大肠癌分化、浸润和转移与细胞外基质的关系 被引量：4

1

作者 冯树 宋今丹 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 1997年第2期100-103,共4页

应用SP免疫组化方法观察63例大肠癌细胞外基质成分层粘连蛋白（LN）、IV型胶原的表达。结果：部分癌组织显示胞浆LN阳性；LN与IV型胶原在基底膜的表达与分布基本一致，表现为基底膜不同程度的缺失，缺失程度与癌分化程度相关，分化越低... 应用SP免疫组化方法观察63例大肠癌细胞外基质成分层粘连蛋白（LN）、IV型胶原的表达。结果：部分癌组织显示胞浆LN阳性；LN与IV型胶原在基底膜的表达与分布基本一致，表现为基底膜不同程度的缺失，缺失程度与癌分化程度相关，分化越低，缺失越重；IV型胶原的缺失程度尚与癌的侵袭能力有关，浸润较深及有淋巴结转移者缺失较重。提示：LN与IV型胶原可成为临床判断大肠癌分化程度的有用指标；IV型胶原含量少的大肠癌，恶性度高，侵袭力强。 展开更多

关键词 大肠肿瘤 分化 层粘连蛋白 IV型胶原

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药物诱导后的人大肠癌细胞的 [Ca^(2+)]_i 的变化 被引量：3

2

作者 王红梅 宋今丹 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 1997年第2期97-101,共5页

采用荧光分光光度计法检测维甲酸（ＲＡ）、１，２５（ＯＨ）２ＶＤ３及佛波酯（ＰＭＡ）诱导ＣＣＬ２２９细胞分化后［Ｃａ２＋］ｉ变化，并观察内质网（ＥＲ）特异的Ｃａ２＋－ＡＴＰａｓｅ抑制剂Ｔｈａｐｓｉｇａｒｇｉｎ（ＴＧ）、... 采用荧光分光光度计法检测维甲酸（ＲＡ）、１，２５（ＯＨ）２ＶＤ３及佛波酯（ＰＭＡ）诱导ＣＣＬ２２９细胞分化后［Ｃａ２＋］ｉ变化，并观察内质网（ＥＲ）特异的Ｃａ２＋－ＡＴＰａｓｅ抑制剂Ｔｈａｐｓｉｇａｒｇｉｎ（ＴＧ）、ＩＰ３受体抑制剂Ｈｅｐａｒｉｎ对ＲＡ诱导［Ｃａ２＋］ｉ变化的影响，从而探讨ＲＡ诱导［Ｃａ２＋］ｉ变化与ＥＲ的关系。结果显示：ＲＡ和１，２５（ＯＨ）２ＶＤ３在数秒内引起［Ｃａ２＋］ｉ显著升高。在ＥＧＴＡ和Ｖｅｒａｐａｍｉｌ预处理细胞条件下，ＴＧ不能抑制ＲＡ引起Ｃａ２＋从细胞内钙池中外流，ＲＡ作用后ＴＧ仍能升高［Ｃａ２＋］ｉ。另外，Ｈｅｐａｒｉｎ也不能完全抑制ＲＡ升高［Ｃａ２＋］ｉ。提示ＲＡ诱导大肠癌细胞升高［Ｃａ２＋］ｉ可能通过ＥＲ上ＩＰ３敏感性和非敏感性钙池，亦可能细胞内存在除ＥＲ外对ＲＡ敏感的钙池。 展开更多

关键词 大肠肿瘤 癌细胞 内质网 钙离子

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克霉唑对结肠癌细胞系CCL229生物学行为的影响

3

作者 莫志成 周晶 宋今丹 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1999年第3期253-255,共3页

目的：研究克霉唑对结肠癌细胞生长，粘附和侵袭转移中的作用。并初步探讨其机制。方法：用不同浓度的克霉唑加入培养中的结肠癌细胞株ＣＣＬ２２９中，观察加药前后细胞生长速度的变化；检测细胞与基质的粘附能力；用细胞分离试验测定... 目的：研究克霉唑对结肠癌细胞生长，粘附和侵袭转移中的作用。并初步探讨其机制。方法：用不同浓度的克霉唑加入培养中的结肠癌细胞株ＣＣＬ２２９中，观察加药前后细胞生长速度的变化；检测细胞与基质的粘附能力；用细胞分离试验测定细胞的同质粘附性。Ｂｏｙｄｅｎ小室法检测细胞的侵袭能力；流式细胞光度术检测细胞尿激酶型纤溶原激活剂（Ｕｒｏｋｉｎａｓｅｔｙｐｅｐｌａｓｍｉｎｏｇｅｎａｃｔｉｖａｔｏｒ，ＵＰＡ）表达。结果：药物作用后，ＣＣＬ２２９细胞体外增殖能力减弱；在低浓度药物作用时，与基质粘附能力和同质粘附性均无明显变化，高浓度药物作用后，与基质和同质粘附性均下降；体外侵袭实验表明，药物作用后，ＣＣＬ２２９细胞穿过基底膜能力减弱；细胞ＵＰＡ表达量下降。结论：克霉唑使细胞的恶性表型发生变化，可使其侵袭转移能力受到抑制，并呈现剂量依赖性。 展开更多

关键词 结肠肿瘤 克霉唑 肿瘤侵袭 CCL229

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核酸探针传感器的构建 被引量：8

4

作者 陈誉华 宋今丹 李大为 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1996年第6期527-531,共5页

依据石英振子的晶体谐振频率是其表面沉积物的函数，建立了简便、特异、敏感性达１００ｐｇ，并能对受检样品相对定量的核酸杂交检测新方法，即压电晶体式核酸探针传感器，该方法的主要特点是以快速。

关键词 核酸杂交 生物传感器 核酸探针

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肿瘤坏死因子α多克隆抗体对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的保护作用研究 被引量：6

5

作者 李旦 孙桂莲 +1 位作者 史金阳 韩玉昆 《临床神经病学杂志》 CAS 1999年第1期15-17,共3页

目的研究肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）α多克隆抗体对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤（ＨＩＢＤ）后大脑的保护效应。方法制备左脑ＨＩＢＤ的新生大鼠模型，于ＨＩＢＤ前后分别腹腔注射一定浓度的ＴＮＦα多克隆抗体，观察用药前后损伤大脑脑水含... 目的研究肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）α多克隆抗体对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤（ＨＩＢＤ）后大脑的保护效应。方法制备左脑ＨＩＢＤ的新生大鼠模型，于ＨＩＢＤ前后分别腹腔注射一定浓度的ＴＮＦα多克隆抗体，观察用药前后损伤大脑脑水含量及组织病理学变化。结果ＨＩＢＤ前后腹腔注射ＴＮＦα多克隆抗体可明显降低脑水含量（Ｐ＜０．０１），大脑水肿明显减轻，神经元死亡明显减少，但对其相应ｍＲＮＡ转录无影响。结论ＴＮＦα多克隆抗体可以拮抗ＴＮＦα的炎性作用。 展开更多

关键词 新生鼠 缺氧缺血性 脑损伤 肿瘤坏死因子 脑保护

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CCL_（229）细胞经诱导后蛋白激酶C及抑制剂活性的变化 被引量：2

6

作者 王红梅 于秉治 +1 位作者 王芸庆 宋今丹 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1996年第1期52-56,共5页

检测以维甲酸（ＲＡ）、１，２５－二羟基维生素Ｄ３（１，２５（ＯＨ）２ＶＤ３）诱导２ｄ、佛波酯（ＰＭＡ）诱导６ｈ的人大肠癌细胞ＣＣＬ（２２９）的蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）及其抑制剂活性．结果显示：诱导后ＰＫＣ总活性升高（Ｐ＜... 检测以维甲酸（ＲＡ）、１，２５－二羟基维生素Ｄ３（１，２５（ＯＨ）２ＶＤ３）诱导２ｄ、佛波酯（ＰＭＡ）诱导６ｈ的人大肠癌细胞ＣＣＬ（２２９）的蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）及其抑制剂活性．结果显示：诱导后ＰＫＣ总活性升高（Ｐ＜０．０５）；ＲＡ、１，２５（ＯＨ）２ＶＤ３诱导引起细胞质ＰＫＣ活性增加，ＰＭＡ诱导后细胞膜ＰＫＣ比率（细胞膜活性／总活性）显著升高（Ｐ＜０．０１）；诱导后ＰＫＣ抑制剂活性均降低，其中１，２５（ＯＨ）２ＶＤ３组与对照组有显著差异（Ｐ＜０．０５）；提示ＰＭＡ引起ＰＫＣ从细胞质向细胞膜转移，不同药物诱导后ＰＫＣ及其抑制剂活性出现不同的相对均衡关系． 展开更多

关键词 大肠肿瘤 癌细胞 蛋白激酶C 抑制剂

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普罗布考对高糖诱导的脂肪间充质干细胞损伤的保护作用 被引量：1

7

作者 王哲 刘晓玉 +3 位作者 张殿宝 王喜良 林学文 王秋实 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期615-620,共6页

目的 探讨普罗布考在保护人脂肪间充质干细胞（hADSCs）对抗高糖引起损伤中的作用及机制.方法 原代培养人脂肪间充质干细胞hADSCs,应用免疫荧光对3～5代细胞表面抗原CD34、CD45、CD90、CD105进行表型鉴定.将hADSCs分为正常糖对照组（CO... 目的 探讨普罗布考在保护人脂肪间充质干细胞（hADSCs）对抗高糖引起损伤中的作用及机制.方法 原代培养人脂肪间充质干细胞hADSCs,应用免疫荧光对3～5代细胞表面抗原CD34、CD45、CD90、CD105进行表型鉴定.将hADSCs分为正常糖对照组（CON组）、高糖组（GLU组）、普罗布考＋高糖组（PRO＋GLU组）、抑制剂SB203580＋高糖组（SB＋GLU组）、普罗布考组（PRO组）、抑制剂SB203580组（SB组）.MTT法测定细胞增殖;流式细胞仪检测细胞凋亡情况;DCFH-DA法检测细胞内活性氧水平.Western blot技术检测p-p38MAPK蛋白的表达水平.结果 与CON组比较,GLU组hADSCs细胞增殖活性明显降低（P＜0.05）,凋亡细胞比例、ROS水平显著增加（P＜0.05）;与GLU组比较,PRO＋GLU组和SB＋GLU组hADSCs细胞细胞增殖活性都明显增加（P＜0.05）,凋亡细胞比例、ROS水平表达水平均显著降低（P＜0.05）;与CON组比较,GLU组p-p38MAPK表达水平明显上升,普罗布考预处理能明显抑制高糖诱导的p-p38MAPK表达水平上调.结论 普罗布考能帮助hADSCs对抗高糖引起的损伤;p38MAPK通路参与高糖对hADSCs的损伤作用;普罗布考可通过抑制p38MAPK通路的激活保护hADSCs对抗高糖诱导的损伤. 展开更多

关键词 普罗补考 脂肪间充质干细胞 P38MAPK 活性氧

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急性肾小球肾炎患儿血红细胞磷脂过氧化氢谷胱甘肽过氧化物酶活力的研究

8

作者 庞希宁 宋今丹 王淑兰 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第z1期1-2,5,共3页

目的:探讨急性肾小球肾炎（AGN）与磷脂过氧化的关系。方法:用生物化学的方法检测血红细胞磷脂过氧化氢谷胱甘肽过氧化物酶（PHGPx）活力和脂溶性荧光色素（MFP）含量。结果:通过对17例AGN患儿和15例健康人研究表明:AGN急性期PHGPx活力... 目的:探讨急性肾小球肾炎（AGN）与磷脂过氧化的关系。方法:用生物化学的方法检测血红细胞磷脂过氧化氢谷胱甘肽过氧化物酶（PHGPx）活力和脂溶性荧光色素（MFP）含量。结果:通过对17例AGN患儿和15例健康人研究表明:AGN急性期PHGPx活力明显降低,LSFP含量增加,恢复期二者与正常对照组均无显著差异。结论:AGN存在磷脂过氧化改变,并且是可逆的。 展开更多

关键词 急性肾小球肾炎 磷脂过氧化氢谷胱甘肽过氧化物酶 脂溶性荧光色素

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白细胞介素1β多克隆抗体对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的作用

9

作者 李旦 孙桂莲 +1 位作者 史金阳 韩玉昆 《卒中与神经疾病》 1999年第1期7-8,共2页

目的：研究白细胞介素－（ＩＬ）１β多克隆抗体对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤（ＨＩＢＤ）后对损伤大脑的保护效应。方法：制备左脑ＨＩＢＤ的新生大鼠模型，于ＨＩＢＤ前后分别腹腔注射一定浓度的ＩＬ－１β多克隆抗体，观察用药前后损... 目的：研究白细胞介素－（ＩＬ）１β多克隆抗体对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤（ＨＩＢＤ）后对损伤大脑的保护效应。方法：制备左脑ＨＩＢＤ的新生大鼠模型，于ＨＩＢＤ前后分别腹腔注射一定浓度的ＩＬ－１β多克隆抗体，观察用药前后损伤大脑脑水含量及组织病理学变化。结果：ＨＩＢＤ前后腹腔注射ＩＬ－１β多克隆抗体可明显降低脑水含量（Ｐ＜０．０１），但对其相应ｍＲＮＡ转录无影响。组织病理学观察发现用药组大脑水肿明显减轻，神经元死亡明显减少。结论：ＩＬ－１β多克隆抗体可以拮抗ＩＬ－１β的炎性作用，对ＨＩＢＤ大脑有保护效应。 展开更多

关键词 新生儿 缺氧缺血性 脑损伤 白细胞介素

原文传递

人羊膜负载人羊膜间充质干细胞对SD大鼠皮肤创面愈合的影响 被引量：12

10

作者 霍双枝 施萍 庞希宁 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期611-614,I0005-I0009,共9页

目的观察人羊膜(HAM)负载人羊膜间充质干细胞(hAMSCs)对SD大鼠皮肤创面愈合的影响。方法采用胰酶消化HAM的上皮细胞,将hAMSCs接种于HAM上培养,然后贴覆于大鼠创面,观察创面大体变化,采用HE染色和免疫组织化学染色法检测创面愈合情况,并... 目的观察人羊膜(HAM)负载人羊膜间充质干细胞(hAMSCs)对SD大鼠皮肤创面愈合的影响。方法采用胰酶消化HAM的上皮细胞,将hAMSCs接种于HAM上培养,然后贴覆于大鼠创面,观察创面大体变化,采用HE染色和免疫组织化学染色法检测创面愈合情况,并与单纯羊膜组和对照组进行比较。结果 HAM负载hAMSCs组大鼠创面的平均愈合时间为(18.3±0.9)d,明显快于对照组的(26.4±0.7)d(P<0.01)和单纯羊膜组的(21.5±1.2)d(P<0.05);术后11 d和14 d,HAM负载hAMSCs组大鼠的创面愈合率分别为(81.5±7.2)%和(94.3±3.6)%,明显高于对照组的(48.5±3.2)%和(74.3±4.3)%及单纯羊膜组的(68.5±4.5)%和(86.8±4.8)%(P均<0.01)。皮肤切片HE染色结果证实,HAM负载hAMSCs组大鼠的伤口愈合质量明显优于单纯羊膜组和对照组。免疫组织化学染色结果显示,术后14 d,HAM负载hAMSCs组大鼠皮肤CK19阳性表皮干细胞数为48.2±3.2,明显高于单纯羊膜组的37.7±3.1(P<0.05)和对照组的29.6±2.4(P<0.01);血管内皮生长因子阳性颗粒表达数为64.5±4.5,也明显高于单纯羊膜组的52.6±3.8(P<0.05)和对照组的40.7±3.1(P<0.01)。结论 HAM负载hAMSCs可能是通过促进表皮干细胞和毛细血管再生,促进皮肤损伤修复。 展开更多

关键词 人羊膜 人羊膜间充质干细胞 创伤修复 角蛋白19 血管内皮生长因子

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糖基化终末产物调节氧化应激影响脐血间充质干细胞增殖及普罗布考保护作用 被引量：7

11

作者 王哲 王秋实 +1 位作者 刘晓玉 张殿宝 《实用药物与临床》 CAS 2013年第4期273-276,共4页

目的探讨糖基化终末产物(AGEs)对人脐血来源的间充质干细胞(MSCs)增殖的影响及普罗布考的保护作用。方法体外分离培养脐血MSCs,应用流式细胞术对细胞表面抗原CD34、CD45、CD105进行表型鉴定。将MSCs分为白蛋白(BSA)对照组、糖基化修饰... 目的探讨糖基化终末产物(AGEs)对人脐血来源的间充质干细胞(MSCs)增殖的影响及普罗布考的保护作用。方法体外分离培养脐血MSCs,应用流式细胞术对细胞表面抗原CD34、CD45、CD105进行表型鉴定。将MSCs分为白蛋白(BSA)对照组、糖基化修饰的牛血清白蛋白(AGE-BSA)浓度效应组和普罗布考干预组。应用WST法检测各组细胞增殖情况。应用二氯醋酸荧光素探针和氧化应激检测试剂盒检测各组细胞活性氧(ROS)、超氧化物岐化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)含量。结果流式细胞鉴定显示,脐血MSCs不表达CD34、CD45,表达CD105。与对照组相比,AGE-BSA组增殖能力下降,ROS含量增加,SOD和GSH-Px活性下降。与AGE-BSA组相比,普罗布考在10、20、50、100μmol/L范围内促进细胞增殖,降低细胞ROS含量,增加SOD和GSH-Px活性。结论 AGEs能够调节氧化应激,抑制脐血MSCs增殖。普罗布考的作用机制可能是通过抑制ROS生成和提高抗氧化酶活性来保护脐血MSCs增殖能力。 展开更多

关键词 普罗布考 糖基化终末产物 脐血间充质干细胞 细胞增殖 氧化应激

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表皮生长因子影响人羊膜间充质干细胞迁移的机制 被引量：6

12

作者 李彩虹 施萍 庞希宁 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期606-610,共5页

目的研究表皮生长因子(EGF)影响体外培养的人羊膜间充质干细胞(hAMSCs)迁移的机制。方法将体外培养的hAMSCs分为对照组(未处理)、EGF组、抑制剂AG1478+EGF组、抑制剂LY294002+EGF组和抑制剂U0126+EGF组5组,采用Transwell小室测定各组hAM... 目的研究表皮生长因子(EGF)影响体外培养的人羊膜间充质干细胞(hAMSCs)迁移的机制。方法将体外培养的hAMSCs分为对照组(未处理)、EGF组、抑制剂AG1478+EGF组、抑制剂LY294002+EGF组和抑制剂U0126+EGF组5组,采用Transwell小室测定各组hAMSCs的迁移能力,W estern blot检测各组磷酸化EGFR(P-EGFR)、磷酸化AKT(P-AKT)和磷酸化ERK1/2(P-ERK1/2)及金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9的表达情况,RNA-Seq技术对EGF组和对照组细胞中差异表达基因进行分析。结果 EGF组细胞的迁移能力明显高于对照组(P=0.0361),抑制剂AG1478+EGF组(P=0.0113)、抑制剂LY294002+EGF组(P=0.0169)和抑制剂U0126+EGF组(P=0.0293)明显低于EGF组。EGF可增加hAMSCs的P-EGFR、P-AKT和P-ERK1/2及MMP-2的表达,但P-AKT和P-ERK表达的增加可被AG1478和LY294002抑制。对EGF组和对照组细胞中差异表达基因的GO功能富集分析和KEGG代谢途径分析结果表明,EGF组细胞中发生转录上调的基因主要参与转录调节、蛋白质修饰、凋亡抑制等生命过程,其中与MAPK信号通路有关的基因为DUSP5、IL1B、DUSP6、NGF和HSPA2。结论 EGF引起的hAMSCs迁移可能是通过PI3K/AKT、ERK信号通路介导的,需要MMP-2的表达,及其参与转录调节、蛋白质修饰和凋亡抑制等基因的协同表达。 展开更多

关键词 人羊膜间充质干细胞 表皮生长因子 磷脂酰肌醇激酶-3 细胞外调节蛋白激酶

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晚期糖基化终产物对人脂肪间充质干细胞功能影响的体外研究 被引量：4

13

作者 王哲 刘晓玉 +1 位作者 张殿宝 王秋实 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期897-901,共5页

目的:探讨晚期糖基化终产物(AGEs)对人脂肪来源的间充质干细胞(hADSCs)促进创伤修复功能的影响。方法:体外培养hADSCs,实验分为牛血清白蛋白(BSA)对照组、低浓度糖基化修饰的牛血清白蛋白(AGE-BSA)效应组和高浓度AGE-BSA效应组。采用WS... 目的:探讨晚期糖基化终产物(AGEs)对人脂肪来源的间充质干细胞(hADSCs)促进创伤修复功能的影响。方法:体外培养hADSCs,实验分为牛血清白蛋白(BSA)对照组、低浓度糖基化修饰的牛血清白蛋白(AGE-BSA)效应组和高浓度AGE-BSA效应组。采用WST法和Transwell迁移实验检测各组细胞增殖和迁移情况。应用实时定量PCR和ELISA检测各组细胞分泌血管内皮生长因子(VEGF)、肝细胞生长因子(HGF)和胰岛素样生长因子1(IGF-1)的表达。结果:与对照组相比,AGE-BSA组增殖能力和迁移能力明显下降(P<0.05),VEGF、HGF和IGF-1 mRNA及蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。结论:AGEs能损伤hADSCs的促进创伤修复功能,因而能够影响hADSCs治疗糖尿病皮肤溃疡病的治疗效果。 展开更多

关键词 晚期糖基化终产物 人脂肪间充质干细胞 细胞增殖 伤口愈合

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表皮生长因子干预人羊膜间充质干细胞的增殖和迁移 被引量：3

14

作者 李彩虹 施萍 庞希宁 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2011年第23期4312-4315,共4页

背景:人羊膜间充质干细胞移植可促进皮肤创伤的愈合。目的:观察表皮生长因子对体外培养人羊膜间充质干细胞增殖和迁移的影响。方法:人羊膜间充质干细胞经分离、鉴定并培养至第3代。细胞经过不同浓度的表皮生长因子处理后,用MTT法测量吸... 背景:人羊膜间充质干细胞移植可促进皮肤创伤的愈合。目的:观察表皮生长因子对体外培养人羊膜间充质干细胞增殖和迁移的影响。方法:人羊膜间充质干细胞经分离、鉴定并培养至第3代。细胞经过不同浓度的表皮生长因子处理后,用MTT法测量吸光度值从而计算出细胞存活率,通过计数穿过Transwell小室的细胞数测定表皮生长因子对细胞迁移能力的影响;并用表皮生长因子受体的抑制剂AG1478及PI3K的抑制剂LY294002检测其对细胞迁移能力的影响。结果与结论:表皮生长因子处理后细胞的吸光度值升高1.55倍,穿过膜的数量增高1.5倍;AG1478、LY294002对表皮生长因子引起的迁移有抑制作用。提示表皮生长因子处理后细胞增殖和迁移能力均增强,迁移与EGFR-PI3K信号通路有关。 展开更多

关键词 人羊膜间充质干细胞 表皮生长因子 增殖 迁移 信号通路

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正畸力引起的牙周组织内白细胞介素-1 mRNA含量变化的研究 被引量：2

15

作者 阎秀林 王岩 +1 位作者 伊哲 朱丽 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2009年第3期248-250,共3页

目的研究在正畸牙移动中牙周组织炎症反应的情况和白细胞介素-1(interleukin-1,IL-1)mRNA表达水平是否发生一定的变化。方法选取中国医科大学实验动物部Wistar大鼠36只,分别采用石蜡切片HE染色和实时定量RT-PCR的方法检测施加正畸力后1... 目的研究在正畸牙移动中牙周组织炎症反应的情况和白细胞介素-1(interleukin-1,IL-1)mRNA表达水平是否发生一定的变化。方法选取中国医科大学实验动物部Wistar大鼠36只,分别采用石蜡切片HE染色和实时定量RT-PCR的方法检测施加正畸力后1、3、7和14 d牙周组织内炎症反应和IL-1α及IL-1βmRNA的含量变化。结果机械力使牙周组织内炎症反应明显,同时IL-1α和IL-1βmRNA的含量增加,对于IL-1α,其mRNA含量在3 d后明显增加,7 d后达到高峰,之后下降;而IL-1βmRNA的含量在加力1 d后即开始增加,3 d后达到峰值,随后下降。结论在正畸牙移动中,牙周组织内炎症反应明显;IL-1α和IL-1βmRNA的含量增加,并有一定的时相特异性。 展开更多

关键词 正畸学 白细胞介素-1 信使RNA

原文传递

REST/NRSF基因shRNA慢病毒载体的构建与鉴定 被引量：2

16

作者 李宏图 施萍 庞希宁 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2011年第32期6036-6040,共5页

背景:神经元限制性沉默因子(REST/NRSF)能负向调控神经元及胰岛细胞分化相关基因的表达。目的:构建并筛选能高效沉默大鼠REST/NRSF基因的shRNA慢病毒载体。方法:针对REST/NRSF基因设计4组特异性siRNA靶点,合成靶序列的寡核苷酸序列,退... 背景:神经元限制性沉默因子(REST/NRSF)能负向调控神经元及胰岛细胞分化相关基因的表达。目的:构建并筛选能高效沉默大鼠REST/NRSF基因的shRNA慢病毒载体。方法:针对REST/NRSF基因设计4组特异性siRNA靶点,合成靶序列的寡核苷酸序列,退火形成双链DNA,与经HpaⅠ和XhoⅠ双酶切后的pFU-GW-RNAi载体连接产生L-shREST/NRSF慢病毒载体,PCR筛选阳性克隆,测序鉴定。包装产生慢病毒颗粒,随后将其感染大鼠骨髓间充质干细胞,采用Real-timePCR方法检测靶基因在mRNA水平的沉默效率。结果与结论:PCR和测序证实,构建出了REST/NRSFshRNA的慢病毒载体L-shREST/NRSF,并能稳定转染大鼠间充质干细胞,感染效率达100%。4组shRNA序列均有基因沉默效果,并以第3组shRN序列效果最为明显。结果表明,该慢病毒表达载体能够在细胞水平有效沉默靶基因。 展开更多

关键词 慢病毒载体 REST/NRSF SHRNA 基因 骨髓间充质干细胞

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microRNA-223对糖基化终产物诱导人脂肪间充质干细胞凋亡和氧化应激影响的体外研究 被引量：2

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作者 王哲 张殿宝 杨向红 《中国动脉硬化杂志》 CAS 北大核心 2017年第1期1-6,共6页

目的观察microRNA-223(miR-223)对糖基化终产物(AGE)诱导人脂肪间充质干细胞(h ADSC)凋亡和氧化应激的影响。方法采用酶消化法分离培养h ADSC,并应用流式细胞术对表面抗原CD14、CD34、CD45、CD90、CD105和人类白细胞抗原DR(HLA-DR)进行... 目的观察microRNA-223(miR-223)对糖基化终产物(AGE)诱导人脂肪间充质干细胞(h ADSC)凋亡和氧化应激的影响。方法采用酶消化法分离培养h ADSC,并应用流式细胞术对表面抗原CD14、CD34、CD45、CD90、CD105和人类白细胞抗原DR(HLA-DR)进行检测。将h ADSC分为牛血清白蛋白(BSA)对照组、AGE修饰的牛血清白蛋白(AGE-BSA)作用组、miR-223模拟物转染组、miR-223模拟物转染+AGE-BSA组、miR-223抑制物转染组和miR-223抑制物转染+AGE-BSA组。应用CCK-8法和TUNEL染色检测各组细胞存活率和凋亡率,Western blot检测Cleaved Caspase3蛋白表达水平,应用双氯荧光素(DCFH-DA)试剂盒检测各组细胞活性氧(ROS)含量。结果流式细胞术检测结果表明,原代培养的h ADSC高表达CD14、CD90和CD105,不表达CD34、CD45和HLADR。CCK-8法、TUNEL染色、Western blot和DCFH-DA法检测结果表明,与BSA对照组相比,AGE-BSA作用组h ADSC凋亡率、miR-223表达水平、Cleaved Caspase3蛋白表达水平、ROS生成显著升高,而细胞存活率下降(P<0.05);与AGE-BSA作用组相比,miR-223模拟物转染能够进一步上调AGE-BSA引起的h ADSC凋亡率、Cleaved Caspase3蛋白表达水平和ROS生成增加,下调AGE-BSA引起的h ADSC存活率减少(P<0.05);与AGE-BSA作用组相比,miR-223抑制物转染能够抑制h ADSC凋亡率、Cleaved Caspase3蛋白表达水平和ROS生成增加,拮抗AGEBSA引起的h ADSC存活率减少(P<0.05)。结论 miR-223高表达能够促进AGE-BSA引起的h ADSC细胞凋亡和ROS生成,其可能作为调控h ADSC促进糖尿病创伤愈合的新靶点。 展开更多

关键词 糖基化终产物 人脂肪间充质干细胞 microRNA-223 凋亡 氧化应激

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大肠癌相关抗原LEA在大肠癌诊断中的意义 被引量：2

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作者 冯慧 宋今丹 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第8期539-542,共4页

目的:探讨LEA在大肠癌中的表达及意义。方法:采用免疫组织化学S-P法检测140例大肠癌组织和100例大肠非癌组织LEA与CEA的表达。结果:LEA表达与肿瘤分化程度有相关性,对高分化腺癌表现出更高的选择性（P<0.01）,CEA单抗对高、中、低分... 目的:探讨LEA在大肠癌中的表达及意义。方法:采用免疫组织化学S-P法检测140例大肠癌组织和100例大肠非癌组织LEA与CEA的表达。结果:LEA表达与肿瘤分化程度有相关性,对高分化腺癌表现出更高的选择性（P<0.01）,CEA单抗对高、中、低分化腺癌选择性相似（P>0.05）,LEA在腺瘤中表达的阳性率,明显高于癌旁粘膜和正常粘膜;LEA在正常粘膜标记的阳性率明显低于CEA（P<0.05）。结论:LEA的表达与大肠癌组织的分化程度有关,LEA可作为大肠癌早期诊断的辅助指标。 展开更多

关键词 大肠癌相关抗原 LEA 诊断

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神经元抑制性沉默元件双链RNA慢病毒载体的构建与鉴定 被引量：1

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作者 李宏图 刘晓玉 庞希宁 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期760-764,803,共6页

目的构建神经元抑制性沉默元件(RE-1/NRSE)双链RNA的慢病毒载体。方法根据RE-1/NRSE序列合成靶序列的寡核苷酸序列,退火形成双链DNA,与经HpaⅠ和XhoⅠ双酶切后的pGC-LV载体连接产生L-smRE-1/NRSE慢病毒载体,采用PCR和测序对阳性克隆进... 目的构建神经元抑制性沉默元件(RE-1/NRSE)双链RNA的慢病毒载体。方法根据RE-1/NRSE序列合成靶序列的寡核苷酸序列,退火形成双链DNA,与经HpaⅠ和XhoⅠ双酶切后的pGC-LV载体连接产生L-smRE-1/NRSE慢病毒载体,采用PCR和测序对阳性克隆进行鉴定。用L-smRE-1/NRSE和包装质粒pHelper 1.0、pHelper2.0共转染293T细胞,包装产生慢病毒颗粒,在倒置荧光显微镜下观察293T细胞中绿色荧光蛋白的表达量,并计算病毒滴度,初步观察其对大鼠间充质干细胞的转染效率。结果PCR和测序证实,构建出了RE-1/NRSE双链RNA的慢病毒载体L-smNRSE/RE-1。包装慢病毒,浓缩病毒悬液的滴度为4×108TU/ml。慢病毒颗粒能稳定转染大鼠间充质干细胞,当感染复数为80时,感染效率达100%。结论成功构建了RE-1/NRSE dsRNA的慢病毒表达载体。 展开更多

关键词 神经元抑制性沉默元件 双链RNA 慢病毒载体

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TSA杀伤培养的人大肠癌细胞DLD1及机理的研究

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作者 庞希宁 宋今丹 柴原茂树 《细胞生物学杂志》 CSCD 北大核心 2002年第3期187-189,F003,共4页

我们用曲古抑菌素A(TSA)作用于人大肠癌细胞DLD1,研究小眼相关转录因子(MITF)表达及其酰基化与癌细胞凋亡关系。Northern杂交实验结果表明:TSA作用组MITF表达明显增加,而对照组无明显MITF表达。电镜观察可见TSA引起DLD1超微结构的损伤... 我们用曲古抑菌素A(TSA)作用于人大肠癌细胞DLD1,研究小眼相关转录因子(MITF)表达及其酰基化与癌细胞凋亡关系。Northern杂交实验结果表明:TSA作用组MITF表达明显增加,而对照组无明显MITF表达。电镜观察可见TSA引起DLD1超微结构的损伤及凋亡改变。提示TSA可能成为有效的杀伤癌细胞的药物。细胞因子作用组也可见MITF表达增加和细胞超微结构的改变。说明是否TSA引起MITF表达等可能与细胞因子作用通路相关。 展开更多

关键词 TSA杀伤培养 人大肠癌细胞 DLD1 机理

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