差异显著(P<0.01或P<0.05)。电镜下肠组织超微结构:A组正常,B组变化明显,C组变化较B组减轻。结论ITF可降低血浆DAO活性,抑制肠组织TNF-αmRNA及蛋白表达,减轻LPS所致幼鼠肠损伤,发挥保护作用。 展开更多
关键词 肠 内毒素 肠三叶因子 二胺氧化酶 肿瘤坏死因子 大鼠
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血小板活化因子受体拮抗剂对幼年大鼠肠黏膜上皮细胞间紧密连接蛋白的影响 被引量：9
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作者 王丽杰 刘春英 +3 位作者 许玲芬 高红 姜卫国 孙梅 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2006年第4期392-397,共6页
目的:探讨血小板活化因子(platelet activating factor,PAF)受体拮抗剂对肠黏膜上皮细胞间紧密连接蛋白ZO-1的影响．方法:18日龄Wistar大鼠,随机分为对照组,内毒素组(LPS组)和PAF受体拮抗剂组(预防组和治疗组)．LPS组和对照组分别腹腔... 目的:探讨血小板活化因子(platelet activating factor,PAF)受体拮抗剂对肠黏膜上皮细胞间紧密连接蛋白ZO-1的影响．方法:18日龄Wistar大鼠,随机分为对照组,内毒素组(LPS组)和PAF受体拮抗剂组(预防组和治疗组)．LPS组和对照组分别腹腔注射内毒素 (5 mg/kg)和生理盐水(1 mL/kg)．预防组和治疗组分别于每一时相点注射LPS前、后30 min 腹腔注射PAF受体拮抗剂BN52021(5 mg/kg)．按时间点分别处死动物,取回肠用于电镜观察,免疫组化及RT-PCR检测ZO-1．结果:电镜下对照组肠微绒毛及细胞间紧密连接未见异常．实验组上皮细胞连接增宽;微绒毛变细、稀疏,部分断裂、脱落;细胞器受损．拮抗剂组改变较实验组减轻．紧密连接蛋白ZO-1正常时均匀一致地分布于小肠上皮细胞连接处的尖端,呈蜂巢状,实验组ZO-1 分布不均,染色变淡．免疫组化平均光密度值及RT-PCR结果可见LPS组ZO-1表达明显低于对照组,6 h表达最低,光密度从对照组 0．224 7降至LPS组0．198 5,ZO-1 mRNA从1．18 降至0．16(P<0．01)．预防组及治疗组变化趋势同LPS组,6 h预防组及治疗组光密度分别为 0．199 2和0．203 8,ZO-1 mRNA分别为0．47和 0．53,与对照组相比均有显著差异(P<0．01)．各时相点ZO-1较LPS组高,预防组较治疗组 ZO-1略低,无统计学差异．结论:PAF可降低肠道紧密连接蛋白ZO-1,从而损害肠道的屏障功能,而PAF受体拮抗剂可减轻肠道屏障功能损伤的程度． 展开更多
关键词 血小板活化因子 受体拮抗剂 屏障 紧密连接 ZO-1
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喉癌组织中Mst1基因表达与喉癌的相关性及其对人Hep2细胞化疗敏感性的影响 被引量：5
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作者 尚超 李巍 +2 位作者 郭艳 富伟能 孙开来 《山东医药》 CAS 北大核心 2010年第27期25-27,共3页
目的探讨Mst1基因在喉癌发生、发展中的作用,并指导化疗用药。方法荧光定量PCR法检测74例喉癌及相应癌旁组织中Mst1 mRNA表达;实验分为实验组、空白对照组和阴性对照组,实验组转染真核表达载体pcDNA3.1-Mst1,空白对照组未转染,阴性对照... 目的探讨Mst1基因在喉癌发生、发展中的作用,并指导化疗用药。方法荧光定量PCR法检测74例喉癌及相应癌旁组织中Mst1 mRNA表达;实验分为实验组、空白对照组和阴性对照组,实验组转染真核表达载体pcDNA3.1-Mst1,空白对照组未转染,阴性对照组转染空载体。Western blot法检测三组Mst1蛋白表达。三组细胞培养基中分别加入0、1、3、5μg/ml顺铂(DDP)进行干预,作用12 h,MTT法测定三组细胞增殖活力,流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果喉癌组织中Mst1 mRNA表达明显低于癌旁组织;实验组Mst1蛋白表达、细胞凋亡率明显高于空白对照组及阴性对照组,细胞增殖活力明显低于空白对照组及阴性对照组;DDP干预后,随DDP浓度增加,实验组细胞凋亡率明显升高,增殖活力明显降低。结论喉癌发生与Mst1 mRNA表达降低相关,Mst1蛋白表达增加能抑制Hep2细胞增殖并促进凋亡,并可在一定程度上增强肿瘤细胞对DDP的敏感性,可将Mst1基因作为指导喉癌化疗用药的参考指标。 展开更多
关键词 哺乳动物绝育20样激酶1 喉肿瘤 喉癌 细胞凋亡
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直肠癌患者血清中白介素-8、TNF-α和T细胞亚群的临床研究 被引量：8
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作者 唐晓军 曹维克 +1 位作者 贾绍昌 陈坚 《临床肿瘤学杂志》 CAS 2010年第7期631-633,共3页
目的探讨直肠癌患者免疫状态及其与肿瘤临床病理特征的关系。方法分别采用流式细胞仪和ELISA双抗夹心法检测43例直肠癌患者血清中单个核细胞CD4、CD8以及白介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量,并与正常人进行对照。结果直肠癌患... 目的探讨直肠癌患者免疫状态及其与肿瘤临床病理特征的关系。方法分别采用流式细胞仪和ELISA双抗夹心法检测43例直肠癌患者血清中单个核细胞CD4、CD8以及白介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量,并与正常人进行对照。结果直肠癌患者外周血T细胞亚群CD4、CD4/CD8明显低于对照组(P<0.01),并且随着Dukes分期的增加而逐渐降低;CD8、IL-8和TNF-α明显高于对照组(P<0.01),并且随着Dukes分期的增加而逐渐升高。结论直肠癌患者存在免疫功能低下,血清中T细胞亚群以及IL-8、TNF-α含量与直肠癌Dukes分期具有相关性。 展开更多
关键词 直肠癌 T细胞亚群 IL-8 TNF-Α
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BCR／ABL融合基因和转录因子FoxO3a在初发和急变慢性粒细胞白血病患者中的表达变化 被引量：7
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作者 穆会君 谢平 +1 位作者 沈云峰 蒋元强 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期190-193,共4页
目的:观察慢性粒细胞白血病(CML)初发和急变患者外周血BCR/ABL融合基因和转录因子FoxO3a的表达变化及其意义。方法:利用EVA Green建立实时荧光RT-PCR检测BCR/ABL、FoxO3a和GAPDH的方法,检测25例CML初发和25例CML急变患者的外周血样本中B... 目的:观察慢性粒细胞白血病(CML)初发和急变患者外周血BCR/ABL融合基因和转录因子FoxO3a的表达变化及其意义。方法:利用EVA Green建立实时荧光RT-PCR检测BCR/ABL、FoxO3a和GAPDH的方法,检测25例CML初发和25例CML急变患者的外周血样本中BCR/ABL融合基因和FoxO3a的表达,以及30例正常人外周血样本中FoxO3a的表达,以GAPDH为内参基因,各组基因表达水平的差异采用△△CT相对定量法。结果:CML急变患者外周血BCR/ABL融合基因的表达水平是初发患者的4.72倍,正常人外周血样本中FoxO3a的表达水平分别是CML初发和急变患者的143.39倍和8.18倍。结论:BCR/ABL融合基因的高表达与转录因子FoxO3a的低表达可能与CML不同阶段的病理过程相关联。 展开更多
关键词 BCR/ABL FOXO3A 慢性粒细胞白血病 融合基因 实时荧光RT-PCR
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血涂片中出现有核红细胞的临床意义 被引量：7
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作者 顾中华 王珏 毛玉文 《江南大学学报（自然科学版）》 CAS 2005年第1期109-110,共2页
目的　观察血涂片中出现有核红细胞的病因及临床意义.方法　新鲜血片经瑞氏.姬姆萨染色,光学显微镜镜检.结果　100例血片中出现有核红细胞的病例分布于 12 种疾病中.结论:观察血片中有核红细胞的形态,对某些疾病的诊断有重要的临床意义.
关键词 血片 有核红细胞 幼稚细胞
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